Определение сахара, связанного с белками

Определение сахара, связанного с белками [c.209]

Для оценки влияния удобрения на качество урожая химическому анализу на содержание тех или иных хозяйственно ценных органических веществ подвергают его продуктивную часть. Определение содержания белка в зерне, крахмала в клубнях картофеля, сахара в корнях сахарной свеклы, жира в семенах масличных культур, витаминов в плодах и овощах — важная и необходимая задача агрохимика при оценке эффективности удобрений в конкретных условиях хозяйства. Часто эта сторона агрохимической работы учитывается недостаточно, однако оценка любых приемов, связанных с использованием удобре з ий, будет неполной без анализа урожая на качество. [c.563]

Дальнейший успех в изучении аппарата Гольджи был связан с развитием методов дифференциального центрифугирования. В 1970—1980 гг. был выполнен цикл работ, позволивший получить высокоочищенные мембраны аппарата Гольджи и разделить их по плотности цистерн на три фракции. Было продемонстрировано, что в аппарате Гольджи происходят не только гликозилирование и отщепление от белков определенных молекул сахаров, но и фосфорилирование белков, присоединение к ним сульфатных групп и даже жирных кислот. Это созревание белков в аппарате Гольджи, получившее название процессинг, очевидно, необходимо для их сортировки и направленного транспорта. В насто- [c.178]

Компенсационный диализ и вивидиализ — методы, разработанные для исследования биологических жидкостей, представляющих собой коллоидлые системы. Принцип метода компенсационного диализа состоит в том, что в диализаторе вместо чистого растворителя используют растворы определяемых низкомолекулярных веществ различной концентрации. Например, для определения не связанного с белками, т. е. свободного, сахара в сыворотке крови проводят ее диализ против изотонического солевого раствора, содержащего различные концентрации сахара. В том растворе, [c.420]

Наряду с определением нейтрального сахара в белке изучали также содержание в нем гексозаминов. В более ранних работах гексозамины определяли с использованием реакции Эльсона — Моргана, гидролиз альбумина проводили в 2 и. соляной кислоте при 100° в течение 3 час при этом были получены значения, равные 0,8 [53] и 0,9% [51]. Однако в более поздней работе Моггриджа и Нойбергера ([67], см. также том 1, гл. 8) было показано, что для количественного выделения гексозамина применявшиеся условия гидролиза не являются оптимальными (ср. [68]). Действительно, позднее было показано, что для освобождения всех остатков аминосахаров, связанных гликозидными связями, требуются более жесткие условия (необходима обработка 4 н. соляной кислотой при 100° в течение 3—6 час) и тогда получаются значения [c.12]

Клеточные мембраны, так же как и искусственные липидные бислои, способны пропускать воду и неполярные молекулы за счет простой физической диффузии. Олнако клеточные мембраны пропинаемы и для различных полярных молекул, таких, как сахара, аминокислоты, нуклеотиды и многие другие метаболиты, которые проходят через синтетические бислои чрезвычайно медленно. За перенос подобных растворенных веществ через клеточные мембраны ответственны специфические белки, называемые мембранными транспортными белками. Они обнаруживаются во всех типах биологических мембран и могут сильно отличаться друг от друга. Каждый конкретный белок предназначен для определенного класса молекул (например, неорганических ионов, Сахаров или аминокислот), а нередко лищь какой-то разновидности молекул из этих классов. Специфичность транспортных белков была впервые показана, когда обнаружилось, что мутации в олном-единственном гене приводят к исчезновению у бактерий способности гранспортировать определенные сахара через плазматическую мембрану. Аналогичные мутации теперь известны и у людей, страдающих различными наследственными болезнями, при которых нарушается транспорт тех или иных веществ в почках или кишечнике. Например, у индивидуумов с наследственной болезнью цистинурией отсутствует способность транспортировать определенные аминокислоты (включая цистин - связанный дисульфидной связью димер цистеина) из мочи или кишечника в кровь. В результате происходит накопление цистина в моче, что приводит к образованию цистиновых камней в почках. [c.381]

Принцип аффинного электрофореза может быть использован не только для определения /констант диссоциации комплексов белков со связанными лигандами, но также и для определения констант диссоциации комплексов со свободными лигандами. Подвижность белковой зоны при электрофорезе на аффинном носителе иовышается в зависимости от концентрации свободного специфического лиганда. Таким образом были определены константы диссоциации комплексов лектин —сахар [64]. [c.168]

Пользуясь этим свойством связанной воды, Соренсен разработал способ определения гидратации белков. Гортиер и Ньютон определяли количество связанной воды, используя метод криоскопии. Думанский предложил очень удачный рефрактометрический и поляримегрический методы определения. Мы не будем описывать их. Укажем лишь в качестве примера на принципы криоскопического метода. Так,например,Гортнер и его сотрудники определяли количество связанной воды в коллоидах растительных соков. Для этого путем высушивания сначала определялось общее количество воды в исследуемом объекте. Затем к определенному объему растительного сока прибавлялось известное количество тростникового сахара и измерялось понижение точки замерзания. После этого такое же количество сахара растворяли в дистиллированной воде, причем брали ее столько, сколько содержалось в растительном соке. Измерялась депрессия и оказывалось, что в соке она была значительно больше, чем при растворении в чистой воде. При соответствующих пересчетах можно было узнать количество связанной коллоидом воды. В лаборатории Думанского этим методом было определено количество воды, связываемое крахмалом. Оказалось, что 1 г сухого крахмала при помещении его в холодную воду связывает 0,18 г воды. [c.293]

Постановка опыта по изучению баланса азота. При изучении обмена азота необходимо учесть следующие обстоятельства если моча за 24 часа обычно отвечает обмену азота за то же время и азот, полученный из пищи, разрушенный и перешедший в мочу, обычно успевает выделиться за то же время, то выделение кала сильно отстает, иногда на 3—4 дня. Поэтому при определении баланса нельзя производить определение азота только в кале, выведенном в день опыта, и вообще нужно изучать баланс не за один, а за 4—5—б дней (чехМ больше, тем лучше), т. к. и моча может быть задержана на некоторое время в зависимости от водного обмена, что видно по иногда резко колеблющимся суточным количествам ее. Кроме того, некоторое изменение привычных условий жизни и питания, связанное с постановкой опыта, также может отразиться на балансе, в силу хотя бы большего или меньшего, чем обычно, потребления пищи. Поэтому опыт ставят обычно следующим образом. Подопытное лицо подвергается медицинскому исследованию, исследованию мочи на белок и сахар, исследованию крови на число форменных элементов и гемоглобина, измерению роста и взвешиванию (последнее аовтиряется ежедневно все время опыта, так как вес в зависимости отводного обмена иногда сильно колеблется).-После этого составляется точная раскладка (с учетом не только белков, но и жиров и углеводов, общей калорийности и витаминов), которую в данном опыте хотят исследовать. Затем начинается предварительный 4—5-дневный период. В течение его у исследуемого лица собирается за каждые 24 часа моча (с 9 ч, утра до 9 ч. следующего утра), точно измеряется и выливается. Собирается отдельно и кал в стеклянную, фарфоровую или новую (без трещин ) эмалированную посуду кал ежедневно взвешивается и выбрасывается. Вся пища, которую получает исследуе [c.194]

Для определения связанного с белками сахара (гексозы) можно использовать методику Веймера и Мошина [c.209]

В белках сыворотки имеется метилпентоза-фукоза, для определения которой тоже предложена методика. Так же как и ранее приведенные связанные сахара, содержание ее в крови здоровых и больных значительно различается, почему мы считаем нужным привести ее определение. [c.211]

Метод [7], который был применен для определения содержания маннозы в альбумине куриного яйца, включает прибавление радиоактивной маннозы к раствору белка. После кислотного гидролиза манноза была выделена в виде фенилгидразона, и по его удельной радиоактивности было вычислено содержание маннозы в белке. Однако полученное при этом содержание маннозы в белке можно считать правильным только в том случае, если справедливы некоторые предположения. Первое из них состоит в том, что манноза, связанная гликозидной связью или освобождающаяся при гидролизе, разрушается приблизительно с той же скоростью, что и добавленная радиоактивная манноза. Второе предположение состоит в том, что гидролиз гликозидных связей манпозы происходит гораздо быстрее, чем разрушение маннозы после ее освобождения. Мы полагаем, что можно подобрать условия, при которых одно из этих предположений или даже оба будут достаточно точными. Метод можно применять к нерастворимым производным других сахаров [46, 47, 139, 140]. Нужно с осторожностью выбирать тин изотопа, применяемого в этих экспериментах, так как при перекристаллизации фенилгидразона в-маннозы-1-И наблюдался изотопный эффект [141]. Такие изотопные эффекты менее вероятны нри применении в качестве метки С [141 (. Грэхем (неопубликованные данные) недавно расширил этот метод и использовал его в сочетании с хроматографией на колонках. [c.209]

Влияние сахаридиых остатков на свойства связанных с ними белков практически неизвестно. По крайней мере некоторые гликопротеиды очень устойчивы к тепловой денатурации. Поведение большинства белков, связанных с большим количеством сахаров, оказывается аномальным при исследовании их теми методами, которые применяются для определения размера и формы молекул. [c.205]

Согласно современным воззрениям липидный компонент биомембран представляет собой не консервативный матрикс для интегральных и периферических белков, а динамическую структуру, в которой постоянно происходят фазовые переходы, связанные, в частности, с формированием кластеров липидных молекул. В процессе кластеризации кислых фосфолипидов и ганглиозидов активно участвуют ионы кальция. Предполагают, что ганглиозиды, представляющие собой амфифильные липиды, играют определенную роль в восприятии и передаче сигнала через плазматическую мембрану клетки. Переход молекул ганглиозидов в кластеризированное состояние зависит от их концентрации в мембране и существенно ускоряется в присутствии физиологических концентраций и Mg +, но не одновалентных катионов. Считают, что кластеризующее действие обусловлено сдвигом равновесия при обратимой ассоциации кластеров за счет снижения сил электростатического отталкивания между молекулами сахаров, выступающих из мембраны (О. Теиатап11, М. Маззегш , 1987). Таким образом, Са + играет роль агента, исшивающего индивидуальные липиды в мембране. [c.17]

В процессе переноса белков из ЭР к местам конечного назначения через аппарат Гольджи изменяются не только К-связанные олигосахариды многие белки модифицируются и другими способами. Например, как отмечалось выше, у некоторых белков сахара присоединяются к боковым цепям определенных остатков серина или треонина. Такое 0-связанное гликозилирование, как и наращивание цепей К-связанных олигосахаридов, катализируется гликозилтрансфераз ами. Эти ферменты добавляют к белку по одному сахару, используя в качестве субстрата нуклеотид-сахара, содержащиеся в полостях аппарата Гольджи. Обычно первым присоединяется К-ацетилгалактозамин, а за ним следует различное количество дополнительных остатков Сахаров, от нескольких до 10 и более. [c.63]

Рис. 8-65. Трехмерная структура небольшого N-связанного олиго сахарида, определенная с помощью ренттеноструктурного анализа гликопротеина. Этот олигосахарид содержит всего 6 остатков Сахаров, тогда как в N-связанном олиго сахариде, первоначально присоединенном к белку в ЭР, содержится 14 остатков сахаров (см. рис. 8-52). А. Шар о стержневая модель, изображающая все атомы, кроме водородных Б. пространственная модель, темные атомы - остаток аспарагина. (С любезного разрешения Ri hard Feldman.)

Справочник химика 21

Химия и химическая технология