Зонная методом в клетке

Этот метод широко применяется для локализации радиоактивного материала в клетке, срезе ткани или на пластине геля после электрофореза смеси макромолекул. Для регистрации радиоактивных зон на исследуемый образец накладывают рентгеновскую пленку, в которой под действием радиоактивного излучения из бромида серебра образуется металлическое серебро. Засвеченные участки, соответствующие радиоактивным зонам, наблюдаются визуально после проявления пленки. Одним из вариантов радиоавтографии является флюорография. В этом случае в исследуемый образец импрегнируют сцинтиллятор и вновь накладывают рентгеновскую пленку. Метод основан на том, что низкоэнергетические Р-частицы, образующиеся при распаде изотопа (например, трития), взаимодействуют с молекулами сцинтиллятора, при [c.65]

Применяют различные методы. На предметное стекло наносят 1—2 петли жидкой туши и петлю исследуемых бактерий. Жидкости тщательно смешивают, и смесь размазывают по стеклу краем покровного стекла. Накрывают чистым покровным стеклом и, положив на препарат кусочек фильтровальной бумаги, осторожно прижимают покровное стекло к предметному стек.чу. При микроскопировании у бактерий, образующих капсулу, на темном фоне препарата явственно выступает вокруг клетки прозрачная светлая зона, не заполненная тушью. [c.72]

В рамках рассматриваемой модели низкий выход гидропероксида а можно объяснить высокими локальными концентрациями групп ООН и радикалов К- в зоне, из-за чего вероятность их взаимодействия оказывается значительной. Низкий выход свободных радикалов при распаде гидропероксида полимера а об-ясняется тем, что в отличие от низкомолекулярных жидкостей пара свободных радикалов, вышедшая из первичной клетки, длительное время находится в небольшом объеме зоны нарушения порядка, где вероятность рекомбинации радикалов остается высокой. Низкомолекулярные акцепторы свободных радикалов, растворенные в полимере, содержатся в тех же зонах нарушения порядка, в которых протекает реакция, и могут реагировать с радикалами, вышедшими из первичной клетки, но не вышедшими еще из объема зоны, т. е. не способными инициировать реакцию окисления. Этим, по-видимому, объясняются завышенные значения а, определяемые ингибиторным методом. Для перехода от [c.95]

В таких случаях необходимо сохранить связь всех показателей с зоной, как определенным территориальным объектом, ввести в клетку матрицы или, что теперь то же самое, в карту индексы вида сырья и метода производства и ранжировать показатели себестоимости, удельных капитальных вложений и суммарных затрат в один общий ряд про-60 [c.60]

Впрочем, при расчете показателей для каждого вида сырья для всех зон, внося в каждую клетку матрицы наряду с другими индекс продукта, возможно удастся пользоваться первым приемом обработки расчетов локально по каждому методу производства и виду сырья. [c.61]

Рис. 22.10. Слева — гистологическое строение двигательной зоны коры головного мозга человека. Справа — клетка Беца из двигательной зоны коры импрегнация по методу Гольд-жн. (Са]а1, 1911).

Метод первоначально использовался для подсчета клеток крови [62—64]. Предложены модификации [65], позволившие использовать этот метод также для определения объема клетки. Принцип действия заключается в том, что между двумя электродами, помещенными в два разделенных резервуара, которые связаны стеклянной чувствительной зоной (отверстие), протекает постоянный ток (см. рис. 6.14). Ртутный сифон временно выводится из равновесия с помощью вакуума. При закрывании крана суспензия засасывается через отверстие за счет возвращения ртути в равновесие. Электрические контакты замыкаются ртутью при прохождении через отверстие определенного точного количества суспензии. При этом изменяется сопротивление электро- [c.189]

Существуют три основных методических подхода для решения этой задачи. Первый способ — избирательное окрашивание нейронов, выделяющих определенный нейромедиатор, может осуществляться с помощью преобразования естественного медиатора в его флуоресцирующее производное. В этом случае флуоресценция определенных групп клеток поможет выявить специфические связи в структурах мозга. Второй экспериментальный подход связан с введением молекул медиатора, предварительно меченного радиоактивным изотопом. Нейронные окончания, содержащие исследуемый медиатор, способны избирательно захватывать метку. Затем их легко выявить методом авторадиографии. Третий способ обнаружения специфических связей в нервной системе состоит в использовании высоко специфичной способности узнавать либо антигенные детерминанты медиатора, либо определенные ферментные белки, участвующие в метаболизме нейромедиаторов, либо нейрорецептор-ные компоненты на мембране клетки. Последние считаются наиболее убедительным свидетельством в пользу существования конкретных нейрохимических взаимодействий межцу клетками и зонами мозга. Обычно для иммунохимической идентификации используют флуоресцентный краситель или изотоп, который маркирует антитела. В последние годы широко распространились методы, использующие антитела, меченные частицами тяжелых металлов, например коллоидного золота, железа и др. [c.224]

Как указывалось выше, некоторые микроорганизмы способны использовать в качестве питательных субстратов самые различные высокомолекулярные соединения полисахариды, белки, нуклеиновые кислоты, липиды и др. Однако макромолекулы не могут проникать через мембрану клетки. Они подвергаются расщеплению, которое осуществляется под воздействием экзоферментов> относящихся к классу гидролаз. Большинство из них катализирует гидролиз полимера до растворимых продуктов, обычно димеров или мономеров, которые поступают в клетку с помощью специфических транспортных механизмов. Образование экзоферментов широко распространено среди различных групп микроорганизмов. При поиске продуцентов ферментов-гидролаз в лабораторной практике применяют специальные методы. Сущность их состоит в следующем. Микроорганизмы выращивают на агаризованной среде, содержащей макромолекулярный субстрат. Если клетки выделяют в среду экзоферменты, гидролизующие данное соединение, то выросшие колонии окружены зоной, в которой обнаруживаются продукты гидролиза. [c.165]

Прежде чем перейти к описанию методов определения выживаемости клеток ин виво, необходимо упомянуть важный метод, который стоит как бы между методами ин витро и ин виво. Если поддерживать культивируемые клетки в суспензии при постоянном перемешивании, они могут образовывать агрегаты — так называемые сфероиды. Это трехмерные кластеры, состоящие из сотен или тысяч клеток, имеющие много характерных свойств, присущих солидным опухолям это делает их изучение особенно ценным с точки зрения лучевой терапии рака (см. гл. 9). Например, клетки в сфероидах обнаруживают широкий диапазон времен клеточного цикла, с увеличением размеров сфероида все меньше клеток находится в состоянии активной пролиферации, появляются зоны некрозов и погибающих клеток, а также гипоксические зоны. Метод заключается в облучении сфероидов, дезагрегации их для последующего излучения отдельных клеток с помощью стандартных ин витро методов, описанных в гл. 3. Клетки, растущие в виде сфероидов, обычно более резис- [c.66]

Биохимических исследований структуры и механизма действия электрических синапсов до сих пор не проводилось. Однако щелевыми контактами связаны не только нервные клетки, но также и клетки печени, эпителия, мышц и многих других тканей. Из них удалось выделить и охарактеризовать биохимическими методами и электронной микроскопией мембранные фрагменты, которые определенно сохраняли зоны межклеточных контактов. Электронные микрофотографии показывают упорядоченные структуры частиц, которые Гудинаф назвал коннексонами [1] и которые образуют каналы между клетками, отстоящими друг от друга на 2 нм. Из этих мембран были выделены два полипептида с М 25 000 и 35 000, названные коннексинами. Возможно, что два коннексона соседних клеток посредством дпме-ризации могут образовать канал (рис. 8.1). Показано, что этот канал пропускает не только ионы щелочных металлов, но п молекулы с М 1000—2000. Таким образом, коннексоны, кроме электрического сопряжения, обеспечивают для клеток возможность обмена метаболитами. Проницаемость таких каналов могут регулировать ионы кальция. [c.189]

Некоторые ученые различают так называемое свободное пространство поглощающих клеток корня, в которое ионы и соли поступают пассивно, и лишь за пределами его лежит зона активного поглощения тех же веществ, вызываемого метаболическими процессами в живых клетках (обменом веществ в них). Из свободного пространства соли и ионы легко выделяются наружу, а из метаболической зоны это для многих ионов крайне затруднено. Свободное пространство выявлено не анатомически оно вычислено в опытах с радиоактивными изотопами та часть их, которая может быть легко вымыта из корня водой, считается находящейся в свободном пространстве . Эта часть изотопов составляет около 20% таким же признается и это свободное пространство . Однако столь косвенный метод еще нельзя считать вполне доказательным. В действительности свободным пространством может быть и смачивающий поверхность корневого волоска тонкий слой воды сюда же можно отнести и насыщенные водой промежутки в клеточной оболочке. Если же принять эту точку зрения, то станет очевидным, что свободное пространство находится не внутри, а вне корня. И вещества, поступившие в свободное пространство , представляют собой лишь резерв при использовании их растением в ходе корневого питания. Таким образом, понятие свободное пространство еще недостаточно ясно. [c.58]

Определение экзогенной связанной ИУК-С в растительных клетках микрорадиоавтографическим методом проводят в верхушках стеблей и корней растений, т. е. в зоне роста, которая охватывает клетки, находящиеся в фазе деления и в начале фазы растяжения. Этот метод может быть применен при изучении взаимосвязи между из- [c.30]

В основу этого метода положен зонный электрофорез в электролите, который движется перпендикулярно направленик> электрического поля. Первоначальный вариант метода предназначен для разделения на бумаге. Позднее [2] он был применен в отсутствие носителя, при этом стабилизация зон осуществлялась ламинарным потоком достаточно тонкого слоя электролита. Электрофоретическая ячейка имела форму плоской квадратной или прямоугольной рамки, длина ее стороны составляла несколько десятков сайтиметров, а толщина слоя равнялась 0,25—0,60 мм. Вначале этот прибор использовался для разделения высоко- и низкомолекулярных пептидных соединений, нсь позднее выяснилось, что таким способом можно эффективно разделять не только растворимые электрофоретические соединения, но и коллоидные частицы, включая субклеточные частицы и клетки, если конструкция аппарата не допускает быстрого осаждения макрочастиц на стенках электрофоретической ячейки. Движение частиц в условиях непрерывного электрофореза описывается следующим простым соотношением [39] [c.285]

Широкое развитие в технологических схемах производства особо чистых металлов получили так называемые кристаллофизические методы рафинирования. Зонная плавка и ее разнообразные варианты — бестигель-ная зонная плавка, плавка в клетке , а также вытягивание монокристаллов из расплава по Чохральскому обычно завершают технологические схемы получения ультрачистых металлов для полупроводниковой техники. [c.12]

Зона клеточного деления обычно занимает 1—2 мм позади кончика корня и слегка перекрывается с зоной растяжения клеток. Кончики корней служат удобным материалом для изучения митоза, и один из применяемых для этого методов описан в разд. 23.3. Позади зоны деления рост происходит главным образом за счет растяжения клеток клетки увеличиваются в размерах так же, как это описано для побега и показано на рис. 22.18. Зона увеличения размеров клеток находится на расстоянш примерно 10 мм от кончи- [c.133]

Кроме осуществления контроля за растяжением клеток ауксин может также инициировать деление клеток или способствовать этому. Если нормальные клетки, например стебля или кор-ня, выращивать методом культуры тканей в определенной химической среде, то деление клеток будет зависеть от ауксина,, вырабатываемого клетками или присутствующего в среде. Аналогичным образом начало камбиальной активности у деревьев весной частично контролируется ауксином, диффундирующим вниз от развивающихся почек. В корнях и стеблях закладка придаточных или боковых корней в зоне перицикла находится отчасти под контролем ауксина. Эта индуцирующая митоз деятельность осуществляется ауксином совместно с другой группой растительных гормонов — цитокининами, которые будут рассмотрены позже. Ауксин не только контролирует инициацию камбиальной активности, но, возможно, определяет также природу клеток, дифференцирующихся из камбиальных продуктов. Наличие ауксина в камбии на стороне, обращенной к ксилеме (главным образом в молодых дифференцирующихся элементах ксилемы, по которым он транспортируется от верхушки стебля),, способствует развитию камбиальных производных на этой стороне камбия в ксилемные клетки (рис. 9.14). На внешней стороне камбия высокие концентрации сахаров и гиббереллинов в зрелой флоэме обусловливают развитие присутствующих здесь камбиальных производных во флоэмные клетки. Как мы увидим позже, гиббереллины продуцируются в основном молодыми раскрывшимися листьями и потому обычно находятся во флоэме совместно с образовавшимися при фотосинтезе сахарами. [c.273]

Подвижность элементов и кооперативные свойства. Некоторые особенности биомембран существенно отличают их от липидных бислоев. Одной из них является текучесть биомембран, подвижность элементов. Исследование дрейфа белков в мембранах показывает, что этот процесс не является хаотическим и случайным, а обеспечивается благодаря функционированию всей клетки в целом [12]. Обсуждаемая модель может быть хорошо приспособлена к описанию процессов управления состоянием мембран через модификацию ССИВС (разд. 3.4),. обусловливающих различную степень жидкостности или ригидности отдельных ее участков. С другой стороны, имеются данные о высокой подвижности липидных компонентов, полученные, в основном, с помощью метода спиновых меток [4]. С позиции модели, однако, эти данные можно интерпретировать и как перенос энергии между спиновыми метками через зоны ССИВС. Такая возможность, ввиду отсутствия представлений, о зонной структуре биомембран, до сих пор не учитывалась. [c.163]

В данном разделе метод вестерн-блоттинга используется для выявления экспрессии гена npt-II в трансформированных клетках моркови [50]. Антитела к NPT-П получали из сыворотки кролика, при этом животных иммунизировали ферментом, выделенным из Е. oli с помощью стандартных методов работы с белками (ионообменная [35] и аффинная [15] хроматография). Показано, что NPT-П выявляется в виде одной иммуно-реактивной зоны, обладающей той же электрофоретической подвижностью, что и исходный бактериальный фермент. Эти результаты позволяют сделать ряд заключений об экспрессии фермента в клетках растений трансляция мРНК гена nos-npt-II в [c.358]

В агар добавляют также большой избыток тех же эритроцитов. Агар разливают тонким слоем в чашки Петри и инкубируют последние 1 ч при 37° С. За этот срок ан-тителопродуцирующие клетки секретируют некоторое количество антител, которые присоединяются к окружающим клетку эритроцитам. Затем на чашки наслаивают раствор комплемента и снова инкубируют их прп 37° С. Комплемент диффундирует в агар и, связываясь эритроцитами, сенсибилизированными антителами, вызывает их лизис. При просмотре чашек невооруженным глазом будут видны круглые зоны просветления в агаре, число которых соответствует числу антителопродуцирующих клеток. Метод может быть применен для определения клеток, продуцирующих антитела против самых разнообразных антигенов. Антигены или гаптены при этом фиксируют на иоверхностп эритроцитов, засеваемых в агар. После связывания антител против соответствующего антигена эритроциты в присутствип комплемента лизируются (так называемый пассивный гемолиз). [c.260]

В основу метода определения токсигенпости положен принцип взаимодействия дифтерийного токсина и антитоксической противодифтерийной сыворотки, диффундирующих в толщу агара и образующих в нем зоны преципитации (рис. 28). Однако при испытании дифтерийных культур на токсигенность нужно иметь в виду, что появление преципитатов в агаровом геле у дифтерийных культур возможно за счет взаимодействия не только токсина с антитоксином (специфические преципитаты), но и антибактериальных антител с соответствующим антигеном микробной клетки (неспецифические преципитаты). Неспецифические преципитаты могут образовываться у токсигенных и нетоксигенных дифтерийных культур. От специфических эти преципитаты отличаются слабой выраженностью, нечеткостью контуров и более поздним обра- [c.284]

Методы регенерации растений из меристем уже разработаны для 60 видов и широко используются в практике для массового размножения и оздоровления посадочного материала ряда декоративных растений, а также для оздоровления картофеля от вирусных болезней. Успешно разрабатываются специальные методы создания банка клеток для сохранения генофонда растений путем консервирования в условиях глубокого холода (—196.°С) их меристематических тканей, находящихся в точках и зонах роста, и эмбриоидов. Для этого применяют программное замораживание, т. е. постепенное замораживание с точно регулируемой скоростью снижения температуры (порядка. ] °С/мин) с использованием специальных веществ — криопротекторов (глицерин, сахара, этиленгликоль и их производные, поливинилпирролидои и диметилсульфоксид), ослабляющих повреждения клеток. Криопротекторы добавляют к среде, в которой находятся клетки перед замораживанием. Банк клеток растений (генофонд)—один из способов сохранения разнообразия растительного мира. [c.410]

Для приготовления ступенчатого градиента 100%-ный маточный раствор перколла смешивают с ЗФР или сбалансированным солевым раствором (СР), чтобы получить 74%-ный (плотность 1,085), 68%-ный (1,080), 63%-ный (1,075) или 52%-ный (1,060) растворы перколла. 2 мл каждого из растворов последовательно (в соответствии с уменьшающейся плотностью) наслаивают в коническую пробирку на 15 мл. Наконец, клетки, ресуспендированные в 5 мл СР, наносят на градиент и центрифугируют 30 мин при 1400 g. Клетки, локализованные в более низкой зоне — между 74%- и 68%-ным перколлом, собирают и после двух-трех промывок СР используют для тестирования пролиферативной активности. При использованном методе выход этих клеток составляет 5—20% общего числа взятых клеток. [c.235]

Описываемые ниже методики более чувствительны, чем гемагглютинация. Кроме того, метод определения зон гемолиза позволяет обнаруживать индивидуальные антителосекретирующие клетки. Используемые в настоящее время методы особенно удобны для определения ревматоидных антител, синтезируемых либо клеточными линиями, гибридомами и нормальными клетками, индуцированными митогенами in vitro, либо клетками, свежевыделенными из организма. [c.315]

Смотреть страницы где упоминается термин Зонная методом в клетке: [c.365] [c.229] [c.196] [c.56] [c.159] [c.298] [c.85] [c.287] [c.62] [c.32] [c.222] [c.162] [c.170] [c.210] [c.8] [c.203] [c.359] [c.262] [c.256] [c.417] [c.120] [c.214] [c.217] [c.222] [c.284] [c.53] [c.288]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология