Элюирование пятен с хроматограммы на бумаге

В самой ранней работе Андерсона и сотр.1 хроматографирование проводили на двух бумажных полосках (ватман № 1). Пробу наносили на бумагу в виде раствора в ацетоне. Для элюирования использовали воду и четыреххлористый углерод для проявления хроматограммы — раствор фторбората л-нитробензол-диазония. Количество примеси рассчитывали, замеряя площадь ее пятна и сравнивая с площадью пятна стандартного раствора. Для определения примесей, содержащихся в количестве менее 1%, их сначала концентрировали 5— 6-кратной перекристаллизацией из горячего хлорбензола. Авторам удалось выделить и идентифицировать три примеси орто-пара-изомер дифенилолпропана, соединение Дианина и трис-фенол ]. [c.186]

Самый точный метод количественного анализа, основанный на элюировании производного, дает точность ниже 1%. Однако использование элюирования преду сматривает предварительное полное хроматографическое отделение определяемого вещества от сопутствующих. Поэтому элюирование чаще применяют для определен ния веществ в зонах двухмерных хроматограмм. Недостатком элюирования яв ляется то, что для последующих точных измерений необходим раствор достаточной концентрации, следовательно, на бумагу требуется наносить сравнительно большие количества вещества. Раствор следует наносить на линию старта не пятном, а длинной полосой для создания высокой загрузки хроматограмм. , [c.265]

В настоящее время часто применяют метод элюирования пятна. Этот способ определения концентрации вещества в зоне, по-видимому, наиболее точный. Полученную хроматограмму разрезают на отдельные зоны, проявляют, и вещество экстрагируют с бумаги соответствующим растворителем. Определяют его концентрацию одним из инструментальных методов анализа спектрофотометрическим, полярографическим или любым другим наиболее подходящим методом. Для получения достоверных данных очень важно полное отделение одного вещества от другого и точный метод определения очень малых количеств определяемого элемента. [c.91]

Если хроматограмма предназначена для элюирования, то проведение хроматографирования зависит от способа обнаружения. В тех случаях, когда разделяемые вещества окрашены или имеют характеристическую флуоресценцию в ультрафиолетовом свете, пятна после определения их местонахождения на бумаге можно вымывать сразу. Так, компоненты нуклеиновых кислот, флавины и т. д. обнаруживают благодаря их отчетливой флуоресценции. Другие соединения, пятна которых при дневном освещении едва заметны, могут вызывать заметное тушение слабой флуорес- [c.476]

Количественная хроматография на бумаге и в тонком слое весьма перспективна ввиду ее простоты и в принципе должна быть точным методом анализа, поскольку в идентичных условиях количество вещества в зоне всегда будет определяться количеством вещества, нанесенным в точку на линии старта. Кроме того, распределение в зоне должно быть постоянным, для того чтобы метод конечного измерения (по площади пятна, по показаниям денситометра или путем измерения оптической плотности после элюирования) обеспечивал количественное определение первоначально нанесенного вещества. Однако на практике исключительно трудно создать идентичные условия развития каждой хроматограммы. Цель настоящей работы — обсуждение факторов, вызывающих изменения в распределении вещества в зонах, и способов их преодоления. [c.9]

ИЛИ смесью этанола с водой (9 1) [24]. Калий, рубидий и цезий можно отделить один от другого при элюировании фенолом, насыщенным 20%-ной соляной кислотой [121]. Для разделения щелочных металлов используется восходящая хроматография на полоске бумаги, пропитанной фосфомолибдатом аммония [2]. Сначала пробу элюируют раствором 0,1 М азотной кислоты и 0,2 М нитрата аммония. При этом цезий и рубидий R/ 0,00 и 0,06) отделяются от калия (/ / 0,27) и смесн натрия и лития Rf 0,73 и- 0,78). Далее разрезают полоску на три части. На средней части проводят обнаружение калия. Нижнюю часть повторно хроматографируют смесью 0,2 М азотной кислоты и 3,5 М нитрата аммония, чтобы отделить цезий (Rf 0,1) от рубидия Rf 0,6). Верхнюю часть повторно хроматографируют 96%-ным этанолом, чтобы отделить натрий от лития. Щелочные металлы обнаруживают, например, с помощью виолуровой кислоты или, если они были разделены в форме хлоридов, нитрата серебра. Виолуровую кислоту используют в виде 0,1%-ного раствора после опрыскивания хроматограмму нагревают при 60 С. При этом пятна натрия н калия окрашиваются в фиолетовый цвет, пятна лития — в красно-фиолетовый. Этот реагент окрашивает также пятна ряда других металлов. Обнаружение с помощью нитрата серебра носит косвенный характер образующийся хлорид серебра темнеет на свету. [c.144]

ФТГ-Производные можно идентифицировать хроматографированием на бумаге [92, 186, 288] и на распределительной колонке [290]. Последний метод пригоден для количественных определений, но можно выполнять также быстрые полуколи-чественные определения путем элюирования пятен хроматограмм на бумаге. Пятна проявляются иод-азидным реактивом, специфичным на двухвалентную серу, а при количественных определениях обнаруживаются по сильному поглощению в УФ-области ФТГ-производных [92]. [c.242]

Разработан спектрофотометрический метод количественного определения серпентина в препарате раунатин и корнях раувольфии змеиной. Методика заключается в разделении выделенной из растительного материала суммы алкалоидов методом хроматографии на бумаге в системе растворителей хлороформ — изопропиловый спирт (20 1), насыщенной формамидом,. элюировании серпентина из пятна хроматограммы этанолом с последующим количественным определением серпентина спектрофотометрически при длине волны 308 нм. [c.348]

Наиболее точные методы количественного хроматографического анализа основаны на вымывании (элюировании) вещества из бумаги какими-либо растворителями и колориметрическом определении концентрации вещества в элюате. Точность этих методов для многих соединений составляет 3—6%. Для определения положения на хроматограмме пятна данного вещества, которое должно быть элюировано, используют флюоресценцию, метод метчиков или опрыскивание хроматограмм очень слабым реактивом, дающим окраску с данным веществом. После установления положения пятна данного вещества участок бумаги, -соответствующий площади пятна, вырезают и кладут в пробирку, содержащую соответствующий растворитель, и экстрагируют вещество из бумаги. Затем, добавляя в пробйрку соответствующий реактив, раствор окрашивают и по интенсивности окраски определяют концентрацию вещества. [c.33]

После нанесения пробы хроматограмму вкладывают в хроматографическую камеру и начинают элюирование. При этом необходимо знать, какое количество вещества неподвижной фазы содержится в подвижной фазе, которая используется для элюирования. Гидрофильные элюенты, чаще всего на основе бутанола, или даже однофазные элюенты (например, смесь изопропиловый спирт — вода) содержат такое количество воды, что в ходе элюирования бумага может впитать из них необходимую воду и набухнуть. В этом случае хроматографирование можно начинать немедленно и получить в результате пятна также правильной круглой формы это обстоятельство доказывает, что разделение происходит по принципу распределительной хроматографии. Однако, если содержание воды в подвижной фазе невелико, ниже примерно 10% (а это имеет место при использовании таких систем, как бутилацетат — вода, бензол — пропионовая кислота — вода, тетрахлорметан — уксусная кислота — вода, системы Буша и др.), необходимо до начала элюирования ввести в бумагу требуемое количество полярной неподвижной фазы. С этой целью бумагу выдерживают над водой в камере с влажной атмосферой (приведение в равновесие), обрабатывают ее водяным паром, опрыскивают мелкодисперсным аэрозолем, содержащим вещества неподвижной фазы, или пропитывают влажным эфиром по методу Буша и Кроушоу [19]. [c.89]

Количественное определение веществ после хроматографичес кого разделения проводится денситометрически непосредственн на хроматограмме либо после элюирования. В последнем случа пятна вырезают и после измельчения извлекают определяемо вещество из бумаги каким-либо подходящим растворителем. Сс держание анализируемого вещества в извлечении или сухом ос татке после отгонки растворителя находят любым методом, при годным для определения малых количеств (спектрофотометрия Полярография и т. д.) [c.212]

Двойной пик на кривой элюирования галлия, очевидно, прямо связан с двойным пятном, наблюдаемым на бумаге при элюировании концентрированной соляной кислотой. Хроматография на бумаге, обработанной Д2 ЭГФК, позволила объяснить причину появления двойных пятен. Использование для нанесения исходного пятна галлия растворов этого элемента в соляной кислоте различной концентрации и элюирование 5,5—6,5 М кислотой сразу после нанесения пятна показало, что пятно галлия на хроматограмме с Rp близким к 1, отсутствует, если исходный раствор [c.479]

Для количественного определения алкалоидов спорыньи с хроматограмм удобен способ, при котором флуоресцирующие пятна вырезают из хроматограмм и обрабатывают в пробирке раствором п-диметиламинобензальдегида в серной кислоте, разбавленной таким количеством воды, чтобы бумага распадалась на волокна, но не обугливалась. Одновременно происходят цветная реакция и элюирование алкалоидов из волокон целлюлозы. Раствор, окрашенный в синий цвет, фильтруют и фотометрируют. Расчет делают по калибровочному графику, построенному по известной концентрации алкалоидог5. Точность определения этим методом равна точности фотометрического метода ( 4%). [c.130]

Нами были предприняты попытки разделить ниобий и тантал на бумаге по методике, данной в работе Виллиамса. Внача-, ле мы применяли обычную технику хроматографии. Хроматограммы с нанесенным раствором фтористых комплексов ниобия и тантала после элюирования метилэтилкетоном,. насыщенным водой, и высушивания обрабатывались раствором таннина и выдерживались над раствором аммиака для нахождения пятна ниобия. Затем полоса разрезалась на равные куски по 3 см, [c.26]

Занн с сотр. [35] идентифицировали продукты гидролиза полиамидов следующим образом. Из продуктов гидролиза хлористоводородную кислоту отгоняют при нагревании под вакуумом при 100 °С. Остаток растворяют в 2,5 мл воды и экстрагируют кислоты эфиром. Эфирный экстракт упаривают досуха и осадок растворяют в воде до образования 1%-ного раствора кислот. На лист фильтровальной бумаги ватман № 1 размером 20X30 см помещают три капли этого раствора и приготовляют вертикальную хроматограмму, пользуясь для элюирования смешанным растворителем, состоящим из 60 частей по объему пропанола, 30 частей концентрированной гидроокиси аммония и 10 частей воды. Хроматограмму проявляют 0,04%-ным раствором бромтимолового голубого с рН = 10 пятна кислоты имеют желтую окраску. Значение Rf для адипиновой кислоты равно 0,5, а для себациновой кислоты — 0,7. [c.121]

Основным условием для точного определения, выражаемого в абсолютных единицах, является точное отмеривание объемов пипеткой при нанесении. Об этом уже было упомянуто выше (см. стр. 98). Поскольку при работе с малыми объемами точность достигается лишь с большим трудом, в некоторых методах ограничиваются онределением относительного количества веществ, соответствеино рассчитывая абсолютные количества из результатов определения общего количества другим способом. При всех методах определения in situ результаты необходимо сравнивать с эталонными растворами, содержащими известные количества веществ, также подвергнутых хроматографированию. Иногда в качестве эталонов можно обойтись другими более доступными веществами, однако чаще всего оказывается необходимым сравнивать каждое пятно с пятном того же вещества в качестве эталона, что в случае редких веществ может оказаться неудобным. В тех способах, когда определяют вещество, вымытое из бумаги, в большинстве случаев также удобнее пользоваться эталонными образцами, так как при хроматографировании и элюировании могут наблюдаться потери. Поскольку условия, при которых протекает хроматографирование, проявление, а такяге элюирование, до некоторой степени меняются от хроматограммы к хроматограмме, оказывается необходимым сравнение с тгятнами эталонных образцов, подвергнутых одновременному хроматографированию на том же листе бумаги. Если определению предшествовало проявление или оно являлось составной частью определения, то следует обращать внимание на равномерность распределения реактива на хроматограмме и на равномерность темиературы в сушильном шкафу. Удобнее сравнивать образцы, хроматографированные на одном и том же листе, поэтому двумерная хроматография меиее пригодна для количественных определений, чем одномерная. [c.180]

Для полярографического определения из хроматограммы вырезают по данным контрольной хроматограммы пятно определяемого вещества. В исследуемой части бумаги не пользуются ника <ими способами обнарун е-ния кроме флуоресцентного. Для элюирования можно применять способы, приведенные на стр. 178. Измел1.ченная при элюировании бумага обычно не мешает полярографическому определению, и ее нет необходимости удалять. Неред М элюируют та шм агентом, который непосредственно служит в качестве основного электролита при полярографии. Если элюирующий агент не является электролитом, то к нему можно добавить подходящий эле тролит. В случае неорганических веществ вырезку из хроматограммы [c.190]

Пем и Фукс [2] для количественного оиределения разработали весьма остроумный способ, при котором флуоресцирующие пятна вырезают из хроматограммы и обрабатывают в пробирке раствором ге-диметиламино-бепзальдегида в серной кислоте, разбавленной таким количеством воды, чтобы бумага распадалась па отдельные волокна, но еще не подвергалась обугливанию (Я 124). Одновременно происходят и цветная реакция, и элюирование красителя из волокон целлюлозы. Раствор, окрашенный в синий цвет, фильтруют и фотометрируют. Точность определения равна точности фотометрического метода (4 4%). [c.547]

Пятна на бумажных хроматограммах могут быть обнаружены по их цвету, флуоресценции, с помощью химических реакций, которые происходят после опрыскивания бумаги различными реагентами, или по радиоактивности (рис. 8-9). Авторадиографическое обнаружение пятен с использованием рентгеновской пленки описано в гл. 6. Идентификацию обычно проводят путем сравнения с заведомыми образцами с известными величинами Rf или после элюирования. Элюирование сводится к вырезанию из бумаги зоны, содержащей пятно, с последующим промыванием се соответствующим растворителем элюирование обычно протекает ко-.инчественно. [c.184]

Смотреть страницы где упоминается термин Элюирование пятен с хроматограммы на бумаге: [c.114] [c.141] [c.107] [c.100] [c.159] [c.159] [c.166] [c.192] [c.135] [c.414] [c.79] [c.213] [c.447] [c.190] [c.165] [c.192] [c.163] [c.79] [c.223]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология