Ионная сила и растворимость белков

При высокой ионной силе белкового раствора наблюдается конкуренция между белковыми молекулами и ионами соли за молекулы воды. Степень гидратации белка снижается, взаимодействие белок—белок при этом становится эффективнее, чем белок—вода, и белок осаждается. Растворимость многих белков при этом связана с ионной силой раствора следующим уравнением [c.53]

Правило фаз и фазовые диаграммы были с успехом использованы при изучении растворимости белков. Кривые растворимости оказались особенно полезными при определении чистоты белковых препаратов. Среди различных используемых в белковой химии физических критериев чистоты, включающих гомогенность при ультрацентрифугировании или при электрофорезе, критерий постоянства растворимости белка остается основным надежным показателем, если только белок не полимеризовался и не образовал прочных комплексов с другими компонентами смеси. На растворимость белка в данном растворителе влияют многие факторы наиболее важными из них являются ионная сила, температура и pH. [c.161]

Миофибриллярные белки составляют 50—60% общего количества белков мышечных клеток. При низкой ионной силе эти белки нерастворимы, а при повышении ее до 0,3 становятся растворимыми и могут быть экстрагированы. Главный белок мышцы. миозин составляет основу толстых нитей. Другой белок, актин, является главной составной частью тонких нитей (рис. 4-7). С нитями актина связаны регуляторные белки мышцы — тропомиозин и тропонин [84], а в Z-пластинке имеется а-актин. Не так давно в составе М-линий обнаружен белок, который был назван ]У -белком [85]. [c.318]

Показано, что при обработке спермы и ядер НММ увеличивается выход ДНП из клетки и существенно повышается его растворимость в низких ионных силах за счет лабилизации связи ДНК — белок. [c.352]

Весьма вероятно поэтому, что в осуществлении тонической деятельности гладких мышц наиболее важную роль играют именно миофибриллярные белки, растворимые в солевых средах с низкой ионной силой, особенно тропомиозин или второй недавно открытый водорастворимый миофибрил-лярный белок. [c.424]

Из того факта, что наиболее важный член выражения для щ пропорционален 2 , следует, что растворимость белков при постоянной (низкой) ионной силе должна быть минимальна в изоэлектрической точке и должна повышаться с увеличением заряда. Найдено, что это обычно имеет место (типичные данные приведены на рис. 68), если в кристаллической фазе белок не является солькх типа Р Хг- Такие кристаллы будут иметь минимальную растворимость, когда ионы белка в растворе несут заряд 2. [c.283]

Растворяющее действие солей особенно четко проявляется в тех случаях, когда белок нерастворим в дестиллированной воде. Так эвглобулины сыворотки крови или растительные глобулины нерастворимы в воде, но легко растворяются после добавления хлористого натрия к суспензии белка в воде. Способность нейтральных солей стимулировать растворение белков объясняется электростатическим взаимодействием между их ионами и заряженными группами белка [37]. Как упоминалось в гл. V, растворы белка в изоэлектрической точке содержат не только изоэлектрические молекулы Р с нулевым свободным зарядом, но также анионы и катионы белков с формулами Р , Р , Р. .. и Р+, Р++,. .. Растворимость этих ионов выше, чем растворимость белка в изоэлектрической точке [36]. Так, например, вычисленная растворимость незаряженных молекул карбоксигемоглобина лошади равна г па л воды при ионной силе, равной нулю, в то время как истинная растворимость смеси незаряженных и заряженных молекул составляет 17 г на 1 л [36]. Количество ионизированных молекул белка увеличивается не только при добавлении кислот или оснований, по также и при добавлении нейтральных солей [36]. Это увеличение может быть причиной повышения растворимости белков, т. е. причиной растворяющего действия солей. Нет необходимости считать, что при этом образуются постоянные прочные связи между ионами белка и ионами добавленных солей [37]. Вероятно, каждая из ионных групп белка окружается, в силу ее электростатического действия, атмосферой солевых ионов противоположного знака. Трудно решить, ведет ли это к образованию постоянных связей между белком и неорганическими ионами (см. гл. V). [c.113]

Вместе с тем феномен значительной радиочувствительности структурированных растворов ДНП или конденсированных систем ДНП, находящихся в нерастворимом состоянии, был отмечен в ряде исследований. Так, Эррера [24] установил, что при дозах 10 р значительно снижается жесткость нуклеопротеид-ного геля, экстрагированного из эритроцитов цыпленка, причем этот эффект зависит от температуры. Розенталь и другие [33] наблюдали частичное отделение гистона в суспензии нуклеопротеидных волокон при физиологической ионной силе среды. В этом случае при дозах (5—15) 10 р наблюдался выход 20— 30% растворимой ДНК- Кол и Эллис [21] в довольно сходных экспериментах нашли, что способность нуклеопротеидных волокон, выделенных из селезенки крыс, к набуханию в воде уменьшается, если облучать их в виде суспензии в 0,14 М растворе Na l. Эти же авторы показали, что при действии трипсина на ДНП, облученного дозой 850 р, количество ДНК, выделенной из комплекса, было большим, чем в случае необлученного нук-леопротеида. Авторы трактуют найденный ими эффект как следствие лабилизации связей ДНК — белок под действием радиации. Повышенный выход ДНК под действием трипсина после [c.13]

Когда два белка находятся в растворе при pH, лежащем между их изоэлектрическими точками, один компонент несет положительный, а другой — отрицательный заряды и таким образом они стремятся осадить друг друга. Уже давно было признано, что это явление налагает ограничения на любой метод фракционирования белков. Были разработаны специальные методы, использующие такие взаимодействия для выделения группы белков из сложных смесей. Эти группы могут быть подвергнуты дальнейшему разделению путем повторного фракционирования с использованием э.тектролитов большей ионной силы или в присутствии биполярных ионов, т. е. в условиях, при которых взаимодействия между макромолекулами растворенного вещества сводятся к минимуму [197]. В другом методе разделения белков в межизоэлектрической области используется синтетическая полимерная кислота, которая вытесняет анионные компоненты из комплекса с катионным белком [198, 199]. Соотношение между растворимостями в системе, содержащей полимерную кислоту и белок ниже их изоэлектрической точк11, иллюстрируется на примере системы иолимета-криловая кислота — альбумин бычьей сыворотки (рис. 18). Следует отметить, что избыток полимерной кислоты приводит к повторному растворению осадка, появление которого указывает на образование отрицательно заряженных комплексов. Кривые растворимости не зависят от длины цепи [c.82]

Белки яичного белка фракционируют осаждением этанолом (различные концентрации), изменением ионной силы (/), изменением величины рИ и температуры методом, аналогичным методу Кона для белков плазмы [16]. Конечную надосадочную жидкость (pH 4,6, температура —15°, I = 0,04, фракция, полученная при 0,11 М насыщении этанолом), содержащую овомукоид, концентрируют, диализуют и сушат вымораживанием. Полученный белок авторы не анализировали, и впоследствии было показано, что он содержит примесь гликопротеина (13,6% гексоз, 13,8% гексозамина и 3% сиаловой кислоты), который но обладает ингибирующей активностью по отношению к трипсину [17]. Этот гликопротеин был выделен методом хроматографии на геле фосфата кальция он оказался сходен с овомукоидом по изоэлектрической точке, константе седиментации и растворимости и, вероятно, мог присутствовать в препаратах овомукоида, по.лучепных другими методами. [c.25]

Хорошо известно свойство белков связываться с полиэлек-тролитными носителями множественными солевыми связями. Особый интерес представляют комплексы, растворимые только при определенных значениях pH [113]. Однако обычно область осаждения таких комплексов растянута, в то время как для медицинского применения желательно иметь по возможности узкий интервал осаждения, расположенный в области физиологических значений pH. Пути к получению таких полимер-белковых соединений связаны с нестехиометрическими полиэлектро-литными комплексами, содержащими белок в дефектах структуры [114]. Так, ферменты пенициллинамидаза и алкогольде-гидрогеназа ковалентно связаны с одним из компонентов комплекса— поликатионом, а полианион защищает молекулы ферментов, разместившиеся в дефектах комплекса. В качестве полианиона была использована полиметакриловая кислота с Мш= =260 тыс., в качестве поликатиона — сополимер 4-винил-1-этил-пиридиния с 5—10% 4-ВИНИЛ-1-(2-гидроксиэтил) пиридином Мш = 40 тыс., к которому триазиновым методом был присоединен фермент. В зависимости от pH и ионной силы раствора комплекс, содержащий фермент, может существовать в трех состояниях — А, Б и В. Первое из них А — нестехиометрический комплекс с ядром стехиометрического состава и общим [c.191]

Реннин, вызывающий свертывание молока, необходим детям, так как они питаются почти исключительно молоком. В силу своей жидкой консистенции молоко могло бы быстро пройти через желудок, не успев подвергнуться действию пепсина. Однако реннин успевает превратить казеин (белок молока) в растворимый параказеин. Присутствующие в молоке ионы кальция, соединяясь затем с параказенном, образуют нерастворимый комплекс — молочный сгусток. Коагулированный таким образом белок молока остается в желудке дольше. [c.366]

В липопротеинах связь между липидами и белком осуществляется за счет взаимодействий различной природы адсорбционных (белок адсорбируется на поверхности липида, повышая растворимость и термическую устойчивость последнего) гидрофобных (между неполярными фрагментами молекул липида и белка) ион-дипольных (когда липид представлен фосфолипидом, способным к ионизации). Чаще всего в липопротеинах действуют комбинированные силы, способствующие образованию в высшей степени упорядоченных структур. В живых организмах липопротеины выполняют транспортную (перенос белком липопростетической группы), ферментативную, гормональную функции. [c.89]