Глюкоза калибровочная кривая

Содержание сахаря в испытуемом растворе рассчитывают по калибровочной кривой, составленной по стандартным (рабочим) рястворам глюкозы. На оси абсцисс откладывают пеличины, характеризующие со- [c.225]

Рис. 31. Калибровочная кривая глюкозы

Рис. 14. Калибровочная кривая стандартных растворов глюкозы.

Для определения по этому методу прежде всего строят калибровочную кривую 0,25 г 2-метил-4,6-динитрофенола растворяют в 10%-ном растворе едкого натра и разбавляют в мерной колбе до объема 250 мл. К 25 мл полученного раствора прибавляют 10%-ный раствор едкого натра до объема 100 мл. В пять пробирок вносят последовательно 0,5 1,0 2,0 4,0 6,0 мл этого раствора. Далее в каждую пробирку градуированной пипеткой добавляют такое количество 10%-ного раствора едкого натра, чтобы общий объем жидкости в каждой пробирке составлял 10 мл. К полученным растворам прибавляют по 5,0 мл этилового спирта и 1,0 мл 1%-ного водного раствора глюкозы. После этого содержимое пробирок хорошо перемешивают и выдерживают на водяной бане при 60 °Св течение 20 мин. Одновременно приготовляют контрольный раствор, для чего к 10 мл 10%-ного раствора едкого натра в шестой пробирке прибавляют 5 мл спирта и 1 мл раствора глюкозы и обрабатывают так же, как и пробы с препаратом. После охлаждения водой до комнатной температуры содержимое каждой пробирки переносят в соответствующий градуированный цилиндр и разбавляют в нем дистиллированной водой до объема 100 мл. Растворы тщательно перемешивают и измеряют поглощение света растворами (экстинкцию) при помощи колориметра в кювете с толщиной слоя 1 см. Измерения производят относительно контрольного раствора, не содержащего 2-ме-тил-4,6-динитрофенола. По полученным данным строят кривую зависимости интенсивности поглощения света растворами от содержания в них 2-метил-4,6-динитрофенола. В исходных растворах соответственно содержится 0,125, 0,25, 0,5, 1,00 и 1,50 мг 2-метил-4,6-динитрофенола. [c.101]

Расчет. Количество глюкозы в элюате, выраженное в микрограммах (мкг), находят по калибровочной кривой для глюкозы. Концентрацию глюкозы в анализируемой пробе, которую хроматографировали, вычисляют по формуле [c.96]

К 1 мл образца, содержащего до 70 мкг сахаров, добавляют последовательно 1 мл 5%-ного раствора фенола, 5 мл 98%-ной серной кислоты (при аккуратном перемешивании), охлаждают до комнатной температуры и выдерживают 15-30 мин. Измеряют оптическую плотность раствора при 490 нм и расчитывают концентрацию сахаров по калибровочной кривой, полученной с использованием глюкозы. [c.146]

Ход определения. 0,5 мл спинномозговой жидкости переносят пипеткой в центрифужную пробирку, добавляют 3 мл щелочного раствора сульфата двухвалентной меди и поступают так же, как при определении глюкозы в крови. Результат вычисляют по калибровочной кривой способом, описанным в предыдущем параграфе. Для титрования пользуются 0,01 М раствором комплексона. [c.520]

При низких концентрациях глюкозы (0,05 —20-10 М) калибровочную кривую можно получить либо из начальных участков кривой изменения тока во времени (кинетический метод), либо из стационарных значений тока. Длительность определения меньше 12 с при использовании кинетического метода и равна 1 мин при измерении стационарных токов. Воспроизводимость результатов лучше 2% при измерении начальной скорости (кинетический метод) и 1% при измерении стационарного тока. Ошибка, полученная при использовании метода наименьших квадратов для построения калибровочного графика из данных кинетических кривых, равна 1,9/ , а из стационарных кривых - 2,1%. [c.173]

Количество сахаров определяют по калибровочной кривой, построенной по результатам измерения экстинкции аналогичным способом обработанных стандартных растворов сахара (например, глюкозы). [c.108]

Для измерения концентрации глюкозы с помощью энзимного электрода на основе глюкозооксидазы последний необходимо калибровать по стандартным растворам глюкозы, подобно другим ионоселективным мембранным электродам. Вид калибровочных кривых определяется как концентрацией энзима внутри геля, 324 [c.324]

Типичные кривые зависимости потенциала от времени показали, что первоначально в течение 2 с ток уменьшался из-за диффузии глюкозы через целлофан и (или) слой геля с ферментом, а затем увеличивался, достигая стационарного значения. Таким образом, анализ можно проводить двумя способами либо по первоначальной скорости тока, либо по его окончательному значению в стационарном состоянии (примерно 1 мин). Обе эти величины в функции от концентрации глюкозы дают удовлетворительные калибровочные кривые. Изучение вопроса о влиянии pH на ток показало, что значение pH = 6,6 оптимально для метода скорости , а pH = 6,9 — наилучшее для метода стационарного состояния . Сравнивая три типа энзимных мембранных электродов, установили, что их стабильность во времени наилучшая для [c.327]

Для каждой серии определений строят калибровочную кривую по данным оптической плотности, полученной при анализе стандартных растворов глюкозы, концентрацией 10— [c.173]

Оптическая плотность исследуемого раствора должна лежать в рабочей зоне калибровочной кривой в пределах 10—150 мкг глюкозы. Если же при измерении интенсивности окраски исследуемой пробы полученные значения не укладываются в калибровочную кривую, то опыт повторяют с меньшим или большим количеством исследуемого ферментного раствора. [c.174]

Аликвотную часть крахмального раствора с ожидаемым содержанием крахмала 20—200 мкг отбирают пипеткой в промытую кислотой пробирку и разбавляют водой до 2,0 мл. Одновременно подготавливают серию контрольных пробирок, содержащих от О до 200 мкг в-глюкозы в 2 мл раствора. Пробирки погружают в холодную воду и в каждую из пипетки или бюретки прибавляют по 10 мл антронового реактива. Содержимое пробирок тщательно перемешивают. Возможно осаждение антрона, по это не влияет на результаты определения. Пробирки нагревают 15 мин на кипящей водяной бане (до максимального окрашивания), затем быстро охлаждают, погружая их в холодную воду, и измеряют поглощение при 620 ммк. При определении крахмала по калибровочной кривой для с-глю-козы соответствующие значения, полученные для в-глюкозы, необходимо умножить на 0,90. [c.313]

Зависимость оптической плотности от концентрации d-глюкозы, D-галактозы, о-маннозы, 6-дезокси-ь-маннозы (ь-рамнозы), п-арабино-зы и D-ксилозы имеет линейный характер. Для о-ксилозы и о-глюкозы линейность сохраняется в интервале от О до 150 мкг. Количество сахара в образце определяют по калибровочной кривой, построенной для известных сахаров, которые были нанесены на ту же пластинку, что и анализируемая смесь. Для смесей, содержащих 20—100 мкг каждого сахара, точность определения составляет 3%. [c.50]

Количество глюкозы определяется по калибровочной кривой стандартного раствора глюкозазона. В качестве стандарта служит 0,01% спиртовой раствор, 1 мл которого содержит 100 мкг глюкозазона, что соответствует 50 мкг глюкозы. [c.45]

По данным экстинкции, с помощью калибровочной кривой определяется содержание глюкозы в растворе глюкозазона, а затем вычисляется количество глюкозы, взятой на определение ее удельной активности. Так как глюкоза ткани составляет 43% общего количества глюкозы, то на долю глюкозы [c.47]

Н). На основании этих данных строится калибровочная кривая (рис. 14), по которой и определяется содержание глюкозы в испытуемых пробах. [c.61]

По калибровочной кривой находят содержание глюкозы в фото-метрируемых пробах глюкозы (в мг %) [c.61]

СИ, что может вызвать тяжелые ожоги при попадании на кожу или в глаза. Необходимо пользоваться защитными очками и перчатками. Нельзя насасывать раствор в пипетку ртом. Необходимо знать меры по оказанию первой помощи при попадании кислот на кожу и в глаза.) Пробирки помещают на 15 мин в водяную баню с температурой 25 °С и затем снимают показания оптической плотности в каждой пробе при 488 нм против контрольного образца, приготовленного без глюкозы (разд. 16.1.1). Концентрацию глюкозы в пробах определяют по стандартной калибровочной кривой, отражающей зависимость между оптической плотностью стандартных растворов и концентрацией глюкозы. [c.296]

Пробы разбавляют дистиллированной водой так, чтобы они содержали 0,05—0,3 мг глюкозы в 1 мл. Устанавливают pH от 6,8 до 7,2 добавлением 0,1 н. КОН или 0,1 н. НС1. Для определения pH можно пользоваться индикаторной бумагой. Готовят контрольную пробу и серию стандартов, содержащих 0,05—0,3 мг глюкозы в 1 мл, путем разбавления дистиллированной водой. Добавляют фермент и хромофор и инкубируют смесь согласно инструкции фирмы-изготовителя. Добавляют пастеровской пипеткой 1 каплю 4 н. НС1 и определяют оптическую плотность в стеклянной кювете при 400 нм разд. 16.1.1). Определяют концентрацию глюкозы в пробах по стандартной калибровочной кривой, отражающей зависимость между оптической плотностью стандартных растворов и концентрацией глюкозы. [c.297]

Стандартный раствор глюкозы для составления калибровочной кривой в 3,5 см раствора глюкозы (от 10 до 200 мкг глюкозы в 1 см" воды) добавить 5 см антрона и колориметрировать. [c.350]

Количество глюкозы, образующееся при расщеплении дисахарида, рассчитывают по калибровочной кривой, построенной при применении стандартных растворов глюкозы. [c.131]

Берут 5 пробирок. Добавляют во вторую 0,2 жл раствора глюкозы, содержащего 40 жг% глюкозы, в третью — 0,4 м,л, в четвертую — 0,6 жл и в пятую — 0,8 жл этого раствора. В пробирки добавляют воду Б первую мл, во вторую — 1,6 жл, в третью — 1,4 жл, в четвертую — 1,2 мл, в пятую — 1,0 мл. В каждую пробирку вносят по 0,2 мл крови, содержащей около 80 мг% сахара (сахар определяют по Хагедорну—Иенсену). Содержимое пробирок обрабатывают, как описано в работе 130. Полученные результаты представляют в виде калибровочной кривой, на оси абсцисс откладывают содержание сахара в мг% , а на оси ординат найденные оптические плотности. Попытка строить калибровочную кривую по растворам глюкозы, не содержащим кровь, дает неточные результаты. Метод описан для колориметра ФЭК-М, но его можно применить и на колориметрах, снабженных светофильтрами с узкими полосами пропускания, например на ФЭК-Н-57. В этом случае вместо кювет с водой ставят кюветы, содержащие раствор, полученный в контрольном опыте, где вместо крови была взята вода, обработанная пикриновой кислотой и щелочью, как описано в работе 130. Фотометрия против кюветы с водой дает на ФЭК-Н-57 очень высокие значения оптической плотности, что может привести к большим ошибкам. [c.291]

Построение калибровочной кривой. Готовят точно 1 %-ный раствор глюкозы (или другого вещества, которое хотят определять). Он содержит 10 мкг/мл или 100 мкг глюкозы в 0,01 мл. Из этого раствора разбавлением дистиллированной водой готовят растворы, которые в 0,01 мл содержат 90, 80, 70, 60, 50, 40, 30, 20 и 10 мкг глюкозы. На ленту хроматографической бумаги в разные места наносят по 0,01 мл каждого приготовленного раствора. На другую ленту наносят разные количества 1%-ного раствора — 0,01 0,02 мл и т. д., которые соответственно содержат 100, 200 мкг и т. д. глюкозы. После высыхания пятен растворов на воздухе ленты на мгновение погружают в раствор анилинфталата, осушают между листов фильтровальной бумаги и кладут на ребро в сушильный шкаф. При температуре 100°С ленты выдерживают 10 мин. (Для других веществ время и температура проявления указаны в табл. 5.) Из лент вырезают окрашенные пятна, элюируют и определяют оптическую плотность элюата, как описано ниже. На основании полученных данных строят кривую зависимости оптической плотности (интенсивности окраски) элюата от количества глюкозы, взятой на реакцию с анилинфталатом, т. е. калибровочную кривую. [c.95]

Если анализируемые частицы участвуют в лимитирующей стадии процесса, то их концентрация будет обратно пропорциональна времени, необходимому для протекания реакции до заранее выбранной степени. Однако при этом необходимо соблюдение двух условий 1) высокой ионной силы, что позволяет обойтись без введения поправок на изменения коэффициентов активности 2 - высокой концентрадии других компонентов, что позволяет пренебречь ее уменьшением. Пробы с неизвестной концентрацией можно анализировать, пользуясь калибровочной кривой или предварительно экспериментально определенным коэффициентом пропорциональности. Степень протекания реакции выбирают так, чтобы начальное и конечное значения аналитического параметра были удобны для измерения. Малмстадт и Пардю [75] использовали фиксированное изменение разности потенциалов между электродами в анализируемом и стандартном растворах. Они показали, что в интервале концентраций 5 — 500 мг/л глюкозу можно определить с относительной ошибкой 1%, используя ее окисление под действием фермента. Реакция протекает в две стадии глюкозоксидаза [c.76]

Навеску мальтозы 500 мг, взвешенную на аналитических весах, растворяют в мерной колбе на 100 мл и дистиллированной водой. доводят до метки. Для колориметрирования берут 1 мл в мерную пробирку емкостью 10 мл, прибавляют 3 мл ферментативной смеси п в1.1держивают 30 минут в водяной бане при температуре 45 1°. Затем переставляют пробирку в холодную воду, тем самым резко обрывая реакцию. Когда содержимое пробирки охладится до комнатной температуры, объем раствора в ней доводят до метки 50%-ной серной кислотой, а затем производят измерение интенсивности окраски фотоэлектроколориметром со светофильтром № 5 при длине волны 550 ммк. Параллельно ставят глухой опыт. Содержание глюкозы определяют по калибровочной кривой, которую строят по стандартным растворам глюкозы 0,0025%-, 0,0050%-, 0,0075%-, 0,010%-ным. Для колориметрирования берут по 1 мл раствора в мерную пробирку емкостью 10 мл. дальнейшие операции проводят так, как описано выше. [c.48]

Заслуживает внимания спектрофотометрический метод определения растворимости целлюлозы в щелочи [23, 2,4], особенно для целлюлоз с низкой растворимостью. Метод основан на определении ионов хрома с помощью спектрофотометра при длине волны около 600 ммк, с последующим расчетом по калибровочным кривым содержания фрадций, перещедщих в раствор. Калибровочные кривые строят по простым сахарам, как правило, по глюкозе, либо по глюкозе и ксилозе. Спектрофотометрический метод имеет хорошую воспроизводимость он относительно прост, быстр по выполнению и может применяться для очень маленьких образцов с сохранением достаточной точности. [c.199]

Для расчета содержания карбонильных групп предварительно строят калибровочную кривую. С этой целью готовят 0,1%-ный раствор химически чистой глюкозы. 0,05 мл этого раствора вносят микропипеткой в пробирку, добавляют туда 0,5 мл 0,2 н. раствора едкого кали и 0,5 мл 0,2%-кого раствора ТТЗ, нагревают 10 мин на кипящей водяной бане, охлаждают, доливают метанолом до объема 10 мл и колориметрируют. Найденная величина оптической плотности соответствует 0,05 мг глюкозы, или 0,007775 мг СО-групп. Эти данные наносят на график, откладывая по оси абсцисс оптическую плотность, а по оси ординат — содержание СО-групп полученную точку соединяют с началом системы координат. [c.347]

Остаток, содержащий метилгликозиды, растворяют в 100 мл воды, отбирают аликвотную пробу (1 мл), добавляют к ней 1 мл 5%-ного раствора фенола и быстро вливают 5 мл концентрированной серной кислоты. Поглощение измеряют при 490 ммк, концентрацию г гюкозы в пробе определяют по стандартной калибровочной кривой. Содержание глюкозы в образце найдено 41%, рассчитано по расходу перйодата 40%. [c.488]

В случае прибавления носителя расчет несколько усложняется. Определяемое по калибровочной кривой содержание глюкозы в осадке глюкозазона является суммарной величиной, включающей глюкозу ткани и глюкозу носителя. Поэтому при вычислении величины удельной активности нужно знать, какой процент составляет глюкоза в глюкозазоне к общему количеству глюкозы ткани, определение которой производится по методу Фужита и Иватаке, описанному ниже (см. стр. 49—50). [c.47]

Пример расчета. Содержание глюкозы в 1 г мышеч-ной ткани составляет 0,75 мг. Количество глюкозы, добавленное в качестве носителя, равняется I мг на 1 г ткани. Следовательно, в общем количестве глюкозы, содержащейся в осадке глюкозазона и определяемой по калибровочной кривой, глюкоза [c.47]

Ферментативный иммунохроматографический метод. Добавляют 10—20 мкг образца (буферного раствора, сыворотки или цельной крови) к 1 мл ферментного реагента (приготовленного на 0,1 М натрий-фосфатном буфере, pH 7,0 и содержащего 0,2 моль хлорида натрия 0,2—1,0 мг конъюгата [теофиллин — пероксидаза] 100 мг глюкозооксидазы 2 г неиммунных IgG барана). В полученную смесь погружают край индикаторной полоски (4x90 мм), содержащей иммобилизованные антитела против теофиллина ( 30 мкг/см ),и дают растворителю подняться за счет капиллярных сил до противоположного края полоски (на это уходит 10 мин). Переносят полоску в проявитель (приготовленный на 0,01 М натрий-фосфатном буфере, pH 7,0, и содержащий в 1 л 0,02 моль хлорида натрия 0,5 г тритона QS-44 400 мг 4-хлорнафтола 0,05 моль глюкозы 2 г бычьего сывороточного альбумина). Через 5 мин на бумаге появляется голубая окрашенная область в форме ровной полосы или ракеты. Высота окрашенной области пропорциональна концентрации определяемого вещества. Для количественного анализа предварительно строят калибровочную кривую, отражающую зависимость высоты окрашенного фронта от концентрации теофиллина. [c.135]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология