ДСН додецилсульфат натрия определение концентрации

Определение концентрации белка в препарате СУР. 40 мкл препарата СУР растворяют, добавляя 80 мкл буфера VII, содержащего однопроцентный раствор тритон Х-100. Содержание белка измеряют по методу Лоури (с. 81) с модификацией, применяемой для определения белка в растворах тритона Х-100. В этом случае в раствор карбоната натрия, использующийся для определения, добавляют додецилсульфат натрия до конечной концентрации 0,3%. Далее определение ведется обычным способом Измеряют содержание белка в 20 мкл разведенного препарата СУР. [c.425]

Взаимодействие додецилсульфата натрия (ДСН) с положительно заряженным эфиром целлюлозы исследовали путем измерения солюбилизации красителя и вязкости. Полученные данные подтверждают выдвинутые нами ранее представления о существовании неполного первого слоя ПАВ на полимере, полного слоя (осаждения) и развивающегося второго слоя таким образом, при постоянной концентрации полимера солюбилизация протекает при очень малых количествах добавленного ДСН, падает до нуля в зоне осаждения, а при увеличении концентрации ДСН наблюдается эффективная солюбилизация, которая превышает солюбилизацию в области существования мицелл ДСН, образующихся при еще больших концентрациях ДСН. Данные по солюбилизации для систем метилцеллюлоза/ДСН позволяют отнести эти системы к третьему из рассмотренных выше типов, тогда как такой тип состояния системы оксиэтилцеллюлоза/ДСН этим методом не обнаруживается или обнаруживается недостаточно достоверно. С помощью вискозиметрии, однако, удалось получить определенные данные в пользу существования третьего типа системы для случая оксиэтилцеллюлоза/ДСН. Было также показано, что данные вискозиметрии согласуются с результатами, полученными методом солюбилизации. Добавление ДСН к катионному полимеру приводит к значительному уменьшению вязкости раствора, в особенности в области концентраций, соответствующих адсорбции на полимере двойного слоя ПАВ. Для всех систем полимер/ДСН были проведены измерения поверхностного натяжения. [c.515]

Итак, для додецилсульфата натрия в зависи.мости от выбираемого определения ККМ мы получили для а,,,, оценки 0,033 0,064 0,065 0,094. Сравнивая их со значением ос, = 0,083, заключаем, что максимум концентрации свободных поверхностноактивных ионов может располагаться как ниже, так и выше КК. А в зависимости от того, какое определение ККМ используется. Важно другое разница сс., и а,п невелика, а это значит, что указанный. максимум находится очень близко к ККМ. Дей-ств тельно, из выражения [c.115]

На рис. 1—3 изображены результаты опытов по изучению влияния тритона Х-100, трис-дезоксихолата, додецилсульфата натрия и дигитонина на Mg " -, Na -, К -АТФазную активность во фракциях микросом, миелина и синаптосом, предварительно инкубированных с различными концентрациями этих детергентов в течение 30 мин. при 4—5° С. Все исследованные ПАВ в определенных концентрациях активируют Mg -, Na" -, К " -АТФазу во всех трех фракциях. [c.119]

Электрофорез в присутствии додецилсульфата натрия (ДСН) позволяет снизить до минимума влияние зарядов белков на их подвижность, которая в этих условиях зависит только от размеров молекул. Под действием ДСН третичная и вторичная структуры белков разрушаются. Для определения молекулярной массы очищенных белков, а также мембран, рибосом и т. д. широко используется метод Вебера и Осборна [80]. ДСН высвобождает и солюбилизирует компоненты этих структур, которые невозможно растворить никаким иным способом. В этом методе используется только одна концентрация геля, и график зависимости относительной подвижности (отношение расстояния, пройденного фронтом красителя, к расстоянию, пройденному зоной белка) от логарифма молекулярной массы имеет линейный харак- [c.272]

Недавняя работа отечественных исследователей [27] показала, что вязкость адсорбционного слоя и пленки в целом резко повышается при добавлении в раствор ПАВ незначительных количеств (тысячные доли процентов) стабилизатора — жирного спирта. При этом переход от низкой вязкости к высокой имеет место при определенном мольном соотношении пенообразователя и стабилизатора пены. По-видимому, стабилизатор до достижения необходимого соотношения солюбилизируется в мицеллах ПАВ и его концентрация в адсорбционном слое недостаточна для образования высоковязких слоев. Кроме того, в смешанных вязких пленках, содержащих, например, в качестве стабилизатора лауриловый спирт, а в качестве пенообразователя додецилсульфат натрия, адсорбция ПАВ может протекать более медленно, чем из тех же растворов, но без стабилизатора. [c.54]

Пожалуй, самый существенный вывод из проведенного качественного рассмотрения—заключение об определенной свободе выбора концентрации ПААГ и, особенно, содержания в нем сшивки (С в пределах 2—5). В любом случае выбор значений Т должен быть сделан на основе ряда пробных опытов, в которых, в частности, следует варьировать pH буфера и продолжительность электрофореза (электрофорез белков в присутствии додецилсульфата натрия пока не рассматривается). [c.16]

Уравнение Гиббса часто применяют для вычисления адсорбции на межфазных поверхностях эмульсий М/В. Благодаря значительной межфазной поверхности, эмульсии являются удобными системами для определения адсорбции посредством измерения падения концентрации эмульгирующего агента. Кокбейн (1954) успешно измерил поверхностные концентрации додецилсульфата натрия на межфазной поверхности эмульсии типа М/В и показал применимость уравнения Гиббса. Трудности возникают, когда замедляется достижение постоянного значения поверхностного или межфазного натяжения, например, в случае сильно разбавленных растворов, следов высоко поверхностно-активных примесей или при наличии макромолекул. Во-первых, все методы, связанные с увеличением межфазной поверхности — например, метод счета капель или метод дю Нуи — дают завышенные результаты (Педдэй и Расселл, 1960). Во-вторых, применение равновесной формулы к системе, поверхностное натяжение которой все еще медленно уменьшается (например, протеины), является сомнительным, так как скорость понижения а может быть [c.85]

С привлечением количественной теории электростатической уС тойчивости Дерягина—Ландау—Вервея—Овербика (ДЛВО) [133, 134] Даном и Чонгом [72] была предпринята попытка выяснения механизма образования частиц при полимеризации винилацетата в водном растворе. Исследовалась полимеризация, инициированная персульфатом калия различной концентрации в отсутствие эмульгатора и в присутствии различных количеств додецилсульфата натрия. Заряд частиц рассчитывался из экспериментально определенного числа групп 564, находящихся в составе полимера, и из количества адсорбированного эмульгатора [135]. На основе указанной теории энергия отталкивания заряженных частиц Уя определялась как функция их заряда, радиуса и расстояния между ними [c.123]

Из небольшого числа работ по определению ККМ смесей ионогенных и неионогенных ПАВ можно указать исследование Иода с сотрудниками [63], которые исследовали зависимость электропроводности от концентрации растворов додецилсульфата натрия в присутствии определенных количеств полиоксиэтилендодецилового эфира, содержащих разное количество оксиэтиленовых групп (их среднее число на молекулу составляло 5, 10, 15, 20 и 25 соответственно). Некоторые из этих результатов представлены на рис, 52, [c.161]

Нильсон получил изотермы адсорбции меченного тритием додецилсульфата натрия в воде и в буферном растворе при pH 6,5, содержащем постоянный избыток нейтральной соли (0,1 моль1л), в области концентраций от О до 15 моль кг. Предельная поверхностная концентрация, соответствующая монослою с площадью 33 на молекулу, была получена, когда объемная копцентрация в буферном растворе достигла величины 2 10" моль [кг. При этом были получены некоторые данные, указывающие на то, что мицеллообразование начинается при концентрациях ниже ККМ. Поверхностный избыток додецилсульфата натрия, меченного тритием, в водном растворе был определен при постоянной объемной концентрации этого соединения (1 10 моль/л) и при различных объемных концентрациях тетрадецилсульфата натрия и деканола. Было обнаружено, что тетрадецилсульфат натрия при вытеснении меченого додецилсульфата натрия с поверхности более эффективен, чем деканол. [c.214]

В заключение приведем пример того, как метод меченых атомов помог окончательно разрешить запутанную ситуацию. Ранние данные [73] показали, что, хотя с увеличением концентрации поверхностное натяжение растворов лаурилсульфоновой кислоты вначале убывает, равновесная кривая зависимости поверхностного натяжения от концентрации проходит через минимум. Поскольку в минимуме наклон кривой равен нулю, согласно уравнению (П-85), Г2 также равен нулю. В то же время низкое поверхностное натяжение ( 30 дн/см ) в минимуме означает, что на поверхности имеется поверхностно-активное вещество. Позднее подобное парадоксальное поведение наблюдалось и для растворов лаурилсульфата натрия. В конце концов выяснилось, что это отклонение связано с присутствием некоторого количества примеси лау-рилового спирта. В изящном исследовании с использованием тритированного спирта Нильсон [74] показал, что по мере увеличения концентрации лаурилсульфоната натрия лауриловый спирт сначала концентрируется в поверхностном слое (см. в разд. П1-8 обсуждение эффекта проникания ), а затем, когда концентрация поверхностноактивного вещества становится достаточно большой, возвращается в объем раствора. Этим и объясняется появление минимума поверхностного натяжения. По-видимому, рассматриваемый эффект обусловлен солюбилизацией (см. разд. Х1-5Б) спирта агрегатами или мицеллами, образующимися при некоторой определенной концентрации детергента. Если использовать тщательно очищенный додецилсульфат натрия [75], минимум поверхностного натяжения исчезает. [c.71]

Для того чтобы эта оценка была количественной, мы использовали следующий подход, оправдавший себя в наших более ранних работах, для суждения об изменениях РНК-синте-зирующей активности зародышей в ходе развития [2, 7]. Определенное количество зародышей на интересующих нас стадиях развития инкубировали в течение некоторого, равного для каждой серии определений, промежутка времени в присутствии одинаковых концентраций С -карбоната (конкретные условия опытов см. в подписях под рисунками). После инкубации из этих иорций икры при помощи фенола в присутствии 1%-ного додецилсульфата натрия при 5—8° выделяли суммарный препарат РНК, дающий (после обрабогки ДНКазой) седиментационные профили, подобные показанному на рис. 1. Этот препарат подвергали осаждению в присутствии 1,5 М Na l на холоде, в результате чего из него были удалены гликоген, примесь ДНК и транспортные РНК. [c.176]

Изученггые надш ПАВ — тритон Х-100, трис-дезоксихолат, додецилсульфат натрия и дигитонин — в определенных концентрациях вызывают активирование Mg -, Na -, К -АТФазы. Степень активирования максимальна в микросомной фракции и миелине и минимальна в синаптосомах. Концентрация ПАВ, необходимая для максимальной активации Mg " -, Na+-, К -АТФазы, в синаптосомах ниже концентрации, обусловливающей активацию фермента в других мембранных структурах. Активирующее действие ПАВ проявляется тогда, когда они находятся в молекулярно-диснерсном состоянии. Полученные данные показывают, что существует определенная специфика внутримембранной организации Mg +-, Na+-, К+-АТФазного комплекса в различных клеточных структурах, обладающих этой активностью. [c.125]

Поверхностно-активные вещества — тритон Х-100, трис-дезоксихолат, додецилсульфат натрия и дигитонин — в определенных условиях (концентрация, время воздействия) обусловливали активирование Mg +-, Na+-, К+- АТФазы фракции микросом, миелина и синаптосом, выделенных из мозга кролика. Степень активирования ферментативной активности была значительно более выражена на микросомной фракции и миелине, чем на синаптосомах. Концентрация детергентов, необходимая для максимальной активации Mg +-, Na+-, К+-АТФазы в синаптосомах, была меньше концентрации, оСусловливаюшей активацию фермента в других мембранных структурах. Путем исследования критической концентрации мицеллообразования разных детергентов и сравнения этой величины с активирующими ферментативную систему концентрациями, сделано заключение, что активирующее действие детергентов проявляется при их молекулярно-дисперсном состоянии. Полученные данные свидетельствуют о наличии определенной специфики внутримембранной организации Na+-, [c.212]

Как правило, выделение и очистку мембранных белков проводят в присутствии детергентов. Присутствие дигитоннна или додецилсульфата натрия в небольших концентрациях не влияет на эффективность аффинной хроматографии. Однако в каждом конкретном случае необходимо учитывать влияние детергента на процесс сорбции, элюирования и особенно на метод определения биологической активности, применяемый до нанесения образца на колонку. Использование буферных растворов, не содержащих детергентов, может привести к неспецифической сорбции белка на сорбенте вследствие его агрегации, что существенно повлияет на степень очистки. [c.185]

Детальную характеристику действия препарата на синтез отдельных классов РНК получают, анализируя РНК полирибосом в градиенте плотности сахарозы. Для выделения РНК из полирибосом их суспендируют в буфере Б, к суспензии добавляют додецилсульфат натрия до 0,5% и ЭДТА до 5 мМ, после чего раствор инкубируют при 37 С в течение 1 мин. Для анализа профилей РНК используют градиент концентрации сахарозы 5— 20%, приготовленный на буфере Б. Центрифугируют в течение 15 ч при 50000 g (бакет-ротор SW 25.2 центрифуги Спинко , 20000 об/мин) при 3 С. Фракции, соответствующие пикам в градиенте, содержащие рРНК и мРНК, используют для определения удельной радиоактивности РНК после осаждения материала 10% раствором ТХУ. Для количественного осаждения к пробам перед добавлением ТХУ приливают по 3 капли 1% раствора дрожжевой РНК. Осажденный материал наносят на миллипоровые фильтры и измеряют радиоактивность. Результаты выражают в имп/мин на мг РНК и ДНК клеток. [c.292]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология