Ингибиторы ферментативных

Каталитические ферментативные реакции применяются не только для определения субстратов и ферментов, а также для определения активаторов и ингибиторов ферментативных реакций. Концентрацию субстрата можно определить и некинетическими методами, при этом реакцию проводят до конца, а затем делают необходимые измерения. [c.437]

Пользуясь представлениями модели ключа и замка , укажите, какими свойствами должен обладать ингибитор ферментативной реакции. [c.467]

ИНГИБИТОРЫ ФЕРМЕНТАТИВНОЙ АКТИВНОСТИ. ЯДЫ [c.350]

В некоторых случаях, когда присоединение к матрице может затронуть активный центр фермента, его стараются защитить добавлением в реакционную смесь субстрата или конкурентного ингибитора ферментативной активности. [c.347]

Многие синтетич. П., особенно основного характера, являются ингибиторами ферментативных нроцессов или обладают антибактериальными свойствами. Включение гидрофобных аминокислотных остатков в цепь П. нередко сильно увеличивает ингибирующее действие. [c.17]

Кон определил молекулярный вес единицы ферментного белка, содержаш его 1 активный центр, с помощью метода равновесного диализа ингибиторов ферментативного катализа, т. е. измерения количества белка, связывающего 1 моль ингибитора. Найденная им цифра молекулярного веса — 135 ООО. На самом же деле очищенный белок представляет собой гексамер этой элементарной единицы, т. е. имеет молекулярный вес 810 ООО. [c.486]

Изучение подавления активности ферментов служит одним из способов расшифровки механизма их действия. Подходом к решению последней задачи является изучение специфичности действия ферментов. В свою очередь, это требует корректного измерения кинетических параметров в присутствии изучаемого аналога субстрата. Рассмотрим способы определения характера взаимоотношений субстратов, их аналогов и ингибиторов ферментативной активности путем вычисления ряда кинетических параметров. [c.37]

Пример 15-Ж. Обнаружение конформационного перехода в ферменте при связывании субстрата. При добавлении к а-химо-трипсину ТНС флуоресцирует и, следовательно, должен с ним связываться. ТИС не является конкурентным ингибитором ферментативного гидролиза различных субстратов, так что он не может присоединяться к участку связывания субстрата. Однако добавление субстрата вызывает уменьшение флуоресценции. Это уменьшение могло быть результатом уменьшения связывания (ТНС флуоресцирует только в том случае, если он связан) или умень- [c.429]

Ингибиторы ферментативных каталитических реакций часта подразделяют на обратимо и необратимо действующие. Эта классификация основана на легкости отделения ингибитора от фермента при помощи физического метода типа диализа. Так, например, эзерин описан как обратимый ингибитор, в то время как фюсфор-содержащие соединения подобно диизопропилфосфофториду (ВРР) принадлежат к необратимым ингибиторам холинэстеразы. Однако, поскольку рассматриваются механизмы ингибирования, эта классификация только вносит неопределенность, так как из нее вытекает, что обратимые и необратимые ингибиторы действуют различным образом в действительности оба типа ингибиторов действуют, соединяясь с ферментом с образованием неактивных комплексов, обладающих весьма различными константами диссоциации . Необратимые ингибиторы образуют комплексы с очень малыми константами диссоциации и поэтому удаляются из комплекса путем диализа только очень медленно, тогда как обратимые ингибиторы образуют комплексы с высокими константами диссоциации и поэтому на всех стадиях удаления присутствует избыток несвязанного ингибитора, поддающегося диализу. Однако более полезным оказывается подразделение ингибиторов на конкурентные и неконкурентные (хотя многие ингибиторы обнаруживают смешанное поведение), так как эти ингибиторы действуют различными путями и кинетические уравнения для них разные. При конкурентном торможении ингибитор соединяется с тем же самым [c.121]

Регуляция глутамин-синтетазы Е со//-впечатляющий пример кумулятивного ингибирования по типу обратной связи. Напомним, что глутамин синтезируется из глутамата, NH4 и АТР (разд. 21.2). Глутамин-синтетаза состоит из 12 субъединиц с мол.массой 50 кДа каждая, уложенных в два параллельных гексагональных кольца (рис. 21.15). Этот фермент - ключевой регуляторный элемент метаболизма, поскольку он, как показали Эрл Стэдтман (Earl Stadtman) и его коллеги, регулирует поток азота. Амидная группа глутамина-источник азота в биосинтезе ряда соединений, например триптофана, гистидина, карбамоилфосфата, глюкозамин-6-фосфата, СТР и АМР. Глутамин-синтетаза кумулятивно ингибируется каждым из этих конечных продуктов метаболизма глутамина, а также аланином и глицином. Видимо, в молекуле этого фермента имеются участки связывания для каждого из этих ингибиторов. Ферментативная активность глутамин-синтетазы почти полностью подавляется при связывании всех восьми конечных продуктов. [c.245]

Встречаются ингибиторы ферментативных реакции, которые, строго говоря, не могут быть отнесены ни к обратимым, ни к необратимым ингибиторам. Речь идет об ингибиторах, которые при взаимодействии с ферментом образуют первоначально диссоциирующий комплекс, однако этот комплекс аналогично фермент-субстратному комплексу претерпевает дальнейшие химические превращения с образованием более прочных связей между ингибитором и ферментом и которые могут разрываться, например, под действием воды, с освобождением фермента и образованием продуктов распада ингибитора. Примером таких ингибиторов в отношении некоторых гидролаз эфиров карбоновых кислот могут быть производные М-алкилкарбаминовых кислот, которые до недавнего времени относились к обратимым ингибиторам. [c.80]

Хотя цитохром 2 катализирует разложение и других субстратов (а-окси-н-бутиратов, а-окси-н-капроатов, а-оксиизокапроатов), их концентрация в биогологических средах на несколько порядков ниже, чем концентрация молочной кислоты, поэтому мешающее влияние пренебрежимо мало. Ингибиторы ферментативной активности цитохрома 2. находятся в биологических средах также в очень низкой концентрации [485, 486] и мало влияют на нее. Большое число метаболитов с восстановительными свойствами, напримф мочевая кислота, глутатион, цистеин, адреналин, аскорбиновая кислота, р-аланин, окисляются или [Fe( N)g] , или на платиновом электроде, и их ток окисления складывается с током, соответствующим окислению молочной кислоты. Поэтому в присутствии этих метаболитов проводить определение молочной кислоты нежелательно. [c.169]

К многоцентровым белкам относится гемоглобин. Его молекула состоит из четырех полипептндных цепей двух типов и четырех функционально активных остатков гема, содержащих железо. В глицеральдегидфосфатдегидрогенезе на активную нативную молекулу фермента приходится четыре идентичных полипептидные цепи и четыре центра для связывания субстрата и фермента. Для таких регуляторных многоцентровых ферментов зависимости скорости реакции от концентрации субстрата, ингибитора или активатора не совпадают с зависимостями, рассмотренными выще. Скорость реакции в этих случаях сильнее зависит от концентрации субстрата, ингибитора или активатора. Зависимость скорости реакции от концентрации субстрата для такого типа ферментов часто выражается 5-образной кривой. Молекулы, стехиометрически не сходные с субстратом, могут выступать не только в роли ингибиторов ферментативного катализа, но и в роли активаторов. Поэтому часто молекулы, изменяющие скорость ферментативного катализа в ту или другую сторону (ускоряющие или замедляющие), называют эффекторами. [c.520]

Очень важны каталитические реакции в биохимическом анализе. Многочисленные химические реакции, получившие название энзиматических (ферментативных), катализируются энзимами (ферментами) — природными катализаторами процессов, протекающих в живых организмах. Выделить эти природные катализаторы трудно, иногда невозможно, поэтому о концентрации их судят прежде всего по их каталитическому действию, по степени ускорения ими соответствующей химической реакции. Механизм действия катализаторов такого типа очень сложен, но, по-видимому, стадия комплексообразования на одном или нескольких этапах энзиматических реакций все-таки обязательна. Часто действие отдельных ионов металлов в биохимических реакциях близко к действию энзимов (сложные органические реакции декарбоксилирования щавелевой и уксусной кислот катализируются ферментами и ионами двухвалентных марганца, цинка, кадмия, никеля и др.). Такие реакции могут быть использованы также для определения отдельных ионов металлов. Чувствительность их невелика, но они позволяют определять ионы с заполненной электронной рболочкой (кальций, цинк, кадмий и др.). Некоторые типы металлов действуют как активаторы или ингибиторы ферментативных реакций. Это свойство металлов тоже используется в аналитической химии. [c.46]

Биохимия. Из галоидозамещенных оротовых кислот наиболее эффективным ингибитором ферментативного превращения оротовой кислоты в уридин-нуклеотиды является 5-фтороротовая кислота [235]. Подавление дегидрооротазы и оро-тидин-5-фосфатазы, участвующих в синтезе уридин-нуклеотидов, установлено уже давно. [c.194]

НЫМ производным сахаров, которые далее могут использоваться в синтезе нуклеозидов, а также свободных дезоксифторсахаров. Оба типа соединений представляют несо.мненный интерес как возможные ингибиторы ферментативных реакций. [c.163]

Различают два больших класса ингибиторов ферментативной активности—конкурентные и неконкурентные—на основании того, ослабляется (конкурентное ингибирование) или не ослабляется (неконкурентное ингибирование) их ингибирующее действие при повышении концентрации субстрата. На практике многие ингибиторы не проявляют тех свойств, которые характерны для чисто конкурентного или чисто неконкурентного ингибирования. Другой способ классификации ингибиторов основывается на характере места их связывания. Одни из них связываются с ферментом в том же месте, что и субстрат (в каталитическом центре), а другие—на значительном расстоянии от активного центра (в ал-лостерическом центре). [c.88]

Свойства УДФ-дезоксигексоз как ингибиторов изучены в настоящее время подробно лишь на примере УДФГ-4-эпи-мераз [37]. Все эти соединения являются конкурентными ингибиторами ферментативной реакции. Их константы ингибирования сопоставлены в табл. 13 с константами Михаэлиса субстратов реакции. [c.192]

Структурная специфичность ЛВ по отношению к целевым биомакромолекулам (рецепторам) является необходимым, но недостаточным условием избирательности и интенсивности их действия. При постоянном числе рецепторов эффект препарата зависит от концентрации действующей субстанции, длительности действия, степени адаптации рецепторов, наличия конкурентных или неконкурентных ингибиторов ферментативных реакций и других вне- и внутриклеточных факторов. Любой из этих факторов может оказаться причиной отсутствия биологического эффекта высокоактивного препарата. Исследование закономерностей процессов, происходящих с введением в организм физиологически активном, в частности лекарственным, соединением, составляет предмет изучения фармакокинетики. К фармакокинетическим процессам относятся [c.74]