Акридинового оранжевого основание

Схема другого устройства с оптическим блоком детектирования представлена на рис. 15.3-1. В своей основе он состоит из устройства ввода с делением потока (контролирующего порции пробы, вводимой в колонку), самой колонки, специальной прокладки, удерживающей наполнитель в колонке, и ячейки детектора. Для достижения удовлетворительной чувствительности при детектировании, основанном на флуоресценции пробы, необходимо, чтобы длина оптического пути была порядка 1 мм. В связи с этим световой поток пропускают по всей длине канала детектора (для чего на внешнюю стенку наносят отражающее алюминиевое покрытие) и направляют в фотоумножитель через оптическое волокно. При общем объеме колонки 490 нл объем детектора составляет 2,3 нл. На рис. 15.3-3 представлен пример хроматографического разделения двух флуоресцентных красителей (флуоресцеина и акридинового оранжевого), реализованного менее чем за 1 мин. [c.643]

Основание акридинового оранжевого, основание [c.72]

Акридиновый оранжевый — основание [c.10]

Бис-(диметиламино)-акридин см. Акридиновый оранжевый — основание [c.82]

Правильность выделения специальной группы реовирусов стала очевидной, когда в начале 60-х гг. обнаружили уникальные особенности структуры реовирусной РНК. Сначала заметили, что при окрашивании клеток, зараженных реовирусами, акридиновым оранжевым наблюдается флуоресценция в зеленой области спектра (ортохроматическая), а не в оранжевой (мета-хроматическая), характерной для одноцепочечной РНК. Акридиновый оранжевый обладает высоким сродством к одноцепочечным нуклеиновым кислотам и окрашивает их метахроматически. Поскольку к тому времени уже было известно, что реовирусы содержат РНК, был сделан вывод, что эта РНК двухцепочечная [107]. Дальнейшие исследования показали, что реовирусная РНК состоит из комплементарных цепей, образующих двойную спираль [102, 157]. Для нее характерны высокая температура плавления и малый температурный интервал денатурации, устойчивость к панкреатической рибонуклеазе и иная, чем у одноцепочечной РНК, плавучая плотность. Определение нуклеотидного состава реовирусной РНК показало, что она содержит одинаковое число пуриновых и пиримидиновых оснований. Двухцепочечный характер реовирусной РНК был подтвержден также данными рентгеноструктурного анализа [16, 102]. [c.266]

При титрованиях, основанных на реакции диазотирования, в титруемом растворе часто содержатся ионы железа (III), например в тех случаях, когда определяемые ароматические амины получают восстановлением соответствующих нитросоединений металлическим железом. При этих титрованиях иодид-крахмальная бумага непригодна для установления конечной точки, поскольку Ге +-ионы реагируют с 1"-ионами аналогично азотистой кислоте. В таких случаях в качестве индикатора применяют 4,4 -диаминодифенилметан-2,2 -сульфон ( сульфон ) [10], который селективно реагирует только с азотистой кислотой (появляется неустойчивая синяя окраска). Вместо этого соединения можно применять акридиновый желтый, метаниловый желтый, сафранин Т и акридиновый оранжевый [И, 12]. Все названные вещества представляют собой так называемые капельные внешние индикаторы. [c.268]

Было изучено связывание молекул красителей [57], диамагнитных и парамагнитных ионов металлов [58—66] с нуклеотидами и нуклеозидами. При связывании акридинового оранжевого наблюдалось [57] смещение резонансных сигналов нуклеозидов и нуклеотидов в сильное поле, что, вероятно, обусловлено образованием смещанных агрегатов за счет стэкинг-взаимодействия оснований с красителем. Показано, что ионы Мп + и Со2+ связываются преимущественно с фосфатными группами АМФ и АТФ [58—66]. [c.423]

ДНК, могут существенно изменять кривые плавления, когда их молярная концентрация О в растворе значительно меньше молярной концентрации Р в растворе оснований, входящих в состав ДНК. К такого рода веществам относятся ионы тяжелых металлов (Си, Ре и др.), некоторые антибиотики (актиномицин) и кра.сители (акридиновый оранжевый, профлавин), некоторые белки. В качестве примера см. рис. 2.11, где приведена зависимость ДГ от концентрации белка рибонуклеазы. Существенно подчеркнуть, что скрепки связаны с ДНК межмолекулярными силами и за время опыта перераспределяются на молекуле ДНК, занимая при каждой температуре термодинамически наиболее выгодное состояние. [c.75]

Существенное уменьшение биологической активности в ряде случаев наступает на той стадии реакции, когда деградация полинуклеотидной цепи еще не обнаруживается. Например, облучение видимым светом РНК ВТМ в присутствии 8 10" М акридинового оранжевого в течение 30 мин приводит к исчезновению 95% инфекционности, однако коэффициент седиментации РНК при этом практически не изменяется. Вероятно, потеря биологической активности в значительной мере связана с деструкцией гетероциклических оснований нуклеиновых кислот. [c.683]

Некоторые красители акридинового ряда могут эффективно уменьшать выход УФ-индуцированных димеров в ДНК. Защитное свойство акридинов основано на их способности интеркалировать между парами оснований в молекуле ДНК. Характерная черта взаимодействия акридинов (например, акридиновый оранжевый) с ДНК заключается в том, что при образовании комплекса резко увеличивается интенсивность флуоресценции красителя в максимуме спектра при 530 нм. По мнению некоторых авторов, это может быть обусловлено синглет-синглетной миграцией энергии возбуждения с оснований ДНК на краситель. Расчеты показывают, что максимальный квантовый выход такой миграции энергии достигается при соотношении 1 молекула красителя/ 5 оснований, и составляет 32%. [c.438]

Помимо увеличения интенсивности флуоресценции тестом на связывание акридинов с ДНК может служить также изменение степени поляризации люминесценции, зависящей от подвижности молекул красителей. С помощью этого метода показано, в частности, что плоскость кольца акридинового оранжевого перпендикулярна длинной оси спирали ДНК и параллельна плоскостям оснований. [c.438]

Химические различия, выявляемые методами дифференциального окрашивания. Природа химических различий, выявляемых этими методами, еще только исследуется. Обычно обсуждаются две основные гипотезы так называемая ДНК-вая и белковая. Первая исходит из данных о том, что различные участки хромосом человека отличаются по количественному содержанию А—Т (аденин—тимин) и О—С (гуанин— цитозин) пар оснований. Акрихин-иприт связывается преимущественно с АТ-бога-тыми участками [466, 341]. Акридиновый оранжевый, соединяясь с одноцепочечной ДНК, дает красную флуоресценцию. После контролируемой денатурации К-сегменты окращиваются в красный цвет. На основании этих данных можно предложить [c.44]

Пример 15-П. Структура комплекса ДНК —флуоресцирующий хромофор пример определения ориентации красителя по поляризации флуоресценции. Флуоресцирующий хромофор акридиновый оранжевый прочно связывается с ДНК. Так как он является эффективным мутагеном, структура такого комплекса представляет некоторый интерес. Будучи связанным с ДНК, акридиновый оранжевый не подвергается некоторым свойственным ему химическим реакциям (например, реакции диазотирования), на основании чего можно предположить, что он каким-то образом располагается внутри двойной спирали ДНК. Будучи связанным с ДНК, акридиновый оранжевый флуоресцирует не только при возбуждении в области своей собственной полосы поглощения, но также при возбуждении светом, поглощаемым только основаниями ДНК, что указывает на перенос энергии от оснований. Квантовый выход при этом переносе энергии очень велик, так что акридиновый оранжевый (имеющий плоскую структуру) должен находиться очень близко от оснований. Известно направление плоскости поляризации флуоресценции акридинового оранжевого относительно плоскости его колец и длинной оси, так что, если бы систему лишить подвижности, можно было бы, измеряя плоскость поляризации флуоресценции по отношению к молекулам ДНК (используя свет, поглощенный акридиновым оранжевым, а не основаниями), определить ориентацию молекул акридинового оранжевого относительно ДНК. Флуоресценция акридинового оранжевого сильно поляризована, что указывает на значительное уменьшение подвижности. Если бы он в результате связывания не имел возможности перемещаться относительно спирали ДНК, следовало бы ожидать такую низкую подвижность, поскольку ДНК настолько сильно вытянута, что имеет очень низкий коэффициент диффузии. Недоступность диазотиро- [c.442]

Пример 15-С. Определение ориентации ДНК в хромосомах с помощью поляризации внесенной флуоресценции. В примере 15-П было показано, что флуоресцирующий хромофор акридиновый оранжевый интеркалирует между парами оснований ДНК и что его плоскость перпендикулярна оси спирали. Этот краситель также связывается внутри клеток с хромосомами эукариотов, С помощью флуоресцентного поляризационного микроскопа была измерена поляризация флуоресценции акридинового оранжевого относительно оси вытянутых хромосом, и эти данные были [c.443]

Ог может быть возбужден в результате процесса переноса энергии. В ином случае основания ДНК могут быть возбуждены и могут стать более чувствительными к окислению невозбужденным Ог. Акридиновый оранжевый и Ог могут образовать комплекс, который при возбуждении становится очень реакционноспособным. [c.559]

Красители основного характера, являюш,иеся производными акридина. Все эти красители являются аминоакридинами. Они обладают большим сродством к животному волокну (протеины), анионы которого (—СОО ) соединяются с красителем—сильным основанием (главным образом катионы). Связь, в таких солевых звеньях, очевидно, увеличивается за счет сил Ван-дер-Ваальса. Для крашения шелка и шерсти эти красители применяются редко, так как их выкраски неустойчивы к свету. Окрашенная кожа на свету не выцветает, и потому значительная часть всей продукции акридиновых красок направляется в кожевенную промышленность. Они дают оранжевые и оранжево-коричневые тона на мездре окрашенной кожи и обычно применяются для окраски поверхности дешевых сортов кожи. В этой отрасли кожевенно-красильной промышленности, где вообще предпочитают анионные красители, не имеется примеров использования анионных акридиновых красителей ( кислых или прямых ). [c.418]

Азур-эозин по Романовскому Акридиновый желтый Акридиновый оранжевый Акридиновый оранжевый — основание Альд1чид-фуксин по Габу [c.685]

Для гистохимического и цитохимического обнаружения нуклеиновых кислот в живых клетках (обзоры и монографии — см. ) используют обычно характерное УФ-поглощение нуклеиновых кислот и специфические цветные реакции, основанные на высвобождении восстанавливающих групп остатков 2-дезоксирибозы при мягком кислотном гидролизе (реакция Фельгена для ДНК) или на способности полинуклеотидов образовывать комплексы с основными красителями (реакция Браше для РНК люминесцентные методы, основанные на взаимодействии с акридиновым оранжевым). Весьма существенным признаком, который позволяет надел<но идентифицировать вещество, дающее упомянутые выше реакции на срезе ткани, как ДНК или РНК, является исчезновение характерного УФ-поглощения или цитохимической реакции после обработки среза препаратами нуклеаз — ферментов, катализирующих расщепле- [c.28]

На основании данных по биологической инактивации ДНК (например, потере инфекционности) можно расположить красители по уменьщению фотодинамической активности в ряд тиопиронин, рибофлавин > метиленовый синий > акридиновый оранжевый > [c.682]

Эухризин зК (основание акридинового оранжевого) (СНз)аК N К(СНз)г Ч/ А СН 8,4-10,4 Оранжевая — зеленая [c.193]

По-видимому, эти углеводороды по механизму своего действия относятся к тому же классу, что и акридиновые красители (см. стр.. 412), которые непосредственно связываются с ДНК, образуя комплексы весьма своеобразной структуры. Физические исследования комплексов, в особенности рентгепоструктурный анализ, показали, что молекулы таких веществ, как профлавин, акридиновый оранжевый, упаковываются между парами пуринов и пирими-дипов, образуя перемежающиеся слои. При этом нарушается нормальная структура спирали Крика—Уотсона. Спираль несколько растягивается в длину, чтобы в ней могли уместиться между слоями оснований дополнительные слои молекул красителей. Подобные комплексы — примеры так называемых соединений включения [c.405]

Теоретическая обработка результатов по тушению фосфоресценции и ее временам жизни (тфосф), а также данные ЭПР показали, что за время жизни триплетного состояния нуклеотидов в полиадениловой кислоте (2,4 с) энергия возбуждения делокализуется в пределах 100 оснований. Сходную информацию дают проведенные Галли опыты с комплексами ДНК—акридиновый краситель. Исследовалась зависимость интенсивности замедленной флуоресценции (альфа-фосфоресценции) акридинового оранжевого от интенсивности возбуждаю-н его света, адресуемого не красителю, а основаниям. Оказалось, что при увеличении интенсивности возбуж- [c.225]

Если исследователь располагает большим количеством лиофилизированной ткани, целесообразно растереть ее н взвесить столько, сколько нужяо для выделения ДНК, учитывая вес добавленной окиси алюминия. Эффективное разрушение клеточной стенки, вероятно, представляет собой ключевой фактор успешного выделения ДНК, и в связи с этим необходимо следить за тем, чтобы растирание проводилось тщательно. Респиратор необходим для предотвращения вдыхания окиси алюминия, что может иметь вредные последствия. Особенно важно удалить все водянистые ткани, которые затрудняют растирание и в любом случае содержат мало ДНК. Механическая гомогенизация, например, в кoфe foлкe не столь эффективна, как в ступке, однако может применяться в самом начале процедуры растирания. Можно проконтролировать степень разрушения растительной ткани путем насыщения образцов водой и исследования их под микроскопом для выявления неразрушенных клеток. Неразрушенные ядра на любой стадии выделения удается выявить, окрашивая препараты акридиновым оранжевым (приложение 2[УП], ). Метод, основанный на использовании СТАВ-буфера можно применять и в работе со свежим растительным материалом (разд. 4.3.2.2), а также для выделения ДНК из органелл (разд. 4.4.1.3). [c.243]

Пример 2-И. Поляризационно-флуоресцентная микроскопия. Известно, что акридиновый оранжевый способен интеркалиро-вать между парами оснований ДНК. Плоскость поляризации флуоресценции акридинового оранжевого известна, а отсюда известен и угол поляризации флуоресценции относительно оси спирали ДНК. Акридиновый оранжевый прочно связывается с хромосомами, как полагают, за счет связывания с ДНК. Поэтому поляризация флуоресценции хромосом дает возможность установить ориентацию молекулы ДНК относительно хромосомы. [c.55]

Пример 13-Г. Доказательство методом вискозиметрии того, что некоторые веи ества могут внедряться между гетероциклическими основаниями ДНК. Краситель акридиновый оранжевый 1Трочно связывается с двухцепочечной ДНК- Коэффициент седиментации (гл. 11) комплекса уменьшается по сравнению с коэффициентом седиментации свободной ДНК это уменьшение может быть результатом либо деполимеризации, либо увеличения коэффициента трения, благодаря увеличению осевого отношения. Если уменьшение коэффициента седиментации обусловлено деполимеризацией, то [т]] должно понизиться, а если оно обусловлено увеличением коэффициента трения, то величина [т]] повысится. Экспериментально установлено, что величина [г ] комплекса больше, чем для свободной ДНК, так что осевое отношение комплекса должно быть больше, чем у свободной ДНК. Следова- [c.376]

Вышеуказанные методы не нашли широкого применения и потому, что был разработан более простой и более информативный способ определения активности рестриктаз, основанный на разделении продуктов реакции — фрагментов 3,НК, различающихся по длине, электрофорезом в агарозных гелях. В первых вариантах применения этого метода визуализацию разделенных фрагментов ДНК проводили авторадиографией [1821 или путем окрашивания акридиновым оранжевым [271]. Апробация с этой целью этидиума бромистого, дающего при освещении гелей УФ светом флуоресцирующие зоны ДНК, Шарпом с сотр. [241] продемонстрировала высокую чувствительность обсуждаемого способа детекции ДНК и способствовала повсеместному применению электрофоретического метода для оценки активности рестриктаз. [c.127]

Справочник по аналитической химии (1979) -- [ c.271 ]

Справочник по аналитической химии (1975) -- [ c.195 ]

Справочник по английской химии (1965) -- [ c.193 ]

Справочник по аналитической химии Издание 4 (1971) -- [ c.195 ]

Справочник по аналитической химии Издание 3 (1967) -- [ c.193 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология