Нитроцеллюлоза, фракционировани

Рис. 4-72. Методы Нозерн - и Саузерн -блоттинга. После электрофоретического фракционирования смеси молекул ДНК или РНК в агарозном геле проводят перенос различных фрагментов нуклеиновых кислот на лист нитроцеллюлозы или найлона ( блоттинг ). Этот лист затем инкубируют с радиоактивным ДНК-зондом в течение длительного времени в условиях, способствующих гибридизации. Затем лист тщательно промывают, гак что радиоактивно меченными оказываются лищь те фрагменты, которые гибридизуются с ДНК-зондом. На радиоавтографе,

Большое число работ было посвящено изучению физической и химической неоднородности производных целлюлозы методом дробного осаждения. Так, например, еще в 1920 г. Дюкло и Вольман [50] описали методику фракционирования нитроцеллюлозы путем дробного осаждения его фракций водой из ацетонового раствора. [c.37]

Брукс и Бэджер [18] сообщили также о фракционировании высокомолекулярной нитроцеллюлозы на крахмальной колонке с использованием метода градиентного проявления. Проявление начинали смесью ацетона и циклогексана, после чего концентрацию циклогексана постепенно снижали. Заканчивали проявление колонки смесью ацетона с метиловым спиртом. Поскольку растворяющая способность проявляющей смеси увеличивалась, получали фракции с возрастающим молекулярным весом. [c.324]

К таким задачам относятся, например, обезвоживание коллоидных веществ, с трудом поддающихся фильтрованию очистка коллоидов от посторонних примесей, например очистка клея, желатины, растворов нитроцеллюлозы отделение водно-масляных эмульсий, фракционирование суспендированных коллоидов, осаждение каучука из латекса, пропитка тканей, дубление кожи, очистка глицерина, фруктовых соков, очистка воды и т. п. [c.170]

Второй метод основан на осаждении отдельных фракций из раствора применением нерастворителей. Этим путем шло большинство исследователей при фракционировании нитроцеллюлозы,. Приведенная ниже схема поясняет сказанное [c.254]

Работа 6. Фракционирование нитроцеллюлозы [c.57]

Клессон и Клессон [179—181] использовали указанный принцип для фракционирования незаряженных полимеров на заполненных нейтральными адсорбентами колонках. Эти авторы получили удовлетворительные результаты при фракционировании нитроцеллюлозы, неопрена, полиметилметакрилата и других полимеров на адсорбентах типа активированного угля, гидрата окиси алюминия и карбоната кальция. В этих случаях точно так же более крупные молекулы исключались и, следовательно, адсорбировались в меньшей степени, чем молекулы меньших размеров. [c.114]

Осуществить разделение лигнина и углеводов не удалось иутем фракционирования смеси продуктов прямого галогенирования и сульфонмрования древесины. Трудно объяснить явления, наблюдаемые при ацетилировании или нитровании древесины, только исходя из существования механической смеси полимеров неясно, почему в нитрованной древесине присутствует фракция, нерастворимая в ацетоне, в то время как нитролигнин и нитроцеллюлоза растворимы в ацетоне или почему после ацетилирования не растворяются все компоненты древесины, хотя в отдельности ацетилированные лигнин и целлюлоза растворимы. Эти наблюдения легче было бы объяснить наличием лигноуглеводных связей. [c.164]

Для нитроцеллюлозы было показано, что результаты фракционирования зависят от температуры проведения эксперимента [14]. [c.299]

Фракционирование нитратов целлюлозы детально описано н работах [264, 265]. Анализ нитроцеллюлозы проводили [266] методом гель-проникающей хроматографии на колонке, заполненной полистирольным гелем, с ацетоном в качестве растворителя. [c.502]

Определение молекулярного состава целлюлозы путем перевода ее в азотнокислые эфиры и последующего их фракционирования позволяет получить, по мнению многих исследователей, наиболее достоверные результаты. Фракционирование нитроцеллюлозы осуществляется ступенчатым осаждением из ацетонового или этилацетатного раствора. Недостаток этого метода фракционирования — его большая трудоемкость и длительность, что в значительной мере снижает его ценность и в ряде случаев (например, в промышленных лабораториях) исключает возможность его применения. [c.304]

Для фракционирования готовят 0,25%-ный раствор нитроцеллюлозы в ацетоне. С этой целью 2,5 г нитроцеллюлозы, высушенной в вакууме при температуре 50° С до постоянного веса, помещают в литровую банку с притертой пробкой и заливают 1 л 95 /о-ного водного ацетона. Банку устанавливают в аппарат для встряхивания. Растворение в зависимости от степени полимеризации целлюлозы продолжается от 1 до 20 ч. Полноту растворения проверяют в проходящем свете по отсутствию нерастворившихся частиц. [c.305]

Для фракционирования нитроцеллюлозу растворяют в смеси ацетона и воды 91 9 (200 мл). Высаживание фракций осуществляют добавлением строго определенных объемов воды (табл. 10). Это позволяет разделить образец на определенное число фракций, приблизительно равных по весу. Осаждение проводят при 25° С непосредственно в центрифужном стакане. Образующуюся дисперсию центрифугируют сразу после осаждения. Последние фракции (10, И, 12) определяют упариванием раствора, как указано в табл., 12. Далее определяют вес и степень полимеризации каждой фракции. [c.307]

Рис. 278. Зависимость приведенного осмотического давления от концентрации. Сравнение различных мембран при использовании образца фракционированной нитроцеллюлозы в н-бу-тилацетате [107].

Во избежание влияния различных примесей как нитроцеллюлоза, так и бензилцеллюлоза подвергались очистке методом, электродиализа. Помимо этого от нитроцеллюлозы путем фракционирования отмывались низкомолекулярные фракции. [c.59]

Для фракционирования нитроцеллюлозы можно применять смесь ацетона и воды, для фракцио нирования каучука — смесь бензола и этилового или метилового спирта и т. д. При фракционировании растворением первой фракцией является низкомолекулярная фракция и последней — наиболее высокомолекулярная. [c.76]

При проведении иммуноблоттинга сложную смесь антигенов вначале подвергают гель-электрофорезу, а затем фракционированные пептиды переносят (блоттинг) на лист нитроцеллюлозы для идентификации индивидуальных антигенов при помощи специфических антисывороток. Производя предварительное разделение в геле с додецилсульфатом натрия или в геле для изо-электрического фокусирования можно получить данные о размерах и изоэлектрической точке исследуемых антигенов, а также о сходстве между ними (родстве) (рис. 29.13). [c.531]

Опыт второй. Фракционирование низкозамещенной нитроцеллюлозы (которому подвергают образец № 2, табл. 8,9) осуществляется экстракцией навесок 6%-ным раствором NaOH при постепенном снижении температуры. Растворившуюся часть отделяют на центрифуге от осадка. Осадок промывают на центрифуге холодным 6%-ным раствором NaOH. Раствор выливают в холодную 5%-ную уксусную кислоту, осадок промывают холодной водой, затем спиртом и эфиром, высушивают при температуре 313 К в вакуум-сушильном шкафу и анализируют. Количество растворившейся фракции определяется иодометрически. Нерастворившийся остаток анализируется отдельно. [c.184]

На примере фракционирования нитроцеллюлозы дробным осаждением водой из ацетонового раствора Мефрои-Бигет [33] показано, что весьма удобным приемом для дробного осаждения является так называемый метод треугольника , схематически изображенный на рис. 13. По этой схеме в первом туре в раствор полимера добавляется столько растворителя, чтобы выпала примерно половина растворенного вещества и таким образом получают осадок (О) и маточник (М). Осадок в свою очередь разделяется повторно на осадок О] и маточник М1, а маточник — на осадок О2 и маточник М2. Маточник Ма и осадок [c.33]

Гликман [51] широко применял метод фракционного осаждения при изучении природы растворов нитроцеллюлозы им были использованы различные растворители ацетон, бензол, этилацетат. Он использовал также метод осаждения повышением концентрации нитроцеллюлозы в водном ацетоне при отгонке водно-ацетоновой смеси под вакуумом или при обычном давлении и им же этот метод был применен для фракционирования бензилцеллюлозы [52] дробным осаждеиием спиртом из бензольно-спиртовых растворов. Им изучена также температур- [c.37]

Метод понижения температуры применялся также для фракционирования нитроцеллюлозы из растворов в ацетонг, полиметилметакрилата и полистирола из смесей хлороформа, гептана и метанола [81].. [c.44]

Как будет показано ниже, очень существенно работать с хорошо очищенными от различных примесей препаратами. Поэтому все исследованные нами объекты подвергались электродиализу в диализаторе Паули. Применяемое напряжение равнялось 300 в в начале очистки и доводилось в конце до 6000 в при конечном градиенте 150—200 в см. В боковых камерах была дистиллированная вода начиная от 3000 е — дважды перегнанная вода. При высоких напряжениях во избежание нагрева воды в камерах диализатора применялось водяное охлаждение. Нитроцеллюлоза дополнительно подвергалась тщательному фракционированию осаждением из 5 %-ных ацетоновых растворов смесью воды и ацетона (1 1) и переосажде-нию из ацетоновых растворов водой. Было получено 12 фракций работа производилась с наиболее высокомолекулярной фракцией г уд = 0,460 0,2%-ного раствора). Все опыты по определению растворимости велись в термостате. [c.247]

Этот результат был позднее подтвержден Леви и Гиера [81 ]. Эти авторы нашли, что диацетат целлюлозы можно фракционировать хроматографически, однако триацетат целлюлозы не фракционируется, хотя и адсорбируется в такой же степени. Они рекомендуют использовать смесь эфира со спиртом 2 1 в качестве растворителя для хроматографического фракционирования нитроцеллюлозы на животном угле, применяемом в качестве адсорбента. [c.323]

Данные по адсорбции полимера из растворов суммированы Пататом с сотр. [47], однако роль адсорбции полимера на насадке в процессе фракционирования до сих пор остается неясной. Можно предполагать, что адсорбция полиолефинов на песке или стекле вообще не происходит или происходит в незначительной степени. При исследовании более полярного полистирола Кригбаум и Курц [45] показали, что для элюирования высокомолекулярных фракций (>3-10 ) с песчаной насадки иногда необходимо работать при температуре выше критической температуры смешения. Авторы объяснили этот факт адсорбцией, степень которой возрастает как при увеличении молекулярного веса полимера, так и при уменьшении размера частиц насадки. Тот факт, что при фракционировании полистирола методом градиентного элюирования и методами хроматографии эффективности разделения оказываются весьма близкими, Шнайдер и сотр. [48] объяснили адсорбцией. Протекание адсорбции можно заранее предполагать в случае сильно полярных полимеров и насадок. Деро и От [13] рассмотрели работу Брукса и Бадгера [49[, которые провели фракционирование нитроцеллюлозы по молекулярному весу и по степени замещения путем адсорбции полимера на крахмале. [c.77]

Нигард и Холл обнаружили, что адсорбционные свойства мембрапных (( ИЛьтров из нитроцеллюлозы можно нснользовать для фракционирования нуклеиновых кислот [1]. Для этой же цели нригодна и нитроцеллюлоза, упакованная в виде колонки [2, 3]. Но сравнению с мембранными фильтра- ми колонки из нитроцеллюлозы обладают большей емкостью, и, кроме того, выход нуклеиновых кислот с колонок гораздо выше. [c.125]

Влияние размера ионов на процесс адсорбции видно из данных Дейля по поглощению полигалактуроновых кислот различной степени гидролиза на сильноосновных ионитах (см. табл. VI). Иллюстрацией разделения коллоидных веществ, различающихся размером молекул, могут служить исследования Марка и Саито , которые изучали фракционирование ацетилцеллюлозы при хроматографировании на колонке с кровяным углем. Низкомолекулярные компоненты адсорбировались в верхней части колонки, в то время как высокомолекулярные компоненты проскакивали. Много примеров приведено в работах Клессона, который работал в области отделения высокомолекулярных полимеров от низкомолекулярных (нитроцеллюлоза, метилметакрилат, неопрен). [c.415]

Шульц [179] определял распределение молекул нитроцеллюлозы по paa MepaM путем фракционирования с последующим измерением осмотического давления. Он построил довольно сим.метричную кривую распределения разница в значениях СП достигала шести-восьмикратиого размера, что соответствует указанным вьппе изменениям значений СП некоторых фракций (табл. 13). [c.228]

Для анализа РНК. кодирующих альбумин, с помощью ДНК-зонда используется метод Нозерн-блоттинга. На первом этапе с помощью гель-электрофореза, фракционируют интактные молекулы РНК дефектных и контрольных клеток печени и пол чают набор полос. Для гого чтобы молекулы РНК, содержащиеся в геле, сделать более доступными ДНК-зонду, осуществляют перенос (блоттинг) фракционированных молекул РНК из геля на лист нитроцеллюлозы. На следующем этапе лист нитроцеллюлозы инкубируют с раствором, содержащим меченый ДНК-зонд. Полосы РНК, гибридизующиеся с зондом, выявляют методом радиоавтографии (рис. 4-72). Известно, что скорость движения молекул нуклеиновых кислот в геле зависит от их размера при электрофорезе малые молекулы перемещаются быстрее, чем большие. Сравнивая [c.239]

Белки, разделенные в геле с помощью ДСН-электрофореза, переносят на твердую подложку, например на нитроцеллюлозу или активированную бумагу (Renart et al., 1979). Считается, что активированная бумага, с которой перенесенные белки связываются ковалентно, обладает более высокой сорбционной емкостью, которая, к сожалению, проявляется и в более высоком фоновом связывании. На сегодняшний день наиболее популярным материалом матрицы для белкового переноса является нитроцеллюлоза. Методы фракционирования белков в геле с использованием ДСН-электрофореза и (или) изоэлектрофокусирования весьма многочисленны и разнообразны. В настоящей статье мы не будем их рассматривать, а при изложении материала будем считать, что у нас имеется гель, в котором с применением тех или иных электрофоретических приемов уже провели разделение белковых компонентов исследуемых образцов. [c.342]

Недавно было показано, что после двумерного фракционирования 0,2 мг смеси белков по методу О Фаррелла, выявившего около 400 пятен, описанный только что перенос можно осуществить последовательно на три нитроцеллюлозных фильтра, если силу тока переноса ограничить 300 мА, а продолжительность-— одним часом. После обработки фильтров первичными антителами иммунные комплексы обнаруживали с помощью радиоактивно меченного белка А. При этом также использовали возможность снятия антител для последующей повторной обработки фильтра антисывороткой другой специфичности, однако вместо ДДС-Na для этой цели применили вымачивание фильтра в течение 1,5 ч при комнатной температуре в кислой среде 0,1 М глицин-H l (pH 2,2) с 50 мМ КС1 и 20 мМ ( H, OO)jMg. Фиксированные на нитроцеллюлозе антигены при этом не утрачивали своих иммунохимических свойств [Lego ki, Verma, 1981]. [c.133]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология