Размывание внеколоночное

Однако наряду с размыванием полосы хроматографической зоны в процессе разделения в колонке может происходить также и размывание ее в устройстве для ввода пробы, в соединительных капиллярах инжектор — колонка и колонка — детектор, в ячейке детектора и в некоторых вспомогательных устройствах (микрофильтры для улавливания механических частиц из пробы, устанавливаемые после инжектора, пред-колонки, реакторы-змеевики и др.). Размывание при этом тем больше, чем больше внеколоночный объем по сравнению с удерживаемым объемом пика. Имеет также значение и то, в каком месте находится мертвый объем чем уже хроматографическая зона, тем большее размывание даст мертвый объем. Поэтому особое внимание следует уделять конструированию той части хроматографа, где хроматографическая зона наиболее узкая (инжектор и устройства от инжектора до колонки) — здесь внеколоночное размывание наиболее опасно и сказывается наиболее сильно. Хотя считается, что в хорошо сконструированных хроматографах источники дополнительного внеколоночного размывания должны быть сведены до минимума, тем не менее каждый новый прибор, каждая переделка хроматографа должны обязательно заканчиваться тестированием на колонке и сравнением полученной хроматограммы с паспортной. Если наблюдается искажение пика, резкое снижение эффективности, следует тщательно проинспектировать вновь введенные в систему капилляры и другие устройства. [c.12]

В процессе эксклюзионного разделения полимера за счет фракционирования молекул по размеру образуется зона определенной ширины. Размывание вещества в колонке и в других элементах жидкостного тракта хроматографа (внеколоночное размывание) приводит к дополнительному расширению этой зоны. Зарегистрированная хроматограмма полимера представляет собой кривую, в которой суммированы указанные эффекты. Общую дисперсию хроматограммы можно представить выражением [c.52]

В критической области, где соединительные линии вносят вклад во внеколоночное размывание зоны, для всех соединений используют отрезки капилляра с внутренним диаметром <0,25 мм. [c.181]

Внеколоночное размывание хроматографической полосы на участке от колонки до кюветы детектора сильно снижает эффективность разделения. В данной линии совершенно недопустимы плохо промываемые объемы (например, недостаточно чисто обработанные торцы капилляра), а ее длина должна быть минимальной. [c.186]

Экспериментально эффективность хроматографических колонок должна определяться в оптимальных условиях расход элюента для колонок длиной 60 - 120 мм и внутренним диаметром 2 мм лежит в диапазоне от 70 до 150 мкл/мин. Обычный расход элюента при использовании хроматографов серии "Милихром" - 100-150 мкл/мин. Коэффициент емкости хроматографического пика должен быть в диапазоне 7-9 должно отсутствовать уширение хроматографических пиков, обусловленное межмолекулярными взаимодействиями внеколоночное уширение должно быть сведено к минимуму элюент должен быть составлен таким образом, чтобы не происходило адсорбционное модифицирование адсорбента. Максимальная эффективность достигается при температуре окружающей среды 18 -22°С, при минимальном объеме и количестве вещества в пробе. Несоблюдение этих правил может привести к уменьшению эффективности хроматографической колонки в 2-3 раза ( ). Реальная эффективность хроматографической колонки сильно зависит от размывания пробы во внеколоночных элементах конструкции хроматографа в узле ввода пробы (инжектор), в соединении между инжектором и хроматографической колонкой, в соединении между колонкой и кюветой детектора, в самой кювете детектора. Например, автоматизация узла ввода пробы в хроматографах "Милихром-2" и "Милихром-4" привела к потере в среднем около 15% эффективности колонки по сравнению с обычным "Милихромом". Конечно, [c.21]

Общая конструктивная схема колонки включает в себя корпус, фильтры и наконечники (рис. 5.11). Корпус представляет собой цилиндрическую трубку из нержавеющей стали, стекла или полимерных материалов он служит емкостью для слоя сорбента. Верхний и нижний концы корпуса закрывают фильтры. Чаще всего это диски из пористой нержавеющей стали, по диаметру соответствующие наружному диаметру колонки. Диаметр пор фильтров 0,5—2 мкм, их назначение — удерживать слой сорбента в колонке. Кроме того, фильтр на входе в колонку задерживает механические примеси из подвижной фазы и образцов. Наконечники герметизируют всю колонку и служат для подключения капиллярных трубок, соединяющих колонку с дозатором и детектором. Конструкция наконечников должна быть такой, чтобы свести к минимуму внеколоночное размывание пробы и разделенных компонентов. Наконечник хорошей конструкции так формирует поток на входе в колонку, что поперечное размывание и отрицательное влияние стеночного эффекта сводятся к минимуму. Фактически в колонке работает при этом только центральная часть сорбента. Такие колонки характеризуются высокой эффективностью. Однако при указанной конструкции колонки сорбент будет легко перегружаться по мере увеличения массы вводимой пробы, и поэтому наконечники препаративных колонок призваны решать прямо противоположную задачу — распределять пробу по возможно большей части поперечного сечения. В настоящее время чаще всего применяются колонки трех типов цельнометаллические, разборные со сменными разделительными патронами полимерные для работы в режиме радиального сжатия. [c.197]

Для достижения высокой эффективности микроколонок Очень важно, чтобы мертвые объемы в хроматографической системе были сведены к минимуму При соблюдении этого условия внеколоночное размывание пика не ухудшит разделения, достигнутого в колонке Недавно появились в продаже также насосы и системы ввода пробы для микроколонок (разд 3 2) [c.22]

Внеколоночное размывание пика [c.23]

КОЛОНОЧНОГО в табл 2-3 приведены объемы колоночных и внеколоночных пиков для колонок различных типов На рис 2-4 показана взаимосвязь между объемами колоночных и внеколоночных пиков для различных величин внеколоночного размывания [c.24]

Соединительная трубка между колонкой и дозатором также играет важную роль Чтобы не увеличивать внеколоночное размывание пиков, следует пользоваться трубками внутренним диаметром не более 50 - 70 мкм Упомянутые выше дозаторы рассчитаны на подключение к хроматографической системе с помощью трубок наружным диаметром 1/16 дюйма (1,6 мм) Трубки столь малого внутреннего диаметра промышленностью не выпускаются Однако для соединения колонки с дозатором пригодны трубки из нержавеющей стали наружным диаметром 1/16 дюйма (1,6 мм) с вкладышем из кварцевого стекла или нержавеющей стали, имеющим достаточно узкий внутренний канал Правда, изготовить их довольно трудно [c.46]

В эксклюзионной хроматографии до недавнего времени широко использовали колонки, набитые сорбентами с размером зерна 40-100 мкм (например, колонки со стирогелями зернением 37-75 мкм). Внутриколоночное размывание в этих колонках было достаточно большим, и во многих случаях для получения корректных результатов анализа требовалось вводить поправку на приборное уширение. Современные колонки, заполненные сорбентами с размером зерна 5-10 мкм, имеют значительно более высокую эффективность (до 50000 - 60000 т.т./м), значение о У них мало, а приборное уширение в значительной степени определяется внеколоночным размыванием. Поэтому при работе с такими колонками нужно обращать особое внимание на минимизацию мертвых объемов во всех внеколоночных коммуникациях. [c.52]

Прямой ввод пробы. — это метод, основанный на вводе мгновенно испаренной пробы в колонку. Нагрев узла ввода пробы проводят независимо от нагрева термостата. Испарение пробы происходит на входе в устройство ввода — в стеклянном вкладыше (внеколоночное испарение) или в начальной части колонки (внутриколопочное испарение). Размывание пика происходит за счет размывания во времени и пространстве. На рис. 3-38 представлены различные устройства для прямого ввода пробы в колонку. [c.58]

Теория Jq)oмaтoгpaфии должна не только объяснить, но и количественно оценить статистически обусловленное размывание хроматографической полосы. Размывание, приводящее к перекрыванию хроматографических пиков, происходит как в колонке, так и вне ее (внеколоночное размывание). Причины размывания соединений в хроматографической колонке подробно рассмотрены при изложении теории теоретических тарелок (см. разд. 8.4.1) и кинетической теории (см. разд. 8.4.2). Внеколоночное размывание происходит в устройстве ввода пробы, коммуникациях от устройства ввода пробы до колонки и от колонки до детектора, а также в самом детекторе. Теория хроматографии позволяет оценить вклад каждого из этих факторов в размывание полосы, т. е. ширину пика, =. Стандартное отклонение пика (а) ипи дисперсия (а ) являются результирующими всех случайных процессов на молекулярном уровне, вызывающих размывание. Дпя распределения Гаусса эффективность колонки (Я, М) связана с дисперсией. ВЭТТ может быть определена как дисперсия на единицу длины колонки ( , мм) [c.280]

Относительный вклад каждого из отдельных факторов размывания пика зависит от природы хроматографической системы сравните уравнения Ван-Деемтера для газовой и жидкостной хроматографии. На практике следует учитывать, что в лучших конструкциях фоматографов внеколоночное размывание сводится к минимуму, например за счет уменьшения мертвого объема системы, а условия хроматографирования выб(фают так, чтобы Я была связана, главным образом, с одним или двумя основными факторами размывания полосы, в последнем случае они должны вносить примерно равный вклад. [c.281]

В жидкостных хроматофафах часто используют автоматические коллекторы фракций, что позволяет анализировать количественно собранные вещества другими химическими или физическими методами. Все объемы соединительных трубок, колонок, ячейки детектора, ввода пробы должны быть как можно меньшими, чтобы избежать внеколоночного размывания дюматофафической полосы. [c.329]

ВЭЖХ. Важным преимуществом КЭ перед ВЭЖХ (помимо плоского профиля ЭОП) является отсутствие соединительных гидравлических линий между узлами инжектор -капилляр и капилляр - детектор, которые приводят к уширению зоны вещества за счет внеколоночного размывания. [c.351]

Вариация (квадрат стандартного отклонения) наблюдаемого пика У р(набл) может быть выражена суммой вариаций пика, связанных с внутриколоночными эффектами (ст р), и вариаций, связанных с внеколоночным размыванием пика (С7 > [П], т е [c.23]

Рис 2-4 Взаимосвязь между объемами колоночного и внеколоночного пиков для различных степеней внеколоночного размывания пнков [c.24]

Если принять, что допустимое внеколоночное размывание пнка составляет 5%, то, согласно расчету (путем подстановки уравнения (17) в уравнение (И)), допустимый вводимый объем пробы может достигать примерно одной трети (28%) объема колоночного пнка Однако осуществить ввод пробы в виде идеального поршня с помощью реального узла ввода невозможно Следовательно, реальный вводимый объем должен быть меньше расчетного, причем величина его зависит от способа ввода пробы, т е от исходной кривой ее распределения [И, 14, 28-30] [c.28]

Ячейка детектора не может работать как идеальная камера смешения В действительности происходит лишь частичное перемешивание раствора, вследствие чего реальный вклад ячейки детектора обычно представляет собой нечто среднее между этими двумя предельными ситуаидиями [13] С увеличением скорости потока вклад детектора возрастает и приближается к верхнему пределу (У ) Эмпирически установлено, что, если объем интересующего хроматографиста пика превосходит объем ячейки детектора в 10 и более раз, вкладом детектора во внеколоночное размывание пика можно пренебречь [14] В этом случае даже при полном перемешивании потока в ячейке детектора объем пика возрастает менее чем на 8% [c.34]

Если вы собираетесь включить в свою микро- или полу-микросистему ВЭЖХ имеющиеся в продаже стандартные узлы, то обратите особое внимание на способ их присоединения, чтобы избежать внеколоночного размывания пиков [c.42]

Соединительные трубки и фитинги системы должны бытъ проектированы специально для высокоскоростной ВЭЖХ с чтобы уменьо1ить внеколоночное размывание пнков На следует обратить особое внимание, поскольку обычно на колонки составляет всего 3 - 10 см [б] [c.51]

В настоящее время получили распространение колонки внутренним диаметром 4,6 мм и длиной 25 - 30 мм Они также относятся к полумикроколонкам Смысл этой классификации состоит в том, что для всех полумикроколонок объем неудерживаемого пика равен примерно 10 мкл При одном и том же объеме пика могут применяться любые системы ВЭЖХ, дающие одинаковое инструментальное размывание полосы (суммарный объем внеколоночного пика) При этом размывание пика не зависит от размеров колонки [c.78]

При послеколоночной дериватизации выходящий из колонки элюат, содержащий разделенные компоненты пробы, смешивается с необходимым реагентом и вводится в реактор, в котором и происходит образование необходимых производных Продукты этой реакции далее детектируются с помощью фотометрического, флуориметрического или электрохимического детектора Для проведения реакции применяются реакторы трех типов в виде полой трубки, в виде трубки с насадкой и в виде трубки с расчлененным потоком Любой из этих реакторов неизбежно приводит к внеколоночному размыванию пиков, поскольку перемещение определяемых компонентов в реакторе происходит достаточно медленно [c.145]

Чтобы осуществить высокоскоростное и высокоэффективное разделение методом ЖХ, следует учесть все факторы, влиякь щие на продолжительность и эффективность разделения В число таковых входят размеры колонки (ее длина и внутренний диаметр), объемная скорость подвижной фазы, постоянная времени детектора и внеколоночное размывание хроматографических полос Продолжительность анализа зависит прежде всего от размеров колонки и объемной скорости подвижной фазы Взаимосвязь между этими факторами иллюстрируется рис 7-56 Как следует из этого рисунка, чтобы время анализа, проводимого методом обычной ВЭЖХ, снизилось в 10 раз, размеры колонки и объемная скорость должны соответствовать заштрихованной области При этом необходимо учитывать пе- [c.214]

Из системы для высокоскоростной ВЭЖХ необходимо также устранить все источники внеколоночного размывания пиков, поскольку дисперсии полос разделенных компонентов очень малы вследствие малой длины колонки и малых размеров частиц насадки Рис 7-59 иллюстрирует влияние внеколо- [c.215]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология