Мутант включение

В 1974 году Дж. Адлер и его сотрудники опубликовали в США работу по движению мутанта кишечной палочки, лишенного способности синтезировать АТФ за счет дыхания, У мутанта включение дыхания никак не [c.154]

Транспозоны могут служить маркером гена, предназначенного для клонирования. Как известно, при клонировании хромосомных генов бактерий иногда возникают сложности, связанные с тем, что нет простого метода, позволяющего выявить, какая из плазмид, несущих встроенный фрагмент хромосомной ДНК, содержит интересующий исследователя ген. Иногда эту проблему удается решить, выделив сначала мутант по этому гену с включенным в него или расположенным поблизости транспозоном. [c.308]

Рис. 15.4. Изменение разбивки считываемой последовательности на триплеты в результате мутации со сдвигом рамки . Бактериофаг Т4 способен образовывать лизоцим. Этот фермент кодируется геном фага. Вверху представлен отрезок нормальной нуклеотидной последовательности (фаг дикого типа) и указаны соответствующие аминокислоты, Внизу приведена нуклеотидная последовательность двойного мутанта, полученного из дикого типа в результате двукратной обработки профлавином. Нуклеотид А во втором триплете утрачен, и начиная с этого места триплеты считываются неправильно ( рамка считывания сдвинута). В результате включения О в конце пятого неверного триплета в дальнейшем восстанавливается правильный порядок считывания. Таким образом, нуклеотидные последовательности двойного мутанта и дикого типа различны только на участке от второго до пятого триплета включительно. Если кодируемые этими триплетами аминокислоты не существенны для функции данного белка, то вторая мутация восстанавливает свойства (фенотип) дикого типа (генетическая супрессия).

Поскольку выделение мутантов у микроорганизмов — задача относительно несложная, микроорганизмы являются очень удобным объектом при исследовании метаболических процессов и изучении физиологической роли определенных биохимических реакций, тем более что протекающие в живых организмах метаболические процессы в основном универсальны. Например, бактерии, птицы, рептилии и млекопитающие нуждаются в синтезе одинаковых низкомолекулярных соединений. Далее, различные виды организмов используют одинаковый клеточный аппарат для включения этих соединений в определенные макромолекулы. Так, оказывается, что последовательность аминокислот в некоторых белках достаточно близка у таких далеких организмов, как микробы и млекопитающие. Информацию, необходимую для решения некоторых общих проблем биохимии, можно получить при работе с любыми живыми организмами, однако бактерии обладают тем преимуществом, что при работе с ними можно использовать такие методы, которые неприемлемы при работе с другими организмами. Как отметил Дж. Уотсон [43] [c.29]

Включенные в опыт мутанты, а также сорт Белоцерковская 198, из которого они были получены, различались между собой по содержанию и соотношению хлорофиллов а в б, при этом листья одних и тех же ярусов мутантов и исходного сорта имели как неодинаковое содержание хлорофилла, так и разное соотношение хлорофиллов а я б. [c.100]

Использование индикаторного ЭМС-агара позволило выделить также мутантов Е. соН, неспособных использовать в качестве источника углерода и энергии такие сахара и спирты, как арабиноза (Ага ), ксилоза (Ху1 ), маннит (М1Г) или мальтоза (МаГ). При исследовании таких мутантов, неспособных сбраживать сахар, оказалось, что в большинстве случаев эти мутанты утратили способность образовывать тот или иной фермент, участвуюш,ий в тех предварительных превращениях соответствующего сахара или спирта, которые предшествуют его включению в гликолитический путь и которые есть у Е. соН дикого типа Aia+ Ху1+ Ш Ма1+. [c.120]

Изобразите предполагаемую кинетику включения Н-тимина в ДНК до и после изменения температуры от 30° до 42° при культивировании температурочувствительных мутантов Е. соН, содержащих мутации (а) в гене dna Л и (б) в гене dna Е. Известно, что рифампицин ингибирует РНК-полимеразу. Изобразите ожидаемый кинетический профиль включения Н-тимина в ДНК до и после добавления рифампицина к культуре Е. соН дикого типа. [c.129]

Дрожжи с их быстрым размножением и простой одноклеточной организацией - привлекательный объект для генной инженерии, и их легко использовать для включения ДНК, добавляемой в питательную среду. В принципе это позволяет клонировать нормальную ( дикого типа ) форму любого из генов d . Как показано на рис. 13-21, интересующий нас клон может быть без труда вьщелен благодаря его способности избавлять соответствующего мутанта d от его аномалий. [c.413]

Изменения в структуре ДНК встречаются очень редко. Так, например, в среднем ген может удвоиться 10 раз, прежде чем произойдет заметная мутация [128а]. Тем не менее, работая с бактериями нли бактериофагами, мы можем обследовать чрезвычайно большое число особей в поисках мутаций. Если, например, посеять один миллион вирусных частиц на чашку с агаром в условиях, позволяющих распознать мутацию определенного гена, то в среднем мы можем надеяться обнаружить один мутант. Наиболее часто встречаются мутации, обусловленные заменами пар оснований (точковые мутации). Оии происходят в результате включения неправильного основания при репликации или репарации ДНК. При таких мутациях одно основание в триплете кодона замещается другим. В результате возникает другой кодон, что приводит к замене в соответствующем белке одной аминокислоты на другую . Замену одного пиримидина на другой С—)-Т или Т—)-С) или одного пурина на другой пурин иногда называют транзицией, тогда как замену пурина на пиримидин или, [c.246]

Проявление признаков. Уже возможность фотореактивации после УФ-облучения указывает на то, что первичный эффект при воздействии мутагенного фактора не обязательно ведет к истинной мутации. Включение бромурацила в цепь ДНК или димеризация тимина представляет собой лишь премутацию димеризация тимина-процесс обратимый, и в случае фотореактивации дело не доходит до возникновения мутанта. Только при последующей редупликации премутировавшей цепи ДНК первичное повреждение становится стабильным и в дальнейшем передается потомству как новый элемент генотипа. Такая закрепившаяся мутация может исчезнуть только в результате обратной мутации. Проявление мутации в фенотипе связано с рядом последовательных процессов, которые требуют определенного времени или нескольких клеточных делений. Новый фенотип проявится лишь тогда, когда измененный ген начнет функционировать. Этапы, необходимые для реализации нового фенотипа, различны для разных клеток и разных типов мутаций. [c.447]

Существуют так называемые мутации оператора (см. гл. XXI), приводящие к включению (или выключению) целой группы генов (оперона), причем влияние таких мутаций проявляется только в г мс-конфигурации. Это означает, что комбинации Oab io и о аЪсЮ по-разному влияют на синтез белков А, В и С. Первая из этих комбинаций возникает при введении о в генотип ОаЬс, а вторая — при введении О в генотип о ab . Переход О -у о может приводить либо к инактивации всех генов оперона (мутанты 0°), либо к их одновременной активации в отсутствие внешнего индуктора (мутанты 0 ). [c.503]

Включение профага в хромосому бактерии в определенном положении вызывает определенный эффект, в частности иммунитет к действию фага того же самого типа или его мутантов. Наличие профага влияет также на биохимические свойства бактерии-хозяина, и если при конъюгации или трансдукции (см. ниже) этот профаг переносится на нелизогенный штамм [c.253]

У лизогенных бактерий удалось получить мутации под действием ультрафиолетового облучения. Можно различными способами понижать, или подавлять, способность этих мутантов к образованию фагов, вызывающих лизис клетки-хозяина. Можно определить положение соответствующих локусов, и в результате мы получим детальную карту разных локусов профага, который в свою очередь либо включен в определенном месте в бактериальную хромосому, либо прикреплен к ней. Чтобы показать, какие поразительные результаты достигнуты в этой области, мы представим здесь карту расположения мутантных генов умеренного фага Я, инфицирующего Es heri hia соН (фиг. 120). Судя по свойствам мутанта, можно [c.257]

Детали биосинтеза пиримидиновой или тиазо-ловой частей молекулы тиамина до сих пор не выяснены. Накаяма [210] сообщил, что смесь тимина и урацила может удовлетворить потребность в тиамине у мутантов Е. соИ. Однако Гольдштейн и Браун [96], изучая обмен равномерно меченного G -ypaцилa у нуждающегося в урациле мутантного штамма Е. oli, не обнаружили значительной радиоактивности в пиримидиновой части молекул выделенного тиамина. Не наблюдалось также сколько-нибудь значительного включения предшественников урацила, таких, как 2-С -оротовая кислота, [c.241]

Мутант-сферококкоид № 31, включенный в настоящее исследование, получен от производного ЭИ у сорта Украинки и отличался химерным строением колоса [6]. Этот мутант ежегодно в течение 12 лет расщеплялся на растения с фенотипом исходпого сорта, химерные сферококкоиды и стерильные формы с признаками Т. spaero o um. [c.106]

К сожалению, мы еще слишком мало знаем о химии микробных мембран для предсказания детального механизма включения сидерохромов в клетку. Однако основным процессом, посредством которого сидерохромы попадают в клетку, является активный транспорт [26, 27]. Устойчивость к антибиотическому сидерохрому альбомицину была использована для отбора мутантов, неактивных в транспорте сидерохромов, о это нельзя установить, если мутантам недостает специфических связывающих белков [31]. Транспорт железа, лодобно транспорту других важных питательных веществ, может быть очень сложным и многостадийным процессом. [c.216]

Хотя во всех своих рассуждениях мы исходили из того, что каждая аминокислота кодируется нуклеотидным триплетом, выводы, к которым мы пришли, на самом деле не за ксят от этого допущения. Они сохранили бы свою силу и в том случае, если бы число оснований, кодирующих одну аминокислоту, было равно 4 или 5 или даже было сколь угодно большим. Важно только, чтобы нуклеотидная последовательность считывалась с одного конца гена до другого слово за словом так, чтобы при наличии двух близко расположенных нарушений — включения и выпадения — текст , находящийся за пределами двух мутантных участков, читался правильно. Однако получение тройных мутантов типа (+ + +) и (— ---) позволило показать, что кодирование осуществ- [c.331]

Гены тб. гпЬ и mi определяют образование ненормально мелких стерильных пятен, Ь2 — область прикрепления к хромосоме бактерии, xis — белок, контролирующий исключение фага из хромосомы хозяина, ini — белок включения в хромосому, red (ехо и Р) — белки, участвующие в рекомбинации, с1, сП, fill —иммунитет (и прозрачные стерильные пятна), гех ген, контролирующий исключение (подавление роста) гП-мутантов Т-четных фагов. [c.341]

Биохимические исследования жизненного цикла бактериофагов семейства 2 были в значительной степени дополнены работами по выделению и исследованию фаговых мутантов. Эти мутанты относились в основном к тем же двум условно-летальным типам, которые были использованы при построении кольцевой генетической карты Т-четных фагов а) чувствительные к температуре ( т ззеп5е ) мутанты, неспособные размножаться при повышенной температуре, при которой происходит развитие фага дикого типа, и б) ат6ег(нонсенс)-мутанты, способные размножаться только в клетках штаммов, несущих супрессорную мутацию, обеспечивающую-включение приемлемой аминокислоты в растущую полипептидную цепь под влиянием мутантного бессмысленного кодона УАГ (УАА или УГА). [c.474]

Биосинтез хлорамфепикола являлся предметом многочисленных экспериментальных и теоретических исследований, и они привели к осуществлению крупномасштабного производства антибиотика уже в тот период, когда еще не существовало эффективных химических методов синтеза. Поскольку 7 является продуктом микробиологического превращения, то, изменяя условия выращивания культуры и отбирая мутанты, можно максимально увеличить выход желаемого метаболита. Одно из важнейших условий выращивания культуры (которое можпо легко варьировать) — присутствие специфических субстратов, способных выступать в роли достаточно эффективных предшественников метаболита. Это условие положено в основу методики исследования путей биосинтеза, ибо меченые предшественники можно использовать для измерения суммарных скоростей включения метки и для определения происхождения отдельных атомов в конечном метаболите. [c.164]

Через 4 ч после начала споруляции в клетках впервые появляется другая форма фермента. Она содержит белок с мол. массой 29000 дальтон, ассоциированный с обычным минимальным ферментом. Новый белок, обозначаемый придает способность минимальному ферменту транскрибировать in vitro новые гены. По крайней мере в одном из spoO-мутантов не синтезируется. Поэтому можно думать, что рассматриваемый белок является продуктом гена, участвующего в споруляции на ранней стадии и необходимого для включения следую- [c.158]

Регуляторный ген, продукт которого контролирует переключение транскрипции с предранних генов на задер-жанно ранние, был идентифицирован благодаря мутациям, нарушающим переключение. Мутанты фага лямбда по гену N способны транскрибировать только предран-ние гены, и поэтому инфекционный процесс останавливается на этой стадии. Наблюдаемый эффект во многом похож на то, что происходило с фагом 8Р01, несущим в гене 28 мутацию, которая нарушает образование С генетической точки зрения безразлично, обусловлено ли включение транскрипции новых классов генов изменением специфичности инициации или антитерминацией. Оба процесса находятся под позитивным контролем со стороны раннего фагового гена, кодирующего белок, необходимый для включения следующего класса генов. [c.169]

Основная часть генетических экспериментов, выявивших природу генетического кода, была осуществлена Фрэнсисом Криком, Сиднеем Бреннером и их коллегами с использованием г//-мутантов фага Т4. Полученные ими результаты были впервые представлены на Биохимическом конгрессе в 1961 г. Они изучали г7/-мутации, полученные с помощью профлавина. Интерес к профлавин-индуцируемым мутациям был обусловлен тем, что эти мутации, как считалось, возникают в результате изменений в нуклеотидной последовательности ДНК, не связанных с замещением отдельных нуклеотидов. Основанием для такого представления послужили особые свойства профлавин-индуцированных мутаций, которые заметно отличают их от мутаций, полученных при действии мутагенов другого типа. Мутагены-аналоги нуклеиновых оснований - 2-аминопурин и 5-бромурацил вызывают мутации при включении в состав ДНК вместо нормальных нуклеотидов. Считалось (и как оказалось в дальнейшем вполне справедливо), что мутации, вызываемые этими мутагенами, представляют собой результат замещения отдельных оснований. Подтверждением этому служил тот факт, что те же самые вещества способны индуцировать и реверсию полученных с их помощью мутаций к исходному дикому типу (см. гл. 20). В то же время для профлавин-индуцированных мутаций реверсии к дикому типу под действием мутагенов, аналогов оснований, практически не наблюдается (табл. 12.2). Мутации этого типа ревертируют или спонтанно, или с более высокой частотой при действии профлавина. То, что профлавин-ин-дуцированные мутации вообще способны к реверсии, свидетельствует [c.70]

Рис. 13.5. А. Включение Н-тимина (черные кружки) и С-лейцина (цветные кружки) в клетки температурочувствительного мутанта (1паЕ при рестриктивной температуре. После температурного сдвига до 42,5° синтез ДНК практически немедленно прекращается, в то время как синтез белка продолжается с нормальной скоростью. Сравните это с поведением клеток температурочувствительного мутанта (1паА (включение Н-тимина-черные квадратики включение С-лейцина-цветные

Для исследования живых бактериальных клеток разработан ряд методов. При микроскопировании можно использовать культуры, выраш,енные в жидких средах, однако для получения нужного числа бактерий они нуждаются, как правило, в разведении стерильной средой. Культуры, выраш енные на твердых средах, можно суспендировать с помощью стерильной петли или иглы в капле стерильной жидкой среды или какого-нибудь раствора, но не водопроводной воды, до слабого помутнения (разд. 2.5.1). Следует помнить, что возраст культуры и физико-химические параметры среды могут быть причиной ненаследуемых (фенотипических) модификаций как внепротоплазматических компонентов (жгутики и капсулы), так и компонентов, находящихся внутри собственно клетки (различные включения) все эти компоненты являются важными признаками, по которым ведется идентификация. Вместе с тем специальные операции или пересевы, производимые в лаборатории, могут благоприятствовать развитию мутантов, имеющих наследственно измененные по сравнению с диким типом черты строения. Изменения могут быть стабильными и нестабильными, но очевидно, что при описании формы и структуры бактерий условия содержания культуры должны быть строго определенными, так как старение культуры и изменения состава среды могут быть причиной ряда морфологических изменений. [c.56]

Эта общая тактика поиска применима для любого мутанта, для которого удается найти подходящий субстрат, позволяющий благодаря изменению окраски различать колонии мутантов. В качестве примеров можно указать на применение и-нитрофенилфосфата для выявления фосфатазных мутантов, красителя Гимзы или метилового зеленого для выявления мутантов по нуклеа-зам и диазотированных производных казеина, коллагена или альбумина для выявления мутантов по протеолити-ческим ферментам. Солюбилизация желатины (которая сама по себе не является цветовым индикатором), сопровождающаяся переходом из опалесцирующей формы в прозрачную, уже давно используется для измерения протеолитической активности. Подобным образом нук-леазную активность можно выявлять по солюбилизации РНК и ДНК, включенных в агар в виде кислотонерастворимых компонентов. [c.37]

Смотреть страницы где упоминается термин Мутант включение: [c.661] [c.600] [c.354] [c.219] [c.150] [c.176] [c.529] [c.241] [c.161] [c.330] [c.331] [c.332] [c.345] [c.361] [c.432] [c.432] [c.279] [c.150] [c.176] [c.120] [c.130] [c.36] [c.286] [c.82]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология