Ацетилхолинэстераза специфичность

Результаты определения молекулярной активности, полученные Берри [100], по-видимому, не могут быть признаны достаточно точными по причинам, указанным выше (недостаточно высокая специфичность использованных ингибиторов и наличие в эритроцитах других белков, помимо ацетилхолинэстераз, которые могут реагировать с ингибиторами). Данные лаборатории Коэна [101, 102], полученные с отмытой стромой эритроцитов и предотвращением побочных реакций ингибитора, и наши данные [103] с очищенным препаратом растворимой ацетилхолинэстеразы эритроцитов, полученные кинетическим методом, наиболее близки. Это дает основание считать, что молекулярная активность ацетилхолинэстеразы эритроцитов при оптимальных условиях действия фермента состав- [c.168]

Этот ингибитор, близкий по строению препарату Гд-42, обладает высокой реакционноспособностью по отношению к ацетилхолинэстеразе. О специфичности его действия свидетельствует тот факт, что при доведении реакции между ферментом и ингибитором до конца степень торможения активности ацетилхолинэстеразы линейно зависит от концентрации ингибитора. [c.172]

Ацетилхолин и ионы тетраалкиламмония, как было показано выше, образуя комплексы с холинэстеразами, вызывают существенное уменьшение энтропии. Если это связано с созданием более стабильной конформации белковой молекулы, то можно ожидать защитный эффект соединений этого типа против тепловой инактивации. Эксперименты подтверждают такое предположение. На рис. 53 и 54 показано защитное действие тетраметиламмония (ТМА) и тетраэтиламмония (ТЭА) при тепловой инактивации ацетилхолинэстеразы эритроцитов (рис. 53) и холинэстеразы сыворотки крови (рис. 54) (очищенные препараты ферментов). Тепловая инактивация проводилась при pH 7,5 в течение 20 мин. в отсутствие ионов тетраалкиламмония, а также в их присутствии в разных концентрациях (показаны на оси абсцисс). Для выяснения специфичности действия аналогичные опыты проводились с КВг (в тех же концентрациях). Температура инактивации ацетилхолинэстеразы 51, холинэстеразы— 58° С. Замечено, что ацетилхолинэстераза менее термоустойчива, чем холинэстераза 50%-ная инактивация достигается соответственно при 49 и 56,5° С. [c.192]

С целью изучения закономерностей проявления анионного центра в специфичности действия ацетилхолинэстеразы в настоящей работе изучена кинетика ферментативного гидролиза субстратов [c.509]

Ацетилхолинэстеразу следует отличать от так называемых псевдохолинэстераз (КФ 3.1.1.8), которые обычно проявляют только количественные различия от нее по субстратной и ингибиторной специфичности. Псевдохолинэстеразы найдены в сыворотке, их физиологическая функция неизвестна, но показано, однако, что они не участвуют в синаптической передаче. [c.208]

Снижение избирательности сорбента при выделении макромолекул после превышения некоторой критической концентрации лиганда (когда сорбент начинает действовать как неспецифический ионообменник) впервые описано Кальдероном и др. [16]. При выделении ацетилхолинэстеразы аффинный сорбент теряет свою специфичность, если концентрация лиганда возрастает от 0,15-10" до 1,6-10 моль/л. Критические концентрации лиганда составляют, следовательно, 10 моль/л, что соответствует расстоянию между ближайшими соседними молекулами лиганда, равному 100 А, если предполагается равномерное распределение молекул лиганда внутри геля в узлах кубической решетки. Понятно, что при концентрации < 10 з моль/л молекулы лиганда находятся на достаточно больших расстояниях друг от друга, чтобы предотвра- [c.80]

Для измерения молекулярной активности ацетилхолинэстеразы нервной ткани нами был применен метод титрования каталитических центров ингибитором Гд-42 (формула II, стр. 166). Этот ингибитор обладает высокой реакционноспособностью по отношению к ацитил-холинэстеразе нервной ткани (бимолекулярная константа скорости реакции в присутствии ацетилхолина 10 —10 л моль-мин). Высокая скорость реакции при низких концентрациях Гд-42 характеризует выраженную специфичность этого соединения по отношению [c.169]

Избирательность октаизопропилтетраамидопирофосфата по отношению к ложной холинэстеразе была детально изучена Остином и Берри [14]. Качественно избирательное угнетение было показано на примере кислородного аналога гутиона [35] и г цс-изомера фосдрина [26] оба эти ФОС оказались специфичными по отношению к ацетилхолинэстеразе. [c.134]

Касида [251 исследовал степень угнетения эстераз насекомых при действии постоянной концентрации ТЭПФ (Ю ) и нашел существенные различия у 18 изученных им видов при использовании ацетилхолина в качестве субстрата степень угнетения колебалась от 1 до 93%. Однако между видами были найдены значительные различия в субстратной специфичности ферментных препаратов и поэтому полученные результаты не могут быть отнесены за счет разных свойств ацетилхолинэстеразы отдельных видов. [c.135]

Высокоспецифическая сорбция белков биосорбентами зависит от объемной концентрации карбоксильных групп в ионите (рис. 6) и от pH раствора. Специфичность обусловлена строением биосорбентов, но регулируется и условиями проведения фронтальных сорбционных и десорбционных процессов. На биосорбенгах биокарб можно осуществлять не только разделение белков близкой молекулярной массы и с близкими изоточками, как, например, протеазы и амилазы (ММ 28 ООО и 30 ООО, р/ 4,8 и 4,6), но также и одноактное выделение с получением высокоочищенных препаратов из культуральной жидкости и экстрактов протеолитических и амилолитических ферментов, ацетилхолинэстеразы, нейрамини-дазы, урокиназы, иммуностимулятора тималина, нейрогормонов, а также других белков и пептидов. [c.134]

Ацетилхолинэстераза обладает довольно широкой специфичностью в отношении аминоспиртовой компоненты, поскольку катализирует гидролиз не только эфиров холина, но и других аминоспиртов. [c.299]

Поскольку известно, что 34 является мощным необратимым ингибитором ацетилхолинэстеразы, то для проявления биологической активности присутствие нитроалкильного или нитроарильного заместителя необязательно. Роль нитрогрунны состоит скорее в том, что она влияет на реакционную способность и придает веществу некоторые желательные характеристики, например специфичность действия и летучесть. Влияние нитрогрунны на реакционную способность можно проиллюстрировать работами Маркова и сотр. [395], изучавших реакции ряда м- и тг-нитрофенилфосфатов и фосфонатов с ацетилхолинэстеразой, а также реакции мета- и пара-изомеров 37. Для пара- и лie/ 7.я-изoмepoв 37 соответственно кг составляет 1,4-10 и 1,6-10 л/(моль-с) [см. реакцию (10)]. Интересно, что скорости щелочного гидролиза этих двух соединений очень близки [396]. Другое очевидное преимущество соединений типа 37, имеющих нитрофенильные заместители, заключается [c.180]

Константы скорости ингибирования холинэстеразы яда кобры под действием исследованных фосфорорганических соединений сопоставлены с соответствующими данными для ацетилхолинэстеразы бычьих эритроцитов и бутирилхолин-эстеразы сыворотки крови лошади. Показано, что фермент яда кобры по ингибиторной специфичности близок к ацетил-холинэстеразе бычьих эритроцитов. [c.861]

Таким образом, характерной для специфичности ацетилхолинэстеразы является полная компенсация эффекта "антигидро-фобности" катионного заряда, что и является, по-видимому, основной функцией анионного пункта в активном центре этого фермента. В результате этого ацетилхолинэстераза гложет использовать гидрофобность субстрата как фактор селективности действия и одновременно сохраняет способность эффективно взаимодействовать с реагентами, содержащими ониевые группировки в заместителе. Это позволяет ей выполнять свою биологическую роль в высокоэффективном гидролизе ацетилхолина, который, как медиатор нервного возбуждения должен обладать хорошей растворимостью в водной среде. [c.512]

Что Касается ацетилхолинэстеразы, то изучение обратимых ингибиторов, таких, как диамины и стерео-специфичные аминоспирты, проводилось с целью выяснения свойств поверхности активной области при этом был обнаружен по крайней мере один анионный центр в активной области [350, 351. Это также объясняет взаимодействие ацетилхолинэстеразы с некоторыми ка-тионоидными субстратами помимо ацетилхолина [352]. [c.136]

НЫХ реагентов, в том числе с водой, спиртами и аминами, такими, как аминокислоты, гидроксиламин и фе-Нилгидразия (353—371]. Реакции субстратов и нуклеофильных реагентов в различных комбинациях, описанные выше, есть не что иное, как реакции производных карбоновых кислот. В качестве примера можно указать на гидролиз, транспептидацию, реэтерификацию (или алкоголиз), кислородный обмен в кислотах, превращение кислот в фенилгидразиды, гидроксиламинолиз эфиров, аминолиз амидов и др. В большинстве перечисленных примеров в качестве катализатора использовался химотрипсин, хотя в некоторых случаях применялись другие ферменты, такие, как ацетилхолинэстераза или папаин. Нельзя сделать вывод, что каждый гидролитический фермент будет катализировать любую реакцию в равной степени например, папаин катализирует транспептидацию в большей степени, чем химотрипсин [40]. Поскольку специфично(сть различных гидролитических ферментов еще е обсуждалась, было бы интересно затронуть вопрос о влиянии структуры на реакционную способность, которая связана с каталитическим действием. В связи с этим рассмотрим простую трактовку ферментативного катализа, данную Михаэлисом и Мен-теном, которые предложили схему [c.137]

Каталитическая активность мембранной ацетилхолинэстеразы находится под контролем структурного состояния липидной фазы эритроцитарной мембраны. Фосфолипазы (Аз, С и В) оказывают на мембраны близкое модифицируюп ] ее действие, хотя они характеризуются не только различной специфичностью (природой разрываемых в липидах связей), но и пространственной асимметрией действия. Панкреатическая фосфолипаза Ад и фосфолипаза В гидролизуют липиды, расположенные на обеих сторонах эритроцитарной мембраны, а фосфолипаза С гидролизует фосфолипиды, расположенные на внутренней ее стороне. Модификация липидного бислоя с внутренней стороны мембраны приводит к изменению структурного состояния липидов, а затем и белков, расположенных снаружи. Косвенным свидетельством возможности такой трансмембранной передачи структурного сигнала может служить отрыв ацетилхолинэстеразы от мембраны под влиянием фосфолипазы С (И. Д. Болотовский и соавт., 1987). Обработка любыми фосфолипазами как бы превращает мембраносвязанный фермент в квазисвободный. [c.55]

Активность ацетилхолинэстеразы, считающаяся специфичной после подавления холинэстеразы с помощью изо-ОМФА, маркируется осадком ферроцианцда меди. Для [c.237]

Также следует отметить, что антитела против ацетилхолинэстеразы не связываются с псевдохолинэстеразой. Холинэстеразы различаются по субстратной специфичности, чувствительности, это видо-, тканеспецифические ферменты. [c.61]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология