Аппаратура для жидкостной колоночной хроматографии

Техника выполнения и аппаратура жидкостной колоночной хроматографии [c.41]

Хроматография производных аминокислот получила интенсивное развитие в связи с разработкой методов определения первичной структуры белков. Вероятно, трудно найти в органической химии и биохимии более удачный пример столь тесной взаимосвязи развития представлений о структуре и функциях большого класса веществ, каким являются белки, с хроматографическими методами анализа. Основное внимание было направлено на разработку методов определения N-концевых остатков аминокислот в белках, причем в идентификации соответствующих производных большое значение имели тонкослойная (ТСХ) и бумажная хроматография (БХ) (см. обзоры [1, 2]). Газожидкостная и жидкостная колоночная хроматографии находят в этой области ограниченное применение, однако интерес к последнему методу постепенно растет. Интерес к жидкостной хроматографий вызван вполне определенными причинами. Во-первых, постоянно появляются новые методы избирательной модификации остатков аминокислот в белках, а идентификация производных аминокислот требует развития хроматографических методов. Во-вторых, исследованию подвергают все более труднодоступные белки, что в свою очередь вызывает необходимость создания надежных методов количественного анализа. Интерес к колоночной хроматографии возрастает также в связи с выделением и получением необычных аминокислот, а также в связи с необходимостью предотвращения ошибок при определении аминокислотной последовательности. Понятия современный и классический метод используют здесь условно, поскольку новые методики обычно создают на базе стандартной аппаратуры примером может служить автоматический анализ ДНФ- и ДНС-аминокис-лот [3, 4]. Насколько известно, до сих пор не пытались использовать скоростную хроматографию высокого разрешения для разделения производных аминокислот, хотя некоторые соединения, например ДНС-аминокислоты, являются для этого метода довольно удобным объектом. Производные аминокислот использовали в структурном анализе белков крайне неравномерно. По-видимому, всеобщее увлечение ДНФ-аминокислотами проходит окончательно, уступая место повышенному интересу [c.360]

Метод жидкостной колоночной хроматографии, несмотря на свою простоту и универсальность, не выдержал конкуренции с газовой хроматографией. Быстрота анализа, оснащение современной автоматической аппаратурой— детекторами, самописцами, интегрирующими устройствами — выдвинули газовую хроматографию на первое место. Но в последнее время дали себя знать и недостатки метода. В самом деле, все исследуемые смеси обязательно должны быть летучи для проведения [c.110]

Воспроизводимость и правильность измерения абсолютных и относительных параметров удерживания как в газовой, так и в жидкостной колоночной хроматографии обусловливаются совокупным влиянием многочисленных факторов, вклад каждого из которых в общую погрешность измеряемой величины определяется классом используемой аппаратуры, техникой дозирования, типом и степенью перегрузки колонки (ее эффективностью), природой, происхождением и количеством используемых подвижной и неподвижных фаз, наличием в них нежелательных примесей, физико-химическими свойствами поверхности твердого носителя (в газовой хроматографии), возрастом колонки, а также квалификацией оператора. [c.253]

Применение колоночной распределительной хроматографии. Успехи, достигнутые в развитии современной жидкостной распределительной хроматографии, позволяют решать различные аналитические задачи. Ранее этот метод использовался редко, так как из-за малой эффективности колонок значительно увеличивалась длительность анализа, что способствовало сильному разбавлению образцов подвижной фазой. Эти недостатки, а также отсутствие эффективной аппаратуры препятствовали распространению метода. В последнее время в этой области достигнуты значительные успехи, и метод колоночной распределительной хроматографии стал применяться как стандартный при решении [c.68]

В отличие от жидкостного колоночного хроматографического разделения в классических вариантах бумажной и тонкослойной хроматографии разделение веществ осуществляется в тонком слое сорбента, нанесенного на пластину, или на бумаге, являющейся одновременно твердым носителем для жидкой неподвижной фазы. Движение подвижной фазы, содержащей разделяемые компоненты, происходит только в результате действия капиллярных сил. Поэтому эти методы близки по технике выполнения хроматографического разделения, по использованию однотипного оборудования и аппаратуры, а также по способам анализа разделяемых компонентов. [c.113]

В настоящее время хроматографическое приборостроение развивается главным образом в области газовой (газо-жидкостной и газо-адсорбционной), жидкостной колоночной и тонкослойной хроматографии. Обеспеченность аппаратурой этих видов хроматографии существенно различна. [c.247]

Газовая хроматография представляет собой процесс, в котором разделение смеси производится с помощью подвижной газовой фазы, проходящей над сорбентом. Метод подобен широко применяемой жидкостной распределительной колоночной хроматографии, за исключением того, что подвижная жидкая фаза заменена движущейся газовой фазой. Газовая хроматография (ГХ) подразделяется на газо-адсорбционную хроматографию (ГАХ), где сорбентом является твердое тело с большой поверхностью, и газожидкостную хроматографию (ГЖХ), где сорбент — нелетучая жидкость, нанесенная на инертный твердый носитель. Подвижная фаза, или газ-носитель, представляет собой инертный газ, который пропускается с постоянной скоростью через насадочную колонку — трубку небольшого диаметра, содержащую сорбент. Аналитическая к олонка длиной около 1,5 ле и внутренним диаметром 4 мм может иметь эквивалент от 700 до 4000 теоретических тарелок (смотри ниже) в зависимости от типа и равномерности заполнения насадки. То, что говорится о газо-жидкостной хроматографии, об ее аппаратуре, детекторах, взятии пробы газа и т. д., в основном применимо к газо-адсорбционной хроматографии, которая является исторически более ранним методом и применяется преимущественно в случае анализа газов или относительно неполярных веществ с высокой летучестью. Область применения газо-жидкостной хроматографии значительно шире, так как этот метод применим к более широкому многообразию веществ и вместе с тем допускает применение не только насадочных, но и капиллярных колонок. В этой главе рассматривается только газо-жидкостная хроматография. [c.43]

Тонкослойная хроматография (ТСХ) является одним из видов жидкостной хроматографии, поэтому область ее применения столь же широка, как и колоночной жидкостной хроматографии. Однако ТСХ характеризуется и дополнительными преимуществами 1) простота методики и аппаратуры 2) экспрессность 3) большая гибкость (например, возможность осуществлять проявление в двух направлениях — двумерная хроматография, совместное использование электрического поля и хроматографического разделения и т. д.) 4) определение соединений, которые практически не элюируются (в колоночной хроматографии эти соединения отравляют колонку). [c.5]

В развитии хроматографии вслед за периодом, когда основные ее достижения, были связаны в первую очередь с созданием и совершенствованием аппаратуры, наступило время, когда столь же серьезные усилия стали направлять и на создание высокоэффективных материалов — сорбентов, носителей, неподвижных жидких фаз и т. д. — которые, собственно, и определяют качество хроматографического разделения веществ. Совершенствуются, порой весьма значительно, традиционные хроматографические материалы повышается их химическая однородность, чистота, улучшаются механические свойства. Выдающиеся результаты достигаются при использовании в колоночной жидкостной хроматографии микро-зернистых сорбентов. Наряду с этим появляются и классы совершенно новых хроматографических материалов с особыми свойствами, идеально соответствующими их назначению. Примерами таких материалов являются биоспецифические и поверхностно-пористые сорбенты для жидкостной хроматографии. Промышленность выпускает все больше материалов в максимально удобной для непосредственного применения форме, например готовые к применению пластины со слоем сорбента для тонкослойной хроматографии, растворы и смеси реактивов для предварительной обработки проб перед анализом или для проявления хроматограмм и т. д. [c.4]

Модернизация аппаратуры, применяемой в классической жидкостной колоночной хроматографии, сделала ее едпим из наиболее перспективных и совершенных методов анализа. Он по.пучнл название высокоэффективной жидкостной. хроматографии (ВЖХ). В н 1Стоя(цее премя этот метод является одним из главных методов анализа органических соединений. [c.595]

Удачным усовершенствованием аппаратуры жидкостной колоночной ( каскадной ) хроматографии является предложенная в работе [472] и-образная колонка, одна ветвь которой состоит из ряда (до 10) последовательно соединенных стеклянных секций размером 50 к 18 мм, а другая — из стеклянной трубки, соединенной с капельной воронкой. Для более точного регулирования скорости элюирования высоту верхней, не заполненной адсорбентом секции подбирают так, чтобы она находилась на уровне жидкости в капельной воронке. Подача разделяемых веществ и смеси хлороформ—этанол (в соотношении от 100 1 до 100 3) по длине слоя окиси алюминия I степени активности снизу вверх позволила эффективно разделить сложную смесь, состоящую из оксиэтилированных алкилфенолов, аминов, амидов жирных кислот и полиэтиленгликолей. [c.239]

Разделение первичных аминов, диаминов и полиаминов на ионообменных колонках с сорбентом типа аминекс с использованием несколько измененной аппаратуры, обычно применяемой для автоматического анализа аминокислот, показало, что жидкостная колоночная хроматография, по-видимому, является в настоящее время наиболее перспективным способом разделения [c.267]

В этой главе мы познакомимся с конструкциями колонок и аппаратурой как для жидкостной хроматографии прп низком давлении (до 5 атм), так и для ЖХВД, а также с некоторыми техническими приемами, общими для всех методов колоночной хроматографии, разбору которых посвящены следующие пять глав. Своеобразная техниками аппаратура для ТСХ описаны в последней главе. [c.65]

Последним из хроматографических методов, разработанных на основе теории распределительной хроматографии Мартина и Синджа, явилась колоночная хроматография в жидкой фазе. Этот метод развивался сравнительно медленно из-за высоких требований к аппаратуре, необходимой для его реализации. Только в последние годы жидкостная хроматография получила широкое распространение благодаря исключительно большим возможностям применения как в аналитических, так и препаративных целях, причем скорость анализа и его высокая чувствительность компенсируют высокую стоимость соответствующих приборов. Хотя метод жидкостной хроматографии имел те же предпосылки для развития, что и метод газовой хроматографии, в решении некоторых аналитических задач, прежде всего в области высокомолекулярных соединений, жидкостная хроматография имеет большие преимущества. Тем не менее в большинстве аналитических лабораторий жидкостная хроматография не может вытеснить хроматографию в тонких слоях, поскольку ТСХ выгодно отличается простотой оборудования и обслуживания и малыми затратами денежных средств. [c.14]

Хроматографическое разделение было открыто М. С. Цветом в 1903 г. в виде жидкостно-адсорбционного варианта. Однако жидкостная хроматография (ЖХ) в течение долгого времени не получала столь широкого распространения в аналитической практике, как газовая хроматография (ГХ), хотя последняя была предложена значительно позднее и охватывала более узкий круг веществ. Одной из причин медленного развития колоночной жидкостной хроматографии было отсутствие соответствующей аппаратуры, в частности высокочувствительных и достаточно универсальных детектирующих устройств и малопроизводительных беспульсационных насосов высокого давления. [c.300]

Для выбора условий разделения смссей органических соединений в обращенно-фазовой жидкостной хроматографии. Предназначена для условий использования колоночной разделительной аппаратуры. [c.103]

Колоночная жидкостная хроматография — старейший хроматографический метод, который в настоящее время возрождается, восстанавливая свою репутацию как одного из самых эффективных и доступных. Хотя жидкостная хроматография почти па полвека старше газовой, она находилась в положении бедного родственника из-за неоовершенства методик и длительности анализа, традиционно связываемых с этим методом. Однако в последние четыре года интерес к жидкостной хроматографии возрос главным образом благодаря резкому увеличению скорости разделения и повышению эффективности метода. Основываясь на теоретических представлениях, в основном газовой Х1роматографии, удалось разработать аппаратуру для работы при высоких скоростях и с высоким разрешением и улучшить конструкцию колонок. Методика жидкостной хроматографии в настоящее время настолько усовершенствована, что по времени и эффективности жидкостная хроматография может соперничать с газовой, и в связи с этим можно надеяться, что метод найдет самое широкое применение для аналитических разделений. [c.7]

В жидкостной хроматографии разделение осуществляется жидкой подвижной фазой на неподвижной фазе в колонке за счет процессов, включающих адсорбцию и абсорбцию. Поскольку элюент находится в жидком состоянии и температура чаще всего не влияет (сильно) на разделение, то соответствующие системы для жидкостной хроматографии должны быть относительно простыми и недорогими. Внедрение в практику высокоскоростной хроматографии высокого давления привело к резкому усложнению и повышению стоимости соответствующей аппаратуры. Методом жидкостной хроматографии можно анализировать относительно большие пробы независимо от летучести и термической стабильности составляющих их компонентов. На оборудовайии для колоночной жидкостной хроматографии (КЖХ) можно легко и быстро концентрировать очень разбавленные растворы. За исключением жидкостной хроматографии высокого давления, остальные варианты этого метода требуют значительно больше времени для анализа по сравнению с газовой хроматографией. К недостаткам жидкостной хроматографии можно отнести ограниченный круг детектирующих систем. [c.65]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология