Антитела, протеолитическая

И о том, ЧТО вызывает симптомы миастении. Например, было найдено, что при действии антител ускоряется протеолитическая деградация рецептора. Возможно, что именно таким способом антитела уменьшают плотность рецептора на концевой пластинке н увеличивают тем самым скорость его обмена. [c.268]

Иммуноглобулины IgA являются основным классом антител в секретах (молоке, слизи, слезах, секретах дыхательных путей и кишечника). Эти белки существуют либо в виде мономера (как IgG), либо чаще в виде димера, содержащего дополнительно одну J-цепь и еще одну полипептидную цепь, называемую секреторным компонентом (рис. 119). Секреторный компонент синтезируется эпителиальными клетками и первоначально находится на внешней поверхности этих клеток, где он служит в качестве рецептора для связывания IgA из крови. Образующийся комплекс (IgA — секреторный компонент) поглощается клетками путем эндоцитоза, переносится через цитоплазму эпителиальных клеток и выделяется в секреты. Дополнительно к этой транспортной роли секреторный компонент может также предохранять молекулу IgA от деградации протеолитическими ферментами в секретах. [c.215]

Комплемент представляет собой сложный комплекс белков, состоящий из 20 взаимодействующих компонентов, обозначаемых С1, С2, СЗ и т. д. до С9, фактор В, фактор О и ряд регуляторных белков. Все они являются водорастворимыми белками с молекулярными массами от 24 000 до 400 000 (табл. 9), циркулирующими в крови и внеклеточной жидкости. Большинство этих белков являются неактивными вплоть до запуска системы в момент образования комплекса антиген — антитело. После активации комплемента его действие носит каскадный характер и представляет собой серию протеолитических реакций. Образно говоря, отношения между антителами и комплементом напоминают собой отношения между ключом зажигания и мотором взаимодействие антитела с антигеном включает мотор. [c.220]

Белки являются специфическими антигенами антитела, образующиеся при впрыскивании чужеродного белка, дают осадки только с этим белком. Так, например, гемоглобин человека производит в сыворотке кролика антитело, осаждающееся гемоглобином человека, но не осаждающееся гемоглобином быка. Только в случае родственных животных родов антитела не дифференцируются белки сыворотки лошади производят в сыворотке кролика антитело, осаждающееся также белками сыворотки осла. С другой стороны, миоглобин быка обусловливает образование антитела, не осаждающегося гемоглобином того же животного ввиду того что оба вещества содержат гем, разумеется, что специфичность обусловлена не последним, а белковым участком молекулы. Белки теряют антигенные свойства в результате денатурации или частичного гидролиза протеолитическими ферментами. Желатина не обладает антигенными свойствами, потому что ее молекулы сильно расщеплены, а у инсулина, по-видимому, отсутствие антигенных свойств обусловлено слишком малым размером его молекул. [c.448]

Протеолитические ферменты папаин и пепсин расщепляют молекулы антител на различные характерные фрагменты папаин дает два отдельных [c.21]

Антигенные свойства белков исчезают после расщепления белков протеолитическими ферментами. В результате денатурации может происходить либо изменение, либо частичная потеря первоначальных антигенных свойств нативного белка. Так, например, антитела против нативного яичного альбумина весьма слабо реагируют с денатурированным яичным альбумином [14]. Иммунизация же денатурированным яичным альбумином приводит к образованию антител, специфически реагирующих только с денатурированным белком [15]. Надо, однако, отметить, что каких-либо заметных различий в антигенной активности нативного и [c.332]

Недостаточная концентрация антител может усиливать репродукцию вируса. Иногда антитела могут защищать вирус от действия протеолитических ферментов клетки, что при сохранении жизнеспособности вируса приводит к усилению его репликации. [c.30]

Комплемент, получивший свое название благодаря тому, что он комплементирует (дополняет) и усиливает действие антител, представляет собой главное орудие, с помощью которого антитела защищают организм позвоночного от большинства бактериальных инфекций. Он представляет собой систему сывороточных белков, которые могут активироваться комплексами антиген-антитело или микроорганизмами и претерпевать каскад протеолитических реакций, конечный результат которого - сборка комплексов, атакующих мембраны. Такие комплексы проделывают в мембране микроорганизма отверстия, тем самым убивая его. В то же время протеолитические фрагменты, освобождаемые в процессе [c.253]

Система комплемента действует сама по себе и совместно с антителами, защищая организм позвоночного от инфекции. Ранние компоненты комплемента представляют собой проферменты крови, которые последовательно активируются в усилительном каскаде реакции ограниченного протеолиза. Этот процесс может протекать либо по классическому пути, который запускается связыванием антител IgG или IgM с антигеном, либо по альтернативному пути, который может запускаться непосредственно клеточными стенками внедрившихся микроорганизмов. Наиболее важный компонент комплемента - белок ИСЗ, активируемый в результате протеолитического расщепления и затем ковалентно связывающийся с близлежащими мембранами. Микроорганизмы, несущие на своей поверхности активированный СЗ (СЗЬ), легко поглощаются и уничтожаются фагоцитирующими клетками. Кроме того, СЗЬ помогает инициировать сборку поздних компонентов, которые образуют большой комплекс мембранной атаки, вызывающий лизис внедряющихся микроорганизмов. При активации комплемента освобождается также ряд небольших растворимых пептидных фрагментов, привлекающих и активирующих нейтрофилы и стимулирующих секрецию гистамина тучными клетками это приводит к воспалительной реакции в местах активации комплемента. Протеолитический каскад комплемента остается привязанным к мембранам внедрившихся микроорганизмов, активировавших этот каскад, главным образом благодаря тому, что некоторые из компонентов, включая СЗЬ, остаются активными менее 0,1 миллисекунды и поэтому не могут распространить атаку на близлежащие собственные клетки организма. [c.260]

Наши представления о строении антител были сильно расширены в последние годы в результате открытия их чрезвычайно специфического расщепления в присутствии протеолитических ферментов и восстановителей [1008, 1009]. Два фрагмента молекулярного веса 45 000, по-видимому, идентичны и ведут себя подобно одновалентным антителам, а третий фрагмент (молекулярного веса 155 000) не имеет сродства к антигену. Физиче- [c.340]

Получение протеолитических фрагментов для анализа структуры и функции антител [c.109]

Установлено, что N- и С-концы полипептидной цепи бактериородопсина находятся по разные стороны цитоплазматической мембраны N-конец обращен наружу, а С-конец — внутрь клетки. Это заключение основывается на данных опытов по действию протеолитических ферментов и моноклональных антител в системах двух типов субклеточных частицах с той же ориентацией мембраны, что у клеток, и протеолипосомах с обратной ориентацией мембраны. [c.105]

РаЪ-фрагмент (РаЬ fragment) - сщин из двух или нескольких идентичных фрагментов с одним антигенсвязывающим центром, образующихся при обработке антител протеолитическим ферментом. [c.265]

Рже. 18-16. Фрагменты, образующиеся при расщеплении молекрт антител протеолитическими ферментами папаином и пепсином [c.231]

С-Область легкой цепи также представлена одним доменом (С ), тогда как у тяжелых цепей оиа заметно длиннее и состоит из 3 - 4 линейно расположенных доменов (С I — С З), структурно гомологичных С-области легкой цепи. Каждый домен упаковывается в отдельную относительно независимую глобулу, причем основной тип вторичной структуры глобулы — антипараллельная р-складча-тая (рис. 118). Между глобулами находятся открытые участки полипептидной цепи, особенно чувствительные к действию протеолитических ферментов. Весьма вероятно, что именно эти участки цепи обеспечивают значительную гибкость всей структуры, позво-1яющей молекуле антитела приспособиться к конфигурации антигена или взаимодействовать с двумя антигенными детерминантами, расстояние между которыми может варьировать. [c.214]

Весьма эффективным методом уточнения топографии мембранных белков, прежде всего точной локализации внемембранных участков, является использование моноклональных антител. Для получения гибридом использовались фрагменты бактериородопсина, полученные путем его расщепления протеолитическими ферментами. Наиболее ценными в этом случае оказались синтетические фрагменты коррелируя величину синтетического пептида и эффективность связывания соответствующего антитела, можно с высокой степенью достоверности зондировать выступающие из мембраны полипептидные петли. Ниже показана локализация различных антигенных детерминант молекулы бaктepиopoдoпtинa в пурпурной мембране (Г. Корана, И. Г. Абдулаев). [c.609]

Система комплемента действует сама по себе и в кооперации с антителами защищая организм позвоночного от инфекции. Она состоит главным образом из неактивных белков крови, которые последовательно активируются в усилительном каскаде реакций. Этот процесс может протекать либо по классическому пути, который запускается связыванием антител IgG или 1дМ с anmit геном, либо по альтернативному пути, который может запускатьси непосредственно клеточными стенками внедрившихся микроорганизмов. Наиболее важный компонент комплемента-белок СЗ, который активируется в результате протеолитического расщепления и затем ковалентно связывается с близлежащими мембранами микроорганизмы, несущие на своей поверхности активированный СЗ (СЗЬ), легко поглощаются и разрушаются профес- [c.50]

Широкие стереохимические проблемы встают в связи с изучением агрегатов, образуемых антигенами с антителами. Если количественное соотношение антигена и антитела лежит в опре деленных пределах, то агрегаты антиген—антитело обычно нерас-гворимы. Эти агрегаты обладают некоторыми специальными свой сгвами, такими, как способность фиксации (связывания) комплемента, освобождение гистамина из некоторых его комплексен в клетках и, возможно, активации определенных протеолитических энзимов (ферментов). Высказан ряд гипотез, объясняющих эти явления может быть, они связаны с особой конформацией реагирующего антитела, а возможно, что некоторые черты и особенности структуры агрегата антиген—антитело могут определять эти специфические свойства. [c.688]

Мономер иммуноглобулина с молекулярной массой 150 ООО может быть превращен в большие фрагменты при действии протеолитических ферментов. Папаин в присутствии цистеина расщепляет иммуноглобулины на 3 фрагмента F (мол. масса 50 ООО), названный так в связи со способностью легко кристаллизоваться (с — rystaled), и два идентичных фрагмента Fab (мол. масса также 50 ООО), получивших свое название потому, что каждый содержит место соединения антитела с антигеном (ab-antibody). Каждый четырехцепочный мономер содержит, следовательно, два места соединения с антигеном. Пепсин расщепляет Н-цепи, начиная с С-концевых групп, и последовательно гидролизует F фрагмент, оставляя (ЕаЬ )2-часть (рис. 7). [c.105]

Молекулы у-глобулинов (антитела) могут быть расщеплены с уменьшением их молекулярного веса наполовину и даже больше протеолитическими ферментами (непсином, трипсином и др.). При этом их иммунные свойства не теряются. [c.510]

Ферментативное расщепление ИгГ имеет особое значение при исследовании различных биологических свойств молекулы. Продолжая работы, начатые по исследованию действия нескольких протеолитических ферментов, ряд авторов показали, что папаин расщепляет ИгГ кролика на три крупных фрагмента — I, ПиШ — с образованием очень малого количества мелких пептидов. Фрагменты I и II имеют молекулярный вес около 42 ООО, III — несколько больше. Как I, так и II содержат участки со свойствами антител, обладающие сродством к специфическому антигену, что было показано несколькими методами [1, 20, 21, 22]. Фрагмент III легко кристаллизуется и содержит в основном изотипические (т. е. видоспецифические) антигенные участки. Аллотипические антигенные участки (т. е. участки, определяющие отличия между иммуноглобулинами разных индивидуумов одного и того же вида) связаны с фрагментами I и II, тогда как способность фиксироваться на KOHie и проходить через плаценту, но-видимому, связана со структурными особенностями фрагмента III. Связывание комплемента после реакции ИгГ со специфическим антигеном представляет собой сложную реакцию, в которой принимают участие все части молекулы, входящие во фрагменты I, II и III [23]. Вполне возможно, что наиболее важным моментом для выяснения структуры молекулы является тот факт, что все указанные биологические свойства сохраняются после расщепления молекулы на три части. Это дает веские основания для предположения, что папаин гидролизует пептидные связи на небольшом уязвимом участке и что исходная молекула состоит из определенных частей, пространственная структура которых не затрагивается при гидролизе. Нисонов и сотр. [24] показали, что при гидролизе пепсином образуется одна фракция с молекулярным весом около 100 ООО, в которой сохраняются оба участка антитела. При восстановлении цистепном в низкой концентрации эта фракция расщепляется на равные части, которые по биологическим и химическим свойствам очень сходны с фрагментами [c.104]

Рис. 18-19. Строение димерной молекулы антител IgA, содержащихся в секретах (сильно упрощенная схема). В дополнение к двум мономерам IgA, которые связаны одним дисульфидным мостиком между тяжелыми а -цепями, комплекс содержит также J-цепь и добавочную нолинентидную цень с мол. массой 70000 дальтон, называемую секреторным комнонентом. Как полагают, эта цепь защищает молекулы IgA от переваривания протеолитическими ферментами секретов

Классический путь обычно активируется, когда антитела IgG или IgM связываются с антигенами на поверхности микроорганизма. Связывание антигена с антителами в свою очередь приводит к тому, что константные области антител связывают первый компонент классического пути, С1, который представляет собой большой комплекс, состоящий из трех субкомпонентов - lq, lr и is (рис. 18-41). Связывание глобулярной головки lq с антителом IgM или IgM, присоединенным к антигену, активирует lq, и в результате запускается ранний протеолитический каскад классического пути. Однако прежде чем произойдет активация, таким способом должна быть связана более чем одна головка поэтому для включения классического пути иужпа целая группа чужеродных антигенных детерминант (рис. 18-41, Б). Это тоже служит для концентрирования процессов активации комплемента на поверхности микроорганизмов, где антигенные детерминанты обычно расположены тесными группами. Активация субкомпонента lq комплекса С1 активирует lr, который приобретает протеолитическую активность и в свою очередь расщепляет и активирует is. Активированный is затем расщепляет С4 на два фрагмента, С4а и С4Ь (образующийся в результате такого рода протеолиза больший фрагмент принято обозначать Ь, а меньший фрагмент -а) С4Ь сразу же ковалентно пришивается к мембране и затем связывает С2 Будучи связанным, С2 также расщепляется активирован- [c.255]

В ходе каскадной протеолитической активации комплемента образуется несколько небольших биологически активных белковых фрагментов. Из них наиболее важны СЗа и С5а. Оба этих фрагмента представляют собой пептиды с сильными основными свойствами, отщепляемые от N-концов исходных белков оба вызывают сокращение гладкой мускулатуры и стимулируют секрецию гистамина тучными клетками и базофилами. Гистамин местно увеличивает проницаемость кровеносных сосудов, что позволяет лейкоцитам и дополнительным количествам антител и комплемента проникать в места инфекции. С5 служит также мощным хемоаттрактаптом для нейтрофилов и усиливает механизмы, с помощью которых эти клетки уничтожают иоглошейные бактерии. Именно эти два пептида в основном ответственны за местную воспалительную реакцию, которой обычно сопровождается активация комплемента [c.257]

Прн иммунохимическом анализе внеклеточных участков рецепторов, снятых с клеточной поверхности с помощью трипсина, был установлен, на первый взгляд, удивительный факт. Оказалось, что в составе протеолитических фрагментов клеточных белков содержатся такие продукты, которые взаимодействуют не только с иммобилизованными лигандами, но и с иммобилизованными антителами к тем же лигандам. В описываемых экспериментах клетки культивировали в среде, содержащей меченую аминокислоту. Источником клеток служили либо покоящиеся макрофаги из брюшной полости, либо костно-мозговые фнбро-бласты кролика, подвергнутые клонированию in vitro. Ряд ключевых экспериментов выполняли на клетках макрофагоподобиои линии Р388 Di (мышь). [c.79]

Большое число работ посвящено получению и изучению конъюгатов протеолитических ферментов — трипсина и террилитина с диальдегиддекстраном [14, 59]. Были найдены условия, позволяющие полностью связывать весь введенный в реакцию с полимером-носителем трипсин, однако активность фермента при этом снижалась до 53 % от исходной по низкомолекулярному субстрату и до 26%—по высокомолекулярному (казеину) [60]. Восстановление азометиновых и альдегидных групп в конъюгате боргидридом с целью повышения стойкости к гидролизу позволило полностью сохранить ферментативную активность, в том числе фибринолитическую. Блокирование тех же групп бисульфитом или гидроксиламином приводит к отщеплению части фермента от полимера-носителя. Скорость автолиза белка в конъюгате значительно ниже, чем у исходного фермента. Конформационная стабильность конъюгата к термоинактивации также повышена. Конъюгат с соотношением фермент полимер 2 3 обладает пониженным сродством к высокомолекулярным ингибиторам сыворотки крови человека. Введение отрицательного заряда в полимер-носитель обработкой бисульфитом способствует этому [59, 61]. Декстрановый конъюгат террилитина обладал пониженными антигенностью и иммуногенностью, а ингибирующее действие антител в сыворотке крови выражено слабее, что важно для медицинского применения [62]. [c.179]

VSV посредством протеолитического расщепления снижает инфекционность вируса примерно на пять порядков, а антитела против гликопротеина эффективно нейтрализуют вирус. Кроме того, прогретые вирионы /s-мутантов с термолабильным G-белком не способны заражать клетку. Область в молекуле глико-протеина, ответственная за прикрепление к клетке, до сих пор не идентифицирована, однако уже получены моноклональные антитела к отдельным детерминантам 0-белка, причем некоторые из них блокируют инфекционность VSV, а другие — нет. Поэтому скоро станет возможным идентифицировать области белковой молекулы, вовлеченные в процесс прикрепления. Олигосахаридные цепи в G-белке, по-видимому, несущественны для прикрепления к клетке, поскольку культивируемый в присутствии туникамицина VSV, содержащий негликозилированный G-белок, обладает инфекционностью, сравнимой с инфекционностью VSV, содержащего гликозилированный G-белок [8]. [c.423]

Смотреть страницы где упоминается термин Антитела, протеолитическая: [c.567] [c.85] [c.486] [c.222] [c.220] [c.47] [c.252] [c.333] [c.432] [c.173] [c.214] [c.414] [c.173] [c.106] [c.284] [c.80] [c.152] [c.396] [c.432] [c.230]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология