Сравнение различных методов детектирования

По сравнению с классической ТСХ ВЭТСХ является значительно более быстрым методом, легче поддающимся стандартизации. В настоящей главе детально рассмотрены различные методы введения проб в ТСХ-систему и способы прямого фотометрического детектирования ВЭТСХ-пластинок (методы измерения отражения, пропускания, одновременного измерения пропускания и отражения, способы детектирования, основанные на возбуждении и гашении флуоресценции). Стандартное отклонение результатов этого метода не превышает 2,5%. Эффективность ВЭТСХ проиллюстрирована иа практических примерах. Одновременно с этим изложены основные требования к оборудованию, применяемому для количественного детектирования ВЭТСХ-пластинок. [c.173]

Описан ионизационный детектор с радиоактивным изотопом в качестве источника излучения, работа которого основана на соударениях первого рода. Детектор может применяться как для дифференциальных, так и для интегральных измерений. Рассматриваются различные параметры, влияющие на показания и чувствительность детектора, и проводится сравнение двух указанных типов детекторов. Достоинство дифференциального детектора заключается в том, что он не чувствителен к небольшим изменениям температуры, давления и расхода газа-носителя. Интегральный же метод детектирования позволяет делать более простые точные количественные расчеты по хроматограмме. [c.90]

Для измерения флуоресценции на границе раздела волновод/жидкость можно использовать различные методы регистрации и обработки сигналов. Флуоресценцию на границе раздела фаз можно детектировать либо обычным способом, располагая детектор под прямым углом к поверхности (на рис. 33.1, б-справа), либо по ходу основного пучка (рис. 33.1, г). Поскольку при детектировании по ходу основного пучка телесный угол излучения света мал по сравнению с регистрацией под прямым углом, первый способ, казалось бы, менее эффективен. Однако существует эффект усиления, и теория предсказывает, что для волновода из плавленого кварца, контактирующего с водной средой п , интенсивность флуоресценции по ходу основного пучка может быть в 50 раз выше, чем интенсивность флуоресцентного света, излученного под прямым углом к отражающей поверхности. Этот эффект - туннелирование флуоресцентного света обратно в волновод - подтвержден как теоретически, так и экспериментально [6, 26]. [c.522]

Таким образом, 8 линейно зависит от lg q. Однако для тонкослойной хроматографии это правило, по-видимому из-за несовершенного детектирования границ пятна, не всегда выполняется. Поэтому количественная оценка может быть проведена только прямым сравнением с серией стандартных растворов. Для этого Зеер [18] предложил следующий метод стандартный объем определяемой смеси веществ наносится в виде точек через определенные интервалы на слой силикагеля. Между этими точками наносятся стандартные объемы ряда эталонных растворов различной концентрации. После развития и проявления хроматограмм приготовляют контактную фотографию пластинок. На ней измеряют площади соответствующих пятен и строят по эталонным растворам графическую зависимость измеренных площадей от количеств вещества. Из полученного графика находят содержание вещества в определяемой смеси. [c.303]

Листовые варианты хроматографии — бумажная и тонкослойная хроматография — обладают общими преимуществами по сравнению с колоночным вариантом хроматографии [41, 55, 381] экспрессностью, простотой осуществления процесса и отсутствием необходимости дорогостоящего оборудования, возможностью разделения и идентификации субмикрограммовых количеств смесей веществ, универсальностью (вследствие возможности варьирования выбора сорбента, особенно в случае тонкослойной хроматографии, тех), простотой детектирования разделенных зон на хроматограмме, возможностью быстрой количественной оценки содержания элементов в зонах различными высокочувствительными методами и др. [c.165]

Для сравнения величин двух потоков нулевым методом не обязательно пользоваться двумя фотоумножителями. Дело в том, что чувствительность каждого из них может несколько меняться независимо друг от друга и это может явиться источником ошибок в измерениях. Поэтому иногда предпочитают пользоваться одним ФЭУ, на который падают одновременно два сравниваемых сигнала, модулированных различными частотами. После усиления резонансными усилителями, настроенными на соответствующие частоты, и детектирования эти сигналы сравниваются. Необходимое время измерения при применении такого рода схем обычно оиределяется постоянной времени индикаторного прибора. [c.131]

В простейших экспериментах с применением С, при которых получаемые результаты эквивалентны результатам работ с радиоактивным С, важнейшим фактором является заметное природное содержание С. Именно этот фактор стимулировал развитие инструментальной техники ЯМР С и сделал реальной интерпретацию спектров. С другой стороны, этот фактор ограничивает чувствительность ЯМР как метода детектирования включенной метки. Если предшественник в каком-то определенном положении мечен на 100%, то, конечно, соответствующие сигналы в его спектре будут интенсивнее сигналов при природной концентрации, составляющей около 1 % Для надежного обнаружения введенной метки ее максимально допустимое разбавление должно быть не выше 100-кратного, а для сколько-нибудь точного количественного определения оно должно быть значительно ниже. Более того, в идеальном варианте необходимо количественное сравнение включенной в несколько различных положений метки здесь уже появляются проблемы, связанные с использованием преобразования Фурье в методе ЯМР. Так, на интенсивность сигналов в спектре ЯМР С заметно влияют релаксационные эффекты, различные для разных атомов углерода эти эффекты трудно воспроизводимы даже в различных спектрах одного и того же соединения. Эта трудность может быть преодолена [70] путем применения парамагнитных релаксационных реагентов , например трис(ацетил-ацетоната)хрома (III) [116, 117], специальных приемов подавле- [c.476]

Весьма важной частью прибора для газо-жидкостной и газо-адсорб-ционной хроматографии является приспособление для обнаружения и записи содержания компонентов в потоке, выходящем из колонки. Одной из задач настоящей статьи является сравнение различных предложенных методов детектирования. [c.116]

Матьюз [17] применил ТСХ для исследования различных материалов, в том числе тяжелых смазочных масел, смазок, моторных масел и топлив, каменноугольного пека и угольных остатков, компонентов, входящих в состав сырой нефти и остаточных продуктов ее переработки, а также различные продукты специального назначения, например зеленое масло, жидкие алканы и различные растительные масла. Эти продукты были идентифицированы ва всех видах стоков. Описываемую методику нецелесообразно использовать для разделения смесей компоненты которых сами являются сложными смесями, как это имеет место при анализе смазок и смазочных масел. Предварительная информация о предположительном составе компонентов в анализируемом продукте может способствовать существенному упрощению выбора условий разделения. Пробы воды экстрагировали петролейным эфиром или метиленхлоридом входящие в состав образцов жиры омыляли. Для разделения использовали пластинки размером 5X2 и ЮХ Х20 см, покрытые слоем Кизельгура О, оксида алюминия Т и силикагеля Т толщиной 0,25 мм. Перед использованием пластинки высушивали на воздухе в течение ночи и затем активировали при 105 °С в течение 30 мин. Каплю экстрагированного масла наносили на пластинку с помощью капилляра для определения температуры плавления. Вязкие масла и смазки предварительно нагревали или наносили в виде концентрированного раствора в хлороформе. Пробы (10%-ный раствор в толуоле, масса/объем) можно нанести в виде полосы длиной 1,5 см, состоящей нз пяти точек. Для предотвращения диффузии пробы следует наносить очень аккуратно и растворитель следует испарять перед началом разделения. В качестве элюентов использовали по отдельности или в различных сочетаниях петролейный эфир, ацетон и этанол. Во всех случаях применяли восходящий способ разделения. Разнообразные методы детектирования, в связи со сложным составом проб, здесь не приведены, их можно найти в таблицах со ссылками на оригинальные исследования в работе [17]. Можно упомянуть, что все пластинки облучали УФ-светом при 254 и 350 нм. Окраску (флуоресценцию) и значения Rf использовали в основном для целей идентификации, вводя для сравнения стандарты, когда это было возможно. [c.582]

Оценка результатов хроматографического разделения путем анализа отдельных фракций — процедура относительно медленная, однако очень часто только таким методом можно получить важную специфическую информацию, а если анализируются радиоактивные материалы, то и повысить чувствительность обнаружения, Чаще всего используется автоматическая регистрация процесса разделения детектором, дающим на выходе электрический сигнал, интенсивность которого пропорциональна концентрации анализируемого соединения. Этим же методом можно провести количественное определение. Обнаружение соединений в жидкостной хроматографии проводится различными способами. Мнопие детекторы оценивают различие в характеристике анализируемого соединения и элюента. В частности, этот принцип положен в основу спектрофотометрического детектирования в ультрафиолетовой, видимой и инфракрасной областях. Детекторы неселективного действия измеряют показатели преломления, проводимость или диэлектрическую проницаемость при тщательной температурной компенсации рабочей ячейки и ячейки сравнения. В некоторых типах детекторов растворитель перед вводом соединения в регистрирующий блок удаляется (например, пламенно-ионизационный детектор с подвижной нагреваемой лентой). Конструкция спектрофотометрических детекторов для высокоэффективной жидкостной хроматографии (особенно ультрафиолетового абсорбционного и рефрактометрического детекторов) хорошо разработана. Если для работы с одной колонкой объединяют два детектора, то сначала устанавливают УФ-детектор, а затем рефрактометрический детектор. [c.67]