Определение жизнеспособных микроорганизмов

Испытание на микробиологическую чистоту включает количественное определение жизнеспособных бактерий и грибов, а также выявление определенных видов микроорганизмов, наличие которых недопустимо в нестерильных лекарственных средствах. [c.194]

Лекарственные средства (таблетки, капсулы, гранулы, растворы, экстракты, сиропы, мази, суппозитории, аэрозоли и др.), не стерилизуемые в процессе производства, могут быть контаминированы микроорганизмами и поэтому должны быть испытаны на микробиологическую чистоту. Испытание на микробиологическую чистоту включает количественное определение жизнеспособных бактерий и грибов, а также выявление определенных видов микроорганизмов, наличие которых недопустимо в нестерильных лекарственньтх средствах. Испытание проводят в асептических условиях, применяя приведенные в ГФ XI, вып.2, методы и питательные средьт для контроля всех видов нестерильных ле-карственттых средств, а также сырья, используемого в их производстве. [c.524]

Качество воды. Определение количества жизнеспособных микроорганизмов. Подсчет колоний после посева внутри или на поверхности агаровой среды. [c.479]

Наиболее полно отражает численность клеток в почве метод прямого подсчета под микроскопом, требующий высокой квалификации исследователя. Для подсчета зародышей методом Виноградского в модификации Шульгиной на предметное стекло наносят определенный объем суспензии, готовят из него мазок на определенной площади, затем мазок фиксируют, красят и подсчитывают под микроскопом количество клеток микроорганизмов. Фиксация препарата не дает возможности выявить- количество жизнеспособных клеток. В какой-то мере этот недостаток можно устранить при использовании метода флуоресцентной микроскопии. [c.141]

Для того чтобы соответствовать требуемым условиям в "функционирующем состоянии", чистые помещения должны проектироваться так, чтобы обеспечить заданный класс чистоты в "оснащенном состоянии". Класс чистого помещения определяется максимально допустимой счетной концентрацией аэрозольных частиц определенного размера и жизнеспособных микроорганизмов в 1м воздуха. [c.745]

Определение жизнеспособных микроорганизмов [c.389]

Определение микробной активности проводится путем учета микробной биомассы желательно жизнеспособных микроорганизмов, исключая метаболически неактивные клетки. Жизнеспособность микроорганизмов определяется их ростом, ведущим к образованию видимых колоний иа чашках с плотным агаром пли появлением мути в жидких средах. [c.240]

Качество воды. Определение количества жизнеспособных микроорганизмов. Подсчет [c.526]

Химический состав клеток микроорганизмов. Соединением, определяющим жизнеспособность клетки, является вода. Количество воды составляет 75—90% от общей массы клетки. В ней растворены многие, необходимые для организма соединения, а биохимические реакции протекают в водных растворах. В спорах вода находится в связанном состоянии и содержание ее снижается до 40 /о-С помощью воды осуществляется транспорт питательных веществ в клетку и выведение из нее продуктов обмена. Она играет определенную роль и в теплорегуляции. Так, перестройка структуры воды, а именно экзотермический процесс образования водородных связей, позволяет в определенной мере снизить отрицательное воздействие низких температур. [c.212]

Есть еще один аспект, касающийся крупномасштабной ферментации, который не имеет отнощения к технической стороне процесса, а касается того, используются ли при этом рекомбинантные микроорганизмы. В большинстве стран крупномасштабное культивирование рекомбинантных микроорганизмов сопряжено с необходимостью соблюдения определенных правил и инструкций. Хотя большинство рекомбинантных микроорганизмов не представляют никакой опасности, важно не допустить их случайного попадания в среду. Для этого используются надежные системы, предотвращающие утечку живых рекомбинантных организмов или ограничивающие их распространение, если утечка все же произошла. Кроме того, перед окончательным удалением из установки все рекомбинантные микроорганизмы должны быть инактивированы в соответствии с определенными инструкциями. Использованную культуральную среду тоже необходимо проверять на наличие в ней жизнеспособных микроорганизмов, чтобы исключить их попадание в окружающую среду. [c.356]

ИСО 6222-88. Качество воды. Подсчет жизнеспособных микроорганизмов. Определение количества колоний посевом в питательной агаровой культурной среде или не в ней. [c.30]

Для сохранения в иле определенного состава (способного к быстрому окислению) проводят регенерацию ила. При это.м происходит окисление не-растворенных органических веществ, сорбированных илом, и увеличение числа жизнеспособных микроорганизмов в активном иле. Регенерацию проводят при участии кислорода воздуха и биогенных добавок для поддержания биохимических процессов в теле бактериальной клетки. [c.306]

Заражение, однако, не обязательно должно сказываться отрицательно на развитии хозяина, оно может быть для него практически безразличным, а иногда даже необходимым, если хозяин использует микроорганизм для питания. Если в процессе эволюции развилась тесная зависимость хозяина от определенных метаболитов микроорганизма, то для сохранения жизнеспособности хозяин вынужден выносить присутствие такого постоянного гостя . Одна из ( рм сосуществования между хозяином и гостем (=симбионтом) получила название симбиоза. [c.145]

Как и у других бактерицидов, бактериологическая активность катионактивных соединений зависит от присутствия других веществ. Описано сравнительно мало соединений, усиливающих действие катионактивных веществ, и довольно много—способных его ослабить. Такие ингибиторы важны практически с двух точек зрения. Во-первых, при проведении дезинфекционных и санитарных мероприятий необходимо знать, в какой мере случайные загрязнения способны ослабить или вовсе устранить бактерицидное действие поверхностноактивного вещества. В этом случае наличие ингибитора в системе, очевидно, нежелательно. Во-вторых, эффективные ингибиторы необходимы для оценки бактерицидной активности катионактивных веществ. При определении скорости бактерицидного действия культуру обрабатывают раствором бактерицида стандартной концентрации в течение определенного времени и затем, удалив полностью бактерицид, определяют жизнеспособность микроорганизмов. В опытах такого рода и применяются ингибиторы для удаления или инактивации бактерицидов, причем ингибитор должен не только полностью инактивировать катионактивное вещество, но и не оказывать никакого влияния на обмен веществ оставшихся микроорганизмов. [c.151]

Главным требованием, которое предъявляется к стерилизующим мембранам, является удаление из фильтруемой жидкости всех жизнеспособных микроорганизмов. В большинстве случаев это требует применения мембран с номинальным размером пор 0,2 мкм. Однако существуют несколько типов бактерий, например определенные виды микоплазм, которые достаточно малы и настолько гибки, что проникают сквозь мембраны с размерами пор 0,2 мкм. Поэтому для их задержки требуются мембраны с размерами пор 0,1 мкм. Но, поскольку производительность таких мембран намного меньше, их применяют лишь в специальных случаях. [c.164]

Подсчет жизнеспособных микроорганизмов используют, чтобы измерить активность антимикробных агентов, и мембранные фильтры идеально подходят для проверки бактерицидного действия таких агентов. С помощью мембранных фильтров можно оценить антимикробное действие антибиотиков, антисептических и дезинфицирующих средств. Чтобы количественно определить бактерицидное действие химического вещества, подсчет должен проводиться после того, как это вещество находилось в контакте с микробными клетками в течение определенного периода времени. Но, прежде чем проводить подсчет оставшихся микроорганизмов, их нужно отделить от химического соединения, поскольку в противном случае действие последнего может продолжаться во время инкубации. С помощью мембранной фильтрации нетрудно осуществить такое разделение химического вещества и микроорганизмов, и подсчет микроорганизмов можно выполнить, проводя инкубацию мембранного фильтра, содержащего клетки, на какой-либо питательной среде при полном отсутствии химического вещества. [c.266]

Чашки помещают на сутки в термостат при 28—30°. Содержавшиеся в воде микроорганизмы размножаются на плотной питательной среде в том месте, куда попали. Из каждой жизнеспособной клетки образуются видимые невооруженным глазом скопления — колонии (рис. П—17). Определенное таким методом на мясо-пептонном агаре число микробов, содержащееся в 1 мл воды, называет ся микробным числом. [c.164]

Попадая в почву, ПАВ изменяют ее физико-химические свойства и влияют на жизнеспособность макро- и микроорганизмов. Как известно, в состав почвенных микроорганизмов входят бактерии, актиномицеты, грибы, простейшие, водоросли. Каждая группа выполняет определенную функцию. От состава и степени развития указанных разновидностей микроорганизмов зависят способность почвы к самоочищению и ее плодородие. В почве может накапливаться большое количество загрязнений, в том числе ПАВ, благодаря огромной ее адсорбирующей поверхности на границе раздела фаз жидкость—твердое тело . По способности адсорбировать ПАВ почву можно разделить на две группы [c.88]

Обнаружение только жизнеспособных паразитических микроорганизмов Возможность определения вирулентности и инфекционности [c.181]

Гибель и уничтожение микроорганизмов. Под гибелью микроорганизмов имеют в виду необратимую утрату способности к росту и размножению в лабораторных условиях это обычно означает потерю способности к образованию колоний. Многие повреждения, как правило приводящие к гибели клетки, в определенных условиях могут быть обратимы, Хорощо известно явление реактивации после облучения ультрафиолетом или воздействия высоких температур (разд. 15.2.2). Количественные данные относительно гибели микроорганизмов (естественной или вызванной каким-либо агентом) можно получить только для популяции, но не для отдельных клеток. В некоторых случаях скорость уменьшения числа живых клеток в популяции в любой момент времени пропорциональна числу имеющихся жизнеспособных клеток процесс отмирания клеток подчиняется тогда кинетике реакций первого порядка (где к-коэффициент, характеризующий скорость отмирания). Это относится, например, к стерилизации облучением. [c.207]

Краткое рассмотрение различных представителей микромира, занимающих определенные этажи размеров, показывает, что, как правило, величина объектов определенно связана с их структурной сложностью. Нижний предел размеров свободноживущего одноклеточного организма определяется пространством, требуемым для упаковки внутри клетки аппарата, необходимого для независимого существования. Ограничение верхнего предела размеров микроорганизмов определяется, по современным представлениям, соотношениями между клеточной поверхностью и объемом. При увеличении клеточных размеров поверхность возрастает в квадрате, а объем — в кубе, поэтому соотношение между этими величинами сдвигается в сторону последнего. У микроорганизмов по сравнению с макроорганизмами очень велико отношение поверхности к объему. Это создает благоприятные условия для активного обмена между микроорганизмами и внешней средой. И действительно, метаболическая активность микроорганизмов, измеренная по разным показателям, в расчете на единицу биомассы намного выше, чем у более крупных клеток. Поэтому представляется закономерным, что низшие формы жизни могли возникнуть и в настоящее время могут существовать только на базе малых размеров, так как последние создают целый ряд преимуществ, обеспечивающих жизнеспособность этим формам жизни. [c.23]

Способность развиваться при определенной температуре следует отличать от способности переносить ту или иную температуру. Так, многие микроорганизмы при тем- пературе ниже нуля сохраняют жизнеспособность длительное время, но активная их жизнедеятельность при такой температуре приостанавливается. Споры многих бактерий не погибают даже при температуре жидкого водорода (—252° С). [c.68]

Лечебная грязь используется для бальнеологических целей лишь после определенной термической и механической обработки ее. Нагрев грязи обычно производят до температуры около 45 . На многих курортах имеет место повторное использование грязи, причем производится ее регенерация в искусственных бассейнах. Поскольку во время процедур в грязь могут попадать патогенные микроорганизмы, возникает потребность определить продолжительность их жизнеспособности в грязи, а также установить методы ее санитарно-бактериологического контроля. [c.532]

Среди других оригинальных методов, не связанных с выращиванием микроорганизмов на средах, можно назвать определение жизнеспособности бактерий в электрическом поле с помощью электрофореза (А. И. Мироп1ни-ков и др., авт. свид. СССР 372261). [c.108]

При прямом подсчете бактерий под микроскопом получают значения, во много раз превышающие число жизнеспособных бактерий, поэтому целесообразно для этой цели использовать мембраны. В этом случае бактерии фиксируются формалином и окрашиваются эритрозином. Определение жизнеспособности является тестом на качество воды, основанным на присутствия в ней жизнеспособных индикаторных микроорганизмов (Es heri hia соН) [7]. Колонии выращиваются из отдельных бактерий, ее образующих (ЕОК). [c.86]

При исследовании биоповреждений металлоконструкций имеются определенные методологические трудности. Во-первых, био-повреждения материалов микроорганизмами носят специфический характер. В отличие от других видов повреждений в них непосредственно участвуют живые организмы, т. е. приходится иметь дело с биологическими объектами и процессами. Ркследования осложняются из-за видового многообразия микроорганизмов и взаимного влияния их друг на друга как положительного, так и отрицательного (симбиоз, комменсализм, конкуренция, антагонизм и т. п.), а также вследствие сложных процессов, протекающих внутри самого микроорганизма (метаболизм, анаболизм, катаболизм). Кроме того, нестабильность некоторых полимерных материалов и влияние их на микроорганизмы еще более усложняет проблему. Материалы конструкций техники и сооружений, а также условия эксплуатации последних, в особенности температурные факторы, влияют на развитие микроорганизмов и вызывают их эволюцию. Выявлено, что отдельные полимеры ЛКП и некоторые вещества (амины, кетоны, окислы азота и пр.), а также пониженная температура (-Ь4...-Ьб °С), искусственная аэрация и другие факторы определяют видовой состав (отбор) и адаптацию наиболее жизнеспособных микроорганизмов. В процессе отбора и адаптации повышается их агрессивность в отношении материалов, на которых они образуют колонии. [c.47]

Основной трудностью прн изучении бактериальных аэрозолей является отсутствие идеального пробоотборника, с помощью которого можно было бы точно измерить число бактерий в 1 см воздуха и распределение частчц-бацилло-носнтелей по размерам. Для определения концентрации живых бактерий в воздухе необходимо осадить их иа питательную среду, дать вырасти колониям и сосчитать их. Хотя многие микроорганизмы могут быть отобраны теми же методами что и частицы обычных аэрозолей (см. главу 7), в некоторых случаях следует серьезно позаботиться о том, чтобы процесс отбора проб не оказал вредного влияния на жизнеспособность микроорганизмов. Для спор вполне пригодна фильтрация, ио большая часть вегетативных форм при фильтрации через сухой фильтр погибает. Для не очень чувствительных к внешним условиям микроорганизмов хорошие результаты папучаются прн использовании миллипоровых фильтров Следует также указать на прямое осаждение бактерий иа слой агара или в жидкость, откуда затем отбирается определенная [c.353]

Механизм стерилизующей фильтрации. Хотя, как правило, мы считаем, что окончательный мембранный фильтр является абсолютным, т. е. способным извлекать все частицы, размеры которых превышают размер его пор, в действительности в нем всегда есть некоторая доля пор, имеющих большие размеры по сравнению с теми, которые указываются в технической документации, и пропускающих сквозь себя бактерии [118]. Как убедительно показал Воллхаусер [232], любой стандартный материал, из которого изготавливаются мембранные фильтры, может пропускать несколько микроорганизмов при определенных условиях и в некоторых пределах. Эти микроорганизмы можно обнаружить, если через мембрану пропустить достаточно большой объем жидкости и весь фильтрат подвергнуть анализу на присутствие в нем жизнеспособных микроорганизмов. Если в исходной смеси, подлежащей фильтрации, содержится небольшое количество микроорганизмов, то те редкие из них, которые попадут в фильтрат, не оказывают значительного влияния на качество стерилизации. Воллхаусер подчеркивает, что отделение бактерий фильтрацией является не методом стерилизации, z представляет собой асептическую процедуру. Таким образом, крайне важно,- чтобы в фильтруемой жидкости было как можно меньше бактерий. Поэтому множество проблем может быть снято, если исходный материал перед стерилизующей фильтрацией будет осветлен. [c.179]

В обоих случаях колонии подсчитываются спустя определенный инкубационный период при благоприятной для изучаемых микроорганизмов температуре. Соблюдая необходимые предосторожности, можно подсчитать колонии с точностью 5%. Обычно пробу бактериального аэрозоля отбирают непрерывно в течение определенного промежутка времени (/ мин) с постоянной скоростью (V л1мин), и среднее число жизнеспособных микроорганизмов в 1 л воздуха рассчитывают по формуле [c.353]

Метод счета на чашках потомства жизнеспособных микроорганизмов в осадках полосы прилива и отлива дает, по-видимому, значительно заниженные величины истинной численности бактерий. Количество бактерий, определенное методом прямого счета в осадках полосы прилива с помощью окраски акридиновым оранжевым и флуоресцентной микроскопии, колеблется от 1,17-10 до 9,97-10 бактерий в 1 г сухого осадка (Dale, 1974). Эти цифры соответствуют выходу биомассы в 30 г бактерий (сухой все) па 1 м , что равно постоянному урожаю бентоса. Кроме того, поскольку у бактерий скорости обмена веществ и размножения значительно выше по сравнению с популяцией беспозвоночных в бентосе, действительная бактериальная биомасса должна быть существенно больше. По-видимому, бактерии играют роль источника питания для бентоса. [c.65]

В результате многочисленных исследований, особенно микроорганизмов, подвергшихся воздействию стрессовых факторов (см. разд. 10.6), было показано, что для подсчета микроорганизмов идеальная структура пор мембран должна быть такой, чтобы отдельные клетки отчасти захватывались внутрь пор, а не располагались непосредственно на поверхности мембраны. Идеальная мембрана для подсчета микроорганизмов должна обладать определенной степенью анизотропии (см. разд. 2.3), причем размеры пор на верхней стороне мембраны должны быть больше среднего диаметра ее пор. При этом клетки задерживаются частично внутри матрицы мембраны, где они менее подвержены вредному влиянию неблагоприятных факторов, например высушиванию при контакте мембраны с воздухом или нехватке питательных веществ. Этот эффект получил название эффекта колыбели (англ. radling) [35], и подсчет жизнеспособных микроорганизмов на таких мембранах оказывается значительно более эффективным (см. также работу [124]). Поскольку мембраны Нуклепор задерживают микроорганизмы исключительно на своей верхней гладкой ло-верхности, они непригодны для целей подсчета жизнеспособных микроорганизмов. [c.238]

Значительное количество жизнеспособных клеток в пищевых продуктах свидетельствует или о недостаточной термической обработке сырья, или о не вполне тщательной мойке и дезинфекции оборудования, либо о неудовлетворительных условиях хранения, при которых раз внваются определенные группы микроорганизмов. Вь1С0кая бактериальная обсемененность свидетельствует о возможной порче продуктов. Содержание в пищевых продуктах 10 —10 микроорганизмов в 1 г — признак недоброкачественности. [c.60]

Лекарственные средства, не требующие стерилизации, обычно содержат микроорганизмы, поэтому их испытывают на микробиологическую чистоту проводят количественное определение жизнеспособных бактерий и грибов в 1 г или 1 мл препарата, а также выявляют микроорганизмы (бактерии семейства энтеробактерий, синегнойная палочка, золотистый стафилококк), которые не должны присутствовать в нестерильных лекарственных средствах. В 1 г или 1 мл лекарственного сырья для приема внутрь должно быть не более 1000 бактерий и 100 дрожжевых и плесневых грибов. В случаях местного применения (полость уха, носа, интравагинальное использование) количество микроорганизмов не должно превышать 100 (суммарно) микробных ютеток на 1 г или 1 мл препарата. В таблетированных препаратах не должно быть патогенной микрофлоры, а общая обсемененность не должна превышать 10 тыс. микробных клеток на таблетку. [c.79]

Как показали советские исследователи М. Н. Мейсель и Е. Н. Одинцова на примере дрожжей, действие ростовых веществ микроорганизмов очень многообразно. Влияние ростовых веществ распространяется не только на рост (откуда они в свое время и получили название), но и на строение клетки, на процессы ее обмена, на ее жизнеспособность. Поэтому более целесообразно эти вещества называть витаминами или витаминоподобными веществами. Витамины играют определенную роль в биохимических процессах микробной клетки. Еще в начале XX в. В. В. Пашутин высказал предположение, что между витаминами и ферментами имеется определенная связь. Н. Д. Зелинский считал, что витамины входят в состав ферментов и поэтому влияют на развитие микроорганизмов. Так, в 1922 г. он указал на то, что связь между ферментами и витаминами, возможно, и выражается в том, что последние необходимы как строительный материал для лервых >. [c.516]

Из светлгых нефтепродуктов и иболее легко поражаются микроорганизмами реактивное и дизельное топлива. Бензин оказывает определенное токсическое действие на микроо] гапизмы, более или менее сильное в зависимости от его состава. В обезвоженных топливах микроорганизмы пе размножаются, но могут остава ься жизнеспособными очень долгое время и при попадании воды снова начинают развиваться. [c.167]

Суть этого метода заключается в том, что на семена наносят большое число клеток Rizobium, соответствующих определенному виду растения-хозяина, что увеличивает вероятность быстрого образования клубеньков у проростков при участии данных микроорганизмов. Для этого нужно достаточно много бактерий, которые должны сохранять жизнеспособность до тех пор, пока в почве они не проникнут в корневые волоски. [c.358]

Температурное воздействие может оказывать как прямое, так и косвенное влияние на внесенпые в почву микроорганизмы. Так, например,повышение температуры вызывает более быструю минерализацию имеющихся в почве органических веществ, усиливает воздействие микробов-антагонистов и т. д. Ряд факторов подобного порядка не остается без влияния на жизнеспособность попавших в почву и не свойственных ей бактерий. Сильный нагрев почвы также может дать пастеризующий эффект. По указаниям некоторых исследователей, замораживание среды вызывает гибель до 90—99% клеток бактериальной культуры, не находящейся в состоянии спороношения. В то же время, по данным других микробиологов, в охлажденной среде отмирание бактерий протекает крайне медленно. Как отмечает Чистяков, (1937) в определении действия низких температур на микробною клетку решающее значение имеет состояние воды в среде. В том случае, когда среда замерзает полностью, микробы относительно быстро отмирают. Если же в среде остается переохлажденная жидкая фаза, то микроорганизмы могут не только сохраняться, но в некоторых случаях даже размножаться. [c.392]

Подобное явление, в частности, наблюдала О. Т. Болотина при исследовании влияния регенерации на активный ил. Было отмечено увеличение в активном иле числа жизнеспособных бактерий 7оо ]оеа гагп1 ега с 14 570 до регенерации до 22 320 после регенерации. Подобное увеличение может быть объяснено следующими причинами. Ранее было сказано, что в процессе очистки стопных вод в аэротенках-вытеснителях микроорганизмы активного ила проходят определенный цикл развития от молодости к старости . Известно, что микробы, которые проходят такой цикл развития, в конце его образуют особые покоящиеся или репродуктивные формы, которые при попадании в среду, богатую питательными веществами, дают начало новому поколению микробов. Однако, как указывал акад. Н. Д. Иерусалимский, необходимо учитывать, что состав бактериальной культуры никогда не бывает однородным и отдельные клетки могут оказываться на разной стадии развития. Поэтому в конце очистки некоторая часть микроорганизмов может еще не закончить своего цикла развития, и так как физиологическое развитие клеток необратимо, то при возвращении их в начало аэротенка на среду, богатую питательными веществами, т. е. не соответствующую их фазе развития, они отмирают. Введение регенератора, в котором отсутствуют питательные вещества, позволяет закончить таким клеткам цикл развития. В результате при той же массе активного ила число жизнеспособных микробиальных клеток оказывается большим, чем в нерегенерированном иле, что и ведет к повышению общей скорости окисления. [c.51]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология