Гетерогенность иммуноглобулинов

В соответствии с характером структурной гетерогенности иммуноглобулинов генетические аспекты биосинтеза иммуноглобулинов рассмотрены вначале отдельно для постоянных и вариабельных частей легких и тяжелых полипептидных цепей, и затем дана общая схема организации генетического материала, контролирующего образование полипептидных цепей иммуноглобулинов. [c.43]

Обработка антител меркаптоэтанолом приводит к разрыву дисульфидных связей, при помощи которых цепи связаны друг с другом, и позволяет получить препараты мономерных легких и тяжелых цепей. При ферментативном гидролизе пептидных цепей иммуноглобулинов появляются чрезвычайно гетерогенные пептидные фрагменты. Этот результат не был неожиданным, поскольку уже давно известно, что в организме содержатся буквально тысячи различных антител, каждое из которых имеет специфический участок связывания для различных антигенных детерминант. Если раньше было неясно, как формируются различные участки связывания, то [c.381]

Форма полос преципитации позволяет судить о гомогенности или гетерогенности исследуемых белков. Гомогенные белки дают симметричные полосы преципитации правильной формы (например, среди сывороточных белков такую полосу преципитации дает альбумин). Гетерогенная популяция молекул обычно дает вытянутую асимметричную полосу преципитации. Это характерно для иммуноглобулинов нормальной сыворотки человека (IgG, IgM, IgA). [c.146]

Вариабельные области иммуноглобулинов, состоящие из V - и Уц-доменов, весьма гетерогенны. Действительно, нет двух вариабельных областей (у разных индивидов), которые были бы идентичны по аминокислотной последовательности. Имеются, однако, сходные по структуре участки. Их можно разделить на три группы в зависимости от степени го- [c.321]

При проведении ИЭФ сыворотки человека в градиенте амфолинов (pH 3— 10) обнаруживается около 40 четких зо н [1454], которые в основном расположены в диапазоне pH 4—6 (так как в этом диапазоне лежат значения ИЭТ большинства белков сыворотки), в связи с чем указанный участок оказывается сильно перегруженным. Кислый аг гликопротеид (ИЭТ 2,7) локализуется на анодном конце электрофореграммы. Иммуноглобулины из-за их гетерогенности по величине заряда образуют ряд дискретных зон в интервале pH 6—9. Вследствие отмеченной выше перегруженности участка в диапазоне pH 4—6 ИЭФ, вероятно, лучше использовать не на первом этапе разделения белков сыворотки, а для дальнейшего фракционирования отдельных белковых компонентов. Тем не менее этот метод нашел практическое применение. [c.334]

Костные рыбы. В классе костных рыб наблюдается определенная гетерогенность молекулярных форм иммуноглобулинов. Однако доминирующей по видам формой являются тетрамер и мономер, относящиеся к одному и тому же 1 М-изотипу. В этом же классе впервые в филогенезе возникает дифференцировка иммуноглобулинов по изотипам двоякодышащих рыб. [c.436]

Рассмотренные замечательные результаты тонких исследований строения иммуноглобулинов и особенно механизмов их биосинтеза в плазмацитах вряд ли были бы возможны, если бы не одно крайне благоприятное для исследователей обстоятельство. Нормальные лимфоидные органы слишком гетерогенны по своему клеточному составу, чтобы предоставить подходящий материал для таких исследований. К счастью, была обнаружена замечательная модельная система, созданная самой природой. Путем последовательных трансплантаций у мыши можно образовать миеломную опухоль, состоящую целиком из плазмацитов, к тому же, в отличие от нормы, интенсивно пролиферирующих (делящихся). [c.104]

Выяснение последовательности аминокислот в пептидных цепях иммуноглобулинов затруднено гетерогенностью этих белков. Антитела к данному антигену, выделенные даже в чистом виде, почти всегда неоднородны. Одной из причин этой неоднородности следует прежде всего назвать наличие у большинства антигенов нескольких антигенных детерминант к которым образуются различные по специфичности антитела. Кроме того, антитела даже к одной детерминанте могут принадлежать [c.10]

Сильно осложняет задачу изучения механизмов биосинтеза иммуноглобулинов и гетерогенность нормальных лимфоидных тканей. Выделение из них продуцентов иммуноглобулинов до сих пор не разработано, так как существующие методы разделения клеточных популяции [c.67]

При сборке молекул иммуноглобулинов 13 вариантов легких цепей и 40 вариантов тяжелых цепей соединяются в различных сочетаниях, образуя в организме человека более 500 вариантов молекул иммуноглобулинов (рис. 31). На самом деле число присутствующих в крови человека молекул иммуноглобулинов значительно больше. Во-первых, большинство полипептидных цепей присутствует в виде двух вариантов (аллотипов), каждый из которых контролируется одним из аллельных генов. Во-вторых, на все это накладывается гетерогенность, связанная с наличием у отдельных молекул активности антитела. Активность антитела данной специфичности может быть связана с молекулами, различающимися не только по константным областям, но даже и по строению вариабельной области. И, наоборот, молекулы, относящиеся к одному варианту, как по константной области, так и по подгруппе вариабельной области могут различаться между собой по специфичности. [c.129]

Наиболее однородна альбуминовая фракция плазмы крови она почти целиком представлена одним белком — альбумином крови. Фракция у-глобулинов содержит главным образом антитела (иммуноглобулины). Другие фракции гетерогенны. [c.503]

Белки миеломы как инструмент исследования. У большинства людей иммуноглобулины (антитела, или секретируемые В-клет-ками рецепторы антигенов) представляют собой сложную смесь белков, синтезируемых многими различными клеточными клонами. На первый взгляд такая гетерогенность кажется непреодолимым препятствием на пути химического анализа антител, поскольку для него необходимы очищенные белки. Однако, как и во многих других случаях, сама природа предусмотрела ситуации, позволяющие решить эту задачу. Неонлазии возникают при злока- [c.101]

При анализе струкхуры и функции иммуноглобулинов следует различать два понятия гетерогенность и вариабельность. Гетерогенность определяет свойства иммуноглобулинов, обусловленные константной (С) частью молекугш, т.е. теми структурными особенностями, которые позволяют делить всю 1руппу этих белков на классы, подклассы, аллотипы и типы легких цепей. Гетерогенность подразумевает также различия в функциональной активности разных классов иммуноглобугшнов за исключением их свойства специфического взаимодействия с антигеном. Вариабельность — это индивидуальная характеристика иммуноглобулинов. [c.52]

Амфибии, рептилии, птицы — все характеризуются гетерогенностью по иммуноглобулинам. При этом эволюционная преемственность с млекопитающими установлена только для IgM. Филогенетическая связь других изотипов иммуноглобулинов млекопитающих с изотипами нижестоящих филумов не установлена. [c.437]

Констатиая облает (С-обласпъ) — инвариантная часть тяжелой и легкой цепей иммуноглобулинов, ответственная за их гетерогенность состоит из одного С-др-мена у легких цепей и 3 или 4 С-доменов у тяжелых цепей в зависимости от изотипа иммуноглобулинов. [c.463]

ИФА, основанный на эффекте ингибирования субстратом фер-мента-метки. В качестве метки антигена используют пероксидазу хрена. Принцип метода основан на значительном отличии ферментативной активности исходного конъюгата и конъюгата в комплексе со специфическими антителами при детекции метки в присутствии 35 мМ перекиси водорода, которая является субстратом пероксидазы. Пероксидаза нативная и в конъюгате с антигеном в значительной степени ингибируется уже при концентрации перекиси 10 мМ, но сохраняет активность в конъюгате при связывании с соответствующими антителами. Новый подход апробирован на примере а-фетопротеина, ферритина, рг-микроглобулииа, дигоксина, иммуноглобулина Е. При длительности 20—30 мин метод позволяет определять до 10 нг/мл а-фетопротеина, что сопоставимо с чувствительностью гетерогенного ИФА. [c.118]

Иммуноглобулины составляют группу макромолекул, чрезвычайно гетерогенную по биологической активности, заряду и молекулярному весу. Это наиболее щелочные из сывороточных глобулинов, обладающие наименьшей электрофоретической подвижностью (обзор Eisen, 1973). Для их отделения от остальных белков сыворотки используют либо обычные физико-химические методы, такие, как высаливание, ионообменная хроматография, гель-фильтрация и препаративный зональный электрофорез, либо аффинную хроматографию последний метод особенно пригоден для выделения из сыворотки специфических антител. Все эти методы достаточно просты, не требуют большой затраты времени и обеспечивают хороший выход иммуноглобулинов. Иммуноглобулины разных животных различаются по заряду, молекулярному весу и электрофоретической подвижности, поэтому методы фракционирования, пригодные для выделения иммуноглобулинов одного вида, не всегда будут без каких-либо изменений пригодны для глобулинов другого вида в каждом отдельном случае необходима подработка методики. В этой главе дается краткое описание общих методов фракционирования, позволяющих выделять иммуноглобулины большинства видов животных. [c.58]

Этим методом можно также с успехом изучать молекулы иммуноглобулинов других классов, обладающих сходными свойствами (Barnstable et al., 1978 A. Ziegler, неопубликованные данные). Однако в ИТФ сравнительный анализ иммуноглобулинов, содержащихся в разных сыворотках, имеет одно существенное ограничение. Дело в том, что любой вид отрицательно заряженных ионов, содержащихся в исследуемом образце, будет усиливать разделяющее действие амфолитов-носителей. Поскольку каждая из сравниваемых сывороток всегда имеет свой собственный набор разновидностей отрицательных ионов, сопоставление электрофореграмм становится невозможным подобное явление не имеет места при ИЭФ. Правда, сходство или различие компонентов в двух образцах можно установить, исследуя в ИТФ их смесь. Кроме того, мы обходили указанное затруднение, внося во все образцы одинаковые количества гетерогенной смеси немеченых ионов (10% лошадиной сыворотки или сыворотки плода коровы), так, чтобы они были в большом избытке по сравнению с [c.147]

Помимо различий между KJтa aми, существует и весьма значительная гетерогенность в пределах каждого оасса. Так, по электрофоретическим свойствам иммуноглобулины настолько разнообразны, что встречаются во всех фракциях норм шьной сыворотки, от а до у (рис. 6.2). [c.98]

Становятся известны все новые представители гетерогенного семейства рецепторных молекул, способных связывать иммуноглобулины (здесь приведены лишь отдельные примеры). Рецептор F iR экспрессируют активированные В-клетки, но не Т-клетки и моноциты. Рецептор F eRII экспрессируют, кроме клеток, указанных в таблице, эозинофилы, тромбоциты, Т-клет-ки и В-клетки. [c.107]

Природа фибриллярного белка амилоида (F-компонент) в последнее время хорошо изучена. Руководствуясь разносторонними исследованиями (определение относительной молекулярной массы, электрофоретический и хроматографический анализ), можно считать, что фибриллы амилоида представляют собой гетерогенную группу (смесь) белков с индивидуальными особенностями в каждом случае амилоидоза [Рукосуев В. С., 1975]. Из смеси белков фибрилл амилоида удалось выделить две группы— белок А (AS) и белок В. Белок А (AS), обнаруженный в амилоиде при всех формах амилоидоза у человека и при экспериментальном амилоидозе у различных животных, по сравнению с белком В содержит больше таких аминокислот, как аргинин, аспарагин, глицин, аланин и фенилаланин, причем последовательность концевых участков аминокислот отличаех-этот белок от любого из иммуноглобулинов. Белок В, обнаруженный в амилоиде при первичном амилоидозе, опухолевидном амилоидозе респираторного тракта и плазмоцитоме, по сравнению с белком А (AS) имеет большую относительную молекулярную массу по аминокислотному составу и последовательности концевых остатков аминокислот он напоминает легкие цепи иммуноглобулинов или белка Бене-Джонса [Isersky С. et al., 1972]. [c.215]

К счастью, потенциометрические методы иммуноферментного анализа не обязательно являются гетерогенными по своей сути. Гомогенные методы удобнее, чем гетерогенные, так как включают меньшее число операций. Фононг и Рехнитц [6] описали метод гомогенного потенциометрического иммуноферментного анализа для человеческого иммуноглобулина О с использованием СО2-электрода. В этом методе получают конъюгат IgG, меченный ферментом, и затем ингибируют активность последнего, связывая конъюгат с антителами к IgG. Используемая ферментная метка, хлоропероксидаза, несколько необычна. Это гем-содержащий фермент, который катализирует ряд реакций галогенирования органических молекул в присутствии пероксида водорода и соответствующего галогенида, например бромирования (3-кетоадипиновой кислоты. Этот процесс сопровождается образованием СО2, что и используют в данном аналитическом методе [c.62]

Лимфоциты делятся на два класса В-клетки и Т-клетки, причем и те и другие образуются из стволовых клеток костного мозга. Т-клетки происходят из стволовых клеток, дифференцирующихся в тимусе, и являются функционально гетерогенными. Их гетерогенность подтверждается тем, что субпопуляции Т-клеток имеют различия не только по функциональным свойствам, но и по фенотипическим поверхностным маркерам. В-клетки не подвергаются дифференцировке в тимусе — они представляют собой лимфоциты, которые после дифференциров-ки в плазматические клетки синтезируют различные классы иммуноглобулинов, составляющие репертуар специфических антител. В-клетки находятся под контролем Т-клеток и не способны к самостоятельной дифференцировке помимо специфического антигенного стимулирования они нуждаются в помощи Т-лимфоцитов (Т-хелперов), которые обеспечивают их специфическими факторами пролиферации и дифференцировки. Другие Т-клетки (Т-супрессоры) могут подавлять образование антител В-клетками. [c.6]

Жизненный цикл иммунокомпетентных клеток лимфоидной ткани (В- и Т-клетки и их потомки в виде клеток, синтезирующих иммуноглобулины и антигенраспознающие и эффекторные лимфоциты) существенно короче, чем время жизни организма. В связи с этим ведущим условием для осуществления иммунологических реакций служит постоянное протекание в лимфоидной ткани гистогенезов, в ходе которых происходят пролиферация предшественников иммунокомпетентных клеток и их дифференцировка в зрелые клетки. Последние, как правило, высоко-специализированы и гетерогенны, а дифференцировочные различия, связанные с иммунологическими функциями, у них жестко закреплены (класс и специфичность синтезируемого иммуноглобулина у В-клеток и специфичность рецепторов для антигенов у Т-клеток). Наоборот, среди клеток-предшественников в течение всей жизни присутствуют и такие, для которых открыты несколько возможностей дифференцировки (Фриденштейн, Чертков, 1969). [c.159]

Антитела, циркулирующие в крови, представляют собой весьма гетерогенную популяцию белков типа глобулинов, которые могут отличаться друг от друга по физическим, химическим и серологическим свойствам. Различают три основных класса иммуноглобулинов IgG (или yG) с константой седиментации ( 20, w) 7S, обычно устойчивый к действию меркаптоэтанола IgM (или М) с константой седиментации 19S, чувствительный к дех ствиго мер-каш оэтанола, и IgA (или 7А), у которого константа седиментации варьирует от 7 до 19S. [c.360]

С целью количественного определения титра кожно-сенсибилизирующих антител и их идентификации на 15-ти морских свинках поставлена реакция пассивной кожной анафилаксии, однако положительный результат пассивного переноса не удалось получить ни в одном случае. Это не противоречит данным некоторых авторов [ 132 ] о том, что лошадиная сыворотка не способствует формированию ПКА у морских свинок. Положительные результаты в реакциях системной и активной кожной анафилаксии без сомнения доказывают наличие состояния сенсибилизации экспериментальных животных. Следовательно, отрицательные результаты в реакции ПКА обусловлены гетерогенностью классов иммуноглобулинов, участвующих в развитии анафилактических реакций. Очевидно, гомоцитотропные антитела представлены классом иммуноглобулинов С, которые имеют очень короткий (порядка нескольких часов) период фиксации в коже и при тестировании после 24 часов не выявляются. [c.262]

После иммунизации, даже монодетерминантным антигеном, в пуле иммуноглобулинов, синтезируемых совокупностью клеток, содержатся антитела, различающиеся между собой, т. е. сыворотки содержат поликлональные антитела. Эта гетерогенность антител обусловлена тем, что каждый плазмоцит вырабатывает только один тип, вид, класс, подкласс антител. Следовательно, каждая клетка или ее потомство, клон вырабатывают свой тип антител, получивших название моноклональных. Принципиально моноклональные антитела можно получить искусственно, культивируя каждую антителопродуцирующую клетку, т. е. получая моноклональную культуру клеток. Однако практически это трудно осуществимо. Поэтому гибридную клетку получают путем слияния иммунного антителопродуцирующего В-лимфоцита, т. е. лимфоцита, взятого от иммунного животного и раковой миеломной клетки. Такая гибридома приобретает свойства ро- [c.156]

Теория Ф. Бернета объясняет многие иммунологические реакции (антителообразование, гетерогенность антител, толерантность, иммунологическую память), однако не объясняет предсуществования клонов лимфоцитов, способных отвечать на разнообразные антигены. По Ф. Бернету, существует около 10 ООО таких клонов. Однако мир антигенов намного больше и организм способен отвечать на любой из них. На эти вопросы теория не отвечает. Некоторую ясность в это представление внес американский ученый С. Тонегава, который в 1988 г. обосновал с генетической точки зрения возможность образования специфических иммуноглобулинов практически ко всем мыслимым антигенам. Эта теория исходит из того, что в организме человека и животных происходит перетасовка генов, в результате чего образуются миллионы новых генов. Этот процесс сопровождается интенсивным мутационным процессом. Отсюда из V- и С-генов, генов Н- и L-цепей может возникнуть офомное число генов, кодирующих разнообразные по специфичности иммуноглобулины, т.е. практически специфичные к любому антигену. [c.172]

Третий фрагмент (также 50 ьДа), обозначаемый Р , не способен к связыванию антигена, но обладает другими биологически важными функциями. В отличие от этот фрагмент способен проникать через плацентарную мембрану. Следовательно, способность иммуноглобулина G проходить сквозь плаценту и попадать в систему кровообращения плода определяется наличием на специфического участка, обеспечивающего перенос через плаценту. На имеется также участок связывания комплемента. Связывание антитела с антигенной детерминантой на поверхности чужеродной клетки часто ведет к лизису последней. Такой результат взаимодействия антитела с антигеном опосредован группой белков, носящих общее название комплемент. Присоединение одного из этих белков к комплексу антиген-антитело и запускает последовательность реакций, приводящих к лизису чужеродной клетки. В обозначении фрагмента индекс с (отангл. ristallizable - кристаллизуемый) указывает на способность этого фрагмента кристаллизоваться. Обнаружение этого свойства послужило первым указанием на гомогенность Р что касается фрагментов то они гетерогенны и обычно не кристаллизуются. [c.238]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология