Флодин

Впервые гели для ситового анализа жидких смесей (сефадексы) были применены Поратом и Флодином в 1959 г. [45]. Примерно в это же время было освоено промышленное производство гранулированных гелей, разделение на которых наиболее эффективно. [c.225]

За последние годы широкое применение для разделения высокомолекулярных веществ и определения их молекулярной массы нашел предложенный Л. Поратом и П. Флодином метод гель-фильтрации (гель-хроматографии). Гель-хроматография состоит в фильтровании исследуемого раствора через колонки, заполненные зернами набухающего трехмерного полимера (сефадекса). Набухшие зерна сефадекса представляют собой своеобразные клетки , внутрь которых могут проникнуть путем диффузии только молекулы (ионы) подходящего размера. Более крупные молекулы проходят с фильтрационным потоком мимо зерен сефадекса (рис, 10.8). Набор различных марок сефадексов с возрастающим размером клеток позволяет отделять низкомолекулярньк вещества от высокомолекулярных, разделять макромолекулы, изучать образование ассоциатов в макромолекулярныхрастворах. [c.299]

Гель-хроматография является новым методом разделения. Бурное развитие метода началось в 1959 г. с получения первого декстранового геля> (Порас, Флодин). Поэтому теоретические вопросы разделения в гель-хроматографии находятся в стадии развития. Основные теоретические концепции этого метода — представление геля в виде геометрической модели, затруднение процессов диффузии и концепция распределения [16]. Существенное отличие метода гель-хроматографии от методов адсорбции и распределения заключается в том, что концентрация вещества в стационарной фазе никогда не превышает концентрацию вещества в подвижной фазе. Отклонения от этого правила могут происходить в случае взаимодействия между растворенным веществом и гелем. [c.351]

Гель-фильтрацию открыли в 1959 Д. Порат и П. Флодин, к-рые показали возможность фракционирования водорастворимых макромолекул, в т. ч. белков, по мол. массе, в качестве сорбента они использовали сшитый декстрановый гель. В 1964 Д. Мур предложил с помогцью гель-проникающей хроматографии определять ММР полимеров, фракционируя их на стирол-дивинилбензольном геле. [c.413]

С тех пор как Порат и Флодин в 1959 г. в качестве носителя при фракционировании белков применили первые гели из сетчатого декстрана сефадекса (Sephadex), произошло очень суш,ественное развитие этой техники. Она стала повседневной во всех лабораториях и даже в промышленных производствах, нуждаюш,ихся в выделении белков. Разработано много других носителей, все более расширяющих возможности их применения. [c.73]

Разработанная Поратом И Флодиным в 1959 г. [15] гель-фильтрация явилась большим достижением в развитии фракционирования белков по молекулярному весу. Материал, используемый в этом методе в качестве неподвижной фазы, носит фирменное название [c.23]

Предварительное разделение смеси пептидов в соответствии с их электростатическим зарядом можно осуществить с помощью свободного ионофореза (или многокамерного электрофореза), который успешно применяли Сэнгер и Туппи [72]. Однако этот метод в настоящее время полностью вытеснен гель-фильтрацией, т. е. разделением в соответствии с размерами молекул. После появления первых работ в этом направлении [44, 83] чрезвычайно полезный метод гель-фильтрации был разработан Поратом и Флодиным [61 ] позднее Флодин теоретически обосновал его [20]. [c.37]

Гели были впервые применены для разделения жидких смесей Поратом и Флодином в 1959 г. В гель-хроматографии подвижной и неподвижной фазами служит одна и та же жидкость, т е. растворитель. Часть жидкости, протекающая вдоль зерен геля (твердого носителя), выполняет роль подвижной фазы и переносит компоненты смеси вдоль колонки. Но другая часть жидкости проникает в поры зерен геля и играет роль неподвижной фазы. [c.441]

Подлинный успех хроматографии полимеров связан с открытием в 1959 г. Поратом и Флодиным [7] гель-проникающей хроматографии, впервые использованной ими для фракционирования биополимеров на сшитых декстрановых гелях. В отличие от метода Бейкера — Вильямса фракционирование здесь осуществляется намного проще и быстрее вследствие диффузионного обмена макромолекулами между фазой пористого сорбента и свободным пространством хроматографической колонки, а молеку-лярно-массовые. распределения получают автоматическим пересчетом хроматограмм в соответствии с характерной для данной хроматографической системы молекулярно-массовой зависимостью удерживаемых объемов. [c.11]

В 1959 г. Флодин и Порат [30] получили продукт взаимодействия растворимого декстрана с эпихлор-гидрином этот продукт оказался универсальным гелем, который вскоре начали вырабатывать в промышленных масштабах и выпускать в продажу под торгов-вым названием сефадекс . Следствием этого открытия явилось быстрое и повсеместное распространение хроматографического метода разделения по молекулярному весу, известного теперь под названием гель-фильтрации. Первые образцы геля обладали низкой [c.24]

Естественно, при этом можно ожидать целого ряда побочных реакций например, эпихлоргидрин может сразу гидролизоваться в водном растворе щелочи, и образующийся эпоксид этерифицирует лишь один гидроксил гидролиз может наступить также и после присоединения эпихлоргидрина к полимеру. В этом случае происходит лишь этерификация полимера глицерином, а поперечные связи не образуются. До настоящего времени с помощью химического анализа удалось получить довольно слабое представление об истинной структуре геля [8, 9]. На фиг. 5 показана часть сетки сшитого геля, содержащая все предполагаемые специфические фрагменты. Гель декстрана (сефадекс) выпускается в продажу в виде гранул определенных размеров. Условия его получения описаны в патентной литературе. Здесь мы рассмотрим лишь полимеризацию в блоке по Флодину [8] и проследим, как изменяется степень набухания геля в зависимости от концентрации и молекулярного веса декстрана, а также от его соотношения с эпихлорги-дрином (см. табл. 3), [c.32]

Опыты с применением центрифуги были описаны впервые Флодином, Желоттом и Поратом [104], которые концентрировали таким путем фильтрат культуральной жидкости Polyporus versi olor. С помощью сефадекса G-25 (грубого), добавляемого в количестве 300 г на 1 уг фильтрата, им удалось сконцентрировать (в несколько приемов) 7,5 л до 410 мл. Целлю-лазная активность возросла при этом с 0,532 ед мл до 8,48 ед/мл, а потери общей активности составили лишь 13%. Несколько позже этот убедительный эксперимент был повторен в большем масштабе, когда 85 л сконцентрировали до ИЪ мл [105]. [c.96]

Наконец, следует отметить, что эффективность различных колонок с гелем можно оценить, сравнивая значения ВЭТТ- для одного и того же контрольного вещества. Зная ВЭТТ, можно по Флодину [13] рассчитать размеры колонки, необходимой для решения конкретной задачи (когда Kav известны). Т. Лорент и Э. Лорент [14] построили электрическую модель (аналоговую машину) процесса гель-хроматографии, с помощью которой можно воспроизвести кривую элюирования, если известны значения Kav и время достижения равновесия между стационарной и подвижной фазами. Таким образом можно изучать влияние изменения скорости элюента на форму (ширину) кривой [c.113]

Еще Флодин [1, 13] при систематическом изучении гель-фильтрации особо отмечал следующие основные положения. Объем выхода вещества определяется только размерами его молекул и почти не зависит ни от скорости элюирования, ни от концентрации вещества. (Разделение становится нечетким лишь в том случае, когда вязкость раствора образца намного превышает вязкость элюента [1].) Справедливость этих двух основных положений не подлежит сомнению. Лишь при фронтальном анализе белков на сефадексе G-100 [15] объем выхода в какой-то степени зависел от концентрации. Отсутствие зависимости между объемом выхода и скоростью движения элюента имеет решающее значение при обсуждении механизма процесса (см. далее) поэтому именно это положение проверялось особенно часто, и лишь немногим авторам удалось зафиксировать (совсем небольшие) воспроизводимые различия [12]. [c.114]

При обсуждении объемных соотношений в слое геля исходят из предположения, что в набухшем геле имеются, области, куда могут проникать лишь такие молекулы, размеры которых не превышают некоторой определенной величины. Наличие в гелях областей, соответствующих молекулам определенных размеров, Флодин [13] объяснял специфической структурой геля. В набухшем ксерогеле концентрация полимера вблизи поперечных мостиков (сшивок) настолько высока, что крупные молекулы уже не могут проникнуть в эти области. Размеры и число таких областей определяются степенью сшивки геля (т. е. его способностью к набуханию), с одной стороны, и размерами молекул исследуемого вещества — с другой. В аэрогелях или подобных им жестких носителях (например, в стирагеле) размеры труднодоступных областей уже определены специфической структурой полимера. В этом случае действительно можно говорить о порах , существование которых в ксерогеле можно допустить лишь при значительном упрощении. [c.115]

Соблюдение этого условия обязательно для получе- > ния воспроизводимых результатов. По-видимому, оно выполняется при использовании выпускаемых в настоящее время гелей (см. гл. П). Расчеты Флодина [13], а затем Альтгельта и Мура [19] показали, что скорость диффузии в этих гелях достаточно высока, чтобы вещества могли достичь внутренних областей гранул. Экспериментально это подтверждается тем фактом, что объемы выхода не зависят от реальной скорости потока в колонке, даже если равновесие далеко от идеального. [c.116]

Оптимальные условия обессоливания — этого чрезвычайно важного для химии белков приема — уже давно и исчерпывающе исследованы Флодином [1]. [c.137]

Сефадексы разработаны в 19 59 г. Поратом и Флодином (Р о г а t h J., F 1 о -d i n P., Nature, 1959, v. 183, No. 4676, p. 1657—1659) в качестве молекулярных [c.55]

Менковский М. А., Каминский В. С., Петров Н. А. и Флодин А. А. Технический анализ углей. [Учебное пособие для учащихся горных техникумов по специальности Обогащение и брикетирование угля ]. М.—Л., Углетехиздат, 1952. 160 с. с илл. (М-во угольной пром-сти СССР). Библ. с. 158 (12 назв.). 6495 [c.250]

Когда состав подвижной и неподвижной фазы одинаков, пористый носитель иммобилизированной жидкости часто называют неподвижной фазой . Порат и Флодин [74] успешно использовали для разделения сшитые декстраны в качестве молекулярных сит, и этот материал оказался необыкновенно эффективным. Его применяют в виде геля под названием сефадекс [75] — это сшитый сополимер эпихлоргидрина [СНгСН (О) H2 I] и декстрана, полисахарида, состоящего из глюкозы с преимущественно а,1,6-глико-зидными связями. Степень набухания полимера зависит от растворителя, степени сшивки, степени и вида замещения гидроксильных групп. В обычных водных растворах сефадекс был применен для разделения глобулярных протеинов с молекулярными массами от 100 до 500 000 полисахаридов (100—200 000), а также низкомолекулярных липидов, стеринов, стероидов и триметилси-лильных эфиров сахаров [76]. [c.549]

Предложенная Флодином (см. далее) модель пространственного запрета используется потому, что ее легче всего приспособить к основным положениям общепринятой хроматографической теории. Кроме того, этот механизм удобен для описания принципов ГПХ на языке, понятном хроматографисту, работающему в ЖХ. Для описания процессов разделения по размеру предлагается ряд механизмов, которые можно разделить на три группы [c.180]

Гель-проникающая хроматография представляет собой разновидность метода фракционирования на колонке, в которой разделение осуществляется по принципу молекулярного сита. Этот принцип был известен уже в начале 50-х годов, но лишь после того, как Порат и флодип [101 вновь открыли и широко использовали этот метод, он получил признание и широкое применение в научных исследованиях. Порат и Флодин опубликовали свою первую работу по фильтрованию через гель, как они назвали этот метод, в мае 1959 г. Начиная с этого момента и до 1964 г. было опубликовано более 300 работ, посвященных этому новому методу фракционирования. [c.111]

Название гель-проникающая хроматография выбрано как раз потому, что здесь разделение обусловлено различной проницаемостью гранул геля в отношении молекул растворенного вещества. Порат и Флодин назвали этот метод фильтрованием через гель, но такое название предполагает фильтрование через пластинку или короткую колонку и тем самым, вероятно, вызывает неверные представления о сущности метода. К тому же при истинном фильтровании более крупные частицы задерживаются на фильтре, а менее крупные проходят через него. В отличие от предлон енного Поратом и Флодином название гель-проникающая хроматография , очевидно, более точно отражает существо принципа разделения молекул. [c.112]

Широкое распространение в качестве общепринятого способа фракционирования получил метод ГПХ после опубликования в 1959 г. работы Пората и Флодина [10], где были описаны созданные авторами повые декстрановые гели с наиболее подходящими для практических целей размерами пор и довольно высокой жесткостью. Авторы этой статьи убедительно показали возможности метода ГПХ на примере фракционирования смеси глюкозы с двумя фракциями декстрана с молекулярными весами 1000 и 20 ООО соответственно. Более того, Порат и Флодин продемонстрировали возможность надежного и быстрого отделения соли от белков сыворотки и отметили преимущества подобного сцособа по сравнению с диализом. Для фракционирования методом ГПХ были также предложены в качестве гелей сшитые поливиниловые спирты. [c.115]

Флодин [1] провел оценки величии нолунериодов установления диффузионного равновесия для гранул гелей различных размеров по уравнению, полученному Вермоле [196], [c.120]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология