Эстераза, ингибирование

Показана [124] успешная возможность сочетания методов тонкослойно-хроматографического ингибирования ферментов и полярографии для анализа фосфорорганических пестицидов — метатиона и его аналогов. Сорбентом служит силикагель для проявления хроматограммы использовали систему петролейный эфир (фракция, перегоняющаяся при 60—80 °С) — ацетон (3 1) ферменты — препараты эстераз. После опру- [c.88]

Фториды легко поглощаются организмом, выделяются же медленно, следовательно, они способны вызывать кумз лятивное отравление. Фториды служат энергичными ингибиторами многих ферментативных реакций. Например, значительное ингибирующее влияние фториды оказывают на гликолитические ферменты липаза, различные эстеразы, уреаза, костная фосфатаза, сукцииодегидрогеназа и каталаза — все они подвергаются ингибированию. Фториды сильно замедляют действие пероксидазы, содержащейся, как известно, в щитовидной железе., Поэтому можно ожидать, что отравление фторидами будет влиять на метаболизм вообще, включая и некоторые процессы фосфорилиро-вания. Симптомы острого отравления, описываемые ниже, являются, следовательно, результатом этого широко распространенного ингибирования ферментов. На амилазу слюны, однако, фториды не действуют даже при очень высоких концентрациях . [c.525]

Другая группа ингибиторов, таких, как эзерин и неостигмин, инактивирует этот активный участок фермента обратимо путем карбамоилирования гидроксильной группы серина. Образующиеся соединения представляют собой замещенные эфиры кар-баминовой кислоты, и реакция реактивации фермента протекает медленно. Эти антихолинэстеразные агенты используются для временного ингибирования эстеразы с целью пролонгирования или усиления действия ацетилхолина. [c.207]

Таблица 17. Пределы чувствительности ингибирования фермента пестицидами (фермент — эстераза из печени свиньи)

Фосфорилированные эстеразы, образующиеся при действии фосфорорганических ингибиторов, весьма стабильны, однако найдены противоядия, способные обращать ингибирование. Очень эффективен в этом отношении оксим 2-формил- [c.106]

Так, у эстераз и эстеролитически активных протеиназ определено наличие в активном центре функционального остатка Сер, который подвергается ацилированию на промежуточной стадии процесса. Активный серил фигурирует в псевдохолинэсте-разе, фосфоглюкомутазе, в химотрипсине и трипсине и в ряде других ферментов. На рис. 6.7 изображена схема связывания субстрата ацетилхо-лина ацетилхолинэстеразой (АХЭ) и схема ингибирования ее активности при высокой концентрации субстрата [32]. В эсте-разный участок АХЭ входят нуклеофильная группа V и смежная с ней диссоциирующая кислотная Рис. 6.9. Схема действия креатинкиназы. группа НХ. Ацильный ос- Переходное состояние, [c.375]

Как молекула нейромедиатора, высвобождающаяся из пресинаптической мембраны, достигает постсинаптической мембраны Напрашивается простой ответ — посредством диффузии. Но здесь необходимо объяснить, как медиатор диффундирует мимо многочисленных молекул ацетилхолинэстеразы, которые присутствуют в синаптической щели и теоретически могли бы гидролизовать во много раз большие количества высвобожденного медиатора, сделав, следовательно, невозможным его взаимодействие с постсинаптической мембраной. Предполагается, что этому препятствуют либо структурные особенности вещества синаптической щели — базальной мембраны, которое, возможно, образует каналы, либо временное ингибирование ферментативной активности эстеразы, вероятно, из-за ее взаимодействия с иостспнантической мембраной или из-за насыщения субстратом. Высказано также предположение, что эстераза не присутствует в щели, т. е. на пути диффузии ацетилхолина, а находится в постсинаптической мембране, но такая модель не доказана [8]. [c.201]

При тонкослойно-хроматографическом ингибировании ферментов были использованы [125] также эстеразы, полученные из печени быка, свиньи, овцы, обезьяны и курицы. Показано, что, во-первых, ферментативные реакции обладают разным пределом чувствительности по отношению к ингибированию различными пестицидами, а во-вторых, в зависимости от природы полученной ферментативной вытяжки ингибирование фермента может и не осуществляться (см. табл. 15). [c.90]

Дальнейшее расщепление фосфорилированных (содержащих Р ) эстераз до пептидов и аминокислот позволило точно установить место фосфорилирования молекулы фермента. Оказалось, что при ингибировании любых чувствительных к ФОС эстераз фосфорилируется гидроксильная группа серина. В результате этих исследований удалось установить, что важную роль в активном центре эстераз играет серии и что его гидроксил выполняет функцию нуклеофильной группировки, участвующей в реакции с ФОС. При этом было установлено сходство в последовательности аминокислот вокруг серина для различных эстераз [c.215]

Бензоат 1,2,5-триметилпиперидол-4(р-изомер) является ингибитором гидролиза бутирилхолина, катализируемого холин-эстеразой [9]. Определить тип ингибирования и найти константу [c.89]

Установление того факта, что в ходе взаимодействия ФОС с эстеразами фосфорилируется гидроксил серина, было, разумеется, важным шагом в понимании механизма реакции ингибирования. Однако пока еще это не привело к пониманию специфики строения и реакционноспособности активного центра фермента. Дело в том, что ни серии, ни пептиды, содержащие серин, не обладают [c.215]

Т-113. Реакция ингибирования эстеразы [c.247]

Изучение механизма действия органических соединений фосфора на млекопитающих и насекомых показало, что в организме животных они фосфорилируют жизненно важные эстеразы, ингибируя их нормальные функции. Полагают, что действие этих соединений направляется главным образом на ингибирование холинэстеразы, физиологические функции которой в организме животных очень важны. Холинэстераза гидролизует ацетилхолин [c.472]

Лучшим доказательством ранее высказанных предположений о причинах различных скоростей дефосфорилирования и дезацетилирования активных центров эстераз служил бы пример ингибирования эстераз ангидридами тех кислот, скорость нуклеофильного замещения у "центрального атома которых определялась бы теми же или почти теми же факторами, что и скорость нуклеофильного замещения у атома фосфора. И такой пример существует. Как уже отмечалось выше, нуклеофильное замещение у атома серы во многом сходно с нуклеофильным замещением у атома фосфора, в частности участием вакантных -орбит в образовании л-связей в основном состоянии молекулы и а-связей в переходном состоянии. В связи с этим представляют интерес работы по ингибированию активных центров эстераз с производными сульфокислот. [c.589]

Изучение механизма действия фосфорорганических инсектицидов и акарицидов по отношению к млекопитающим и членистоногим показало, что в организме животных они фосфорили-руют жизненно важные ферменты — эстеразы, подавляя их нормальные функции. В частности, фосфорорганические соединения действуют на холинэстеразу [1]—фермент, который катализирует гидролиз в нервных тканях ацетилхолина, являющегося передатчиком нервного импульса (схема 1). Полагают [2], что действие этих соединений заключается главным образом в ингибировании холинэстеразы. Фосфорорганические соединения связывают холинэстеразу (схема 2), в результате она теряет свою активность и не может вызывать гидролиз ацетилхолина. [c.400]

Избирательное выделение биологически активных макромолекул аффинной хроматографией основано на обратимых взаимодействиях между имхмо билизованным аффинным лигандом и свободной макромолекулой. Однако принцип аффинной хроматографии может быть также использован даже с сорбентом, который содержит необратимый ингибитор, когда после сорбции комплементарной макромолекулы в специфическом комплексе образуется ковалентная связь. Для освобождения выделяемого вещества из комплекса с аффинным сор бентом используют подходящую химическую реакцию. Пример ковалентной аффинной хроматографии— выделение ацетилхолинэстеразы с помощью иммобилизованных органофосфатов [1, 56]. Ацетилхолинэстераза принадлежит сериновым эстеразам, для которых типично ингибирование связыванием с органофосфатами или органофосфонатными эфирами, содержащими легко отщепляемую группу, например, [c.158]

По-видимому, эстераза сначала образует с соединением фосфора комплекс, который далее распадается на продукт фосфорилирования эстеразы и соответствующее гидроксисоедине-ние. Фосфорилированная эстераза может постепенно гидролизоваться (схема 3), при этом ферментативная активность восстанавливается. Однако для некоторых соединений скорость дефосфорилирования настолько мала, что практически полного восстановления активности фермента не достигается. Например, дефосфорилирование холинэстеразы, ингибированной те-траэтилпирофосфатом, в воде протекает настолько медленно, что за 28 дней восстанавливается только 50 % исходной активности. [c.400]

Олдридж и ДэБисон [18] изучали ингибирование холин-эстеразы эритроцитов эфирами фосфорной кислоты типа [c.370]

Следует упомянуть, что процесс отравления у насекомых принципиально аналогичен отравлению теплокровных организмов. И здесь механизм передачи раздражений нарушается путем ингибирования ферментов конечно, поражаемые эстеразы насекомых различаются между собой, а также структурно отличаются от эстераз теплокровных. В этой связи интересно отметить, что существуют сильные ингибиторы холинэстеразы для теплокровных организмов, которые не действуют на насекомых ни как контактный яд, ни при инъекции, ни при ингаляции. Сильнодействующие на человека и животных ингибиторы холинэстеразы физостигмин и простиг-мин, а также высокотоксичный ацетилхолин не вызывают у насекомых поражений. Специфичность действия на ферменты становится ясной на примере следующего факта диизопропил-п-нитрофенилтиофосфат, будучи сильным ингибитором холинэстеразы мух, не ингибирует холинэстеразы пчел. Высоко оцененный в борьбе с различными вредителями, диэтил- -нитрофенилтиофосфат (Е-605) почти не действует на картофельного жука. [c.219]

Для выяснения этого вопроса проводилось исследование кинетики ингибирования холинэстеразы сыворотки крови и ацетилхолинэстеразы эритроцитов тремя ФОС в присутствии тетраметиламмония и тетраэтиламмония [170]. При этом были взяты два необратимых ингибитора, которые должны взаимодействовать лишь с нуклеофильной группировкой активных центров эстераз — соединение Гд-7 (XXVI) и диизопропилфтор-фосфат (ДФФ) (XXXIII) [c.224]

Предполагается, что это промежуточное соединение нестойко и претерпевает спонтанный гидролиз. Такое предположение, однако, означает, что XVI даже менее устойчиво, чем ацилимидазол, так как в противном случае участие гидроксила серина оказалось бы бесполезным. Кроме того, в случае эстераз, которые не подвергаются фосфатному ингибированию (например, А-эстеразы), гидролитическая реакция должна протекать другим путем. [c.307]

Следует заметить, что эффект ингибирования не исчезает когда содержание катионной формы приближается к нулю Это можно интерпретировать двояким образом (а) тем, что свободное основание само по себе обладает известной ингибирующей способностью или (б) тем, что константа диссоциации измеренная в водном растворе, не идентична с константой характеризующей среду, где находится активная поверхность —относительное ингибирующее действие эзерина на холин эстеразу из плазмы крови человека [55] О— относительное ингибирующее действие эзерина на эстеразу из угря [28] - — процентное содержание катионной формы эзерина. [c.309]

Механизм действия паратиона в организме насекомых и растительноядных клещей еще не полностью выяснен. В конечном счете очень правдоподобно, что он основывается на ингибировании жизненно важных ферментов, может быть (как, например, при отравлении теплокровных животных паратионом), на подавлении холинэсте-разы[646, 699], других эстераз [50, 52, 53, 584] или других ферментов [482]. При этом непосредственное ингибирующее действие оказывает, вероятно, не сам паратион, а образующийся из него в организме насекомого при окислении под влиянием определенных ферментных систем параоксон (формулу см. на стр. 56) [514, 647]. [c.59]

ТОЛЬКО незначительное ингибирование холинэстеразы. Если технический паратион все же ингибирует холин-эстеразу, то это значит, что в нем содержатся небольшие количества изомеров с более сильным подавляющим холинэстеразу действием [6, 229, 931]. [c.64]

В работах, посвященных синергистическому действию смесей фосфорорганических инсектицидов указывается на конкурентное ингибирование компонентами смесей группы эстераз (холинэстеразы и алиэстеразы). Различная чувствительность эсте-раз к одному и тому же соединению рассматривается как конкурентная борьба за опасные для эстераз псевдосубстраты, которыми являются фосфорорганические соединения. Принимая, что фосфорорганические вещества одинаково влияют на эстеразы, можно ожидать повышенную токсичность смеси, содержащей компоненты с различной эстеразной активностью по сравнению с токсическим действием смеси на основании правила аддитивности. [c.64]

В первую очередь эстераза с органическим соединением фосфора образует, по-видимому, комплекс, который далее распадается, давая продукт фосфорилирования эстеразы и соответствующе -оксисоединение. Фосфорилированная эстераза может постепенно гидролизоваться водой, при этом эстеразная активность восстанавливается. Для некоторых веществ скорость дефосфор ил ирова-ния настолько мала, что не имеет практического значения. Так например, дефосфорилирование холинэстеразы, ингибированной тетраэтилпирофосфатом, в воде протекает очень медленно, и з 28 дней восстанавливается только 50% исходной активности [c.333]

В гл. 3 книги детально разбираются вопросы взаимодействия фосфорорганических ингибиторов с холинэстеразами in vitro. Автор подробно останавливается на кинетике и термодинамике процессов ингибирования холинэстераз. Обсуждается достоверность кинетических данных и pigo, а также возможность сопоставления этих величин. Рассматривается участие гистидина и серина активных центров эстераз в процессе фосфорилирования ферментов. Особый интерес представляют обобщенные данные по изучению связи между строением и антихолинэстеразной активностью фосфорорганических ингибиторов. Приводятся данные по использованию уравнения Гаммета для нахождения зависимости между антихолинэстеразной активностью и структурой ингибиторов. Описываются фосфорорганические ингибиторы, содержащие в своем составе катионный или катионогенный участки. Представляют особый интерес данные о различной антихолинэстеразной активности оптических изомеров этилового эфира S - -этилмеркапто-этилтиолоэтилфосфоната. Так, например, константы скорости ингибирования холинэстераз левовращающей формой этого соеди- [c.6]

Прежде всего следует отметить, что при исследовании зависимости между строением фосфорорганических соединений и их взаимодействием с активными центрами эстераз удалось наблюдать такие же закономерности, которые являются общими при нуклеофильном замещении у тетраэдрического атома фосфора. Так, например, при изучении кинетики ингибирования холинэстераз л-нитрофенилфосфатами и -нитрофенилфосфонатами отмечалась такая же тенденция в изменении энергии активации и Р2, как и в ранее рассмотренных случаях нуклеофильного замещения у тетраэдрического атома фосфора (см. стр. 515), а именно по мере замены алкильного заместителя, связанного с фосфором, на алкоксигруппу повышается энергия активации и возрастает (табл. 30). [c.584]

Приведенная схема превращений тиофоса не отражает образования комплекса с холинэстеразой, приводящего к ее ингибированию. Согласно принятым взглядам (Alridge, Davidson, 1952) происходят следующие реакции, основанные на конкурентном ингибировании фермента 1) тиофос параоксон 2) параоксон-Нхолинэстераза комплекс (параоксон — холин-эстераза)- п-нитрофенол-f инактивированная фосфорилирован-ная холинэстераза (холинэстераза — диэтиловый эфир фосфорной кислоты). [c.235]

При ингибировании с помощью ДФФ некоторых других ферментов, обладающих эстеразной активностью, также наблюдалось образование производных. Бурснелл и Уэбб [142] применили ДФФ, содержащий радиоактивный фосфор (Р32), для изучения инактивирования эстеразы из печени лошади степень чистоты этой эстеразы, согласно электрофоретическим данным, была равна 80%. Полная потеря активности наблюдалась после соединения одного моля ингибитора с 96 000 г эстеразы. Для исследования реакции между ферментом и этим ингибитором Мичел и Кроп [143а] также воспользовались ДФФ, меченным Р32. Они нашли, что меченый фосфор связывается холинэстеразой электрического угря в количествах, пропорциональных степени ингиби- [c.324]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология