Гемоглобин окрашивание

Добавляют равный объем раствора бензидина и несколько капель перекиси водорода. При положительной реакции наблюдают появление синего или зеленого окрашивания продуктов окисления бензидина с помощью кровяного пигмента за счет кислорода перекиси водорода (стр. 236). При продолжительном стоянии мочи гемоглобин переходит в метгемоглобин и обнаружить кровь бензидиновой реакцией не удается. [c.295]

НИИ его через кожу он вызывает хроническое отравление и окрашивание крови в шоколадно-бурый цвет, так как гемоглобин крови окисляется в метгемоглобин или образует с нитробензолом комплексное соединение. Нитробензол выделяется из организма в виде пара-аминофенола. Нитротолуол и другие метилированные гомологи нитробензола не обладают ядовитыми свойствами. [c.151]

Выполнение анализа. На фильтровальную бумагу (или капельную пластинку) наносят каплю мочи, а на полученное пятно — каплю перекиси водорода и каплю раствора бензидина. В присутствии крови появляется синее окрашивание (гемоглобин, гемин), устойчивое в течение примерно 1 часа. При малом содержании крови окрашивание появляется только через 30— 60 сек. В контрольном опыте (дестиллированная вода) появляется бурое окрашивание. При очень малом содержании крови для повышения чувствительности реакции перед нанесением капли мочи наносят каплю раствора щелочи. [c.493]

При лихорадочных заболеваниях и в присутствии больших количеств уробилина цвет мочи красно-бурый наличие гемоглобина в моче дает различные оттенки красного цвета красное же окрашивание мочи наблюдается и после приема красного стрептоцида. [c.163]

Признаки острого отравления головная боль, головокружение, тошнота, рвота, боли в животе, жажда, повышение температуры, слюнотечение, одышка, цианоз, частое сердцебиение, падение кровяного давления, сонливость (или бессонница), звон в ушах, нарушение зрения и др. В случаях хронического отравления кроме того отмечаются падение веса тела раздражительность, понижение слуха, желтое окрашивание волосяного покрова, ног- тей, конъюнктивы. Лабораторными анализами в крови и моче определяются различные количества пестицидов, снижение гемоглобина и эритроцитов, повышение сахара в крови, в моче появляются белок, кровь и сахар. [c.45]

Ряд методов позволяет проводить специфическое окрашивание гемоглобина, трансферрина и других железосодержащих белков. Кларк [236] использовал с этой целью реагент, содержавший 0,2 г бензидина и 0,5 мл уксусной кислоты в 100 мл воды. Непосредственно перед употреблением к этому раствору добавляли 0,2 мл 30%-ной перекиси водорода. Через 30 мин появлялись синие полосы, которые при хранении постепенно -бледнели. [c.276]

Описаны приемы локализации протеолитической активности после электрофореза в крахмальном [655, 1120] и полиакриламидном гелях [57] с использованием методики включения субстрата в гель. Возможность применения этой методики для указанной цели была недавно изучена [37]. Чтобы предотвратить миграцию белкового субстрата вовремя электрофореза, эти авторы использовали в качестве субстрата казеин, осажденный кислотой. Нерастворимый казеин обрабатывали ультразвуком и образовавшиеся мельчайшие частицы смешивали с гелеобразующим раствором. Конечная концентрация казеина в геле составляла 0,1% (масса/объем). После электрофореза гель инкубировали в течение 2—12 ч при 37°С в 0,1 М буфере трис-НС1 (pH 7,5). Казеин пригоден только при электрофорезе в кислой среде, поскольку в щелочной среде он мигрирует. В этом случае вместо казеина можно использовать препарат гемоглобина, приготовленный путем осаждения и обработки ультразвуком. Окрашивание гелей белковым красителем (напри-, мер, нигрозином) увеличивало контрастность полос. [c.303]

Получаемые в результате пептидные карты дают очень наглядный результат. После окрашивания нингидрином пятна пептидов становятся ясно видны. Сравнение карт гемоглобина А и гемоглобина 8 показало, что все их пептидные пятна идентичны, за исключением одного. Это пятно элюировали с каждой из пептидной карт и определили, что в обоих случаях оно соответствует пептиду из 8 аминокислот. При последующем аминокислотном анализе обнаружилось, что пептид гемоглобина 8 отличается от пептида гемоглобина А лишь по одной аминокислоте. [c.93]

Смертельных отравлений путем приема анилина внутрь в СССР не описано. Смертельная доза анилина при введении через рот не установлена, она равна приблизительно 20 г. Смерть наступает при явлениях паралича центральной нервной системы (клонические и тонические судороги). Патологоанатомическая картина резко синюшное окрашивание кожи и серо-фиолетовый цвет трупных пятен. Многочисленные кровоизлияния во внутренних органах, слизистая оболочка желудка, набухшая, гипереми-рованная. Вены в паралитическом состоянии, переполнены темной кровью без сгустков. Канальцы почек закупорены гемоглобином. Дегенеративные изменения в паренхиматозных органах, главным образом в почках. [c.111]

Отдельные представители. Пиррол С<НзЫ—бесцветная жидкость с приятным запахом, т. кип. 130 °С на воздухе в результате осмоления постепенно принимает коричневую окраску. Качестве)1ной реакцией на пиррол является окрашивание в нем в красный цвет сосновой лучины, предварительно пропитанной хлороводородной кислотой п высушенной. Циклическая пиррольная система встречается в гемоглобине — веществе, окрашивающем кровь, в хлорофилле — веществе, окрашивающем листья, и в билирубине — веществе, окрашивающем желчь. [c.540]

С помощью специфического окрашивания на бумаге установлено, что в а- и р-глобулиновых фракциях содержатся линонро-теиды и гликопротеиды с помощью радиоактивно меченных железа, меди и некоторых других металлов установлено, что последние связаны в крови преимущественно с белками этих фракций. Все это указывает на рол а- и -глобулинов как агентов, транспортирующих жиры, углеводы, металлы и т. д. К наиболее исследованным гликопротеидам крови относятся трансферрин — белок, переносящий железо, гаптоглобин — белок, способный специфически связываться с гемоглобином, и целый ряд других, для которых разработаны специальные методы анализа. Большое число исследований посвящено также и липопротеидам. [c.101]

Электрофорез на ацетате целлюлозы служит простым и вместе с тем чувствительным способом обнаружения аномальных видов гемоглобина. Наиболее подходящей буферной системой является смесь трис-борная кислота-ЭДТА (pH 8,4) [816, 1141, 1224]. Для качественных анализов можно использовать микрометоды. Электрофореграммы анализируют либо без применения красителей, либо после их окрашивания общими белковыми красителями или с помощью пероксидазы. Последний метод, очевидно, более специфичен, так как выявляет только те белки, которые содержат гем. Шнейдер [1141] рекомендует двукратное окрашивание сначала пунцовым S, а затем раствором бензидина, содержащим нитропруссид натрия (дает синюю окраску). Если при электрофорезе необходимо определить содержание минорного (т. е. имеющегося в незначительном количестве) компонента, например гемоглобина Аг, то наиболее надежный метод состоит в том, что на пленку наносят относительно большое (точно определенное) количество образца, элюируют соответствующие зоны электрофореграммы без ее предварительного окрашивания и проводят фотометрическое измерение [1141]. При денситометрическом сканировании окра- [c.321]

Пастевка и др. [974] определяли подвижность компонентов трех основных типов гаптоглобина с помощью дпск-электрофо-реза в полиакриламидном геле, используя в качестве стандарта трансферрин С. Эти авторы пытались идентифицировать фенотип Нр в анализируемых сыворотках по характеру расположения белковых зон на электрофореграмме после их окрашивания амидовым черным. Феррис и др, [378] анализировали комплексы гаптоглобин — гемоглобин методом вертикального электрофореза в пластине 7%-ного полиакриламидного геля с буферной системой трис-борат-ЭДТА (pH 8,3—8,4). Шеридан и др. [1178] для разделения комплексов гемоглобин — гаптоглобин применяли электрофорез в непрерывном вогнутом градиенте концентрации геля. Такая методика лучше, чем другие, обеспечивает разделение полимерных форм, особенно в зоне высокополимерных комплексов. [c.342]

При наблюдении в световой микроскоп ткань благодаря контрастирующему красителю выглядит красной, а включения железа - интенсивно синими. Если все операции проводят очень тщательно (используют бидистиллят, очищают все стекла, сосуды для окрашивания и т.д.), то поверхностных артефактов мало. Поскольку железо-широко распространенный элемент и у позвоночных оно участвует в дыхании, его выявление в данной ткани еще не означает, что оно всегда в ней имеется. Очевидно, если железо участвует в сенсорном процессе, то оно должно всегда присутствовать в магниторецепторной системе. Исходя из этого, мы установили следующий критерий положительного окрашивания на железо. Окрашивание должно обнаруживаться в одних и тех же клетках, по крайней мере в десяти последовательных срезах, и в одних и тех же клетках определенной ткани по меньшей мере у пяти различных животных. Позитивное окрашивание при использовании этой методики не доказывает, что обнаружен магнетит, но оно свидетельствует о присутствии железа и его локализации в ткани. Железо, связанное с белками, например в гемоглобине или цитохромных ферментах, никогда не окрашивается. Этот вывод был сделан при попытке окрасить эритроциты голубя или митохондрии в исследуемых тканях. Частицы магнетита окрашиваются так же, как и любые сплавы металлического железа, поэтому в процессе препарирования и окрашивания тканей нельзя использовать никакие инструменты, содержащие железо. Мы наблюдали окрашивание селезенки голубя, которая содержит железо, отщепившееся от гемоглобина. У пчелы (Kuterba h et al., 1982), большая часть железных гранул представлена гидратом оксида железа, например в составе ферритина, и интенсивно окрашивается. Итак, окрашивание ферроцианидом калия является первым шагом при изучении железосодержащих тканей. Эта методика показывает, какие ткани и клетки содержат железо, а также позволяет установить, распределено ли оно диффузно или присутствует в виде гранул. [c.249]

Количество антисыворотки, вносимой. в канавки, следует подбирать таким образом, чтобы получались четкие дуги преципитации, не выходящие за пределы геля. Рисунок дуг зависит от соотношения концентраций антигена и антитела в геле. Если специфичность антисыворотки высока, для достижения удовлетворительных результато1В достаточно внести в каждую канавку по 150 мкл неразведенной антисыворотки. В некоторых случаях необходимо через несколько часов после начала реакции вновь наполнить канавку антнсывороткой. Другой способ — уменьшить антигенную нагрузку, если только это не отразится на образовании дуг преципитации. Использование цельной сывароики, особенно если она содержит гемоглобин или большое количество липидов, может затруднить отмывание геля от фонового окрашивания. Поэтому лучше использовать IgG-фракции сывороток. [c.221]

Электрофорез используется для разделения молекул, несущих суммарный заряд. Низковольтный электрофорез на бумаге нашел широкое применение для разделения аминокислот, пептидов, белков, нуклеотидов, нуклеиновых кислот и заряженных производных углеводов. Однако при низковольтном электрофорезе на бумаге имеет место значительная диффузия малых молекул, поэтому для их разделения применяют, как правило, высоковольтный электрофорез, при котором время разделения сводится до минимума и вследствие этого уменьшается диффузия. Вместо бумаги в качестве носителя зачастую используют ацетат целлюлозы, высокая чистота которого обусловливает уменьшение адсорбции образца, а следовательно, и лучшее разделение его компонентов. Одним из преимуществ ацетата целлюлозы является также его слабое фоновое окрашивание, что облегчает выявление соединений после рааделе-ния. Электрофорез на ацетате целлюлозы нашел широкое применение в клинике для разделения белков сыворотки крови (включая гликопротеиды и липопротеиды) и гемоглобинов он применяется также при иммуноэлектрофорезе. Высоковольтный электрофорез, как бумажный, так и тонкослойный, используется для разделения аминокислот, концентрация которых в плазме крови и моче при различных нарушениях обмена может быть довольно высокой. Особенно велика ценность тонкослойного электрофореза при разделении малых молекул, таких, как аминокислоты и нуклеотиды, поскольку [c.136]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология