Эксклюзионная хроматография эксклюзионный предел

Выбор носителя. Выбор геля как носителя определяется диапазоном его проницаемости, верхним пределом которого является предел ситового исключения (эксклюзионный предел), а нижним —полная проницаемость. Этот диапазон легко найти из калибровочной кривой, построившее для данного образца и геля. Рассмотрим типичную калибровочную кривую (см. рис. 26) для разделения двух веществ в молекулярно-ситовой хроматографии. Носители, представляющие кривую /, не подходят для разделения этих двух веществ, так как они полностью проникают в гель, и разделение будет неполным. Носители, представляющие кривую 2, также непригодны, так как эти два вещества совершенно не задерживаются гелем. Требуемыми свойствами обладают носители, представляющие кривую 3, так как оба разделяемые вещества входят в линейный диапазон проницаемости геля с максимальным отношением [c.77]

Выбор диаметра колонки лимитируется двумя главными факторами увеличением ВЭТТ за счет поперечной диффузии с ростом диаметра и снижением сорбционной емкости колонки при его уменьшении. Очевидно, что в тех случаях, когда процесс разделения не лимитируется количеством макрокомпонентов в пробе, оправдано уменьшение диаметра. Так, в капиллярной хроматографии используют микроколонки диаметром вплоть до 20 мкм. Применение подобных колонок вводит существенные ограничения по количеству разделяемых веществ. При анализе смесей с большим разбросом по содержанию отдельных компонентов в режиме высокоэффективной хроматографии оправдано увеличение диаметра колонок до 2-3 мм. Это позволяет увеличивать количество пробы без нарушения линейности изотермы межфазного распределения для компонентов, определяющих загрузку колонки. В обычной жидкостной и газовой хроматографии диаметр колонки составляет 5-10 мм (в жидкостной) и 2-4 мм (в газовой) хроматографии. Но и здесь в соответствии с решаемой задачей возможны существенные отклонения в обе стороны минимально до 2-3 мм, максимально до 50-60 мм и более. Причем верхний предел определяется решением не только препаративных задач, но и чисто аналитических, например в эксклюзионной хроматографии. [c.186]

Пригоден для эксклюзионной хроматографии, предел эксклюзии — 3000 [c.198]

В целом ППФ оказались удачным дополнением эксклюзионной хроматографии, позволяющим быстро и эффективно разделять смеси высокомолекулярных органических веществ — латексов, полимерных материалов, протеинов, ДНК, полимеров. Поскольку объем каната невелик (от 1 до 5 мл), то и объем пробы, вводимой в канат, должен быть также мал. Обычно объем пробы находится в пределах от 1 до 500 мкл при содержании разделяемых компонентов в пробе ориентировочно равном = 1%. Это не ограничивает возможности применения ППФ для анализа биологических объектов. [c.246]

Метилированная поверхность пригоден для эксклюзионной хроматографии Предел эксклюзии 50000 [c.234]

В связи с тем что Ко может изменяться в определенных пределах, эксклюзионная хроматография имеет свои отличительные особенности. Изотерма линейна, т. е. концентрация внутри неподвижной фазы всегда прямо пропорциональна концентрации в подвижной фазе, и пики имеют форму кривой Гаусса. Поскольку максимальное значение Ко равно 1, все компоненты должны элюироваться в пределах определенного объема V/, но последние пики накладываются. Образцы могут вводиться последовательно, до того как будет вымыт последний пик. На практике автоматический ввод пробы осуществляется даже с неизвестными веществами. [c.181]

Эксклюзионная хроматография — это относительный метод, а Мг полимерных образцов, используемых для калибровочной процедуры, определяют с относительной погрешностью до 5—10% (при 95% доверительном интервале). Поэтому эксклюзионный анализ следует проводить при таких условиях, когда точность получения Л1г лежит в пределах погрешности определения их с помощью абсолютных методов. [c.137]

Гель-хроматография —осспля форма жидкостной хроматографии. Она осно-вана на разделении молекул по их различному размеру (рис. 5.3-18). Все молекулы, имеющие размеры выше определенного, исключаются из силикагеля или полимерного сорбента с определенным размером пер (эксклюзиониая хроматография). Молекулы с молекулярной массой ниже эксклюзионного предела сорбента соответствующим образом удерживаются. В отличие от всех методов ЖХ, обсуждавшихся до этого, гель-хроматография не основана ни на каком химическом или физическом взаимодействии с неподвижной фазой. [c.287]

В гель-проникающей хроматографии в качестве наполнителя колонок применяют макропористые силикагели, пористые стекла и органические полимерные гели. Материалы одного и того же типа, различающиеся по своей пористости, предназначены для разделения веществ с молекулами разного размера. Пористость характеризуется средним размером пор (десятки и сотни нанометров) или эксклюзионным пределом по молекулярной [c.239]

При выборе наполнителя колонки необходимо учитывать максимальное значение молекулярного веса веществ, которые еще удерживаются данной колонкой (предел исключения по молекулярному весу). Большинство фирм, выпускающих наполнители для колонок эксклюзионной хроматографии, дают предел исключения по молекулярному весу для каждого типа наполнителя. Так, если необходимо провести разделение полимеров с молекулярным весом 4 000, 20000 и 50 000, то в соответствии с табл. 4.3 необходимо использовать в качестве наполнителя колонки биогласс 200. Первым из колонки будет элюироваться полимер с молекулярным весом 50 000 в объеме растворителя, соответствующем свободному объему колонки. Следующим выйдет из колонки полимер с молекулярным весом 20 ООО и последним — полимер с молекулярным весом 4000. Если бы в состав смеси входили полимеры с молекулярными весами 4000, 20 000, 50 000 и 150 000, то следовало бы выбрать в качестве наполнителя колонки биогласс 200 и 500. В этом случае две колонки, каждая заполненная одним из указанных наполнителей, включают последовательно. Первым элюируется из колонки в объеме растворителя, со- [c.89]

Типичные значения объема пробы в эксклюзионной хроматографии лежат в пределах 25-300 мкл. Естественно, что при большей дозе возрастает размывание полосы. Как правило, объем пробы должен быть менее 1/3 объема, занимаемого в колонке индивидуальным низкомолекулярным соединением, элюирующимся из колонки в зоне полного проникания. Этот объем легко определить по ширине его пика у основания. Однако если чувствительность детектора недостаточна и приходится увеличивать массу образца, то нужно увеличивать объем пробы, а не концентрацию, так как в этом варианте ухудшение характеристик колонки будет заметно меньше. [c.51]

Коэф. емкости к существенно влияет на величину R при изменении к от О до 10 (оптим. пределы) сильно возрастает. Значение к определяется уд. пов-стью сорбента и его кол-вом в колонке, а также константой адсорбц. равновесия (константой Генри). Коэф. селективности а определяется различием констант адсорбц. равновесия двух разделяемых компонентов. При увеличении а (от I до 5) резко возрастает, при дальнейшем увеличении а-меняется мало Селективность колонок зависит от хим. структуры пов-сти (в эксклюзионной хроматографии-геом. структуры) сорбента, состава элюента, т-ры колонки и строения разделяемых соединений. Т. к. сорбция хроматографируемых в-в в Ж. X. определяется попарным взаимод. трех осн. компонентов системы-сорбента, разделяемых в-в и элюента, то изменение состава элюента - удобный способ оптимизации процесса разделения. [c.152]

Гель- проникающая хроматография служит для разделения гомологов и олигомеров, например, жирных кислот с относительной молекулярной массой между 100 и 350. Для этогъ выбирают смолы с эксклюзионным пределом около 1000. [c.291]

На рис 7-16 изображены хроматограммы, полученные при разделении феноло-формальдегидных смол методом эксклюзионной хроматографии на колонке 2 м х 0,35 мм (внутр диам ), заполненной полистирольным гелем с пределом эксклюзии 1 10 ед мол массы (TSK-GEL G1000H) [10] [c.171]

Пригоден для эксклюзионной хроматографии предел эксклюзии 3000 Сферические частицы pH 2-11 Функциональные группы СН2ОН Пригоден для эксклюзионной хроматографии Выпускается с различной степенью сшивки (4,7 8 и 10% дивниилбензола) [c.235]

Сопоставление калибровочных кривых, построенных по препаративным фракциям,с кривыми, построенными по эталонным полистиролам [59], показьшает, что кртые совпадают в области молекулярных масс 1000— 10000. За пределами этой области кривые, построенные по препаративным фракциям, лежат вьипе, т. е. отклоняются в сторону более высоких значений М. В области М ниже 1000 это можно объяснить влиянием адсорбции ароматических соединений на геле, приводящей к их задержке в колонке и в результате к более высокой средней молекулярной массе фракций при данном объеме элюирования. В области более высоких молекулярных масс (выше 10000) это отклонение, вероятно, связано с разными условиями, в которых находится нефтепродз ст при проведении эксклюзионного разделения и при определении молекулярной массы, что приводит к разной степени ассоциации в растворе вероятно, при определении молекулярной массы степень ассоциации вьпие и поэтому значения М фракций завьпиены по сравнению с молекулярной массой при эксклюзионной хроматографии. [c.85]

Метод микро-ВЭЖХ облегчает работу с длинными колонками с больпгам числом теоретических тарелок. На рис. 7-10 приведены хроматограммы эпоксидной смолы Epikote 828, полученные методом эксклюзионной хроматографии на микроколонках длиной 50 см и 2 м, заполненных полистирольным гелем с частицами размером 5 мкм. Предел эксклюзии для этого геля по полистирольному стандарту составлял 2-104 ед. мол. массы [10]. На хроматограмме б рис. 7-10 пики побочных продуктов расположены между основными пиками (п = О и п = 1). Объемная скорость элюента составляла всего 1 мкл/мин, и на один опыт расходовалось не более 120 мкл подвижной фазы. Такие длинные микроколонки для эксклюзионной хроматографии просты в эксплуатации, и их легко изготовить. [c.167]

Для гель-проникающей хроматографии выпускаются гли-кольметакрилатные гели Сферой 40, 100, 300, 1000 и 100 000. Цифра означает среднее значение эксклюзионного предела по молекулярной массе декстранового стандарта в тысячах даль- [c.241]

Методом эксклюзионной хроматографии с использованием полистирольных стандартов различной молекулярной массы (от 510 до 3 300 ООО дальтон) определен предел эксклюзии на колонках с синтезированными гетероповерхностными сорбентами. Из градуировочного графика зависимости логарифма молекулярной массы от времени удерживания (рис. 9.10) видно, что предел эксклюзии для обоих гетероповерхностных сорбентов (внешняя поверхность алкильная) близок и находится в области 10 0,5 тысяч дальтон. Для сорбентов с диольной защитой внешней поверхности предел эксклюзии определяли по полиэтиленгликольным стандартам в элюенте вода-ацетонитрил (30 70). Предел эксклюзии находился в области 6—10 тысяч дальтон, но не исключено, что он зависит от исследуемого класса веществ и от состава элюента. [c.543]

В соответствии с первым из этих признаков наиболее распространенным вариантом хроматографических методов являе-гся жидкостно-твердофазная хроматография. Но подобный обобщенный термин не нашел широкого распространения. Обычно принято выделять отдельные методы в пределах этого направления по второму классификационному признаку — механизму взаимодействия хроматографируемого вещества со стационарной фазой жидкостно-адсорбционнуто, аффинную, ионообменную, лигандообменную, эксклюзионную и другие. Каждый из этих методов имеет свою специфику и требует отдельного рассмотрения. [c.191]

Эффект ограниченного проникновения в поры сорбента самых крупных молекул можно успешно использовать для разделения очень больших молекул. В зависимости от размера молекул (в растворе) они будут в большей или меньшей степени исключаться из пор сорбента, что в результате повлияет на их время удерживания. Этот эффект используется в эксклюзион-ной, или гель-проникаюшей хроматографии. В этих методах умышленно устраняются любые взаимодействия между растворенным веществом, и неподвижной фазой. Растворенные молекулы остаются исключительно в подвижной фазе, но доступный объем этой фазы и соответственно объем удерживания могут меняться в пределах общего объема подвижной фазы до так называемого исключаемого объема (предела эксклюзии), который представляет собой объем подвижной фазы вне нор. В этом объеме элюируются очень большие растворенные молекулы ( исключаемые вещества), которые будут первыми появляться на хроматограмме. Эксклюзионную (гель-проникающую) хроматографию целесообразнее всего использовать для анализа соединений с молекулярной массой более 3000 (см., например, [1], с. 270). Поскольку этот метод разделения основан на различиях в размере молекул, а не (термодинамической) селективности, в данной книге он не рассматривается. [c.33]