Рибосомы, выделение

Все реакции типа (ХХ.З) протекают в цитоплазме. Ранее мы приводили соображения, из которых следует, что синтез белка должен осуществляться в рибосомах при участии активированных аминокислот и молекул-адаптеров. Подобной молекулой-адаптером, в состав которой входит активированная аминокислота, служит аминоацил-РНК. Необходимым этапом синтеза является перенос этого комплекса в рибосому и сборка белковой молекулы на РНК-матрице. Этот процесс катализируется особым ферментом переноса, который, по-видимому, обладает малой специфичностью. Фермент переноса, выделенный из бактерий, катализирует перенос аминоацил-РНК, полученной из любого источника, в рибосому бактерии (но не в рибосому животного). Аналогично фермент из кролика катализирует перенос аминоацил-РНК бактерии в рибосомы кролика. Таким путем можно, в частности, осуществить синтез гемоглобина в рибосомах, выделенных из ретикулоцитов кролика. Складывается впечатление, что ферменты переноса до некоторой степени специфичны по отношению к типу рибосом, но значительно менее специфичны к промежуточным комплексам. [c.373]

Роль РНК в синтезе белка показана экспериментальным путем с помощью различных методов. Так, например, установлено, что синтез белка в клетках и тканях подавляется при разрушении РНК ферментом рибонуклеазой. Если обработать клетки амебы, корешки гороха или лука рибонуклеазой, то синтез белка в них прекращается. Под действием рибонуклеазы вирус табачной мозаики теряет способность размножаться в тканях табачного растения. Клетки бактерий, разрушенные ультразвуком, еще сохраняют способность синтезировать белок, но теряют ее после воздействия ферментом рибонуклеазой. В рибосомах, выделенных из проростков кукурузы и гороха, в присутствии рибонуклеазы прекращается синтез белка. [c.276]

Ядра, митохондрии и хлоропласты растений, как сообщалось, также синтезируют белок. Ядра, тщательно выделенные из гороха, включают в белок меченый лейцин в присутствии других белковых аминокислот и АТФ. Синтез белка в митохондриях растений показан не очень убедительно, так как не было исключено загрязнение данной фракции рибосомами. Препараты хлоропластов, как обнаружено, также катализируют включение аминокислот в белок. [c.482]

Выделенные из различных объектов рибосомы очень сходны по структуре и составу. Обычно они представляют частицы сферической формы диаметром 150—350 А. В рибосомах содержится 50—60% белка и 40—50% рибонуклеиновой кислоты. В отличие от митохондрий и хлоропластов липидов в рибосомах нет. Молекулярный вес их частицы составляет около [c.35]

Рибосомы катализируют биосинтез белков, в том числе и ферментов. Показано, что выделенные из клеток и очищенные рибосомы способны синтезировать белки. [c.36]

В этом варианте препарат в виде тонкого слоя помещают в пробирку поверх среды, плотность которой обычно меньше плотности выделяемых частиц, и затем подвергают центрифугированию. Под действием приложенной центробежной силы частицы движутся в виде отдельной полосы через градиент, который служит лишь для того, чтобы предотвратить размывание зоны, или полосы в результате конвекции. Этот исключительно полезный метод, очень широко применяемый как для аналитических, так и для препаративных целей, используется для выделения и характеристики частиц всех размеров, начиная от таких крупных объектов, как вирусы, ядра и митохондрии, и кончая рибосомами, а также чистыми белками и нуклеиновыми кислотами. [c.250]

Эндоплазматическая сеть и рибосомы. Микросомная фракция, состоящая из кусочков эндоплазматической сети и ассоциированных с нею рибосом, а также из фрагментов других мембран со сходными седиментационными свойствами, содержит приблизительно 20% всего клеточного белка и обычно более 60% (иногда до 80%) всей клеточной РНК. В микросомной фракции, выделенной из печени, содержится 20—30 мг белка, около 5 мг РНК и 5 — 8 мг фосфолипидов в расчете на 1 г ткани. Отношение РНК и фосфолипидов к белку равно соответственно 0,20 и 0,30. [c.253]

Несмотря на тщательные поиски, не удалось найти сколько-нибудь достоверных различий ни в составе и структуре свободных и мембраносвязанных рибосом, ни в функциональных свойствах выделенных частиц. Во всех экспериментальных тестах рибосомы, выделенные из свободной полирибосомной и из микро-сомной фракций клеточного гомогената, оказались полностью эквивалентны и взаимозаменяемы. [c.277]

В изолированных ядрышках ДНК по крайней мере частично связана с организатором ядрышка. Если бы гены, ответственные за образование рибосомной РНК, находились в ДНК ядрышка, количество рибосомной РНК, связанной при насыш,ении, превышало бы те 0,3%, которые найдены в опытах с целой геномной ДНК. Однако было обнаружено, что в участках ядрышковой ДНК, способных к гибридизации с рибосомной РНК, такого обогаш ения не происходит (табл. 12). По-видимому, гены, ответственные за образование рибосомной РНК, рассеяны по геному и в основном находятся во внеядрышко-вом хроматине. Рибосомная РНК, синтезированная этими генами, перемещается каким-то неизвестным пока образом в ядрышко, где она одевается рибосомным белком. В любой данный момент в ядрышке содержится смесь полностью завершенных 808-рибосом, 603- и 408-субъединиц, а также рибосомного белка, еще не связанного с РНК. Рибосомы, выделенные из ядрышек, неспособны осуществлять синтез белка вероятно, это объясняется тем, что они не имеют доступа к информационной РНК. [c.42]

В качестве радиоактивной метки. Другая культура была выращена на обычной легкой среде, содержащей HjO, и В качестве радиоактивной метки в ней присутствовал С-урацил. Видно, что меченные С рибосомы, выделенные из легкой культуры, дают три пика с характерными константами седиментации 70S, 50S и 30S, соответствующими нормальным легким рибосомам и некоторому количеству диссоциированных 50S- и 30S- yбъeдиниц. Меченные рибосомы, выделенные из тяжелой культуры, дают три более быстрых максимума с константами седиментации 86S, 61S и 38S, соответствующих тяжелым 70S-pn6o oMaM и диссоциированным тяжелым 50S- и 30S- yбъeдиницaм. На фиг. 214, Б представлена аналогичная кривая седиментации в градиенте плотности сахарозы еще одной смеси рибосом, выделенных из двух культур Е. соИ. Одну из этих культур выращивали, как и ранее, в тяжелой среде с Н-урацилом, а затем переносили на нерадиоактивную легкую среду, где она росла в течение еще 3,5 генерации, после чего из нее выделяли рибосомы. Другая культура все время росла на тяжелой среде с С-урацилом. Видно, что после 3,5 генерации в легкой среде меченные Н тяжелые 508-и 308-субъединицы рибосом по-прежнему седиментируют с той же высокой скоростью, что и меченные тяжелые 50S- и 305-субъединицы тяжелой культуры, не подвергавшейся переносу. Но меченные Н, ранее бывшие тяжелыми 705-рибосомы той культуры, которую переносили с одной среды на другую, седиментируют теперь со скоростью, лежащей примерно посередине между скоростями седиментации полностью тяжелых и полностью легких 708-рибосом. Эти результаты показывают, что, в то время как тяжелые 50S- и 305-рибосомные субъединицы остаются неизменными после переноса бактерии в легкую среду, большинство из них за это время соединилось с легкими , позднее синтезированными партнерами и образовало наполовину тяжелые , наполовину легкие гибридные 708-рибосомы. [c.430]

Рибосомы, выделенные из бактерий или из цитоплазмы и органелл эукариотических клеток, различаются как по размеру, так и по относительному содержанию РНК и белка. Следовательно, рибосомы из различных источников могут иметь разную форму и по-разному быть сконструированы. В табл. 8.1 перечислены компоненты бактериальных рибосом, выделенных из Е. oli. [c.103]

Синтез белков в живых клетках протекает при активном участии рибосом, которые с химической точки зрения представляют собой рибонуклеопротеиды. Каждая рибосома состоит из двух субчастиц. Более крупная субчастица содержит две молекулы рибонуклеиновой кислоты с разными молекулярными массами, а более мелкая — только одну молекулу рибонуклеиновой кислоты, отличную по молекулярной массе от двух указанных. С молекулами нуклеиновой кислоты в каждой субча-стице связано большое число белков. Что касается их состава, то рибосомы, выделенные из разных организмов, имеют ряд общих черт, однако существуют и значительные различия. Многие из них были обнаружены с помощью электрофореза. [c.309]

Присутствие рибосом в частицах аренавирусов может быть случайным в силу плейоморфного характера вирионов и скопления (предполагаемого) рибосом в местах созревания. Рибосомы, выделенные из вирусных частиц, способны синтезировать белок при добавлении необходимых кофакторов и мРНК [68]. При использовании для размножения вируса клеток с is-рибосомами обнаружили, что потомство вируса может вызывать последующую продуктивную инфекцию при таких температурах, когда дестабилизированы рибосомные частицы [147]. Возможно, что 155-мРНК N связана с рибосомами и также включается случайно. Однако не исключено, что на ранних этапах инфекции рибосомы и мРИК дают генные продукты. [c.396]

В эти годы созданы новые физ.-хим. методы аиализа. Были заложены основы хроматографич. методов (М. С. Цвет, 1906). В 20-х гг. Т. Сведберг предложил использовать для седиментации белков ультрацентрифугу, вскоре этим методом был выделен ряд вирусов. В 30-х гг. А. Тизе-лиусом заложены основы электрофореза, в 1944 А. Мартином и др. создана распределит, хроматография, для определения структуры прир. соед. впервые стал использоваться рентгеноструктурный анализ (Д. Кроуфут-Ходжкин, 40-е гг.). Благодаря использованию физ.-хим. методов в 50-х гг. достигнуты крупные успехи в изучении двух важнейших классов биополимеров-белков и нуклеиновых к-т Э. Чар-гафф провел детальный хим. анализ нуклеиновых к-т, открыта двойная спираль ДНК (Дж. Уотсон и Ф. Крик, 1953), определена структура инсулина (Ф. Сенгер, 1953), одновременно осуществлен синтез пептидных гормонов -окситоцина и вазопрессина (Дю Виньо, 1953), открыт один из элементов пространственной структуры белков- спираль (Л. Полинг, 1951). В эти годы Р. Замечником открыты рибосомы, что послужило стимулом для изучения механизма синтеза белка. [c.292]

В процессе прикрепления рРНК к рибосоме участвуют специальные белки - факторы элонгации, обозначаемые ЕР, и гидролизуется ГТФ с выделением энергии. [c.58]

Чтобы обеспечить надлежащий контраст для наблюдения частиц под электронным микроскопом, выделенные 70S рибосомы наносятся на ультратонкую углеродную пленку пленка с прилипшими частицами обрабатывается раствором уранилацетата и высушивается на воздухе. Уранилацетат обволакивает частицы и заполняет полости и щели. Являясь менее электронноплотным материалом, чем уранилацетат, рибосомные частицы оказываются негативно контрасти-рованными на фоне уранилацетата. Стрелки указывают на палочкообразный стержень L7 / L12, описанный в тексте [c.62]

Рис. 33. Электронные микрофотографии индивидуальных 70S рибосом Е. соИ, демонстрирующие их подразделение на две неравные субчастицы (малая сверху и большая снизу) (предоставлены В. Д. Васильевым, Институт белка АН СССР, Пущино) а - рибосомы контрастированы с помощью техники оттенения металлом. В этом случае, чтобы обеспечить надлежащий контраст, супензия выделенных 70S рибосом наносится на поверхность углеродной пленки и высушивается из замороженного состояния затем на частицы наносится ультратонкий слой металла (вольфрама или вольфрамо-рениевого сплава) путем его испарения в вакууме из такого положения, что частицы металла летят под определенным углом (в данном случае около 75 ) к поверхности пленки получаются оттененные металлом ч стицы e — рибосомы контрастированы с помощью техники негативного контраста, как описано в подписи к рис. 32.

В рибосоме Е. соИ только в одном экземпляре. Наиболее крупный белок содержится в малой субчастице это S1 (557 аминокислотных остатков, молекулярная масса 61160 дальтон) он довольно лабильно связан с рибосомой и легко теряется при выделении. Остальные белки много меньше по размеру молекулярная масса самых крупных из них (S2, S3) —около 26000 дальтон. Самые маленькие белки — L29, L30, L31, L32, L33 и L34 — представляют собой основные полипептиды с длиной около 50—60 аминокислотных остатков (молекулярная масса около 5000—7000 дальтон), и все сосредоточены в большой рибосомной субчастице. Размеры рибосомных белков Е. oli представлены в табл. 1. [c.92]

IF-2, наоборот, крупный белок кислой природы с важной для функции SH-группой. Это —главный фактор инициации. Он выделен в двух формах, несколько различающихся по молекулярной массе одна (IF-2a) — около 100000, а другая (IF-2b) —около 90000 дальтон обе формы, по-видимому, функционально эквивалентны в процессе инициации. IF-2 имеет сродство к ГТФ и образует с ним нестабильный комплекс. IF-2 с ГТФ взаимодействует с F-Met-tRNA и с рибосомой (с 30S субчастицей). ГТФ может быть заменен его нерасщепляемым аналогом. [c.224]

В ряде лабораторий (в частности, в лаборатории С. Бреннера) были получены данные о возможности существования в клетках в соединении с рибосомами короткоживущей РНК, названной информационной (иРНК). Сейчас она обозначается как матричная РНК (мРНК), потому что ее роль заключается в переносе информации от ДНК в ядре (где она синтезируется под действием ДНК-зависимой РНК-полимеразы) до цитоплазмы, где она соединяется с рибосомами и служит матрицей, на которой осуществляется синтез белка. Эта блестящая гипотеза затем экспериментально бьша доказана в лаборатории М. Ниренберга. При изучении влияния различных фракций клеточной РНК на способность рибосом, выделенных из Е. oli, к синтезу белка было установлено, что некоторые из них стимулировали включение С-аминокислот в синтезируемый полипептид. Добавление синтетического полинуклеотида, в частности полиуридиловой кислоты (поли-У), в белоксинтезирующую систему приводило к включению в синтезирующуюся белковую молекулу единственной аминокислоты -фенилаланина. Поли-У вызывал синтез в бесклеточной системе необычного полипептида полифенилаланина. Таким образом, искусственно синтезированный полирибонуклеотид, добавленный к препаратам рибосом, включавшим известные к тому времени факторы белкового синтеза и источники энергии, вызывал синтез определенного, запрограммированного полипептида. [c.519]

Выпавший осадок биополимера можно отделить от раствора фильтрованием. Известно, что фильтрование является высокопроизводительной операцией, применяющейся даже в промышленных масштабах. В то же время часто из-за мелкого размера выпавших частиц фильтрование проходит очень медленно, что затягивает процедуру выделения и может служить источником нежелательной инактивации биополимера. Поэтому в тех случаях, когда это не противопоказано масштабами разделения, в биохимии предпочитают использовать центр ифуги. Широко используются рефрижераторные центрифуги с охлаждением камеры, в которой вращается ротор. Частицы осажденного вещества под действием центробежного поля оседают на дне центрифужных стаканов и сжимаются в плотный осадок, с которого оставшийся раствор надосадочная жидкость, или супернатант) легко сливается или отсасывается. Скоростные центрифуги (ультрацентрифуги), создающие центробежное ускорение порядка 10 ускорений силы тяжести, т.е. порядка 10 м-с 2, позволяют осаждать даже некоторые достаточно крупные индивидуальные надмолекулярные агрегаты, такие, как рибосомы и вирусы. [c.234]

Клеточные мембраны после выделения из клеток и тщательной очистки остаются связанными с рибосомами и ДНК, представляя собой мембранополирибосомо-ДНКовые агрегаты [c.103]

Рибосомы в прокариотической клетке (числом порядка Ю на клетку) состоят приблизительно из 30% белка и 70% РНК, что в расчете на всю клетку составляет до 40% белка и 90% РНК "Мягкий" лизис растущих клеток сопровождается выделением почти всех рибосом в виде полирибосомомембранных агрегатов, содержащих все компоненты белоксинтезирующей системы Полирибосомы представляют собой цепочки, состоящие из 70S рибосомных мономеров с диаметром порядка 0,02 мкм, присоединенных к мРНК При низких концентрациях ионов магния — меньше 10 М 70S рибосомы диссоциируют на 30S и 50S субъединицы Размер первых приблизительно 0,007 — 0,016 мкм, молекулярная масса 800 кДа Каждая 30S субъединица включает одну молекулу 16S РНК с ММ около 500 кДа и 21 молекулу разных белков, 50S субъединица размером 0,014 — 0,016 мкм имеет ММ 1,8 10 кДа и содержит [c.103]

С развитием эффективных методов выделения и идентификации следовых количеств белков и их генов было установлено, что интерфероны-это гликопро-теины, состоящие приблизительно из 160 аминокислотных остатков. Каждый вид позвоночных может продуцировать в ходе вирусной инфекции по меньшей мере три разных типа интерферонов один синтезируется фибробластами соединительных тканей, другой-лейкоцитами, третий-Т-лимфоцитами разд. 6.11). Связываясь с мембраной здоровых клеток, интерфероны стимулируют образование специфических ферментов, которые способны разрушать вирусные мРНК и инактивировать фактор инициации белкового синтеза в рибосомах, препятствуя тем самым экспрессии вирусных генов в клетке-хозяине. [c.990]

С водорослями и высшими растениями цианобактерии имеют то общее, что все они осуществляют фотосинтез с выделением кислорода и содержат хлорофилл а, а также ряд других общих с растениями пигментов. Поэтому их и отнесли к водорослям под названием сине-зеленых водорослей. Но уже Ф. Кон, учитывая способ их деления, назвал их S hizophy eae и объединил со S hizomy etes (бактериями сведя в группу высшего порядка S hizophyta. Действительно, если судить по строению клетки, наличию муреиновой клеточной стенки 70 S-рибосомам и другим определяющим признакам, приходится отнести их к грам-отрицательным прокариотам. Цианобактерии-самая обширная, наиболее богатая формами и самая распространенная группа фотосинтезирующих прокариот. Благодаря способности расти в экстремальных условиях и фиксировать молекулярный азот они приобрели большое значение в сложном хозяйстве природы. [c.127]

Клетка преднагшачсна для производства и выделения пищеварительных ферментов. Видны многочисленные мембраны эндоплазматической сети (ЭС), усеянные рибосомами. КГ — комплекс 1 ольджи [c.245]

С. содержится в животных и растительных тканях и микроорганизмах, где образуется синтезом из путресцина и метионина. Особенно большие количества С. содержатся в рибосомах бактерий. Возможно, что роль С., содержагцегося в рибосомах, состоит в том, что он наряду с ионами Mg связывает рибонуклео-протеидные частицы с относительно небольшим мол. весом в высокополимерные агрегаты, осуществляющие белковый синтез. С. может быть выделен из биологич. материала путем хроматографии на анионите и количественно определен в виде 2,4-динитрофенильного производного. С. может быть получен действием избытка жидкого аммиака на 4-амино-1-(3-бромнропилами-но)-бутан. [c.498]

Смотреть страницы где упоминается термин Рибосомы, выделение: [c.282] [c.490] [c.204] [c.418] [c.75] [c.111] [c.7] [c.199] [c.223] [c.236] [c.242] [c.57] [c.141] [c.372] [c.27] [c.96] [c.11] [c.479] [c.273] [c.287] [c.241] [c.244] [c.69] [c.20]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология