Протромбин активация

Активные формы белков П. к. представляют собой сериновые протеолитич. ферменты, у к-рых каталитич. участок активного центра расположен в С-концевых областях тяжелых цепей молекулы. После активации проферментов (в результате элиминирования пептидных фрагментов) С-концевая область ферментов остается связанной с N-концевым доменом дисульфидными связями, благодаря чему осуществляется оптимальная ориентация белков на мембране клетки. Исключение-фермент тромбин, к-рый в результате активации протромбина лишается домена, содержащего Са -связывающие участки. [c.129]

Т. образуется из протромбина в результате его активации. Ингибиторы Т.- белки плазмы крови антитромбин III (мол. м. ок. 65 тыс.), 2-макроглобулин (мол. м. ок. 725 тыс.) и нек-рые др. наиб, ингибирующим действием обладает гирудин. [c.13]

Рнс. 133. Мембранный каталитический комплекс активации протромбина. [c.234]

Физические, химические и биологические свойства крови, очищенной ионитами от кальция, во многих отношениях выше, чем у нитратной крови кровь (или плазма) ближе к натуральному состоянию, несмотря на замену на натрий нормальных катионов крови. Не происходит разбавления протеина или загрязнения крови химическим антикоагулянтом, [цитратом натрия. Если ионит правильно буферирован, pH не изменяется. Эритроциты, лейкоциты и кровяные пластинки, которые не поглощены ионитом, остаются неповрежденными. Большое значение имеет чистота коагуляционной системы, которая достигается полным удалением ионов Са и М это в свою очередь подавляет активирование протромбина. Экспериментальным доказательством чистоты системы является также отсутствие активации ускорителя конверсии протромбина сыворотки и отсутствие каких-либо признаков образования тромбина. Если ввести ионы кальция в очищенную ионитом кровь или естественную плазму, происходит нормальное свертывание [84]. [c.604]

Все факторы свертывания (за исключением фибриногена, протромбина и продуктов их активации, а также ионов Са ) обозначены римскими цифрами (табл. 55.3). [c.325]

Связывание фосфолипида через ионы Са-+ с остатками Gla протромбина усиливает процесс активации последнего в 50—100 раз. Это происходит, по-видимому, вследствие создания высокой локальной концентрации протромбина и фактора Х (рис. 55.9). Фактор вызывает усиление активации протромбина примерно в 350 раз также благодаря повышению локальной концентрации фактора Х . [c.327]

ПРОТРОМБИН, гликопротеин плазмы крови. Мол. м. ок. 70 ООО. Белковая часть молекулы состоит из одной полипептидной цепи. Известна первичная структура для П. быка и человека. (582 аминокислотных остатка). На М-конце П. находится 10 остатков -у-карбоксиглутаминовой к-ты, необходимых для активации П. в тромбин. Синтез этих к-т осуществляется в печени карбоксилированием остатков глутаминовых к-т и регулируется витамином К. Содержание П. в плазме крови здорового человека 0,007—0,017%. ПРОФЕРМЕНТЫ (преферменты, зимогены), неактивные предшественники ферментов, образующиеся в ходе биосинтеза последних. Превращаются в ферменты а результате т. н. ограниченного протеолиза (расщепления обычно одной пептидной связи). Из П. синтезируются мн. протеолитич. ферменты, а также фосфолипазы. Биол. назначение П.— предотвращение преждеврем. проявления ферментативной активности внутри клеток и тканей, в к-рых осуществляется биосинтез ферментов. [c.485]

Фактор Vg, образуемый под действием тромбина из фактора V, впоследствии тем же тромбином и инактивируется, таким путем ограничивается процесс активации протромбина в тромбин. [c.327]

На этапе активации фактора X происходит соединение внешнего и внутреннего путей и образуется общий конечный путь свертывания крови (рис. 55.10). Фактор X представляет собой зимоген сериновой протеазы с мол. массой 55000 и содержит остатки Gla. Как и в протромбине, остатки Gla фактора X обеспечивают Са-+-зависимое связывание с кислыми фосфолипидами мембран тромбоцитов. Для превращения фактора X в его активную форму (XJ необходимо расщепление связи аргинин-изолейцин с помощью другой сериновой протеазы. Известны две сериновые протеазы, расщепляющие связь Arg— Пе в молекуле фактора X. [c.327]

Аналогичная картина наблюдается для тромбина. Активация протромбина фактором Уа (в присутствии Са и фосфолипида) приводит к а-тромбину, который может подвергаться автолизу с образованием р- и 7-тромбинов. Кроме того, могут образовываться другие формы - е, и др. Все они определенным образом отличаются по своим каталитическим свойствам [2067]. Было показано [2068], что р-цепь а-тромбина, будучи выделена в особых условиях, сохраняет до 5% каталитической активности. [c.196]

Ферментный каскад, в котором участвуют циклические нуклеотиды, не уникален и как система усиления регуляторного сигнала. Так, например, активация протромбина протекает через ферментный каскад (система свертывания крови), в котором участвует не 2—3 усилителя сигнала, а более 5. Соответственно, и степень усиления регуляторного сигнала в этом случае достигается большая. [c.206]

Активированный фактор X остается связанным с мембранами тромбоцитов, что ускоряет активацию им протромбина. [c.227]

Витамин К-кофермент в р-циях у-карбоксилирования остатков глутаминовой к-ты в предшественнике протромбина и в нек-рых др неактивных формах факторов свертывания крови с образованием остатков у-карбоксипутами-новой к-ты, В результате соответствующие участки молекул белков-предшествеиииков приобретают способность связывать Са и подвергаться активации с образованием [c.387]

Единственная установленная функция витамина К — это его связь со свертыванием крови. Как удалось проследить, недостаточность витамина К приводит к понижению содержания протромбина (рис. 6-16), некоторых факторов свертывания крови (факторов VII, IX и X) н одного плазматического белка, функция которого пока еще не установлена. В 1972 г. было обнаружено, что дефектный протромбин, образующийся в печени в отсутствие витамина К, не способен связывать ионы кальция, необходимые для последующего связывания протромбина с фосфолипидами и активации его в тромбин. Основываясь на этих сведениях, удалось локализовать структурные различия между нормальным и дефектным белком в М-концевом участке этого гликопротеида, содержащего 560 остатков . Из триптических гидролизатов нормального и дефектного протромбина были выделены пептиды, различающиеся по электрофоретической подвижности. Тщательный химический анализ в сочетании с изучением ЯМР-спектров показал, что в нормальном протромбине остатки в положениях 7, 8, 15, 17,20, 21, 26, 27, 30 и 33, которые при определении аминокислотной последовательности были все идентифнцнро-ваны как глутаминовая кислота, в действительности являются остатками карбокснглутамата. [c.389]

Прямое участие витамина К в биосинтезе биологически активного протромбина продемонстрировано [6] посредством измерения включения в белок С-бикарбоната. Опыты проводились на фракциях печени крыс, дефицитных по витамину К. Все инкубации проводились в присутствии циклогексимида в целях ингибирования биосинтеза белка de novo. Включение изотопа существенно возрастало в присутствии добавленного витамина К. Более того, наличие нормального протромбина в инкубационной смеси было продемонстрировано посредством активации фактором Ха, фактором V, фосфолипидом и ионами Са +. В процессе кислотного гидролиза С-меченного протромбина элиминировалось 50 % радиоактивности, а аминокислотный анализ показал, что остаток радиоактивности входил в состав глутаминовой кислоты, что доказывало участие витамина К во включении бикарбоната в остатки 7-карбоксиглутаминовой кислоты. Наконец, показано [7], [c.547]

Многие белки в противоположность приведенным выше примерам связывают ионы металлов либо временно, либо в течение всего времени их существования в организме. Ранее уже упоминался пример временного связывания Са + в связи с протеолитической активацией протромбина и других компонентов системы свертывания крови (см. разд. 24.2.1.2). Иной случай представляют щелочные фосфатазы и фосфокиназы, где, по-видимому, для экранирования отрицательных зарядов фосфатной группы для облегчения атаки атома фосфора нуклеофилом требуется ион двухвалентного металла типа Mg + или Zn +. Более постоянное связывание ионов металлов белками может служить для выполнения одной из указанных ниже целей. Ионы Са + предохраняют трипсин от автолиза. Конкавалин А (см. ниже) не связывает производных глюкозы до тех пор, пока не свяжет предварительно один ион Са + и один ион Мг 2+ на субъединицу. В данном случае катионы, по-видимому, осуществляют подгонку конформации молекулы, образуя центр связывания глюкозы. Ионы металлов принимают также участие в формировании активных центров ферментов. По- [c.561]

Образование из неактивных белков-предшественников установлено для целого ряда ферментов пепсина, реннина, трипсина, химотрипсина, карбоксипептидазы А их получали, соответственно, из пепсиногена, прореннина, трипсиногена, химотрипсиногена, прокарбоксипептидазы А. Активация предшественника характерна также для многих белков, участвующих в системе свертывания крови так, протромбин превращается в тромбин, плазминоген — в плазмин, а фибриноген — в фибрин. Имеются сведения о существовании в поджелудочной железе проэстеразы. [c.93]

Все протеолитические ферменты — фактор ХИа, фактор Х1а, фактор 1Ха, фактор Vila, фактор Ха и тромбин — ингибируются ДФФ, который для этого реагирует с определенным остатком серина в их молекулах. Аминокислотные последовательности вокруг этого остатка серина и других фрагментов, участвующих в образовании активного центра, почти одинаковы у факторов 1Ха, Ха, ХПа, тромбина и панкреатических эндопептидаз. N-концевые последовательности, освобождающиеся при активации зимогенов, также гомологичны с таковыми панкреатических протеиназ (табл. 3.3). Эти данные, а также сопоставление полных аминокислотных последовательностей тромбина [39], фактора X [40] и фактора IX [41] свидетельствуют о том, что факторы свертывания крови (синтезируемые в печени) и панкреатические протеиназы произошли от общего белка-пред-щественника и функционируют по одинаковому каталитическому механизму. Можно полагать, что структурные перестройки, происходящие при активации зимогенов после разрыва связи, также сходны между собой. При превращении фактора X в Ха, катализируемом фактором 1Ха или фактором УПа, происходит расщепление такой же связи Arg-Ile, как и у других зимогенов [42]. Превращение фактора IX в 1Ха, осуществляемое фактором Х1а, начинается с расщепления связи Arg-Ala, однако это еще не приводит к активации она наступает лишь при последующем расщеплении связи Arg-Ile. При переходе протромбина в тромбин вначале расщепляется связь Arg-Thr (без активации), а затем связь Arg-Ile, это приводит к активации. Для того чтобы превратить фибриноген в фибрин, тромбин расщепляет четыре связи Arg-Gly, а для превращения фактора XIII в Xllla —одну связь Arg-Gly. [c.52]

Важнейшим типом специфического активирования является образование активной формы некоторых ферментов, главным образом протеолитических, из недеятельных проферментов. Этот процесс обычно состоит в отщеплении от белковой молекулы профермента (зимогена) — полипептида, маскирующего каталитически активный участок молекулы. Расщепление проферментов в большинстве случаев производится особыми ферментами — киназами. В качестве наиболее изученных из них можно назвать энтерокиназу кишечного сока, активирующую неактивный трипсиноген, который после отщепления гексапептида переходит в активный фермент трипсин. Профермент тромбокиназа крови активирует протромбин, который переходит в активный тромбин, участвующий в свертывании крови. В других случаях проферменты расщепляются обычными протеазами хемотрипсиноген активируется трипсином. Активация пепсиногена в кислой среде происходит автокаталитически под действием образующегося пепсина. [c.244]

Превращение фибриногена в фибрин происходит под действием протеолитического фермента тромбина, который в нормальных условиях до активации находится в плазме в виде своего предшественника — протромбина. Впервые протромбин и тромбин были выделены в очищенном виде Сигерсом и др. [160] в настоящее время для получения высокоочищенных препаратов протромбина и тромбина используются более совершенные методы [161—163]. Лами и Уо [1641 провели глубокое физико-химическое исследование протромбина молекулярный вес протромбина, по их данным, равен 62 700. По данным количественного анализа [165] углеводная часть протромбина содержит 6,5% гексоз, 1,7% гексозаминов, очень мало пентоз и не содержит гексу-роновых кислот. Превращение протромбина в тромбин может активироваться двумя способами [159] 1) солями в высоких концентрациях (25%-ным раствором цитрата натрия) и 2) добавками тканевых и плазменных факторов к растворам протромбина. Молекулы тромбина способны к агрегации, что приводит к большому разбросу величин его молекулярного веса, приведенных в литературе. По-видимому, минимальный молекулярный вес мономера тромбина примерно равен 8000 [159, 166]. Лоранд и др. [167] показали, что при активации протромбина 25%-ным раствором цитрата натрия от протромбина отщепляется углевод. На более ранних стадиях процесса активации протромбина 40—60% углеводов и примерно такое же количество азота становятся растворимыми в трихлоруксусной кислоте. Количества гексоз и гексозаминов, которые растворимы в трихлоруксусной кислоте при активации протромбина, также составляют 40—60%. Миллер и Сигерс ]168] исследовали углеводную часть, отщепившуюся от протромбина при активации. Тромбин осаждали из активированной смеси сульфатом аммония, а из надосадочной жидкости выделяли углеводную фракцию. При гидролизе углеводной фракции в гидролизате была найдена только глюкоза. Поскольку никаких гексозаминов обнаружить не удалось, было выдвинуто предположение, что в процессе активации протромбина гексозамин может ферментативно отщепляться от гексоз. [c.253]

Протромбин является одним из четырех факторов свертывания (кроме него в эту группу входят факторы IX, VII и X), для биосинтеза которых необходим витамин К [44]. У животных, получающих рацион, лишенный витамина К, синтезируется дефектный протромбин, который не связывает Са + и не активируется in vivo однако in vitro этот протромбин способен активироваться трипсином, и, следовательно, у него сохранен активный центр. В настоящее время установлено, что нормальный протромбин содержит в положениях 7 и 8, 15 и 17, 20 и 21, 26 и 27, а также 30 и 33 от N-конца молекулы у-карбоксиглутаминовую кислоту (Gla), ранее не встречавшуюся в составе белков [45] у животных с недостаточностью витамина К в указанных положениях находятся остатки глутаминовой кислоты. По-видимому, этим объясняются нарушения в связывании Са + дефектным протромбином, поскольку в норме ион Са + связывается с двумя соседними остатками Gla подобно тому, как он связывается с ЗДТА. Фосфолипид взаимодействует с протромбином через Са +, который, как уже говорилось, связан с Gla это обеспечивает связывание комплекса фактор Ха — фактор V с протромбином, что необходимо для процесса активации. Фактор X и фактор IX, так же как и протромбин, имеют в соответствующих положениях [c.53]

Активация протромбина происходит на тромбоцитах в этом процессе участвуют анионный тромбоци-тарный фосфолипид, ионы Са +, факторы и Х . [c.327]

Факторы XII, XI, IX, X, VII и протромбин представляют собой неактивные предшественники протео-литических ферментов, катализирующих активацию последующих факторов при наличии необходимых кофакторов. Фактор XIII—это предшественник фермента трансглутаминазы, но факторы VIII, V, фибриноген [c.49]

Таким образом, в каждом случае активация происходит в результате разрыва очень небольшого числа пептидных связей. По специфичности рассматриваемые ферменты очень сходны с трипсином трипсин может действовать подобно фактору 1Ха и фактору Ха. Вместе с тем факторы свертывания крови являются чрезвычайно специфичными протеиназами они расш,епля-ют только одну или две пептидные связи в одном или двух белках. Причина этого кроется, по-видимому, в способности ферментов узнавать более протяженную аминокислотную последовательность, чем Arg-X, которую узнает трипсин. С этой точки зрения интересно, что в протромбине две связи, расщепляемые фактором Ха, расположены в участках молекулы, имеющих одинаковую аминокислотную последовательность Ile-Glu-Gly-Arg [43]. [c.53]

Сгусток крови образуется на внутренней поверхности измененного сосуда. В этом процессе участвуют различные факторы свертывания крови, в том числе витамин К-зависимые белки (витамин К обеспечивает синтез в печени 7-карбоксиглутами-новой кислоты, присутствующей в каждом из этих белков), в частности протромбин. В результате каскада протеолитиче-ской активации факторов свертывания на конечной стадии из протромбина образуется тромбин, который обеспечивает полимеризацию растворимого фибриногена в нерастворимый фибрин. Фибриновая сеть и захватывает элементы крови. [c.94]

Прокоагулянтный путь (рис. 21.15) занимает центральное место в свертывании крови. В циркулирующей крови содержатся проферменты протеолитических ферментов, секретируемые клетками печени факторы VII, XI, IX, X и фактор II (протромбин). При повреждении сосуда включается каскадный механизм активации этих проферментов. В активации участвуют также циркулирующие в крови факторы VIII и V и мембранный белок Тф (тканевой фактор, фактор III) эти факторы выполняют роль кофакторов ферментов (активаторов). В ходе активации образу- [c.507]

Сходство последовательностей аминокислотных остатков указывает на то, что тромбин эволюционно близок к сериновым проте-иназам поджелудочной железы. Подтверждением этому служат также сходство механизмов активации сравниваемых ферментов и наличие в них системы переноса заряда. Примечательно, что протромбин синтезируется в печени, имеющей в процессе эмбриогенеза общее с поджелудочной железой происхождение. [c.170]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология