Образование производных после колонки

Образование производных после колонки [c.56]

Замечательная особенность газовой хроматографии, связанная с возможностью разделения малых количеств сложных смесей соединений, стимулировала расширение исследований по идентификации чрезвычайно малых количеств соединений, выделенных в чистом виде. Слишком часто бывает так, что после дорогостоящей обработки большого количества вещества химик получает на сложной хроматограмме лишь единственный маленький пик, соответствующий интересующему его активному компоненту, и не имеет возможности установить природу или структуру этого компонента. Однако благодаря недавним достижениям в этой области в настоящее время почти ежедневно поступают сообщения о преодолении трудностей подобного рода, а также об идентификации совершенно новых соединений. В связи с этим нельзя переоценить значение спектрометрических методов анализа (инфракрасная спектроскопия, масс-спектрометрия, спектроскопия ядерного магнитного резонанса), которые позволили значительно уменьшить необходимое для анализа количество вещества и увеличить объем получаемой информации о структурах молекул. С большим успехом применяли и методы, связанные с учетом времени удерживания, с использованием специфических детекторов, которые чувствительны к определенным элементам или группам в молекуле, с учетом физических свойств веществ (например, коэффициентов распределения), с образованием производных соединений и использованием других химических реакций, проводимых в комбинированной хроматографической системе до колонки, внутри колонки или после нее. Особенно эффективны комбинации этих методов друг с другом и использование их параллельно с другими формами хроматографии. [c.104]

Для подтверждения идентификации можно также применять метод смещения хроматографических пиков путем образования производных соединений в самой хроматографической колонке при этом сразу после ввода анализируемого вещества вводят реагент, в результате реакции которого с анализируемым соединением образуется летучее производное. Таким способом спирты превращали в триметилсилиловые эфиры [168] или ацетаты [169], алкалоиды и стероиды — в ацетаты и пропионаты [170], а нафтиламины — в ацетамиды [171]. [c.158]

Фенолы, не замещенные в орто- и пара-положениях, легко реагируют с элементарным бромом с образованием бромпроизводных. Эту способность фенолов использовали для определения эстрогенов путем обработки пробы бромом (изотоп Вг) в безводной уксусной кислоте [140]. После добавления 2,4-дибромпроизводных эстрона, а также 17р-эстрадиола и эстриола в качестве носителей производные выделяли с помощью жидкостной хроматографии в колонке и очищали до получения постоянного значения удельной радиоактивности. Чувствительность этого метода не ниже 1 нг, однако малый период полураспада изотопа Вг (35 ч) затрудняет его использование. [c.84]

Для этой цели используют производные метиловых эфиров ненасыщенных жирных кислот. К 0,5—3 мг сухих метиловых эфиров жирных кислот, помещенных в 50 мл колбы с круглым дном, добавляют 10—15 мг уксуснокислой ртути и 1 мл метанола с содержанием 5% НгО и 0,3% уксусной кислоты. Колбу закрывают, нагревают примерно до 60° на водяной бане в течение 3 минут для растворения смеси и оставляют на ночь в темном месте. Растворитель н избыток уксусной кислоты отгоняют досуха под вакуумом. Сухой остаток трижды растирают в порошок с 1—2 мл бидистиллированного бензола при 50—60° и экстракт фильтруют через стеклянную вату в колонку с 500 мг силикагеля (100—300 меш), внесенного в виде взвеси в бензоле. Насыщенные метиловые эфиры трижды элюируют бензолом, общим объемом 20 мл, после чего тонкий конец колонки смывают несколькими каплями бензола. Ртутные производные ненасыщенных метиловых эфиров элюируют 10 мл 5% СНзСООН в абсолютном этаноле. Затем добавляют 1 мл концентрированной НС1 и 5 мл воды. Через 5 минут этот раствор добавляют в воду в количестве, достаточном для образования мути при размешивании. Ненасыщенные жирные кислоты экстрагируют трижды бидистиллированным петролейным эфиром. Экстракт дважды промывают водой. Циклопропановые кислоты находятся во фракции насыщенных кислот. [c.53]

Таким образом, при образовании первичной хроматограммы концентрация подвижной жидкой фазы всюду в пределах полосы практически равна Со. После начала проявления зона, где она равна Со, все время уменьшается и в хвосте меняется от нуля до Со. В момент полного проявления концентрация сохраняется равной Со только на наружной стороне края фронта полосы. Положение конца области, имеющей концентрацию Со, можно получить, если вместо В в уравнение (10) подставить величину Ь, которая равна объему (мл) растворителя, прошедшего через колонку после начала проявления, и вместо Со подставить первую производную от Со тогда [c.35]

Полифосфаты применяются в жидких удобрениях в качестве стабилизаторов. Дилдер и сотр. [2] разработали методику их определения с помощью ионного обмена путем перевода в соответствующие производные после колонки. Полученная ими хроматограмма приведена на рис. 8.1. Послеколоночные реакции заметно усложняют процесс разделения. Полифосфать вначале гидролизовали в ортофосфорную (или полифосфорную) кислоту в 5 н. серной кислоте с последующим нагреванием смеси в трубке до 90°С. После охлаждения в поток вводили молибдат ванадия и измеряли поглощение при 420 нм. Определяемые ионы гидролизовали и охлаждали 10 мин, и еще 2 мин необходимы для образования окраски. Методика отличается специфичностью и хорошим качеством разделения, хотя послеколоночные превращения занимают довольно много времени. [c.188]

Продукты фторирования (гексафторид серы) регистрируют ЭЗД с очень низким Сд после разделения сернистых газов на насадочной колонке (рис. VII.23). Примечательно, что феноменально высокая чувствительность ЭЗД к SF позволяет исключить стадию предварительного концентрирования микропримесей сернистых газов и дает возможность определять их содержания в воздухе или газе из очень небольшой пробы, объемом всего 0,05 мл. Предел обнаружения сернистых газов по этой методике менее 2 пг, что в 100 раз меньше, чем у лучшего серийного ПФД, а градуировочный график (рис. VII.24) линеен в широком интервале содержаний одорантов. Очень надежны и результаты идентификации сернистых соединений, поскольку в методике используется комбинация РГХ (образование производных) и специфическое детектирование с помощью ЭЗД. [c.331]

Существует радиохимический метод определения соединений с гидроксильными группами, в котором не требуется ни вводить поправок на нерадиоактивные примеси, ни готовить чистое меченое производное для каждого из определяемых соединений [126, 127]. Этот метод основан на использовании п-иодбензоил- Ч-хлорида. Он имеет высокую чувствительность и поэтому в принципе применим к определению пробы любого веса. Однако в этом методе требуется, чтобы определяемые соединения этерифицировались количественно и, кроме того, чтобы образующиеся эфиры можно было выделять или разделять с помощью жидкостной хроматографии. После введения в колонку порции раствора эфира или смеси эфиров обычным образом ведут проявление подходящим растворителем. При этом от верхнего конца колонки к нижнему перемещают датчик сцинтилляционного счетчика, которым измеряют уизлуче-ние изотопа и определяют тем самым распределение радиоактивности вдоль колонки. В другую такую же колонку (колонку сравнения) вводят известное количество подходящего эфира, образованного тем же меченым реагентом, и тем же способом измеряют распределение радиоактивности вдоль нее. После этого определяют площади пиков на полученных радиохроматограммах. Содержание М (мМ) каждого соединения с гидроксильными группами в пробе вычисляют по формуле [c.80]

М. Андерс и Г. Маннерипг [33] предложили метод образования эфирных производных непосредственно в колонке. После ввода пробы в хроматографическую колонку через несколько секунд (не более 5 сек.) вводят последовательно пробу уксусного или пропионового ангидрида, который в хроматографической колонке реагирует с соединениями, содержащими группы — ОН или —КНз, =NH с образованием соответствующих производных. [c.65]

Для выделения белков и пептидов, содержащих свободные 5Н-группы, целесообразно использовать высокое сродство меркапто-соединений к ионам тяжелых металлов, главным образом ртути. В табл. 11.1 дан ряд примеров выделения как белков, так и пептидов, основанного на образовании упомянутого комплекса. На рис. 6.10 приведены результаты выделения 5Н-протеазы из неочищенного экстракта бобов, осуществленного в колонке на оксиал-килметакрилатном геле, содержащем ртутное производное мета-криланилида [57]. 5Н-протеазу с оптимумом протеолитической активности при pH 8 можно выделить из смеси протеолетических ферментов этим способом за одно хроматографическое разделение. После удаления неактивного материала гель-фильтрацией через сефадекс 0-75 сразу получается гомогенная протеаза [58]. [c.124]

После хемосорбционного улавливания формальдегида 1%-ным раствором ЫагСОз [92] его можно определять прямым методом в интервале содержаний от ppb до ppm на колонке (2 м х 3 мм) с Порапаком Т при 95°С с гелиевым ионизационным детектором. Однако чаще всего токсичные альдегиды (основным источником которых в городском воздухе являются выхлопные газы автомобилей) определяют в виде различных производных (см. главу VII). При этом образование последних может происходить непосредственно в ловущке (абсорбере или концентрационной трубке) или после извлечения альдегидов из ловущки, например, по реакции с бисульфитом натрия, которая приводит к образованию замещенного сульфоната натрия [93] [c.121]

Ненасыщенность углеводородов, высших жирных спиртов и метиловых сложных эфиров жирных кислот можно определить двумя методами, используя метод ГЖХ. Двойные связи бронируют, понижая тем самым летучесть соединений, благодаря чему они не элюир уются с хроматографической колонки. Ненасыщенные соединения можно также гидрировать до образования, насыщенных производных с тем же числом атомов углерода, сдвигая удерживаемые объемы до величин, соответствующих насыщенным соединениям. Хроматографически разделяя смеси до и после бромирования или гидрирования, можно идентифицировать и количественно определят ненасыщенные соединения. [c.455]