Хроматография углеводов смолой

Адсорбционная хроматография. В качестве адсорбентов используют как полярные вещества (окснды алюминия, магния, кальция, железа (III), сульфат и карбонат магния, гидроксид кальция, углеводы и др.), так и неполярные (активированный уголь, некоторые смолы). Для разделения нейтральных н основных растворов чаще [c.40]

Потребность в системах высокого разрешения, в которых использовались бы длинные колонки с тонкоизмельченной ионообменной смолой, привела к развитию ионообменной хроматографии высокого давления. В этом разделе мы рассмотрим две такие системы, применяемые для анализа физиологических жидкостей, чтобы показать, что методом ионообменной хроматографии можно проводить разделение очень сложных смесей. На рис. 8.9 показан анализатор для веществ, поглощающих в ультрафиолетовой области, а на рис. 8.10—анализатор углеводов, содержащихся в физиологических жидкостях. Анализаторы такого типа разработаны и тщательно проверены в клинических и исследовательских медицинских лабораториях [7]. [c.233]

Впервые разделение углеводов методом распределительной хроматографии на ионообменных смолах в смесях растворителей различной полярности было описано в 1952 г. [1]. В последние годы метод был значительно усовершенствован. В обзорной статье [2] приведены данные о влиянии ряда факторов на разделение, а также примеры использования метода. В качестве элюента при разделении сахаров и их производных наиболее пригоден водный спирт, и далее речь будет идти только об этом элюенте. [c.55]

Нами широко используется адсорбционная хроматография для выделения и очистки новых лекарственных веществ растительного происхождения. Так, с помощью хроматографического разделения на окиси алюминия удается выделять сердечные гликозиды в индивидуальном состоянии, выделять и разделять на отдельные компоненты некоторые кислородсодержащие гетероциклы применяя полиамидные смолы в качестве сорбента удается разделение водорастворимых соединений и, в первую очередь, соединений фенольной природы на целлюлозном сорбенте проводится очистка и разделение некоторых природных гликозидов, углеводов и аминосоединений. [c.166]

Ионообменная смола в боратной форме впервые была использована в работе [105]. В 1967 г. Кезлер [45] привел быстрый (4—6 ч) количественный метод ионообменной хроматографии углеводов на дауэксе 1-ХВ (ВО -форма, 200—400 меш), биораде АО 1-ХВ (ВО -форма) или техниконе 3/28/У1 В0 -- [c.89]

В ряде сообщений [42—45] и в обзоре [46] подробно изложены результаты изучения возможности фракционирования простых смесей моносахаридов и небольших олигосахаридов на катионообменных смолах, обычно в Li+-, К+-, Са +- или Ва +-фор-мах, при элюировании водой. В недавнем прошлом подобного рода анализы занимали много времени, но тем не менее не обеспечивали надежного разделения. Вследствие этого они представляли незначительный интерес, который, однако, существенно возрос вслед за введением в исследовательскую практику мелкодисперсных смол (с размером частиц 10—30 мкм), что позволило многократно повысить эффективность колонок. Поведение ряда сахаров и полиолов при хроматографии на смоле аминекс А-5 (Bio-Rad) в воде в зависимости от природы противо-иона было изучено с целью оптимизации условий их быстрого разделения на данной смоле (размер частиц 11 2 мкм) [47]. На основании результатов определения коэффициентов емкости был сделан вывод, что удовлетворительное разделение возможно при использовании в качестве противоионов Ag+, Са + и La +, причем катиониты в Са2+-форме представляют наибольший практический интерес. В настоящее время хроматография на катионообменных тонкоизмельченных смолах в Са2+-форме в воде становится еще одним стандартным методом ВЭЖХ углеводов [10, 28]. [c.16]

Полученные экстракцией или адсорбционным разделением концентраты гетероатомных соединений содержат примеси, глав ным образом моно- и бициклических аренов. Очистка от углеводо родов и разделение серусодержащнх соединений на группы осу ществляется вакуумной дистилляцией, адсорбционной хромато графией, ступенчатой реэкстракцией растворами серной кислоты [248], комплексообразованием с солями ртути или серебра Очистку и разделение азотсодержащих оснований проводят с по мощью ионообменной или адсорбционной хроматографии [249, 250]. Кислородные соединения (адсорбционные смолы) очищают от углеводородов и разделяют на классы методами адсорбционной хроматографии, вакуумной дистилляции и этерификацией борной кислотой [248]. Дальнейшие исследования гетероатомных соединений направлены на выявление преобладающего типа соединений в очищенных образцах или идентификацию индивидуальных соединений. [c.142]

Синтез 0-триметилсилиловых эфиров проводят следующим образом [90]. Раствор, доведенный до pH 4 при помощи ионообменной смолы типа амберлит IR-45, концентрируют до небольшого объема. В круглодонную колбу емкостью 50 мл вносят 0,5 мл гидролизата, содержащего 10—15 мг углеводов, и 0,5 мл 0,2%-ного раствора эритрита, смесь перемешивают, выпаривают досуха н выдерживают на водяной бане 30 мин при 50° С под вакуумом. Остаток в колбе растворяют в сухом пиридине. К раствору добавляют 0,4 мл гексаметилдиси-лазана, 0,2 мл триметилхлорсилана и энергично встряхивают в течение 30 сек. Приготовленный раствор вводят в колонку хроматографа при помощи микрошприца. Для количественного определения строят стандартные графики для каждого сахара. Для этого хроматографируют смесь, содержащую исследуемый моносахарид и эритрит в различных соотношениях. Измеряют площади соответствующих пиков, отношения площадей пиков моносахарида и эритрита выражают в виде функций отношений соответствующих весовых количеств. [c.82]

Бетге и др. [87] разработан количественный метод газовой хроматографии смеси, содержащей арабинозу, ксилозу, фукозу, маннозу, глюкозу и галактозу. Сущность этого метода заключается в следующем. Образец смеси, содержащий 10 мг углеводов, освобождают от воды и растворяют в пиридине. Уравновешивание различных форм углеводов ускоряется прибавлением перхлората лития в качестве катализатора. В раствор для получения триметил-силиловых эфиров моносахаридов прибавляют триметилхлорсилан и гексаметилдисилазан, затем пиридин удаляют выпариванием, а образовавшиеся эфиры растворяют в м-гексане. Раствор хроматографируют на колонках с бутандиолянтарным полиэфиром, нитросиликоновыми смолами и полифенилэфирами, нанесенными на твердый носитель. Полученные хроматограммы анализируют при помощи интегратора. Величины полученных пиков пропорциональны количествам присутствующих в смеси моносахаридов. Площади пиков используют для вычисления относительного содержания сахаров в смеси. [c.82]

Кеслер [45], сравнивая три анионообменные смолы в форме боратов, нашел, что для разделения углеводов техникон 3/28/VI значительно эффективнее, чем дауэкс 1-Х8 (200— 400 меш) и биорад АС 1-ХВ (30—40 мкм). При использовании смолы с более низкой степенью поперечной сшивки, например дауэкс 1-Х4, следует учитывать равновесие, которое достигается при увеличенных скоростях кроме того, значительно улучшается хроматографический режим разделения ди- и трисахаридов [47] (о методе такого разделения см. в разд. П1, В, Хроматография на ионообменной смоле в боратной форме). При использовании смолы с более мелкими и более однородными по величине частицами также увеличивается разделяющая способность, однако наиболее критическим параметром, влияющим на разделяющую способность, является, вероятно, ионная сила проявляющего буферного раствора [48, 49]. [c.69]

Орсин-сернокислотный метод был использован Кеслером [45] в хроматографии свободных углеводов на анионообменных смолах в боратной форме. Он использовался также для регистрации разделения продуктов гидролиза древесины и древесной пульпы на анионообменной смоле в сульфатной форме с применением в качестве подвижной фазы 92%-ного водного этанола [57]. Кроме того, орсин-сернокислотный реагент может быть полезен в автоматических анализах элюатов в гель-проникающей хроматографии полисахаридов [58]. Схематическое изображение этой системы с использованием ТесЬп1соп Аи1оапа1угег дано на рис. 22.4. Элюат после колонки вначале смешивают с 1%-ным водным орсином, а затем с 72%-ной серной кислотой. Реакционную смесь затем нагревают до 95 °С, охлаждают и измеряют поглощение образовавшихся продуктов при 420 нм [58]. Для этой цели используют двойной стеклянный змеевик длиной 24 м [c.72]

Собраны сведения о разделении фосфорорганическпх пестицидов, инсектицидов, стероидов, гиббереллинов, пигментов, сложных эфиров, пуринов, сахаров, мономеров и олигомеров в найлоне, тирнмидинов, фенолов, ароматических кислот, спиртов, алкалоидов, аминокислот, карбоновых кислот, смол, карбонильных соединений, амидов, пищевых консервантов, органических галогенпроизвод-ных, иодотирозинов и триглицеридов. Описано также разделение [68, 69] протеинов, ферментов, нуклеиновых кислот, углеводов, пептидов, липидов, гуминовых кислот, сырой нефти, полимеров, например полиэтилена, полибутадиена и ацетата целлюлозы. Гель-хроматография может быть применена для обессоливания растворов, для выделения лития из солевых рассолов [82], а также для удаления низкомолекулярных соединений из растворов высокомолекулярных веществ. [c.550]

Адсорбционная хроматография. В адсорбционной хроматографии используют как полярные, так и неполярные сорбенты. К неполярным адсорбентам откосятся активированный уголь, некоторые смолы, а к полярнымоксид железа (П1), оксид магния, сульфат магния, карбонат магния, оксид кальция, углеводы. Однако наибольшее применение находят активированный оксид алюминия (для разделения нейтральных и основных растворов) и силикагель (при хроматографировании кислых растворов). Чем больше адсорбированной воды содержит оксид алюминия, тем, меньше его активность. [c.24]

Хроматография на мелкодисперсной смоле в Са2+-фор.ме-прп элюировании водой находит также применение для быстрого разделения гомологичных олигосахаридов с СП до 6 или 7, т. е. содержащих до 6 или 7 углеводных остатков. Метод, рекомендуемый в качестве стандартного для анализа сбраживаемых сахаров (о-глюкозы, мальтозы и мальтотриозы) в пивном сусле-[10], позволяет разделить смесь о-глюкозы и мальтодекстринов, с СП до б за 20 мин [49]. Отличительной особенностью этого метода является использование колонки (300X7 мм), заполненной смолой аминекс 50 -Х4 (20—30 мкм) в Са +-форме при температуре 80 °С (применяется электрический нагревательный блок) углеводы элюируют-водой со 0,6 мл/мин. На [c.17]

Несколько прекрасных обзоров, посвященных этому методу и его применению для разделения углеводов, опубликовано в конце 60-х — начале 70-х годов [46, 58, 59]. В распределительной хроматографии существенную роль играют несколько факторов. Наиболее важным представляется характер распределения полярных молекул углеводов между подвижной фазой и смолой, где содержание воды больше, однако взаимодействия этих молекул с противоионами смолы и собственно матрицей также в значительной степени влияют на результат разделения. Все это обусловливает сложность механизма хроматографии и как следствие в некоторой степени непредсказуемость значений времен удерживания для различных сахаров. Как правило, значения коэффициентов распределения увеличиваются с ростом, числа гидроксильных групп в сахарах, однако в некоторых случаях наблюдаются исключения при хроматографии на анионообменной смоле в сульфатной форме о-талоза элюируется в-887о-ном этаноле раньше о-ксилозы [57]. При замене противоиона смолы нередко также происходит обращение порядка элюирования [56]. Значения коэффициентов распределения увеличиваются с ростом концентрации этанола и уменьшаются с повышением температуры, однако изменение перечисленных параметров обычно не сказывается на порядке элюирования сахаров с одной и той же смолы. [c.19]

Ионообменную хроматографию на колонках со смолами в боратной форме применяли для разделения и анализа не только сахаров, но и полиолов [84, 85]. Для этой цели использовали такую же хроматографическую систему [85], как и в случае разделения сахаров [78], но хроматографию проводили при более высокой температуре колонки (75 °С) и при большей скорости подачи буферов (70 мл/ч). Это обеспечивало разделение смеси, содержащей этиленгликоль, пять полиолов и два аминодезокси-полиола, за 4 ч [78]. С помощью анионообменной хроматографии в боратных буферах был успешно разделен ряд производных углеводов, в том числе несколько метилгликозидов [80], а также метиловые эфиры п-ксилозы, о-глюкозы и о-маннозы [c.23]