Справочник химика 21

Химия и химическая технология

Статьи Рисунки Таблицы О сайте English

Клеточные линии устойчивые

    Что такое устойчивая клеточная линия  [c.28]

    Примеры вариантов клеточных линий, устойчивых к ядам [c.153]

    Другая важная задача — выведение трансгенных животных, устойчивых к заболеваниям. Потери в животноводстве, вызванные различными болезнями, достаточно велики, поэтому все более важное значение приобретает селекция животных по резистентности к болезням, вызываемых микроорганизмами, вирусами, паразитами и токсинами. Пока результаты селекщш на устойчивость животных к различным заболеваниям невелики, но обнаде-живающи. В частности, созданы популяции крупного рогатого скота с примесью крови зебу, устойчивые к некоторым кровепаразитарным заболеваниям. Установлено, что защитные механизмы от инфекционных заболеваний обусловлены либо препятствием вторжению возбудителя, либо изменением рецепторов. Вторжению возбудителей, равно как и их размножению, препятствуют в основном иммунная система организма и экспрессия генов главного комплекса гистосовместимости. Одним из примеров гена резистентности у мышей служит ген Мх. Этот ген, обнаруженный в модифицированной форме у всех видов млекопитающих, вырабатывает у Мх -мышей иммунитет к вирусу гриппа А. Ген Мх был вьщелен, клонирован и использован для получения трансгенных свиней, экспрессирующих ген Мх на уровне РНК. Однако данные о трансляции Мх-протеина, обусловливающего устойчивость трансгенных свиней к вирусу гриппа А, пока не получены. Ведутся исследования в целях получения трансгенных животных, резистентных к маститу за счет повышения содержания белка лакто-ферина в тканях молочной железы. На культуре клеток из почек трансгенных кроликов было показано, что клеточные линии, содержащие трансгенную антисмысловую РНК, имели резистентность против аденовируса Н5 (Ads) более высокую на 90 — 98% по сравнению с контрольными линиями клеток. Л. К. Эрнст продемонстрировал также устойчивость трансгенных животных с геном антисмысловой РНК к лейкозу крупного рогатого скота, к заражению вирусом лейкоза. [c.130]


    В таблице представлены примеры вариантов клеточных линий, устойчивых к ядам, и некоторые их характеристики. Эти характеристики включают используемый селективный агент, механизмы токсичности селективных агентов, биохимическую основу устойчивости, тип наследования признака устойчивости в гибридных клетках и локализацию на хромосомах человека, если она известна. [c.158]

    Часто некоторые клетки перевиваемых первичных клеточных культур претерпевают генетические изменения, в результате которых ускоряется их рост. Культуры клеток, которые при этом приобретают селективные преимущества, оказываются способными к неофаниченному росту in vitro и называются устойчивыми клеточными линиями. Одни клеточные линии сохраняют основные биохимические свойства исходных клеток, другие нет. У больщинства клеток, способных к неофаниченному росту, имеются значительные хромосомные изменения, в частности отмечается увеличение числа одних хромосом и потеря других. В молекулярной биотехнологии устойчивые клеточные линии иногда используют для размножения вирусов и для выявления белков, которые кодируются клонированными последовательностями ДНК. Кроме того, они применяются для крупномасиггабного производства вакцин и рекомбинантных белков. [c.28]

    Исследование клеточных линий, устойчивых к интерферону [c.71]

    Путем прямой селекции in vitro отобраны клеточные линии петунии, устойчивые к ртути, сорго — к алюминию, моркови — к алюминию и марганцу одновременно суспензионные клеточные культуры дурмана—к кадмию. На кафедре сельскохозяйственной биотехнологии МСХА также проводились работы по получению клеточных линий и растений-регенерантов льна-долгунца, устойчивых к соли нитрата кадмия и изучалось действие этой соли на интактные растения. Экспериментально показано, что присутствие ионов кадмия в почве приводит к торможению роста стеблевой и корневой частей растения, к сокращению на 7—9 дней онтогенетических фаз развития, следующих за фазой елочки по сравнению с контролем, культурные виды накапливают ионы кадмия в вегетативной массе, в то время как дикие — нет. Мезо- и ультраструктурный анализ стеблей льна-долгунца показал, что присутствие кадмия в субстрате приводило к уменьшению количества клеток элементарных волоконец в пучке, к некомпактному расположению клеток элементарных волоконец в лубяных пучках, а также к формированию клеток элементарных волоконец неодинаковых размеров в пределах одного пучка и к различным срокам формирования вторичной клеточной стенки. В результате клеточной селекции были получены растения-регенеранты, обладающие устойчивостью к соли кадмия (Гончарук Е.А., 2000). [c.148]


    После облучения в атмосфере азота ELT-линия клеток, обладающих более медленным ростом, оказалась устойчивее к тормозящему действию радиации, чем ELD-линия. Дозы облучения, препятствующие какому-либо нарастанию числа клеток сверх инокулированной величины, составляли соответственно для каждой линии 4000 и 2000 р. Однако совершенно иные результаты были получены после облучения в атмосфере кислорода. Разница в чувствительности, наблюдаемая при облучении в атмосфере азота диплоидной и тетраплоидной линий клеток, в таком случае исчезала. Кривые роста, полученные при данной дозе облучения в атмосфере кислорода, были одинаковыми для обеих клеточных линий, и в обеих линиях не наблюдалось увеличения числа клеток при дозе облучения, равной 900 р. Выражая полученные данные несколько по-иному, мы можем сказать, что коэффициент кислородного усиления для линии ELD приблизительно равен 2,2, а для клеток ELT-ли-нии около 4,4. [c.166]

    Описан ряд линий клеток человека и мыши, обладающий устойчивым к интерферону фенотипом. Некоторые из них спонтанно устойчивы [39], тогда как другие приобрели устойчивость после многократного пассирования в присутствии интерферона [8, 85, 136]. Существуют клеточные линии, обладающие устойчивостью по отношению ко всем воздействиям интерферона другие устойчивы только к некоторым из них. Изучение таких клеточных линий может пролить свет на механизмы действия интерферона. Например, в устойчивых к интерферону вариантах клеток эритролейкоза Френд, выделенных при непрерывном [c.71]

    Для выведения линий животных, устойчивых к возбудителям инфекций, можно использовать другой подход, заключающийся в создании путем трансгеноза наследуемых иммунологических механизмов. С этой точки зрения рассматривают самые разные гены, ответственные за работу иммунной системы гены основного комплекса гистосовместимости, Т-клеточных рецепторов, лимфокинов. Наиболее обнадеживающими на настоящее время являются предварительные результаты, полученные при введении мышам, кроликам и свиньям генов, кодирующих Н- и L-цепи какого-либо моноклонального антитела. Идея этого подхода заключается в том, чтобы снабдить трансгенное животное наследуемым механизмом защиты, позволяющим обойтись без иммунизации с помощью прививок. [c.434]

    До тех пор пока условия среды раковой опухоли постоянны, популяция ее клеток находится в сбалансированном состоянии и стволовая линия клеток остается константной. Любое изменение условий среды вызывает селективное изменение равновесия, другие компоненты клеточной популяции начинают преобладать и постепенно образуют новые стволовые линии. Эта способность популяции раковых клеток адаптироваться является камнем преткновения химиотерапии. Даже в тех случаях, когда какое-нибудь вещество эффективно подавляет некоторые или даже большинство типов клеток в раковой опухоли, какие-то устойчивые клетки выживают и рост опухоли продолжается. [c.444]

    I. Стационарный устойчивый режим в области малых Я и больших 5. Он возникает в случае, когда изоклина й8/(И=0 (линия а на рис. 7.2) пересекает левую устойчивую ветвь аттрактора. Этот устойчивый режим является ждущим, т. е. при конечном возбуждении происходит переброс точки за максимум аттрактора (за счет увеличения 5 или ) при этом совершается цикл и система возвращается в исходное состояние. При малых возбуждениях система в силу устойчивости возвращается в исходное состояние сразу без цикла. Сопоставляя это свойство модели со свойствами клеточного цикла, можно сказать, что рассматриваемый режим соответствует состоянию покоя Оо1. [c.145]

    Большинство селекционных программ направлены на выделение in vitro клеточных линий, толерантных к присутствию в среде для культивирования клеток хлорида натрия. Так, показано, что выращивая гаплоидные каллусные клетки табака на среде с постоянно увеличивающейся концентрацией солей, получены клеточные линии, способные к росту в присутствии 1 % Na l. М. Наборе с соав. предварительно обработав суспензионную культуру табака мутагеном (0,15 % ЭМС, 60 мин), путем одноступенчатой селекции выделили клеточные линии, устойчивые к 0,5 % Na l. Отмечено, что выносливость, полученных регенерантов к засолению, проявлялась на уровне целых растений. [c.146]

    Солевыносливость растений удается также повысить в результате селекции к одному фактору засоления осмотическому стрессу. Например, клетки томата, адаптированные к водному стрессу, индуцированному по-лиэтиленгликолем, обладали повышенной устойчивостью KNa i. Повышенная толерантность к соли обнаружена у клеточных линий моркови, отобранных на среде, содержащей в качестве осмотика маннитол в высо-, кой концентрации (99—870 мМ). Из этих результатов следует, что адаптация клеток к осмотическому стрессу применима для отбора солевыносливых вариантов, а исследования подобного рода представляют интерес для изучения как во взаимодействии, так и независимо друг от друга. [c.147]

    Число генов dhfr в линии клеток, устойчивых к метотрексату, варьирует от 40 до 400 в зависимости от строгости селекции и индивидуальной клеточной линии. Линии клеток mtx можно отнести к двум классам, отличающимся своим ответом на отсутствие метотрексата в среде, когда потребность в высоких уровнях активности DHFR снимается. В стабильных линиях амплифицированные гены сохраняются. В нестабильных линиях амплифицированные гены по крайней мере частично утрачиваются при снятии селективного давления. Причиной таких различий, несомненно, служат условия, в которых находятся в них амплифицированные гены dhfr (рис. 38.9). [c.497]


    Для получения стабильно трансформированных клеточных линий также используется стандартная процедура кальций-фосфатной трансфекции и затем селекция на доминантный маркер, который либо введен в состав самого ретровирусного вектора, либо находится в составе отдельной вспомогательной плазмиды, участвующей в котрансфекции. В качестве маркера обычно используют бактериальный ген neo, обеспечивающий устойчивость клеток млекопитающих к аналогу неомицина G418. Процедура трансфекции с последующей селекцией на устойчивость к G418 описана в табл. 9.2. [c.289]

    Клеточная линия, содержащая ретровирус с мышиной кДНК для дигидрофолатредуктазы и бактериальный ген устойчивости к неомицину [c.169]

    Пожалуй, наиболее убедительные данные в пользу описанной вьшге схемы были получены в экспериментах с мутантными клеточными линиями, отобранными по признаку измененной реакции на кортизол. Мутантные клетки получали из лимфоцитарных опухолей, называемых лимфомами. Подобно некоторым нормальным лимфоцитам, клетки лимфомы гибнут при добавлении к культуральной среде небольшого количества кортизола. Однако мз тантные клетки устойчивы к этому действию кортизола. Оказалось, что у некоторых из них рецепторный белок, связавшись с кортизолом, не переходит из цитоплазмы клетки в ядро (рис. 13-14). Хотя такие мутантные рецепторы нормально связывают кортизол, они почти утратили способность присоединяться к ДНК. Эксперименты с разнообразными мутантными рецепторами выявляют сильную корреляцию между их сродством к ДНК в пробирке и миграцией в ядро при связывании кортизола в клетке поэтому можно предполагать, что ДНК составляет по меньшей мере часть мишени, узнаваемой активированными рецепторами в ядре. [c.258]

    Несмотря на огромное разнообразие вариантов клеточных линий 10 типу устойчивости, они могут быть сведены к трем группам ) изменение мишени 2) изменение проницаемости плазматической 1ембраны к селективному агенту 3) увеличение количества нормаль-юй или измененной формы белка мишени вследствие увеличения юзы гена, кодирующего этот белок. [c.153]

    Мутации, затрагивающие ген, кодирующий ГГФРТ, широко 1сп0льзуются в генетике соматических клеток по следующим причи-1ам 1) устойчивые клетки имеют стабильный фенотип и могут быть юлучены практически из любой клеточной линии, включая первич-1ые 2) для селекции устойчивых клеток создана специальная [c.153]

    Устойчивость к ингибиторам транскрипции. Взаимодействуя РНК-полимеразой И, а-аманитин подавляет элонгацию мРНК. стойчивость клеток к этому агенту возникает благодаря измене-1Ю субъединицы РНК-полимеразы II. Устойчивые клетки были полу- ны из различных клеточных линий [26, 27]. [c.155]

    Подготовка миеломных клеток. В гибридомной технологии используют различные миеломные линии (см. обзор [Ю]). Все они имеют генетические маркеры, позволяющие работать с ними в селективных условиях. Наиболее распространены в настоящее время две линии — 5р 2/0 Agl4 и Х63Ад8 6.5.3. Эти клеточные линии имеются во Всесоюзной коллекции клеточных культур. Обе они являются цроизводными линии РЗК, полученной из миеломы мышей ВАЬВ/с МОРС-21. Преимуществом этих клеток является вторичная утрата ими способности синтезировать собственные иммуноглобулины. Клетки дефектны по ферменту гипоксантин-гуанинфосфорибозил-трансфераза, благодаря чему устойчивы к 8-азагуанину и чувствительны к среде ГАТ (см. ниже). Реверсии в этих клетках являются чрезвычайно редким событием, тем не менее рекомендуют каждые 3—б мес эти клетки культивировать в течение 2—3 пассажей на среде с 8-азагуанином (2- 10 М). [c.196]

    Клеточная биотехнология, основанная на уникальном свойстве клеток— их тотипотентности, способности к регенерации целого организма, а также продуцированию ими важнейших соединений вторичного синтеза, обеспечила ускоренное получение новых ценных форм и линий сельскохозяйственных растений, используемых в селекции на устойчивость, продуктивность и качество размножение ценных генотипов оздоровление растений от вирусов и вироидов получение биологически активных препаратов пищевого, кормового и медицинского назначения. В этой области также возникло много трудностей, главными из которых являются недостаточная частота регенерации клеток.и нарушение нормального онтогенеза организмов, узкий спектр самоклонапьных вариаций, слабая экспрессия генов, контролирующих важнейшие хозяйственно-ценные признаки организмов и вторичный метаболизм веществ. [c.16]

    Исследования по культивированию растительных клеток в присутствии патогена были начаты в середине 60-х годов и направлены на изучение корреляции устойчивости/чувствительности к патогену in vivo и in vitro. Непосредственно эксперименты по клеточной селекции на устойчивость к патогенам не всегда были успешными. Однако следует отметить, что китайскими учеными были получены два новых высокоурожайных сорта риса, устойчивых к пирикуляриозу. Селекция проводилась на культуре изолированных пыльников, а в качестве селективного фактора применялась смесь десяти линий гриба. В настоящее время новые сорта занимают в Китае более 140 тыс. га и дают средний урожай 7,5 тыс.кг/га. [c.150]

    Почти два десятилетия активной работы биотехнологов в селекционных и биотехнологических центрах страны позволили получить сотни и тысячи регенерантов растений, в том числе десятки и сотни с ценными свойствами повышенной устойчивостью к засухе, высоким и низким температурам, засолению, опасным грибковым, бактериальным и вирусным заболеваниям, повышенной кислотности почвы. На их основе получены новые ценные сорта ярового ячменя во ВНИИ центральных районов Нечерноземной зоны и НИИ Северо-Востока яровой пшеницы — в НИИ Юго-Востока озимой пшеницы — в Краснодарском НИИХ клевера и люцерны — во ВНИИ кормов, сахарной свеклы — во ВНИИСХ, картофеля — во ВНИИ картофельного хозяйства плодовых культур во ВНИИ генетики и селекции плодовых растений. Всероссийском селекцион-но-технологическом институте садоводства и питомниководства. В Госу-дарственный реестр внесены первые отечественные сорта зерновых и других культур, полученные отечественными селекционерами с использованием линий, созданных на основе биотехнологических методов гаплоидной и клеточной селекции, соматической гидрадизации и др. В России, как и во многих других странах мира, впервые создана правовая база для осушествления генно-инженерных и других биотехнологических работ с использованием в производстве новых трансформированных генотипов растений, животных и микроорганизмов. Приняты и действуют законы О государственном регулировании в области генно-инженерной деятельности , О селекционных достижениях , О племенной работе , О семеноводстве и др. [c.425]

    В присутствии проведите селекцию устойчивых к 0418 линий клеток. СсЮЬ можно хранить при комнатной температуре в виде концентрированного стерильного раствюра в воде (ЮмМ). Обычно для селекции используют концентрации от 3 до 5 мкМ. Для оценки частоты амплификации эндогенного гена следует обработать нетрансфицированные клетки СН0-К1 темп же концентрациями Сс1С12 и при той же плотности клеточной популяции. Частота такой амплификации может быть значительной при использовании Сс1 + в концентрации 3 мкМ и ниже. [c.250]

    НЫХ количеств соли, в результате чего водный потенциал их клеток позволяет им всасывать воду даже из засоленной почвы. При этом соль накапливается в клеточных вакуолях, так что высокое содержание натрия не влияет на цитоплазматические ферменты. Опыты показали, что специальные линии некоторых растений, обычно не рассматриваемых как галофиты, могут обладать значительной устойчивостью к засолению. Например, солеустойчивая линия ячменя, выведенная Эмануэлем Эпштейном (Калифорнийский университет в Дэвисе), дает урожай в условиях такой засоленности, при которой обычный ячмень погибает. Дальнейшая селекция этой линии может дать сорт для выращивания на засоленных почвах. [c.417]


Смотреть страницы где упоминается термин Клеточные линии устойчивые: [c.147]    [c.287]    [c.562]    [c.145]    [c.151]    [c.497]    [c.244]    [c.255]    [c.293]    [c.303]    [c.303]    [c.82]    [c.199]    [c.19]    [c.109]    [c.40]    [c.389]    [c.121]    [c.147]    [c.154]    [c.113]    [c.188]   
Молекулярная биотехнология принципы и применение (2002) -- [ c.28 ]




ПОИСК







© 2025 chem21.info Реклама на сайте