ДНФ-производные гидразидов аминокислот

Гидразиды аминокислот удаляют реакцией с бензальдегидом, изо-валериановым и другими альдегидами, а находящуюся в водной фазе С-концевую аминокислоту анализируют методами хроматографии или электрофореза на бумаге и в тонком слое или с помощью аминокислотного анализатора. Смесь, получаемую после гидразинолиза, можно обрабатывать динитрофторбензолом или дансилхлоридом. Это дает возможность идентифицировать С-концевые аминокислоты в виде ДНФ- (с. 145) или ДНС-производных (с. 148). [c.156]

Для образования солей с такими производными аминокислот, как эфиры, амиды, гидразиды и нитрилы, в качестве оптически активных вспомогательных веществ успешно применяют винную кислоту, дибензоил-о-винную кислоту или о-камфорсульфокислоту. [c.53]

До настоящего времени этот метод остается наиболее распространенным для синтеза гидразидов аминокислот и пептидов, в методику внесено много усовершенствований. Побочные реакции, в частности образование амида, сведены к минимуму за счет применения низкой температуры (ниже —25°С) и использования органического нитрита вместо азотистой кислоты [99]. При низкой температуре снижается также риск перегруппировки азида по Курциусу, Это потенциальное серьезное осложнение, поскольку получающийся при этом изоцианат может взаимодействовать с аминокомпонентой, давая производные мочевины схема (47) , очень по-—СОМНСНр СОМз —> —С0 НСНР М=С = 0 > [c.402]

Акабори разработал химический метод определения С-концевых групп при нагревании белков с безводным гидразином [1, 122]. Пептидные связи расщепляются с образованием гидразидов аминокислот, а С-концевые остатки отщепляются в виде свободных аминокислот. При последующей обработке бензальдегидом гидр-азиды превращаются в дибепзилидеповые производные, а свободные аминокислоты идентифицируются при помощи бумажной хромато- [c.405]

Наличие тритильной группы существенно осложняет синтез пептидов на основе использования тритиламинокислот. Эфиры тритиламинокислот, за исключением производных глицина, не превращаются в соответствующие гидразиды [1006, 1096, 2668]. Попытки Изелина [1096] обойти эти трудности путем избирательного тритилирования гидразидов аминокислот также оказались безуспешными. Однако эфиры тритилпептидов уже [c.79]

Реакция с безводным гидраанном. Реакция с безводным гидразином является единственным химическим методом определения С-концевых аминокислот, который во многих случаях дает достоверные результаты. Два остальных метода — восстановление гидратами металлов и тиогидантоиновый метоД — дают, как правило, невоспроизводимые и недостоверные результаты. Метод предложен Акабори в 1952 г. Белок нагревают с гидразином (безводным) в запаянной ампуле при 100—120° в течение 8—10 часов. При этом происходит расщепление белка—гидразинолиз, в результате чего все аминокислоты, кроме С-концевой, образуют гидразиды. Обработкой бензальдегидом гидразиды аминокислот переводят в нерастворимые производные, которые удаляют фильтрованием. Свободные же С-концевые аминокислоты определяют хроматографически. [c.72]

Метод основан на открытии Акабори с сотрудниками [13], которые показали, что при обработке белка безводным гидразином С-кон-цевые аминокислоты отщепляются в свободном виде. Все другие аминокислоты, участвовавшие в образовании пептидных связей, превращаются в гидразиды аминокислот, которые могут вступать в реакцию конденсации с бензальдегидом с образованием дибензаль-ных производных, нерастворимых в воде. С-концевые аминокислоты, остающиеся в водном растворе, можно идентифицировать каким-либо из известных методов. [c.190]

По более усовершенствованной методике отщепившиеся аминокислоты превращают путем динитрофенилирования в соответствующие ДНФ-производные, а гидразиды аминокислот — в ди-ДНФ-производные. Например, 1 мкмоль белка гидролизуют примерно с 1 г безводного гидразина (99—100%) при 100° в течение [c.191]

Как было указано выше, основные функции, имеющие константу диссоциации вплоть до 10 удобно определять титрованием кислотой в водных растворах. Развитие техники неводной титриметрии значительно расширило область анализа основных функций. Ниже перечислены типы органических соединений, которые были определены как основания в неводных средах амин > , кeтимин алкалоид 215-218 Ы-гетероциклическое соединениеосновная ионообменная смола амид карбоновой кислоты 2 , мочевина , гидразид аминокислота соль амина со слабой кислотой 231, гидрогалогенид амина нитрат амина з2, карбоксилат щелочного металла 234, тиолтиомочевина сульфамид сульфоксид , производное фосфина В качестве титрантов для всех соединений, кроме последнего, использовали раствор хлорной кислоты, а производное фосфина титровали соляной кислотой. [c.401]

Активированными амидами являются также производные 3,5-диме-тилпиразола, которые можно получить при взаимодействии гидразида аминокислоты с ацетилацетоном [c.110]

Отделение свободных С-концевых аминокислот от смеси гидразидов аминокислот следует проводить быстро, так как гидразиды малоустойчивы и в присутствии воды легко превращаются в свободные аминокислоты. Чувствительность определения зависит от метода разделения и чувствительности детектора. В первоначальном варианте к водному раствору гидразидов аминокислот добавляли свежеперегнанный бензальдегид, который превращал гидразиды аминокислот в маслянистые дибен-зали, легко отделяемые от свободных аминокислот путем центрифугирования [1]. Однако при однократной обработке бензаль-дегидом гидразиды аминокислот отделялись не полностью. Изменение методики и использование изоамилового альдегида [2], энантового (гептилового) альдегида [9], а также /г-нитро-бензальдегида [66] не дали заметного улучшения. Гидразиноли-зат обрабатывали 2,4-динитрофторобензолом (ДНФ), что привело к образованию нейтральных ди- и три-ДНФ-производных, которые легко отделяются от кислой моно-ДНФ-С-концевой аминокислоты путем экстракции этилацетатом и диэтиловым эфиром [46]. Кислые ДНФ-производные идентифицировали методом двумерной бумажной хроматографии [53]. Можно обрабатывать гидразиды сначала бензальдегидом, потом ДНФ-бен-золом, а затем уже проводить экстракцию [65]. С-Концевую ДНФ-аминокислоту определяли методом бумажной хроматографии. [c.494]

Японский химик Акабори (1952) предложил способ определения С-концевого (карбоксильного) остатка аминокислоты. Пептид или бе-ЛО К нагревают 10 ч с безводным гидразином при 105 °С. При этом все аминокислоты, кроме С-концевой, превращаются в соответствующие гидразиды, которые отделяют от С-концевой аминокислоты в виде бензилиденовых производных. Применение метода иллюстрируется на примере анализа трипептида [c.691]

Преимущество этого метода в том, что нет необходимости получать производные, однако чувствительный к окислению энантиомер разрушается, а некоторые аминокислоты невосприимчивы к атаке. Оксидазы -аминокислот найдены в некоторых змеиных ядах, а их О-аналоги — в почках млекопитающих. Разумеется, ферменты можно использовать как для получения производных,, так и для фрагментации субстратов. В 1937 г. Бергман и Френ-кель-Конрат обнаружили, что папаин катализирует образование пептидной связи первым примером явилось образование анилида из Л/-бензилоксикарбонилглицина. Этот фермент специфичен для -аминокислот, было обстоятельно изучено образование арилгидра-зидов из рацемических Л/-ациламинокислот. Одна из трудностей состояла в том, что в некоторой степени затрагивался и О-энан-тиомер, одиако в результате исследования множества замещенных арилгидразидов в настоящее время установлено, что о-фторфенил-гидразин приводит к гидразидам, содержащим 99,9 % аминокислот в качестве стандартной аминокислоты используется аланин [50]. (Для сравнения, фенилгидразин дает только 88,2% -фенил-гидразида.) Этот метод сейчас используется для практического раз- [c.245]

При этом анализу подвергают отщепляющуюся аминокислоту или непосредственно ее фенилтиогидантоин. Указанный принцип положен в основу работы секвенсоров, автоматически определяюш их аминокислотную последовательность в пептидных фрагментах, получаемых ферментативным расщеплением исследуемых белков. По Сэнджеру концевую аминогруппу П. маркируют 1-фтор-2,4-динитробензолом, подвергают П. гидролизу и определяют динитрофенильные производные аминокислот. С-Концевую аминокислоту можно отщепить с помощью карбоксипептидазы. Используют также полный гидразиполиз пептида. При этом все аминокислоты, кроме С-концевой, выделяются в виде гидразидов. Применяют также масс-спектрометрич. определение аминокислотной последовательности в П. Сведения об оптич. чистоте П. могут быть получены исследованием их атакуемости природными ферментами. [c.15]

Как показывает опыт, в среде органических растворителей можно определять первичные, вторичные и третичные алифатические и ароматические амины, а также их смеси, основания Шиффа, первичные амины ряда сульфамидов, органические основания, содержащие гетероциклический азот пурин, пиридин, тиазол, гид-разоны, гидразиды, оксазолины, триазолы, ниразолоны, хиноли-ны, бензимндазолы и их производные, а также алкалоиды и их смеси, ряд органических кислот, которые в среде протогенных растворителей проявляют основные свойства, например, пиридинкарбоновые и аминокислоты нитро-, галоген- и аминопроизводные карбоновых кислот, фенолы и их производные, енолы, имиды, тиолы, амиды, меркаптаны, соли алифатических аминов и нитросоединения.Нанример, динитробензол титруется как двухосновная, а пикриновая кислота как трехосновная кислоты в среде этилендиамина. В среде неводных растворителей титруют также спирты и углеводороды, смеси карбоновых кислот с фенолами и минеральными кислотами и т. д. [7]. [c.296]

Этот метод синтеза грег-бутилоксикарбонильных производных применим не для всех аминокислот. Поэтому Швицер и сотр. [2036] предложили использовать грег-бутилоксикарбонил-азид. Указанный реагент, также впервые описанный Карпино и сотр. [465, 465а], получают из фенилового эфира грет-бутилугольной кислоты через соответствующий гидразид. Азид представляет собой вполне устойчивое соединение и перегоняется в вакууме без разложения. Его можно получить аналогичным путем из более доступного п-нитрофенилового эфира. Ацилирование проводят в диоксане или в смеси диоксана с водой в присутствии окиси магния или едкого натра в качестве основания. Реакцию ведут при 40—50°, причем для ее завершения часто требуется не менее 24 час [866, 2036]. [c.69]

В случае эфиров высших пептидов гидразинолиз часто протекает значительно быстрее, чем щелочной гидролиз [1059]. Другим преимуществом гидразидов N-защищенных аминокислот и пептидов является их способность легко кристаллизоваться. Поэтому часто неочищенные эфиры N-защищенных аминокислот и пептидов сразу превращают в соответствующие гидразиды, очистка которых обычно не представляет никаких трудностей. В то же время, по данным Цана и Шнабеля [2637], неочищенные гидразиды относительно мало устойчивы если гидразиды не удается непосредственно получить в чистом виде, то их можно выделить в виде соответствующих изопропилиденовых [692,2719] или бензилиденовых производных [2173]. Алкилиденовый остаток не рекомендуется удалять до перевода гидразида в соответствующий азид, поскольку эта защитная группировка легко отщепляется в кислой среде в условиях реакции нитрозирования [2719]. [c.122]

Имеется очень мало данных о возможности получения гидразидов из соответствующих N-защищенных аминокислот или пептидов путем ацилирования ими гидразина или его производных. Можно указать лишь на работу Клеэ и Бреннера [1255], которые применили для этой цели имидазолидный метод. Однако [c.123]

НОЙ кислоте (30 мин) [457] или хлористым водородом в трифторуксусной кислоте [1962]. При реакции с хлористым водородом в ледяной уксусной кислоте наблюдали образование 0-ацетил-серина. Каллахан и сотр. [457], Шрёдер [1962], а также Вюнш и йенч [2597в] описали другие производные О-трег-бутил-ь-серина Ы-карбобензокси-О-трет-бутил-ь-серин, соответствующий гидразид, свободный О-т-рег-бутил-ь-серин, а также хлоргидрат метилового эфира этой аминокислоты. [c.279]

Реакция ненасыщенных оксазолонов с гидразингидратом протекает сложнее, чем с органическими аминами. Долгое время строение получаемых при этом соединений не было выяснено и только после их спектрального изучения " было установлено, что при взаимодействии ненасыщенных оксазолонов с гидразингидратом образуются гидразиды ненасыщенных ацилированных аминокислот и продукты их дальнейшего превращения— производные пиразолидона [c.179]

С целью модификации свойств целлюлозы нами были получены некоторые новые производные целлюлозы и карбоксилсодержащих полисахаридов (карбоксиметилцеллюлозы и альги-новой кислоты), а именно — эфиры целлюлозы с аминокислотами, эфиры целлюлозы с хлоралкановыми кислотами, гидразиды альгиновой кислоты, амиды альгиновой кислоты и N-зaмeщeнныe амиды альгиновой кислоты и карбоксиметилцеллюлозы, привитые сополимеры карбоксиметилцеллюлозы п полиамидов. [c.302]

Смотреть страницы где упоминается термин ДНФ-производные гидразидов аминокислот: [c.84] [c.122] [c.192] [c.84] [c.122] [c.637] [c.139] [c.354] [c.15] [c.70] [c.104] [c.121] [c.122] [c.123] [c.167] [c.226] [c.248] [c.253] [c.369] [c.70] [c.104] [c.121] [c.122] [c.123] [c.167]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология