Антигены сравнение

Реакция Николаева основана на идентификации величины белковой корпускулы по способности выпадать в осадок при определенной концентрации сульфата аммония. Известно, что чем больше относительная молекулярная масса белковой молекулы, тем при меньшем насыщении соли она выпадает в осадок. Антитела и антигены любой специфичности и природы будут иметь корпускулы меньшей относительной молекулярной массы, чем образуемые при их взаимодействии иммунные комплексы, состоящие не менее чем из 2 молекул. Следовательно, выпадение белков в такой системе будет происходить при добавлении меньшего количества химического реагента, чем в случае, когда реакция антиген — антитело не произойдет. В связи с этим учет реакции основан на сравнении объемов раствора сульфата аммония, необходимого для появления заметной мути (т. е. начала выпадения глобулинов) в опытных и контрольных пробирках. Достигается это повторными добавлениями равных объемов соли (по 0,1 мл, а затем по каплям) и регистрацией мути (визуально или с помощью нефелометра). Если при достижении некоего объема раствора соли муть появится лишь в опытных пробирках, но будет отсутствовать в контрольных, реакцию считают положительной, а разведение сыворотки принимают за титр. В реакции используют сыворотки и их разведения в объеме 1 мл (реже 0,5 мл), а антиген в объеме 0,1 мл. Добавление сульфата аммония начинают через 2—3 мин после тщательного смешивания антигена с сывороткой. [c.247]

Чувствительность в определении единичных аминокислотных замен в случае моноклональных антител значительно выше по сравнению с антисывороткой и позволяет использовать моноклональные антитела даже для детекции тонких конформационных изменений молекулы белка. Благодаря высокой чувствительности, с которой моноклональные антитела определяют антигенные детерминанты, их можно использовать для точного установления границ и структуры детерминант, а также для идентификации и выделения чистых специфических пептидных фрагментов антигена. [c.306]

Процесс соответствующих взаимодействий, имитирующих те, которые доминируют в биохимических процессах и относящихся к нековалентным, получил название "молекулярное узнавание". Молекулярное узнавание можно определить как процесс, включающий в себя как связывание, так и выбор молекулы - "гостя" данной молекулой -"хозяином". Просто связывание молекул не является молекулярным узнаванием. Согласно Лену [4], "узнавание - это связывание с целью". Данное поведение характерно для многих биохимических процессов, таких как ферментативные реакции, связывание "рецептор-субстрат", сборка белковых молекул, иммунное взаимодействие антиген-антитело, транспорт через мембрану и т.д. Одним из критериев молекулярного узнавания является то, что константа ассоциации между "хозяином" и "гостем" является значительно более высокой по сравнению с константами образования комплексов между другими молекулами, присутствующими в системе. В связи с этим особое значение приобретает исследование энергетики межмолекулярных взаимодействий биомолекул. Энергетические параметры позволяют судить о силе взаимодействия, наличии или отсутствии ассоциации между молекулами, а также выявить и описать влияние растворителя на процесс молекулярного узнавания. [c.185]

СРАВНЕНИЕ АНТИГЕННЫХ СТРУКТУР ИЗОФЕРМЕНТОВ И [c.325]

Сравнение антигенных структур изоферментов [c.326]

Вирусные белки могут быть получены генно-инженерным методом, однако нужно учитывать следующие моменты. Как правило, вирусные белки состоят из нескольких полипептидных цепей, в ряде случаев химически модифицированных, Не только в бактериальной, но и в дрожжевой клетке нет структур, осуществляющих созревание таких белков. Следовательно, микробные клетки могут продуцировать только отдельные полипептидные цепи. Это резко снижает или сводит на нет их иммуногенность, которая определяется конформационными антигенными детерминантами, формирующимися в процессе образования третичной или четвертичной структуры белка. Ограниченное применение вирусных белков-антигенов относится к белкам HBS-вируса гепатита В человека и белка УР вируса ящура. HBS-антиген, синтезируемый дрожжевыми клетками, давал иммунный ответ, хотя и меньший по сравнению с инактивированным вирусом, однако достаточно высокий. Образовавшийся белок не секретировался из клеток, а в процессе их разрушения и вьщеления антигена выход его значительно снижался, что ставило под сомнение всю технологическую схему [c.504]

Сравнение антигенных структур белков из разных источников [c.327]

Опыт ставится обычно следующим образом. В серию про--бирок наливают различные объемы пробы, в которой требуется определить концентрацию гормона, например инсулина.-Одновременно готовят пробы, содержащие известное количество этого гормона. Затем в каждую пробирку добавляют стандартное количество меченого гормона (обычно используются гормоны, меченные испускающим улучи) и специфического к гормону антитела. Раствор инкубируют некоторое-время (несколько минут или часов) для достижения равновесия между гормоном (антигеном) и комплексом антитело — гормон. Далее отделяют комплекс гормон — антитело, например, методом гель-фильтрации или осаждением сульфатом аммония и измеряют радиоактивность полученного комплекса. Если в определяемой пробе гормон содержится в высокой-концентрации, то разведение меченого гормона окажется выше, а радиоактивность комплекса гормон — антитело соответственно ниже по сравнению с пробой, где данный гормон присутствует в более низкой концентрации. Используя известные концентрации гормона, строят стандартную кривую, с помощью которой непосредственно определяют концентрацию-гормона в исследуемой пробе. [c.318]

В ряде вопросов, например при выяснении родства между белками, при сравнении фракций патологических и нормальных белков и т. д., перекрестные реакции оказывают существенную пользу. Реакции преципитации весьма чувствительны. Например, с помощью антисыворотки соответствующего титра можно обнаружить овальбумин в концентрации 1 мкг/мл. В зависимости от используемого метода определения азота в количественной реакции преципитации удается обнаружить от 75 до 125 мкг антигенного азота. [c.16]

Видовую принадлежность аэробных бактерий определяют путем сравнения обнаруженных морфологических, культуральных, биохимических, антигенных и других свойств выделенной культуры со свойствами бактерий известных видов и вариантов. [c.35]

По антигенной специфичности токсины делятся на ряд типов, к каждому можно получить гомологические антитела, однако в сыворотке можно обнаружить и гетерологичные антитела, которые свидетельствуют об общности некоторых антигенных детерминант у энтеротоксинов различных серотипов. По сравнению с другими белковыми токсинами стафилококковые энтеротоксины являются слабыми антигенами. [c.362]

О ранних биохимических событиях, происходящих при активации лимфоцитов, Известно очень немногое. Есть трн причины скудости наших знаний об этом. Во-первых, хотя данный антиген обычно активирует сотни различных клонов лимфоцитов, это число ничтожно по сравнению с миллионами клонов, составляющих иммунную систему в целом, н нх поэтому очень трудно выделять н изучать. Во-вторых, иммунный ответ выявляется лишь через не- [c.14]

Примечание. Метол хорон]о приспособлен для анализа сложных смесей с полис пециф и чески ми иммунными сыворотками. Он позволяет проводить антигенное сравнение компонентов в различных сме- сях с полисгсецифическими иммунными [c.102]

Рис. 4.7. Результаты, полученные методом связывания комплемента, с одной стороны, и методом двойной диффузии, с другой стороны, для сравнения антиген ности р-амилаз, экстрагируемых из непроросшего и пророс него зерна ячменя. В двух упомянутых методах использована одна н та же моноспецифическая иммунная сыворотка р-амилазы ячменя. Оба экстракта подвергли диализу и разбавили >1.0 получения одинаковой их активности.

Таблица 10. Антигенное сравнение между вирусами гриппа (H3N8) лошади 1963—1981 гг. выделения

Часть 0-антигена, обращенная к мембране, представляет собой более короткую полисахаридную цеоочку, строение которой по сравнению с внешней частью характеризуется не столь сильным разнообразием. Однако в ее состав входят два сахара, обнаруживаемые только в стенках бактерий, а именно гептоза, содержащая 7 углеродных атомов, и а-ке-тосахарная кислота кетодезоксиоктонат, содержая 8 углеродных атомов. Структурные формулы этих сахаров приведены на рис. 5-10, а их расположение в липополисахаридах сальмонелл — на рис. 5-11. На последнем рисунке показано также, каким образом 0-антиген соединяется с повторяющейся единицей, состоящей из двух молекул М-аце-тилглюкозамина, связанных между собой р-1,6-связью. Эти дисахаридные фрагменты соединены друг с другом при помощи пирофосфатных [c.391]

Б случае иммуноэлектрофореза [49 — 51] принцип электрофореза сочетается с биоспецифической аффинностью белка (рис. 3-5). Белки-антигены сначала разделяются гель-электрофоретически. При встрече с диффундированными внутрь геля антителами происходит образование комплексов антиген — антитело, наблюдаемых в виде серповидных полос преципитации. Иммуноэлектрофорез имеет особое значение в медицинской диагностике (разделение и идентификация сывороточных белков и др.). Рис. 3-6 поясняет эффективность этого метода по сравнению с другими видами электрофореза. [c.352]

На основе этих методов иммунодиффузии или иммуноэлектрофореза разработано много различных технических приемов, описание которых дается в ряде опубликованных работ [4, 5, 6, 42, 55, 86]. Наблюдение за специфическими преципитатами, соответствующими отдельным антигенам, — то, как эти преципитаты перекрещиваются, образуют щпоры или непрерывные линии или же вызывают появление плеча, —лежит в основе сравнения структуры этих антигенов [4, 86]. [c.103]

Электрофорез и классические иммунологические реакции также используются для сравнения белковых смесей и отдельных нативных белков. Однако разрешающая способность этих методов ограничена, так как они дают либо физико-химическую, либо имму-нохимическую характеристику. В сравнении с ними метод иммунодиффузии более информативен, так как с его помощью в двух или нескольких сравниваемых белковых смесях можно обнаружить не только идентичные компоненты, но и возможные общие антигенные структуры, присутствующие в разных компонентах [И—13]. [c.19]

Реакция встречного иммуноэлектрофореза (РВИЭФ). Эта реакция основана на встречной диффузии в электрическом поле антигенов и антител и появлении внутри прозрачного геля видимого преципитата. В агаровом или агарозном геле делают лунки диаметром 2 — 3 мм, причем расстояние между лунками для сыворотки и АГ должно составлять 5 — 6 мм. Лунки располагают попарно (одна — для АГ, вторая — для сыворотки) или по три (одна — для АГ, вторая — для испытуемой сыворотки, третья — для контрольной сыворотки). Лунки для сыворотки располагают ближе к аноду, а для АГ — к катоду. Реакцию проводят с несколькими разведениями АГ, продолжительность электрофореза — 90 мин. Результаты реакции учитывают сразу же после окончания электрофореза, отмечая количество и локализацию линий преципитации при сравнении их с контрольной тест-системой. [c.69]

Рис. 17-28. Принцип метода ра-диоиммунного анализа. Немеченый антиген конкурирует с меченым антигеном за свизывание с антителами. Это снижает количество радиоактивности в преципитате антитела с антигеном, и по величине этого снижения (в сравнении с контрольным образцом) можно определить концентрацию автигена в неизвестном образце.

Радионуклиды для терапии. В последние годы в связи с ростом онкологических заболеваний активно ведутся поиск и исследование PH, которые обладали бы оптимальными для радиотерапии свойствами. Биологическое поведение PH, а именно, особенности распределения и накопления нуклидов в организме, скорость захвата и время жизни в отдельных органах, антигенные проявления, а также характеристики самих опухолевых образований (радиочувствительность размер, влияющий на проницаемость излучения близость расположения к здоровым тканям и органам степень гетерогенности поглощения радиационной дозы в зависимости от региональных изменений потока крови в опухоли) служат основой для выбора терапевтических PH. По мнению медиков радиотерапия имеет меньший риск с точки зрения возникновения вторичных нежелательных явлений, например, лейкемии, по сравнению с химиотерапией и лучевой терапией на пучках частиц. Такое заключение было сделано по результатам многолетних исследований с и Наиболее эффективной считают радиоиммунотерапию (РИТ) с мечеными моноклональными антителами (МКАТ) как дополнение к другим формам воздействия (химиотерапия, хирургическое вмешательство), особенно на начальной стадии появления опухолевых клеток. [c.350]

Установить в более короткое время присутствие и вид токсина можно при помощи агглютинационных проб, под которыми понимают наблюдаемую в пробирке реакцию (флокуляцию) между антигеном (токсином) и гомологическими антителами (вакциной). От 0,006 до 0,19 л/сг токсина ботулизма типов А, В, С и Е могут быть определены в стекле по способу Кониковой при использовании специально модифицированной для этой цели пассивной гемагглютинационной пробы Биодена Чувствительность способа в значительной мере зависит от специфичности и качества вакцин, применяемых для сенсибилизации эритроцитов. При помощи гемагглютинационной пробы обнаруживают также токсоиды, так что чувствительность в случае токсина, содержащего токсоид, более высокая по сравнению с биологической пробой. [c.140]

ИСО 7899 описывает метод выявления срептококков, шдержащих антиген группы D. Данные стрептококки можно рассматривать как индикаторы фекального загрязнения воды. ИСО 6461 описывает метод выделения спор сульфит-восстанавливающих анаэробов lostridia), широко распространенных в окружающей среде. Они находятся в фекалиях человека и животных, в сточных водах и почве. В отличие от кишечных палочек споры живут в воде в течение длительного времени, являясь более устойчивыми, по сравнению с вегетативными формами, к воздействию физических и химических агентов. Поэтому они могут [c.390]

Проведенная ранее качественная хроматография фракций показала, что полный антиген и слабо связанная фракция бреславльской палочки и варианта № 36 имеют очень близкий состав сахаров. Это привело нас к мысли, что слабо связанная фракция, возможно, является частью полного антигена, который не полностью извлекается по методу Буавена. Количественный анализ позволил проверить это предположение. Процентный состав сахаров в полисахариде приведен в таблице. Как видно из таблицы, все полисахариды, которые входят в состав комплексов бреславльской палочки, резко отличаются друг от друга составом сахаров. Если антиген содержит 28,0% галактозы, то слабо связанная фракция — 37,1%. Наибольшее содержание глюкозы (23,3%) имеет прочно связанный полисахарид. Следует отметить, что все фракции содержат быстро движущийся при хроматографии компонент, который, по литературным данным, является дидезоксигексозой — абеквозой [10]. Быстро движущийся сахар, по данным Вестфаля [И], является той частью специфического полисахарида, которая обеспечивает серологическую специфичность вида. Нам кажется, что наличие во всех трех фракциях этого сахара указывает на присутствие в них специфического полисахарида, а уменьшение его количества в двух фракциях по сравнению с полным антигеном свидетельствует, что, кроме специфического полисахарида, в этих фракциях может содержаться и другой полисахарид. [c.289]

Другие доказательства того, что антитело специфично по отношению ко всему пептиду, были получены при адсорбции антисыворотки. При этом вначале проводится реакция антисыворотки с гетерологичным гаптеном до тех пор, пока не перестает образовываться преципитат, а затем уже такая адсорбированная сыворотка используется для реакции с гомологичным гаптеном. После адсорбции антисыворотки против —ГГЛ ГГ соответствующими антигенами остаются антитела, которые реагируют с гомологичным гаптеном, но не со сходными гантенами. Исключение составляет слабая реакция с —ЛЛГ. Проведенные для сравнения опыты с разбавленной антисывороткой показали, что эти изменения в реактивности не обусловлены одним лишь уменьшением общего содержания антител. [c.56]

Было испытано шесть различных катионитов и анионитов в статических условиях. Положительный результат был получен только со смолой НО. Остальные смолы оказались непригодными одни из них вызывали осаждение анатоксина (КУ-1, КУ-9), другие не адсорбировали ни анатоксин, ни пигмент (анионит Декальсо), третьи адсорбировали преимущественно анатоксин. При использовании смолы НО (2,0 г на 10,0 мл концентрата время контакта — 15 мин.) был получен менее пигментированный (с оптической плотностью, в 3—4 раза меньшей но сравнению с исходным концентратом), лучше фильтруемый анатоксин (вЗ раза быстрее). Потери антигенной активности при этих условиях были равны 20-30%. [c.220]

По сравнению с другими антигенами фенолаза представляет то преимущество, что течение иммунизации могкет быть легко и точно прослежено в количественном отношении. Поэтому мы выбрали эту реакцию,чтобы экспериментальным путем ближе подойти к некоторым проблемам иммунитета. Как известно, фенолаза совершенно ие обладает специфичностью в обычном смысле этого слова. Совершенно независимо от своего нроисхон -дения этот фермент ускоряет окисление целого ряда различных фенолов и ароматических аминов, а также окисление иодистоводородной кислоты. [c.565]

Смотреть страницы где упоминается термин Антигены сравнение: [c.302] [c.208] [c.209] [c.559] [c.365] [c.101] [c.107] [c.109] [c.522] [c.256] [c.335] [c.217] [c.112] [c.262] [c.322] [c.15] [c.53] [c.66] [c.136] [c.343] [c.112]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология