Двойная метка

Производные цистеина и валина, меченные тритием, а также валин с двойной меткой ( N и Н) применялись при исследованиях биосинтеза пенициллина [67, 68]. [c.46]

Рис. 6. спектры ЯМР этил-иодида с двойной. меткой а - обычного ( к/2) [С, у] импульса) Ь - в (С, + х) импульса, с-Q (С, + x) Td7)[ , у] импульсной комбинации d - импульсной комбинации 0 (С, + x)(ji/2 ) [С, у], где 6 = 135 во всех случаях [c.28]

Очень ценную информацию дают опыты с использованием соединений с двойной меткой (т. е. соединений, содержащих и С в известном соотнощении). По соотнощению удельной радиоактивности и С в образующихся метаболитах и по изменениям этого соотнощения в продуктах тщательным образом выбранных и проведенных реакций деградации можно определить, например, стереохимию таких стадий биосинтеза, как гидроксилирование илн перегруппировки. При использовании очищенных ферментных систем степень включения метки часто столь высока, что содержаний Дейтерия можно измерять с помощью масс-спектрометрии. [c.487]

Для теоретического рассмотрения движений метки, связанной с белком гибкой ножкой , развита модель ротатора на ротаторе [260], позволяющая рассчитать время корреляции как функцию внутренних вращений. Применение двойной метки позволяет определять расстояния между взаимодействующими радикалами и, тем самым, геометрию конформационных изменений (см. [255, 261, 262]). [c.346]

К коллоидным препаратам с двойной меткой, представляющим интерес д1я радиотерапии, можно отнести фосфат иттрия (У [c.41]

Опыты с изотопами показали, что если животному давать метионин, меченный по сере(8 ), то часть меченой серы быстро переходит в цистеин (цистин) белков организма. Для синтеза цистеина (цистина) углеродный скелет метионина не используется. Это следует, например, из того наблюдения, что после скармливания крысам метионина с двойной меткой (содержащего стабильный изотоп серы а в углеродной цепи — стабильный углерод С з) в цистине, выделенном из шерсти таких животных, было 80% изотопной серы, в то время как меченый углерод отсутствовал. [c.348]

Сказанное особенно ясно видно на примере определения активности смеси нескольких изотопов, например, радиоактивного препарата с двойной меткой. В данном случае определение активу пости—это процедура, включающая в себя и определение состава излучения и процентного содержания компонентов и измерение активности, о чем более подробно будет сказано ниже. [c.227]

Для наблюдения за протеканием подобного обмена, необходимо применять изотопный галоген, обозначенный здесь звездочкой. Для данной реакции изотопный эффект углерода до сих пор еще не исследован, хотя он и представляет большой интерес. Это объясняется необходимостью применять двойную метку, что не только трудно осуществимо, но и связано с большими денежными затратами. Для экспериментальной работы в принципе достаточно чистых образцов двух изотопов одного из элементов — углерода или галогена. [c.158]

При добавлении изотопа Р к обычному Р создается возможность вводить двойные метки в фосфорсодержащие соединения, что является, по-видимому, одним из наиболее важных качеств этого изотопа. Посредством двойной метки можно проследить одновременно в одной и той же системе поведение [c.29]

Описанный метод позволяет проводить измерения соединений с двойной, меткой с такой же точностью, как и соединений, меченных одним радиоизотопом. [c.446]

Для измерения С и других изотопов с более высокой энергией излучения можно применять все три перечисленных метода, и выбор одного из них определяется соображениями, изложенными выше. БХ при работе с двойными метками применяют редко, и в этом случае предпочтительнее пользоваться методом жидкостного сцинтилляционного счета или авторадиографией с выборочной маскировкой. [c.48]

Авторадиография соединений с двойной меткой [c.150]

Рнс. 7.7 Схема метода двойной метки. Р Р, ...РоР,Р, [c.144]

Возможности этого метода, подобно более общему методу двойной метки, лимитируются трудностью разделения олигонуклеотидов с длиной цели п а п+1. Как показано на рис. 7.9, разделение олигонуклеотидов с 15 и 16 отрицательными зарядами происходит не полностью. Использование более тонких различий, например, в нуклеотидном составе или в последовательности, также может оказаться неэффективным, если вещества очень близки и в этом отношении. [c.147]

СОЕДИНЕНИЯ С ДВОЙНОЙ МЕТКОЙ [c.162]

Разумеется, вместо введения двойной метки в одну молекулу можно воспользоваться смесью молекул двух сортов, каждая из которых помечена только в одном месте различными изотопами. [c.19]

Изотопный эффект при газо-жидкостной хро.матографии стероидов. (Ра.зделение стероидов с двойной меткой Н и i .) [c.119]

Превращение в организме серина в глицин — процесс обратимый. Установлено, что при введении животным меченной С муравьиной кислоты и меченого стабильным изотопом углерода С в карбоксиле глицина в тканях появляется серин с двойной меткой [c.366]

Особо чувствительный метод двойной метки основан на применении меченого ( Н]-дансилхлорида в качестве реагента и меченой [ С]-аминокислоты как внутреннего стандарта. Отношение Н С в дансильном производном зависит от отношения количества добавленной ( 0]-аминокислоты к концентрации немеченой аминокислоты в пробе. Этот метод особенно подходит для идентификации аминокислот в биологическом материале. Его чувствительность лежит в пикомольной области [196]. [c.66]

Наилучшие результаты дает применение Н в виде двойной метки, обычно вместе с (поскольку в этих случаях может быть применена одна система детектирования). Этот метод можно использовать для выяснения тонких деталей механизмов биосинтеза, в особенности его стереохимических аспектов (так как возможен синтез стереоспецифически меченных Н субстратов) [106, 107], а также для проверки интактного включения сложных промежуточных соединений если включение метки из последних происходит косвенным путем, то это обычно приводит к существенному изменению первоначального отношения Н/ С. Метод имеет свои недостатки, но он позволяет устранить многие из отмечавшихся выше неопределенностей. При очень высоких удельных активностях соединений, содержащих Н ( 1 мКи), атомы Н можно обнаружить и определить их положение в молекуле методом ЯМР этот метод использовали при изучении процессов биосинтеза [108], однако применение его ограниченно. [c.472]

Особый интерес для лучевой терапии злокачественных опухолей могут представлять коллоидные препараты с двойной меткой, типа фосфата иттрия, содержащие радиоактивный У и Р . Оба изотона являются -излучателями с очень высокими энергиями Р-частиц (у У энергия -излучения Ец=2,2 Мэе, у Р Е = = 1,704 кГэб), но периоды полураспадов у них различны у иттрия— 60 ч, а у фосфора—14,3 дня. [c.41]

При построении механизма гетерогенного катализа широко пользуются механизмами, включающими прямой переход атомов катализатора в продукты реакции с последующей регенерацией. При многообразии частных механизмов катализа подтверждение или опровержение механизмов с переносом атомов катализатора в общем виде на основе опытов с песколь-1 ими системами не имеет смысла. Наиболее подробно он изучался для окисления СО на активных окислах. Большая часть работ советских авторов была проведена с МпО г. Результаты исключают возможность катализа с переносом 0-катализатора для значительной части поверхности [122, 123]. Из-за интенсивного изотопного обмена 0 продуктов реакции с кислородом поверхпостп нельзя полностью исключить катализ переносом на малой доле поверхности [124]. Против переноса говорят выводы Гарнера [125] и его школы по низкотемпературному окислению СО на окислах, поскольку, по данным английских исследователей, основной промежуточный продукт С0 (или СО при низких температурах образуется без участия О решетки. Картина проще для закиси никеля, которая при низких Тир практически ие вступает в кислородный изотопный обмен ни с Ог, ни с СО, ни с СОг. Благодаря этому и высокому процентному содержанию 0 удается уловить небольшой изотопный обмен, сопровождающий каталитический процесс [126]. При 49° С он соответствует менее 0,34% поверхности. Это может быть, как думает Винтер [126], мерой содержания активных центров на поверхности закиси никеля или, по нашему мнению, также мерой обмена промежуточной активной формы с поверхностным О. Подчеркнем эффективность использования в этой работе двойной метки по С и О, позволившей уточнить свойства 0j2- . Таким образом, хотя в настоящее время еще нельзя сделать окончательного выбора между низкотемпературным катализом, идущим [c.25]

Существуют серьезные основания пол.эгать, что биогенез холестерина действительно включает такую последовательность превращений. Если ланостерин и холестерин образуются из сквалена, полученного в свою очередь из ацетата, меченного либо по метилу, либо по карбоксилу, то углеродные атомы ланостерина и холестерина оказываются меченными точно таким образом, как это следует из приведенного выше механизма (см. упражнение 30-30). Кроме того, остроумные опыты с использованием двойной метки показали, что метил в положении 13 ланостерина является именно тем метилом, который первоначально был связан с С-14, тогда как метил при С-14 переместился к этому углеродному атому от С-8. [c.580]

Фаг прикрепляется к бактериальной клетке, во много раз превосходящей его по размерам, с помощью хвостового отростка. Эксперименты с двойной меткой показывают, что ДНК, меченная впрыскивается в бактерию, а белок, содержащий 5 5, остается снаружи. Таким образом, бактериофаг действует как молекулярный шприц . Сразу же после такой инъекции синтез ДНК, РНК и белков клетки-хозяина прекращается. В дальнейшем всеми синтетическими механизмами клетки управляет ДНК фага. Через 2 мин появляется фагоспецифичная РНК через 4 мин можно обнаружить новый белок через б мин после инъекции начинается синтез фаговой ДНК, причем он идет примерно в 5 раз быстрее, чем синтез ДНК хозяина в незараженцых клетках. Через 20 мин образуется примерно 100 новых фаговых частиц, которые освобождаются из клетки. [c.367]

При биосинтезе и исследованиях процессов метаболизма, по-видимому, нельзя обойтись без использования меченых соединений. Анализ с помощью ГЖХ и обычного массового детектора, как правило, показывает присутствие в разделяемой смеси многочисленных соединений, некоторые из которых удается идентифицировать по известным временам удерживания ожидаемых продуктов разделения. Решающее значение имеет обычно присутствие или отсутствие радиоактивности в определенных соединениях если соединение радиоактивно, то его так или иначе следует связать с исходным меченым материалом. Наиболее простой способ проверки радиоактивности разделенных соединений — объединить процесс сбора этих соединений и измерение их радиоактивности (при тех значениях времен удерживания, которые соответствуют ожидаемым меченым соединениям). Измерение радиоактивности можно проводить при этом в течение продолжительного времени. Это позволяет работать с малыми уровнями радиоактивности, и в этом основное преимущество данного способа. Использование сигнала массового детектора для управления сбором разделенных веществ сопряжено с риском, так как радиоактивное соединение может иметь малую массу и не быть обнаружено детектором. Для того чтобы по возможности не пропустить радиоактивного соединения, отбор фракций следует проводить часто и в течение одинаковых промежутков времени на протяжении всего процесса хроматографического разделения (или до тех пор, пока не будет точно известно, что из колонки вышли все нужные соединения). Выполнить все это вручную довольно трудно, поэтому здесь имеет смысл использовать автоматические устройства для отбора фракций [93]. Систему для газовой радиохроматографии с двойной меткой (изотопом С и тритием) и с высоким уровнем автоматизации описали Томас и Дюттон [94]. Эта система включала в себя не только устройство для автоматического [c.297]

К этому классу относятся реакции полных ртутноорганических соединений с ртутноорганическими солями, которые могут приводить или не приводить к химическому изменению системы. Механизм реакции был выяснен с применением двойной метки (стереохимической и радиохимической) на примере изотопного обмена в этаноле оптически активного 2-метилгексил-5-меркурбромида с рацемическим симметричным соединением — ди-(2-метилгексил)-ртутью [c.44]

Аналогичная реакция, также с применением двойной метки, была изучена Хьюзом и Инголдом с сотр. на примере е/пор-бутильных производных. Кинетическое и стереохимическое изучение реакции в этаноле привело к тем же самым результатам. Скорости обмена ртутью и алкильной группой при разных концентрациях исходных реагентов практически совпадают [c.45]

В последние годы для изучения реакций обмена радикалами между различными металлоорганическими соединениями широко используется метод ЯМР. Благодаря этому методу стало возможным изучать чрезвычайно быстрые процессы (динамику равновесных состояний), в частности такие процессы, которые вообще едва ли возможно обнаружить другими методами, например гомообмен (обмен радикалами между двумя химически тождественными молекулами, который, в принципе, можно наблюдать при помощи двойной метки). [c.55]

Оценка эффективности применения растворяющего препарата Aquasol (компания New England Nu lear) при работе с фосфолипидами, меченными С, показала, что лучшие результаты получаются при добавке к этому препарату 10% воды. Для образцов с двойной меткой ( и Н) применение этой смеси неизменно давало хорошие результаты, причем регистрация излучения [c.126]

Бишоп с сотр. [42] описал методики точного определения удельной активности жирных кислот. Они основаны на использовании двойной метки и Н. Одна из методик включает анализ метиловых эфиров смеси жирных кислот, меченных тритием, с его повторением после введения С-эфира той кислоты, для которой нужно определить величину удельной активности. Первое разделение проводится на аналитической колонке, а второе — на препаративной. Величину удельной активности тритированного эфира можно рассчитать из соотношения С Н, определенного методом жидкостного сцинтилляционного счета, и из значений площадей пиков в обоих разделениях. Точность результатов, полученных таким методом, зависит от точности определения площадей пиков, которая обычно бывает невелика. [c.235]

Для количественного определения стероидов использовали также андрогены с радиоактивной меткой. Шульце и Венцель [186] сконструировали специальный проточный газовый счетчик с плоской диафрагмой, предназначенный для измерения радиоактивности тонкослойных пластинок. Они продемонстрировали эффективность этого счетчика на стероидах, меченных Щ и " С. Риондель и др. [187] определяли содержание тестостерона в крови человека сцинтилляционным методом с применением сразу двух изотопов. При этом 1,2-Ш-тестостерон выполнял роль индикатора, а S-тиосемикарбазид — реактива. Чтобы удалить из тиосемикарбазона все примеси, его хроматографировали на тонком слое и на бумаге. Фактическое измерение проводили с диацетилпроизводным тиосемикарбазона. Спарагана [188] определял тестостерон в плазме крови методом изотопного разбавления с двойной меткой. Обрабатывая пробу меченным тритием уксусным ангидридом, он получал [c.320]

Г199. Улучшение разрешения при анализе высокочувствительным методом газовой радиохроматографии с двойной меткой. [c.226]

Рис. 5. Сопоставление клеточного цикла с принципюм двойной метки [м].

Dawson и Field [в] усовершенствовали метод двойной метки, использовав два слоя авторадиографической съемной эмульсии. С помош,ью первого слоя регистрировалось преимуш,ественно распределение трития, в то время как второго слоя могли достичь только р-частицы, обладающие более высокой энергией. Слои отделялись друг от друга целлоидином и зерна серебра в одном либо в обоих слоях могли быть окрашены методом дифференциального связывания краски. Применяя метод двойной или однократной метки, авторы нашли, что облучение HeLa клеток в дозе 300 или 500 р увеличивает общее время генерации, не влияя на продолжительность синтеза ДНК в основном удлиняется период Gi. [c.191]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология