Бумага элюирование

В самой ранней работе Андерсона и сотр.1 хроматографирование проводили на двух бумажных полосках (ватман № 1). Пробу наносили на бумагу в виде раствора в ацетоне. Для элюирования использовали воду и четыреххлористый углерод для проявления хроматограммы — раствор фторбората л-нитробензол-диазония. Количество примеси рассчитывали, замеряя площадь ее пятна и сравнивая с площадью пятна стандартного раствора. Для определения примесей, содержащихся в количестве менее 1%, их сначала концентрировали 5— 6-кратной перекристаллизацией из горячего хлорбензола. Авторам удалось выделить и идентифицировать три примеси орто-пара-изомер дифенилолпропана, соединение Дианина и трис-фенол ]. [c.186]

Важное преимущество электрофореза на бумаге перед методом подвижной границы связано с возможностью полного разделения компонентов путем элюирования соответствующих зон. С помощью комбинирования сте-кания раствора по наклонной фильтровальной бумаге с электрофоретическим отклонением создан метод, позволяющий беспрепятственно разделять компоненты. [c.158]

Расстояние между пятном и стартовой линией зависит от природы растворителя, продолжительности элюирования, степени насыщенности атмосферы камеры парами растворителя, влажности бумаги или атмосферы камеры, типа бумаги, температуры, но главным образом от природы вещества. Это расстояние является типичной характеристикой определенного вещества для заданных условий. Для идентификации веществ в БХ используют относительную величину — / /, определяемую как отношение расстояния а (от стартовой линии до пятна) к расстоянию Ь (от стартовой линии до фронта растворителя) [c.240]

Щелочно-земельные металлы. Ионы Са, 5г, Ва и Mg можно разделить методом круговой хроматографии на непропитанной бумаге при элюировании смесью метанола и этанола (1 1) и обнаружить, например, с помощью виолуровой кислоты или 8-оксихинолина. [c.242]

Количественное определение аминокислот методом распределительной хроматографии на бумаге. Цель работы — определить концентрацию аминокислоты в анализируемом растворе методом колориметрического анализа раствора, полученного при элюировании хроматографического пятна. [c.529]

Далее колонку с сефадексом А-25 промывали растворами муравьиной кислоты (по 4 л) возрастающих концентраций от О до 0,1 н. и затем 0,5 л 2 н. раствора НСООН. Вещества, полученные элюированием 2 н. раствором муравьиной кислоты, разделяли хроматографией на бумаге с растворителем этилацетат—уксусная кислота—муравьиная кислота—вода (18 3 1 4). На хроматограммах после проявления был обнаружен ряд пятен, соответствующих кислым олигосахаридам. [c.125]

При исследовании гидролизата методом хроматографии на бумаге обнаружены 3,4-ди-0-метил-Д-ксилоза и 2,3,4-три-0-метил-0-глюкоза. Смесь этих метил-, производных разделяли на колонке с углем элюированием 20%-ным водным [c.131]

Элюирование пятен с хроматограммы на бумаге [c.476]

Если хроматограмма предназначена для элюирования, то проведение хроматографирования зависит от способа обнаружения. В тех случаях, когда разделяемые вещества окрашены или имеют характеристическую флуоресценцию в ультрафиолетовом свете, пятна после определения их местонахождения на бумаге можно вымывать сразу. Так, компоненты нуклеиновых кислот, флавины и т. д. обнаруживают благодаря их отчетливой флуоресценции. Другие соединения, пятна которых при дневном освещении едва заметны, могут вызывать заметное тушение слабой флуорес- [c.476]

Рис. 442. Элюирование хроматографической бумаги с большой площадью.

Слишком медленное элюирование может быть обусловлено неполным насыщением атмосферы парами воды, низким уровнем воды в хроматографической лодочке или недостаточно тесным прилеганием элюируемой бумаги к вспомогательной полосе или к стеклам. [c.479]

Элюирование бумаги с большей поверхностью (около 100 с-и ) можно осуществить при помощи устройства, изображенного на рнс. 442 [1341. [c.479]

Часто целесообразно при разделении комбинировать электрофоретический и хроматографический методы. Для препаративных целей последним лучше проводить электрофорез, чтобы получить более компактные полосы и избежать возможной частичной деструкции некоторых аминокислот из-за кислотного гидролиза после элюирования с бумаги. [c.395]

Возможность полного удаления не связывающегося с белком фуксина из бумаги является преимуществом этого метода, особенно удобного при количественном определении фракций с помощью элюирования (см. стр. 60). Одну и ту же порцию окрашивающего или дифференцирующего растворов можно использовать 4—5 раз. При первых отмывках новой серии электрофореграмм можно использовать последние порции отмывающего раствора из предыдущей процедуры окрашивания. [c.55]

Судан черный 10В окрашивает липопротеиды в синий цвет. Обычно фон, т. е. участки электрофореграммы, не содержащие липопротеидов, не удается отмыть до абсолютно белого цвета, так как краситель нельзя полностью удалить из бумаги. Об этом не следует забывать при определении содержания липопротеидов методом элюирования (см. стр. 60). [c.57]

Метод хроматографии на бумаге. Долгов время метод хро матографии на бумаге был единственным методом определенш нунлеотидного состава ДНК. Определение состава ДНК этим мето дом состоит из следующих основных этапов выделение ДНК, ei гидролиз до азотистых оснований, разделение их с помощью хро матографии на бумаге, элюирование оснований и последующа ультрафиолетовая спектрофотометрия. [c.130]

Хроматография на колонке является более совершенным методом. Вероятно, основное ее преимущество состоит в возможности до бесконечности удлинять любую ступень элюции, изменяя состав смеси растворителей. Разделение происходит лучше, чем на бумаге, элюированные соединения могут быть сразу подвергнуты инфракрасной спектроскопии или исследованию на антиэстеразное действие. Процедура разделения может оказаться исключительно быстрой, особенно если смесь состоит из двух веществ, одно из которых полностью элюируется данным растворителем, а другое им совсем не извлекается. Одна и та же основная система может быть использована как для аналитических целей на небольшой колонке, так и для получения больших количеств исследуемых веществ. [c.414]

Редкоземельные металлы разделяют на бумаге, пропитанной нонообменни-ками или нитратом аммония. На сильнокислой катнонообменной бумаге 8а-2 можно разделить лантан, церий и неодим методом центрифужной круговой хроматографии, используя для элюирования 0,4 М раствор гликолята (pH 3,76). Смесь Се, Рг, N(1, 8т, и 0(1 разделяют на анионообменной бумаге Ватман ОЕ-20 в растворе 0,15 М азотной кислоты в 99%-ном метаноле (Л/ Се — 0,06 Рг — 0,12 N(1 — 0,21 51т — 0,40 0(1 — 0,60). Для разделения 10 редкоземельных элементов и иттрия использую бумагу, пропитанную 10%-ным раствором нитрата аммония. Эллюируют пробу смесью ацетона и эфира (1 1) с добавками роданида аммония и соляной кислоты, а обнаруживают опрыскиванием насыщенным раствором ализарина в 90%-ном спирте. Порядок расположения пятен элементов соответствует порядку возрастания их атомных масс. Значения / , увеличиваются в ряду Ьа (0,08) Се (0,11) Рг(0,16) N(1 (0,20) 5т (0,31) 0(1 (0,44) V (0,49) Оу (0,50) Ег (0,56) Ь (0,59) Тт (0,90). [c.242]

Фосфаты. Разделение opio-, пирс- и трифосфатов, высших полифосфатов и метафосфатов в виде натриевых солей проводят на непропитанной бумаге, применяя для элюирования спиртовые растворы трихлоруксусной кислоты. Примеры элюирующих смесей и значения R приведе.чы в тзбл. 9.3. Обнаруживающим реа- [c.243]

Количественн1лй анализ в х] Оматографии на бумаге также аналогичен методам, применяемым в ТСХ. Используют методы оп )еделения количества вещества как по площади пятен, так н по ннтенсннности окраски. Более точен способ определения вещества каким-либо методом количественного анализа после элюирования вещсства из вырезанного участка бумаги. [c.617]

Разнообразны техн. приемы, используемые в БХ. Бумаге придают любую форму, удобную для техн. осуществления элюирования компонентов, что обеспечивает определ. скорость протекания р-рителя. БХ можно проводить в центробежном поле нлн в условиях градиента т-ры, что увеличивает эффективность и скорость разделения. [c.669]

Фракционирование белков сыворотки крови на КМ-целлюлозе осуществляют с помощью ступенчатого элюирования, подавая на колонку последовательно следующие растворы 0,02 М натрий-ацетатный буфер, pH 4,6 ( стартовый буфер), затем 0,05 М натрий-ацетатный буфер, pH 5,2 0,08 М натрий-ацетатный буфер, pH 6,0 0,1 М фосфатный буфер, pH 7,0 и, наконец, 0,1 М фосфатный буфер, содержащий 0,5 М Na l, pH 8,3. Каждый новый раствор подают на колонку только после того, как полностью элюируется пик, вымываемый предыдущим раствором. Скорость тока приблизительно составляет 50 мл/ч. Элюат собирают порциями по 2—3 мл. Обработку результатов см. на с. 108. Идентификацию белков осуществляют методом электрофореза на бумаге или в полиакриламидном геле (с. 112). Регенерацию КМ-целлюлозы проводят вне колонки. [c.113]

Ряд количественных определений разделяемых веществ (аминокислот, сахаров, пуринов, красителей и т. д.) основан на элюировании пятна соответствующего вещества с бумаги с последующим анализом элюата колориметрически, спектрофотометрически и т. д. Иногда элюированное вещество подвергается ряду последующих операций для идентификации или установления его структуры. [c.476]

Элюирование образца из вырезанной части бумаги можно осуществить несколькими способами. В самом простом случае вырезанную полосу поме-14ают в пробирку и заливают растворителем, которым данное вещество количественно извлекается. Бумагу можно измельчить, отцентрифугиро-вать и экстрагировать следующей порцией растворителя. Этот способ можно использовать только в тех случаях, когда допустимо значительное разбавление образца, например при колориметрических определениях [861. Следует отметить, что адсорбция вещества на бумаге приводит к значительным ошибкам. [c.477]

Элюируемую полоску плотно наматывают на стеклянную палочку. На получившуюся колонку сверху надевают трубку с расширением, служащим резервуаром для элюента. Колонку нижним концом вставляют в горлышко ампулы с отводохГ ля вакуумирования. Вода, заливаемая пипеткой в резервуар, коллчественно элюир ет вещество и элюат поступает в ампулу. Для количественного элюирования 10 мг аланина с поверхности бумаги в 50 см достаточно собрать 1,5 мл раствора. [c.479]

В табл. 1-10 приведень значения -Ку и Rj протеиногеннЬ1Х аминокислот, полученные при хроматографии на бумаге шляйхер-шюль 2043 Ь в системах бутанол — уксусная кислота — вода (4 1 1) и бутанол — изомасляная кислота — уксусная кислота — вода (5 0,5 0,7 5). Значения Р зультаты трехкратного элюирования. Значения коэффициентов удерживания воспроизводятся, если хроматографирование идет в направлении волокна бумаги. [c.57]

ФТГ-Производные можно идентифицировать хроматографированием на бумаге [92, 186, 288] и на распределительной колонке [290]. Последний метод пригоден для количественных определений, но можно выполнять также быстрые полуколи-чественные определения путем элюирования пятен хроматограмм на бумаге. Пятна проявляются иод-азидным реактивом, специфичным на двухвалентную серу, а при количественных определениях обнаруживаются по сильному поглощению в УФ-области ФТГ-производных [92]. [c.242]

Келлер [489] подобрал условия хроматографирования смесей лонов актинидов на бумаге № 20436 Шлейхер и Шюлль . Им было достигнуто разделение U(VI), U(IV) и Pu(III), а также и(VI), Np (VI) и Pu(III) в процессе элюирования их смесями метанола (этанола, н-пропаяола и н-бутанола) с соляной кислотой в отношении 1 1. Четкое разграничение зон элементов было получено для двух препаратов, содержащих Ас(III), Th(IV), Am(III), Pu(IV), а также U(VI), Am(III) и Pu(IV) при элюировании смесью метанол-азотная кислота (1 1). Продолжительность анализа составляет от 10 до 24 час. в зависимости от природы органического компонента элюента. [c.378]

В работе Гросса [5] описано получение S-этил-1-С -/-гомоци-стеина из йодистого этила-1- и 8-бензил-/-гомоцистеина. Исходное вещество (1,14 г), полученное из метионина через 8-бен-зил- /-гомоцистеин [6] и Ы-ацетил-5-бензил- /-гомоцистеин [7], восстанавливают металлическим натрием в жидком аммиаке, и образовавшийся меркаптид обрабатывают 0,63 г йодистого этила-ЬС Прибор для проведения реакции представляет собой модификацию прибора, о котором идет речь в примечании 2. Вещество, оставшееся после испарения аммиака, растворяют в воде, и полученный раствор подкисляют соляной кислотой до pH 1—2, затем этот раствор пропускают через колонку [8] (высота 2,5 м, диаметр 22 см), наполненную ионообменной смолой дауэкс-50 (степень сшивания 8%) с величиной зерен 200—400 меш. Фракции, содержащие продукт реакции, полученные при элюировании 2,5 н, соляной кислотой, объединяют и испаряют при пониженном давлении. Остаток растворяют в воде и с помощью раствора едкого натра создают среду с pH 6,2. Для очистки вещество сублимируют при температуре 180—200° и давлении 1 мм рт. ст. Выход 0,400 г (60%),[а]д + 23°, концентрация 1% в 2 н. растворе соляной кислоты. Методом бумажной хроматографии в системе бутиловый спирт — вода— уксусная кислота (10 5 2) или в системе третичный амиловый спирт — вода — пиридин (7 6 8) при температуре 22—25° на бумаге ватман № 4 показано, что вещество состоит из свободной аминокислоты и радиохимических примесей RjSi,61 и 0,61 соответственно. [c.218]

Обычная сэндвич-камера может быть легко превращена в "насыщенную сэндвич-камеру", для чего нужно положить крышку смоченную растворителем, на ф1шьтровальную бумагу. Если требуется достижение полного сорбционного насыщения перед началом элюирования, рекомендуется пользоваться такой конструкцией сэндвич-камеры, какая показана на рис. 177. [c.96]

Ненасыщенная обычная камера. Первые работы в области 10ИК0СЛ0ЙН0Й хроматографии проводились при использовании ненасыщенных обычных камер, в которые не вкладывалась фильтровальная бумага. Лишь в 1959 г. Шталь предложил обкладывать стенки камеры фильтровальной бумагой, чтобы устранить предполагаемые краевые эффекты на хроматограмме. Когда в камеру залит растворитель, в газовой фазе начинает формироваться градиент через 10 мин насыщение камеры оказывается полным в нижней трети, составляет примерно 80% (от полного) в середине, но на насыщение верхних частей камеры с высотой 25 см уходит более часа. Следовательно, во время элюирования растворитель испаряется только из верхних зон слоя (близких к фронту). [c.101]

Предварительное насыщение слоя молекулами из газовой фазы (из атмосферы камеры) не является ни новинкой, ни специфичной особенностью тонкослойной хроматографии еше в бумажной хроматографии стандартным приемом считалось "уравновешивание" бумаги перед началом элюирования. При обеспечении- равновесия со всеми компонентами газовой фазы такое равновесное состояние оказывалось столь же сложным, как и состав самих подвижных фаз, обычно употреблявшихся в бумажной хроматографии. Бунгенберг, Де Джонг и Хогивин [162] бьши среди первых специалистов, обративших внимание на необходимость специального предварительного насыщения в бумажной хроматографии и пользовавшихся таким подходом для сглаживания градиентов, обусловленных расслоением подвижной фазы [c.107]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология