Колонки разрешение

Сочетание масс-спектрометрии с газожидкостной хроматографией дает превосходный метод анализа смесей. В этом случае требуются очень небольшие количества вещества. Масс-спектрометр используется в качестве детектора в газожидкостной хроматографии, и многочисленные масс-спектры регистрируются по мере поступления компонентов из колонки. Частично разрешенные пики в хроматограмме легко идентифицируют по изменению во времени масс-спектра вещества, соответствующего этому пику. [c.323]

Для разделения ПАУ применяют капиллярные колонки с неполярными неподвижными фазами типа OV-7, которые обеспечивают хорошее разрешение большинства компонентов. Хуже всего делятся следующие пары бенз(а)антрацен и хризен, бенз(Ь)флуорантен и бенз(к)флуорантен, дибенз(а,Ь)антрацен и индено(1,2,3-с 1)пирен. Более полярные фазы, например 0V-17, дают лучшее разрешение для двух первых пар. Следует [c.259]

Разделение высокого разрешения, достигаемое применением колонок значительной длины, можно заменить с тем же эффектом многократным повторением процесса — рециркуляцией. [c.233]

При выходе из колонки нескольких веществ необходимо оценивать степень их разделения. С этой целью обычно используется величина, называемая разрешением, [c.77]

Разделительные колонки. Для аналитических целей применяют обычно стеклянные колонки, для препаративных —металлические, особенно при работе под повышенным давлением. За исключением специальных областей применения, используют колонки простого устройства с краном (или без него) для регулирования скорости капель. В верхней части колонки обычно помещают сосуд для подачи подвижной фазы. Для предотвращения увлечения стационарной фазы в процессе разделения в нижнюю часть колонны впаивают стеклянную фритту или помещают пробку из стекловолокна. Если сопротивление стационарной фазы настолько велико, что нет необходимости регулировать скорость течения, сам процесс также не регулируют. При чрезмерной скорости течения подвижной фазы наблюдается расширение полос на хроматограмме, т. е. ухудшается разрешение. В качестве. стационарной фазы применяют вещества, перечисленные в табл. 7.3. Колонку заполняют сухой или зашламованной, при помощи подвижной фазы, стационарной фазой. В обоих случаях необходимо следить за тем, чтобы [c.352]

Еще первые работы по молекулярно-ситовой хроматографии показали, что с уменьшением диаметра колонки ее эффективность падает. Поэтому в обычной практике используют колонки большего диаметра, чем обычно применяемые в распределительной или адсорбционной хроматографии. Чаще всего для аналитических целей применяют колонки с внутренним диаметром 7—8 мм, а для препаративных целей — более 60 мм. что дает возможность достичь эффективности более 6000 тарелок на один метр. Использование колонок большого диаметра и большой длины для получения высокого разрешения требует специального оборудования. [c.78]

Одной из основных проблем хроматографии является обеспечение достаточной селективности разделения а. Когда а=1, разрешение равно нулю [ем. уравнение (28.4)] независимо от числа теоретических тарелок в колонке. Из характера функции а [см. уравнение (28.10)] видно, что небольшие изменения а могут приводить к большим изменениям величины / з. В табл. 28.2 показано число эффективных теоретических тарелок, необходимое для достижения определенного разрешения Как видно из таблицы, при приближении а к 1 требования к эффективности хроматографической системы резко возраста.ют. [c.593]

Для разрешения этой задачи используют два способа 1) увеличение диаметра и длины разделительных колонок и 2) очистка отдельных небольших порций исходной смеси с последующим накоплением очищенного газа в соответствующем приемнике. [c.61]

Отсюда следует, что разрешение близких зон пропорционально квадратному корню из длины колонки. Этого следовало ожидать, поскольку одновременно с расхождением максимумов зон (пропорционально Ь) происходит их расширение (пропорционально УЬ). Таким образом, если мы хотим вдвое улучшить разрешение соседних зон, придется увеличить длину колонки в четыре раза. [c.35]

Наибольшую трудность, при применении РАД представляет обеспечение необходимой скорости счета, которая прямо пропорциональна рабочему объему детектора и обратно пропорциональна расходу потока элюента. РАД измеряет активность потока элюента в проточной ячейке и преобразует ее в напряжение выходного сигнала. Необходимо также учитывать фоновый сигнал, причем скорость фонового счета обычно составляет около 30 счетных единиц в 1 мин. При увеличении рабочего объема детектора V и уменьшении, расхода потока элюента Ш чувствительность РАД при прочих равных условиях увеличивается. Однако эти изменения приводят к ухудшению достигнутого на колонке разрешения. С уменьшением V при постоянном W и при сохранении эффективности разделения падает чувствительность детектора. Пропорциональное изменение К и И в сторону их уменьшения или увеличения не изменяет чувствительность детектора, что означает одинаковую чувствительность и универсальность применения его как в аналитической, так и в препаративной хроматографии. [c.282]

Самым эффективным из современных методов исследования состава слоншых смесей и структуры присутствующих в них компонентов можно считать хроматомасс-снектрометрию, сочетающую огромную разделительную способность газовой хроматографии с высокой чувствительностью и идентификационной мощью масс-снектрометрии (метод ГХ — МС). Для создания этого метода потребовалось решить две главные технические задачи разработать быстродействующие масс-спектрометры с очень большой скоростью развертки спектров (за время, меньшее времени элюирования любого соединения из ГХ колонки) и специальных сепарирующих устройств для концентрирования элюатов. Современные масс-спектрометры позволяют получить спектр вещества в интервале массовых чисел 50—500 за время, меньшее 1 с, при разрешении т/Ът= 500 и более [328, 329]. Отделение большей части (80— 90%) газа-носителя от элюирующихся органических соединений, необходимое для поддержания в масс-спектрометре низких остаточных давлений, возможно с помощью молекулярных сепараторов различных типов струйных [330, 331], эффузионных с тонконорис-тыми стеклянными трубками [332] или металлическими мембранами [333, 334], сепараторов с полупроницаемыми полимерными мембранами (тефлоновой [335], силиконовой [336]) и др. [c.40]

Многочисленные носители, применяемые в молекулярно-ситовой хроматографии, имеют различные химические свойства и подразделяются на мягкие, полужесткие и жесткие гели (табл. 6). Эта классификация очень важна, так как с этими свойствами связаны разрешение колонки и способ использования носителей. [c.75]

ИЗОЭЛЕКТРОФОКУСИРОВАНИЕ, метод разделения и анализа амфотерных в-в, гл. обр. белков, в электрич. поле в среде с изменяющимся в определ. направлении pH. В-ва при зтом смещаются к катоду или аноду до тех пор, пока каждое из них не достигнет зоны, pH к-рой совпадает с его изоэлектрич. точкой, и не сконцентрируется в ней ( фокусирование ). Градиент pH создают, помещая в электрич. поле смесь амфолитов с широким набором изоэлектрич. точек, напр, смесь полиаминов, замещенных в разл. степени карбоксиалкильными группами (т. н. амфолинов). Для стабилизации градиента разделение проводят в вертикальных колонках с градиентом плотности, наполненных сахарозой или глицерином, либо в слоях гелей (полиакриламида, се-фадексов). Метод обладает высоким разрешением и примен. для выделения и очистки от десятков миллиграммов до неск. граммов белков, идентификации (неск. мкг) и анализа их сложных смесей и т. д. [c.216]

Таки.м образом, расхождение максимумов зон к концу лгаграцни пропорционально длине колонки, степени различия в сродстве двух веществ к неподвижной фазе (А/ ), и тем больше, чем меньше В. т. е. чем сильнее само это сродство. Формулу (19) для разрешения с учетом (12) теперь можно записать так [c.34]

Из формулы (21) следует, что улучшать разрешение эффективнее не за счет длины колонки, а за счет выбора хроматографической системы, обеспечивающей более выраженное различие сродства двух веществ к неподвижной фазе. Следует подчеркнуть, что если хроматографическая система разделения близких зон отработана на малой колонке, то при переносе ее на колонку большего размера следует увеличивать объем только за счет ее диаметра, оставив подобранную длину колонкп неизменной. Скорость элюции (мл/ч) следует повысить ироиорционально увеличению площади сечентш колонки, с тем чтобы линейная скорость течения подвижной фазы (илп, что то же самое, расход элюента в расчете на 1 см площади сечепия колонки) оставалась неизменной. [c.35]

До сих иор мы считали зону чисто гауссовой, молчаливо пренебрегая протяженностью исходной зоны и как следствие возможностью наличия площадки иа профиле дшгрирующей зоны (рис. 10). Ширина переднего и заднего фронтов зоны у ее основания равна 2а, и если к концу колонки близкие соседние зоны еще сохранят площадку и[ирпной е, то минимальное расстояние между зонами, отвечающее их разрешению, будет составлять А с = 4о 8. В препа-ративнь[х вариантах хроматографии бывает, что е о. В так]1х случаях расширение фронтов зон можно не учитывать, а условие разрешения записать п[)още lS.x 5 е. Разрешение в этом случае лучше представить себе как Н = Д с/8. Оно пропорционально длине колонки (за счет А с), а не корню из ее длины. [c.35]

В большинстве случаев перед хроматографическим процессом стоит задача надежного разделенпя двух илп более заранее известных компонентов исходной смеси. Еслп хроматографическая система j e определена, то в распоряжении экспериментатора етце остается возможность выбора целого ряда физических параметров процесса с целью оптимизации условий разрешения зон (пиков) в этой снстеме. Краткое знакомство с основами теории хроматографии имело целью дать обоснования для такого выбора. Теперь можно подвести итоги. Последовательно рассмотрим следующий ряд параметров геометрия колонки, размер гранул, набивка колонки, скорость элюции, физические свойства элюента (вязкость, температура) и, наконец, загрузка колонки. Рассмотрение будем вести с позиции улучшенпя разрешения и одновременно уменьшения продолжительности хроматографического процесса. Но сначала надо привести еще одну зависимость — скорости ЭоЛюции и от разности давлений иа входе и выходе колонкп Д/ ( перепад давления ) и от размера гранул. Ее описывает уравнение Дарси [c.36]

Минимальная длина колонки, необходимая для разрешения близких зон, может быть найдена из уравнения (21), если в нем положить Rs = i тогда L = 16Я RIIS.RY. Выше упоминалось, что для хорошей колонки можно достичь соотнопшния Я яс 2J, тогда для оценки необходимой длины L люжно записать L/ - A ld R AR) Нагляднее записать это соотноихение через коэффициенты распределения вещества К, подставив R = 1/(1 К) и Mi Aii/(1 А ) - [c.36]

Однако ситуация коренным образом меняется, если компоненты исходной смеси разбиваются на группы, существенно различаю-пцгеся между собой по степени, сродства к неподвижной фазе (А), а следовательно, п по скорости миграции. Очевидно, что такие ком- поненты будут выходпть пз колонки соответствующими группами, разделенными значительными объемами пустого элюента. Это пе-оправданно затягивает хроматографический процесс и ведет к ухудшению разрешения внутри позади идущих групп в результате диффузии. Но этим не исчерпываются неблагоприятные последствия описываемой ситуации. Очевидно, что она не позволяет выбрать состав элюента п другие параметры элюции такнм образом, чтобы они оказались оптимальными для различных групп кодшонентов, как это видно из рис, 12. В случае А условия элюцпи оптимальны для комиоиентов группы 2, и они хорошо разрешаются, но для компонентов группы 1 элюент оказывается слишком сильным среднее для этой группы значение К будет мало, Я —- соответственно велико, а разрешение Я, согласно (21), окажется малым. Компоненты группы 1 покинут колонку, не успев отделиться друг от друга. В случае В условия элюции оптимальны для группы 1, зато компоненты группы 2 будут выходить замедленно, в виде очень расплывшихся пиков их разрешение тоже окажется неудовлетворительным. [c.41]

Это означает, в частности, что фракционирование макромолекул путем изократической элюции в большинстве случаев имеет мало шансов на успех. Подавляющее большинство макромолекул ири данном выборе элюента либо уже будет находиться в подвижной фазе, либо окажется слишком прочно связанным с неподвижной фазой. Непрерывная линейная градиентная элюция здесь удобнее, так как она для одиого белка за другим создает ситуацию, отвечающую быстрой десорбции. Отметим нонутно, что можно исходно уменьшить среднее число точек сорбции и тем самым улучшить условия разрешения, если уже при внесении вещества на колонку уравновесить ее жидкой средой, которая препятствует многоиози-циопной сорбции вещества в колонке, напрпмер солевым раствором умеренной концентрации. Одиако подобрать такую концентрацию, которая была бы оитимальпои для всех компонентов смеси макромолекул, удастся редко. [c.46]

Из-за самой сути процесса гель-фильтрации ее эффективность должна быть заметно ниже, чем в других хроматографических методах. Действительно, здесь все пики (зоны) элюируемых фракций должны укладываться в объем элюента Ук У , в то время как в других методах нри К 1 величина У может во много раз превосходить даже полный объем колонки. Вместе с тем при гель-фпльтрации, как ни нри каком другом хроматографическом методе, на расширение ников и ухудшение их разрешения сильно влияет фактор неравновесности расиределения вещества но объему жидкости в не- [c.112]

Отсюда следует, что число компонентов смеси веществ, которое в принципе можно разделить методом гель-фильтрации (при низком давлении), очень невелико. Показано [J. Morris, Р. Morris, 1976], что число пиков (п), которое молшо разделить с приемлемым разрешением (i 3 = 1) на колонке, имеющей N теоретических тарелок, определяется соотношением [c.113]

Процедура набивки колонки описана в гл. 3. Все операции производят особенно тш,ательно, так как при гель-фпльтрации, как пп при каком другом методе хроматографии, однородность пабивкп колонки необходима для хорошего разрешения пиков. Напрпмер, во время заполнения колонки надо проверить, нет лн одностороннего ее нагревания близко расположенным источником тепла, солнцем или же охлаждения сквозняком. Повышенные требования предъявляются к самим колонкам и остальным элементам хроматографической системы в отношении величины мертвого объема [c.127]

Для обессоливанпя и рассортировки молекул скорость элюции может быть выбрана довольно большой — порядка 20 мл/см- ч (следует предварительно проверить сжимаемость геля ). Как было показано в гл. 1, с позиций достижения наилучшего разрешения пиков существует оптидгальная скорость хро.матографического фракционирования. Слишком медленная элюция приводит к резкому уширению пиков за счет продольной диффузии, слишком быстрая — к более ностененному их уширению за счет нарушения равновесия поперечной диффузии. Оптимальная скорость зависит от размеров молекул и гранул, увеличиваясь с уменьшением тех и других. Для ориентировки можно указать, что оптимальная скорость элюции для белков составляет примерно 2 мл/см -ч (для определения объемной скорости элюции это значение надо умножить на илощадь сечения колонки). Однако нередко имеет смысл в интересах оптимизации условий эксперимента в целом значительно отступить от оптимальной скорости элюции в сторону ее увеличения. [c.136]

В нашем случае = 1,5. Если мы готовы довольствоваться минимально приемлемым разрешением = 1), то = Ь 2,25, т. е. длину колонки можно уменьшить более чем вдвое и все же хорошо отделить интересующее пас вещество. Таким образом, оптимизация позволила от таких исходных параметров, как Ь = 1 и, V = = 2 мл/см -ч, перейти кновыы, оптимальным параметрам разделения [c.137]

Целлюлоза — весьма гидрофильная матрица с очень крупными порами. Выпускаются волокнистые и микрогранулированные (химически сшитые ) целлюлозы. Последние дают лучшее разрешение за счет более однородных размеров пор, но их гидродинамические свойства в колонках хуже. Ионогенные группы присоединяются по гидроксилам целлюлозы. Варьируя условия модификации, можно выбирать плотность расположения ионогенных групп, а тем самым [c.250]

Смотреть страницы где упоминается термин Колонки разрешение: [c.222] [c.213] [c.95] [c.257] [c.145] [c.5] [c.30] [c.31] [c.34] [c.34] [c.38] [c.43] [c.44] [c.94] [c.155] [c.156] [c.157] [c.195] [c.205] [c.211] [c.215] [c.215] [c.223] [c.237]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология