Авторадиография

ИЛИ биохимической реакции выпадает в осадок в виде тяжелого металла, такого, как соли свинца, урана или висмута. Большинство окрашивающих и гистохимических методов, которые используются в РЭМ, является модификацией методов, используемых в оптической и просвечивающей электронной микроскопии, и читателю рекомендуется просмотреть эти источники для выявления методик, которые можно приспособить для растровой электронной микроскопии. Метод авторадиографии может быть использован для локализации областей со специфической физиологической активностью, в то время как проявленные зерна серебра можно отобразить в режиме отраженных электронов. В работе [357] ири изучении клеточного цикла культуры тканей с успехом использовались в совокупности оптический микроскоп, метод авторадиографии и РЭМ. Обзор этих методов представлен в работе [358]. [c.244]

Существуют и другие способы измерения интенсивности радиоактивного излучения содержимого хроматографической колонки по слоям, не связанные с извлечением столбика сорбента и его разрушением. При получении осадочных радиохроматограмм на бумаге приемом анализа может служить авторадиография (фотографирование, как описано на стр. 181). [c.207]

В последние годы в исследованиях, направленных на установление путей всасывания вещества через кожу, широко используются меченые соединения и, в частности, метод авторадиографии. Однако и в настоящее время еще нет достаточно убедительных данных для окончательного решения этого вопроса. [c.21]

Авторадиографию часто рассматривают как вариант Р. на том основании, что при ее проведении также используют фотографич. метод регистрации ионизирующего излучения. Однако этот метод можно считать самостоят. методом исследования твердых тел. При проведении авторадиографии регистрируют ионизирующие излучения радиоактивных атомов, содержащихся в объеме или поверхностном слое тела. Картина распределения оптич. плотности (авторадиограмма) соответствует распределению радиоактивных атомов в исследуемом объеме. При проведении авторадиографии радиоактивное в-во обычно вводят в изучаемый образец при его приготовлении в нек-рых случаях атомы радионуклидов можно вводить ионной бомбардировкой или др. приемами. Применяют любые радионуклиды, испускающие как а- и -частицы, так и у-кванты, однако наилучшие результаты получают при использовании нуклидов, испускающих при распаде -частицы малой энергии ( Н, С, 35g J, др j Контакт образца с фотослоем осуществляют в условиях, когда не происходит их хим. взаимодействие. Оптич. плотность проявленного фотоматериала измеряют [c.167]

Обычно разрешающая способность авторадиографии составляет 10-100 мкм. Применение жидкой ядерной фотоэмульсии позволяет понизить разрешающую способность до 1 мкм. Такой эмульсией покрывают исследуемый объект (при этом обеспечивается наилучший контакт эмульсии с пов-стью), фотоматериал экспонируют, а затем пленку фотоэмульсии отделяют и исследуют. При использовании электронного микроскопа разрешающая способность метода достигает 0,1 мкм. [c.167]

При любом детальном исследовании биологического материала следует сравнивать информацию, получаемую с помощью широкого набора приборов. Во многих случаях полезно начинать исследования с РЭМ, поскольку его диап азон увеличений включает в себя область увеличений от получаемых с хорошей лупой до получаемых в просвечивающем электронном микроскопе высокого разрешения. В РЭМ также мы получаем привычное нам изображение. Сравнительные исследования относительно просто выполнять, подготавливая образец либо для просвечивающего электронного микроскопа, либо для оптического микроскопа после изучения образца в РЭМ. Пример сравнительного исследования приведен на рис. 11.3, а дальнейшие подробности можно найти в статьях [316—319] и в книге [320]. В работе [321] подробно описываются методы, которые могут быть использованы для сравнения всех трех типов изображений с гистохимическими данными, а в статье [322] дается подробное описание сравнительных исследований в световом микроскопе методом авторадиографии и в РЭМ. [c.220]

Авторадиограммы можно также рассчитать количественно, используя фотометрическое определение почернения и сравнивая его со стандартами [671. Авторадиография предназначена главным образом для простого обнаружения радиоактивных веществ на хроматограммах и совместно с радиометрическими методами служит для установления однородности и идентичности изучаемых веществ. [c.674]

Для обнаружения мест нахождения радиоактивных компонентов на хроматограммах (электрофореграммах) используют авторадиографию, радиометрию (в том числе сканирование) или проводят хроматографирование (электрофорез) со свидетелем — неактивным аналогом определяемого вещества. Измерения скоростей счета должны проводиться на радиометрической установке с соответствующим детектором, выбор которого зависит от типа и энергии излучения радионуклида. При работе с препаратами, испускающими достаточно интенсивное гамма-излучение, измерения следует проводить по гамма-излучению. В этом случае удобен, например, сцинтилляционный гамма-счетчик с колодцем. Измеряют скорости счета от участков хроматограммы (электрофореграммы), содержащих основное вещество или определенную радиохимическую примесь, относят их к скорости счета от всей хроматограммы (электрофореграммы) и результат выражают в процентах. Радиохимическая чистота РФП может изменяться со временем под действием различных факторов (радиационное разложение, окисление, воздействие света, температуры и т.д.). Значения радиохимической чистоты, приводимые в фармакопейных статьях на конкретные препараты, указывают на конец срока годности данного РФП. [c.72]

Рис. 46. Авторадиография поперечного среза годичной еловой ветки после введения радиоактивного с1-кониферина (К. Фрейденберг)

Авторадиография поперечных срезов дерева, сделанных при помощи микротома на определенном расстоянии от разреза, показала чрезвычайно интенсивное почернение пленки над средней пластинкой. Это показывало, что конифериловый спирт преимущественно сосредоточивался в данном месте. [c.813]

Авторадиография поперечного среза древесины дала картину, идентичную данным, полученным на дереве, обработанном с1-ко- [c.814]

Для определения минеральных соединений используют классические лабораторные методы, применяемые в минералогии микроскопический метод, дифракцию рентгеновских лучей, радиографию, дифференциальный термический анализ. Особый интерес для изучения их распределения представляет микрозонд Кастена и авторадиография после предварительной активации [12]. Необходимым обычно является предварительное обогащение. Для этого используются различные методы, наиболее известные из которых флотация, отсадка, электростатическое разделение, экстрагирование растворителями и в особенности медленное сжигание ири низкой температуре. [c.41]

На реакционную способность графита существенное влияние оказывает наличие примесей, которые могут служить катализаторами процесса окисления. Особенно сильное влияние оказывают примеси некоторых металлов, например, железо, медь, ванадий, натрий [18, с. 134—137]. Окисление в присутствии примесей имеет локальный характер, а с уменьшением содержания примесей становится более равномерным. Удаление примесей из графита, например нагревом в вакууме при 3000 °С сужает разброс значений скоростей реакции окисления графита различных марок, плотность которых находилась в интервале 1,37-1,80 г/см . Области, в крторых проходит усиленное окисление, определены методами авторадиографии и рентгенографии как области с повышенным содержанием металлических примесей. Повышение скорости окисления может происходить при содержании чрезвычайно малых количеств примесей [18, с. 134-137]. [c.123]

Таким образом, результаты проведенных нами исследований подтверждают данные литературы о локализации истинной и ложной холинэстераз в коже. Кроме того, установлено, что воздействие некоторых ФОИ вызывает изменение ферментов. Тот факт, что почти одновременно и с одинаковой интенсивностью инактивируется холинэстераза, локализующаяся в нижних слоях эпидермиса и вокруг волосяных фолликулов, может в известной мере подтвердить предположение о том, что всасывание ФОС через кожу происходит как трансфолликулярным, так и трансэпидермальным путем. Т. Fredriksson (1961) для выявления путей всасывания ФОС через кожу использовал тиофос, меченный по Р Был применен метод послойной авторадиографии. Автор установил, что тиофос проникает в волосяные фолликулы и сальные железы. Отмечено также увеличение его активности непосредственно под слоями эпидермиса. На этом основании им высказано предположение о том, что тиофос может всасываться через эпидермис. Хотя эти данные могут быть использованы лишь с учетом возможных артефактов (диффузия радиоактивного материала и пр.), все же они являются весьма ценными при решении вопроса о путях всасывания ФОИ через кожу. [c.143]

Таким образом, трансфолликулярное и трансэпидермальное всасывание ФОС через кожу в настоящее время выявлено тремя методами морфологическим, гистохимическим и авторадиографией. [c.143]

АВТОРАДИОГРАФИЯ, метод изучения распределения радиоакт. компонентов по пов-сти и (или) объему тв. объектов, основанный на регистрации ядерных излучений с помощью фотоэмульсии. Радиоакт. атомы вводят в исследуемый объект при его хим. синтезе илн др. методе приготовления. Для Л. пригодны многие а- и (3-радИонуклиды наилучшие результаты дают нуклиды, испускающие при распаде Р-частнцы небольшой энергии (тритий, " С, и др.). Регистриро- [c.9]

После окончания разделения в первом направлении пластинку высушивали, вымачивали в метаноле, снова подсушивали и начинали элюцию во втором направлении (тоже с удлинительным фитилем). Элюцию начинали водой до старта, а затем 0,3 М водным раствором сульфата аммония вплоть до продвижения фронта элюента на 4—5 см по фитилю. Пятна локализовали авторадиографией, затем вырезали и просчитывали радиоактивность методом регистрации черепковского излучения [Остерман, 1983]. На рис. 166 представлено окончательное расположение хроматографических пятен. Несколько неожиданным является сильно сдвинутое вправо положение пятна рТр. По-видимому, 0,3 М сульфат аммония легко вытесняет все нуклеозиддифосфаты из ионной связи с PEI, и решающую роль в определении скорости миграции начинает играть сорбция оснований на целлюлозе. Метильная группа тимина препятствует сорбции. В пользу такой трактовки говорит и соотношение положений пятен рСр и рт Ср. рТр обгоняет рт Ср вероятно, по той причине, что рТр уже движется вслед за фронтом элюции во втором направлении, когда этот фронт еще только достигает пятна рт Ср и начинается растворение находящегося в нем материала. [c.492]

Отбор бактерий-трансформантов можно продемонстрировать, используя плазмиду pBR322 (см. рис. 5.10), содержащую два гена устойчивости к тетрациклину и ампициллину. Для отбора этих бактерий в агар добавляют антибиотик — или ампициллин, или тетрациклин в зависимости от того, какой из генов (Ыа или tet) остался интактным после введения чужеродной ДНК. На такой среде клоны образуют клетки только с плазмидами. Для отделения рекомбинантных бактерий часть материала каждого клона переносят на другую чашку Петри, содержащую антибиотик, ген устойчивости к которому был разрушен при создании рекомбинантов. На этих чашках Петри дают клоны только те бактерии, которые содержат исходную плазмиду, а рекомбинантные бактерии их не образуют. Такая тщательная селекция клонов по устойчивости к антибиотику позволяет идентифицировать рекомбинантные клоны. При поиске рекомбинантных клонов успешно применяют метод авторадиографии. [c.121]

Такую смесь меченых фрагментов олигонуклеотида снова подвергают двумерному фракционированию электрофорезом на ацетилцеллюлозе и гомохроматографией на ДЭАЭ-целлюлозе, как описано выше, а затем проводят авторадиографию. Однако теперь вместо разбросанных по всей иластпнке иятен фингерприита получается зигзагообразная цепочка следующих друг за другом пятен (рис. 173), анализ расположения которых дает информацию о последовательности нуклеотпдов в олигонуклеотиде. [c.504]

Затем одну из пластин формы снимали и на поверхность геля клали лист РЕГцеллюлозы (20 X 40 см), заворачивали гель и пластину в целлофан, прижимали стеклом, клали груз и таким образом, за счет диффузии в течение 15—24 ч переводили картины полос на PEI-целлюлозу. С помощью авторадиографии положение полос на ней можно было локализовать и отметить. Целый трек с лестницей полос вырезали, вымачивали в соответствующем буфере и весь материал прямо на пластинке переваривали 1 НКазой Т2, нанося раствор фермента вдоль всего трека и инкубируя под парафильмом, как описано Bbiuje для пятен. [c.508]

Нейтронные пучки практически используются при синтезе радионуклидов, получении трансурановых элементов, в хим. анализе (см. Нейтронно-абсорбционный ана.гиз, Активационный анализ), горном деле (нейтронный каротаж), ней тронной авторадиографии (см. Радиография). В земной атмосфере свободные Н. непрерывно образуются в результате взаимод. космич. излучения с ядрами атомов, входящих в состав воздуха. Эти Н. приводят к непрерывному образованию в атмосфере радиоактивного С при ядерной р-ции Ы(п, р) С, на чем основаи радиоуглеродный метод геохронологии. Об имеющих практич. значение источниках Н. см. в ст. Нейтронные источники. [c.205]

С помощью авторадиографии можно идентифицировать участки пов-сти образца, способные к повыш. изотопному обмену с окружающей средой, изучать поведение легирующей добавки при синтезе монокристаллов или при получении сплавов, выявить характер покрытия на волокнах, получать информацию о локализации лек. препаратов в органах и т.д. Напр., в в-во, к-рое наносят на волокно в качестве покрьггия, предварительно вводят радионуклид. После нанесения покрытия авторадиограмма такого волокна позволяет определить, является ли покрытие сплошным, каковы его толщина и форма. На основании этих данных можно оценить эффективность прил еняемой технологии нанесения покрьггия. [c.167]

Авторадиохроматография основана на действии ионизирующего излучения на фотографический материал. Авторадиохроматографию осуществляют, возможно плотнее прижимая радиохроматограмму к чувствительной рентгеновской пленке при помощи фотографической рамки или мешочка с песком. Хороший контакт с пленкой особенно важен в случае мягких бета-источников (например, 5 ), так как воздушная прослойка между хроматограммой и пленкой заметно ослабила бы их излучение, что привело бы к искажению результатов. Для трития обычный вариант авторадиохроматографии неприменим, так как длина пробега его бета-частице максимальной энергией 14 Кэв равна только 4 мк. Хорошие результаты можно получить при применении сцинтилляционной авторадиографии [831. Хроматограмму после проявления и высушивания прикрепляют, например, к использованной рентгеновской пленке, помещают в плоский сосуд с хорошо герметизирующей крышкой, заливают сцинтилляционной жидкостью, например раствором /г-терфенила в толуоле, не содержащем серы (3 г/л), и покрывают медицинской рентгеновской пленкой при этом обращают внимание на то, чтобы между пленкой и бумагой не образовалось пузырей. Энергия бета-излучения радиохроматограммы превращается сцинтиллятором в световую энергию, которая вызывает почернение фотопленки. [c.673]

Предложено проводить нейтронно-активационный анализ элементов после их разделения методом бумажной хроматографии [657]. Полученные хроматограммы облучают в течение 10 мин потоком нейтронов 10 н/см . с, выдерживают 5 мин после облучения и фиксируют распределение радиоактивности вдоль хроматограммы с помо-лцью -спектрометрии, авторадиографии или путем сканирования. Эта [c.149]

В высокоэластических полимерах аморфную часть следует рассматривать как область наиболее дефектных мест кристаллической решетки полимера. При наличии сферолитной структуры следует считать, что аморфная часть полимера сосредоточе-йа по границам сферолитов и, следовательно, диффузия в таких полимерах, так же как и в металлах с мелкокристаллической структурой, должна протекать в основном по межсферолитным пространствам, что и было показано в ряде работ методом авторадиографии 2з. [c.157]

Эта особенность привела к очень хорошему преимуществу в гомохроматографии. Это метод, в котором радиоактивные олнго-нуклеотндные фрагменты обнаруживают на хроматограмме с помощью раствора, содержащего нерадиоактивную смесь фрагментов всех размеров, получаемую РНазным расщеплением неочищенной РНК. На пластинках для ТСХ с ДЕАЕ- или полиэтиленимин-целлюлозой меньшие по размеру полианионы располагаются вдоль больших, когда фаза катионной подложки насыщена фрагментами нуклеотидов. Таким образом, радиоактивный образец разделяется на серию фронтальных полос, которые четко детектируются авторадиографией 131]. [c.194]

ДНФ-группу вытеснила Л -(1-диметиламинонафтил-5-сульфо-нильная) или дансильная группа, которую можно вводить при реакции пептида или белка с 1-диметиламинонафтил-5-сульфонил-хлоридом (8) при pH 8 схема (13) . Дансильные производные аминокислот и пептидов сильно флуоресцируют их можно отделить и идентифицировать с помощью тонкослойной хроматографии, например на е-поликапролактаме [16]. Обычная чувствительность (примерно 100 пикомоль) может быть повышена до 25 фемтомоль при использовании [ Н]-меченного дансилхлорида с последующей авторадиографией [17]. [c.266]

Авторадиография поперечного среза однолетнего ростка дерева ели, представленная на рис. 46, показала черную зону шириной 6—8 клеток, содержавшую некоторое количество радиоактивного вещества. Над этой зоной располагалось кольцо шириной примерно 10 клеток, образованное позднее и нерадиоактивное. Радиоактивные клетки были видимы также в коре. Радиоактивный материал был почни весь в лигнинной фракции. Алкоголиз этой фракции дал радиоактивные кетоны Гибберта, что согласуется с результатами, полученными Кратцлем [132, 133]. [c.813]

После того как путем авторадиографии было установлено, в каких частях ветвей содержалась наибольшая радиоактивность, эти части отделяли от остальных и размалывали на молотковой мельннце до размера частиц, проходящих через сито (60 мешей). [c.821]

Молекулярная биология. Структура и биосинтез нуклеиновых кислот (1990) -- [ c.17 , c.215 ]

Молекулярная биология (1990) -- [ c.17 , c.215 ]

Методы и средства неразрушающего контроля качества (1988) -- [ c.339 ]

Большой энциклопедический словарь Химия изд.2 (1998) -- [ c.9 ]

Практическое руководство по жидкостной хроматографии (1974) -- [ c.176 ]

Инструментальные методы химического анализа (1989) -- [ c.504 ]

Химия несовершенных ионных кристаллов (1975) -- [ c.0 ]

Хроматография на бумаге (1962) -- [ c.197 , c.198 , c.452 ]

Методы культуры клеток для биохимиков (1983) -- [ c.0 ]

Практическая химия белка (1989) -- [ c.226 , c.235 , c.308 , c.313 ]

Искусственные генетические системы Т.1 (2004) -- [ c.42 , c.163 ]

Структура и функции мембран (1988) -- [ c.127 ]

Основы генетической инженерии (2002) -- [ c.30 , c.241 , c.280 , c.281 , c.282 , c.283 , c.284 , c.284 , c.285 , c.285 , c.285 , c.286 , c.287 , c.288 , c.289 , c.290 , c.291 , c.291 , c.291 , c.292 , c.293 , c.294 , c.295 , c.296 , c.297 , c.298 , c.299 , c.300 , c.301 , c.302 , c.303 , c.304 , c.305 , c.305 , c.306 , c.307 , c.308 , c.309 , c.310 , c.311 , c.312 , c.313 , c.314 , c.315 , c.316 , c.317 , c.318 , c.319 , c.320 , c.321 ]

Биология с общей генетикой (2006) -- [ c.21 , c.68 ]

Физическая Биохимия (1980) -- [ c.0 ]

Справочник по обогащению руд Издание 2 (1983) -- [ c.290 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология