Цистеин иодом

Исследуемый материал растворяют в 6 М мочевине при pH 7,2 и добавляют меркаптоэтанол в 10-кратном молярном избытке по отношению к содержанию цистеина. Смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 3 ч, затем к ней добавляют иод- или бромацетат в 50—100-кратном молярном избытке по отношению к цистину, содержащемуся в исследуемом образце, оставляют на 2 ч при комнатной температуре и на сутки при 4°С. После этого раствор диализуют против дистиллированной воды для удаления мочевины. [c.166]

Зная окислительный потенциал этой реакции (который, как показывает уравнение, возрастает с повышением концентрации водородных ионов), можно вычислить условия, при которых будет происходить окисление гидрохинона или восстановление хинона. В приблизительно нейтральном растворе гидрохинон окисляется иодом количественно (см. гл. IV, а также том III). Другие хиноны ведут себя аналогично паре хинон — гидрохинон. Также подобно этой паре, хотя и несколько более сложно, поведение системы цистин — цистеин. Обратимые процессы окисления и восстановления некоторых красителей мы рассмотрели в главе, посвященной индикаторам. Большинство других, применяемых в анализе органических соединений, окислительновосстановительных процессов необратимо. [c.275]

Подобно ряду других антибиотиков глиотоксин обратимо инактивируется цистеином. Активность восстанавливается при окислении иодом немедленно, а при хранении инактивированного продукта на воздухе — постепенно [c.81]

Нами было изучено потенциометрическим методом окисление иодом тиосалициловой кислоты, цистеина, диэтилдитиокарбамат-, этилксантогенат-, диэтилдитиофосфат-ионов в водных растворах уксусной кислоты и этанола. Соответствующие окислительно-вос-становительные системы титровались солями тяжелых металлов с количественными результатами. [c.32]

Цистеин, глутатион, меркап- Иод Много [c.497]

Для количественного определения цистеина рекомендуется окисление его иодом в цистин. Найдено, что расход иода на молекулу цистеина в большой мере зависит от температуры, величины pH и концентраций как самого цистеина, таки иода и иодида калия [212]. Такая же зависимость суш,ествует и при окислении цистеина бромом или бромид-броматом [213] (см. стр. 277). [c.276]

Во-вторых, при добавлении постоянного количества тиола, отношение [121/ПГ уменьшается быстрее при низких концентрациях иода, чем при высоких. Следовательно, во время опыта чувствительность ячейки повышается. Когда остается очень мало иода, даже следы тиола вызывают значительное изменение потенциала. Однако в начале опыта имеется 5 микромолей иода. Поэтому если общее количество тиолов, элюируемых во время опыта, составляет менее 1 микромоля, чувствительность ячейки в конце опыта будет только на 5% выше, чем вначале. Для любых практических целей зависимость между высотой ступени и количеством тиола в таких условиях можно считать линейной. В противном случае необходимо построить калибровочную кривую или же во время опыта сменить стандартный раствор иода и иодида. Следует отметить, что некоторые тиолы (например, цистеин) окисляются иодом и после стадии дисульфида. Если такое явление во-время не обнаружить, то оно может привести к значительному завышению результатов. [c.281]

В некоторых случаях реакция протекает количественно лишь при 0°С или при близкой к нулю температуре 22, Большие затруднения встречаются при титровании цистеина, так как на результаты титрования оказывают влияние концентрации цистеина и иода. Однако при косвенном определении (титровании избытка иода) при 0°С в 1 н. растворе соляной кислоты, содержащем 0,5% иодида калия, получаются удовлетворительные результаты. Аналогично ведет себя глутатион . Установлено что в приблизительно 80%-ной уксусной кислоте при комнатной температуре цистеин можно определять прямым титрованием иодом. Меркаптокарбоновую кислоту можно также титровать подом в среде 50%-ной уксусной кислоты [c.587]

Выполнение анализа. К 0,2—0,5 мг гидрохлорида цистеина прибавляют 0,3 мл воды, 3 мл ледяной уксусной кислоты и по меньшей мере двойное по сравнению с требуемым количество 0,004 н. раствора иода в ледяной уксусной кислоте. Смесь оставляют на 1 мин при 20°С, затем разбавляют равным объемом воды и титруют 0,004 н. раствором тиосульфата натрия. При 10-минутном действии иода в среде 90%-ной уксусной кислоты получаются такие же результаты. [c.587]

Работа 87. Проба на цистеин и гомоцистеин (иод-азидная) [c.281]

Непосредственное титрование цистеина иодом неиоз-можно из-за окисления цистеина вплоть до цистеин-сульфокислоты [8]. [c.14]

Надсерная кислота также дает хорошие результаты [393]. Исследование кинетики окисления сернокислым таллием показало, что-эта реакция является бимолекулярным процессом с энергией активации, равной 24,200 кал [394]. При обработке цистина серебряной или медной солями происходит сложная реакция, заключающаяся в том, что цистин частью восстанавливается в цистеин и частью, окисляется в цистеиновую [394,395] или в сульфиновую кислоту. Как показано Оимонсеном [396], при окислении цистина иодом сульфиновая кислота образуется, повидимому, в качестве проме- [c.169]

В пятом периоде периодической системы только молибден н иод обладают четко выраженными биологическими функциями. Молибден активирует ксантиноксидазу и альдегидоксидазу вероятно, он входит в состав связывающего центра нитратредуктузы и сульфитоксидазы. Механизм, с помощью которого молибден связывает субстрат и участвует в каталитической стадии ферментативной реакции, далеко еще не выяснен. Модельные эксперименты с комплексами молибден — цистеин как будто указывают на возможную связь молибдена с серой в его ферментных комплексах. Все три вышеназванных фермента содержат также флавины [Р1], хотя молибден, по-видимому, не связан с ними непосредственно. [c.365]

S-защищенным пептидом без предварительного деблокирования. При этом цистеин или блокированное производное цистеина с электрофильно-отщепляемой S-защитной группой сначала переводится иодом, дироданом [496] или метоксикарбонилсульфенилхлоридом [494, 495] в активированное промежуточное соединение. Последнее реагирует со второй молекулой цистеина или S-блокированного цистеина (R = Н или электрофильно-отщепляемая защитная группа, такая как Trt, Dpm, A m, Thp и др.) и дает производное цистииа [c.205]

Позднее в качестве ценного интермедиата в пептидном синтезе предложен S-ацетамидометилцистеин (66) [58]. Его легко получить из ацетамидометанола схема (27а) и он устойчив в широком диапазоне кислых и щелочных условий. Ацетамидометильная (Аст) группа гладко удаляется при pH 4 в присутствии иона Hg +. Особого внимания заслуживает окислительное отщепление действием иода с непосредственным образованием содержащих дисульфидную группировку пептидов цистеина [59]. Этот процесс может идти как внутри-, так и межмолекулярно схема (28) . [c.388]

Азид-иод. Хроматограмму опрыскивают 0,025 М раствором Ij в 50%-ном этаноле, содержащем 1,5% NaNj. На светло-коричневом фоне моментально проявляются белые пятна цистеина, затем (через 15 мин) цистина, далее (через 60 мин) метионина. Пятна лучше видны в УФ-свете. Этот реагент позволяет обнаруживать также тиамин. [c.393]

Создание дисульфидных связей обычно проводится на одном из последних этапов синтеза обработкой соответствующего тиоль-ного предшественника с помощью подходящих окислителей кислорода воздуха, иода, феррицианида калия KJFe( N)h. Если в цепи имеется лишь два остатка цистеина, то при окислении 5Н-групп [c.153]

Количественное содержание определяют методом кулонометрического титрования, разработанным в Институте биофизики М3 СССР (В. Т. Харламов, А. А. Ин-кин). Метод основан на быстром количественном окислении цистеина-S иодом, который выделяется в анодной ячейке при пропускании тока через буферный раствор (pH = 6,7), содержащий KI и навеску цистеи-на-S . Индикатором титрования служат электроды, регистрирующие появление свободного иода в растворе. Метод удобен в работе, для анализа требуется около 15 мг вещества ошибка метода < 1,5%. [c.14]

Люкас и Кинг [423] подвергли критическому изучению метод Мёрнер — Окуда. Они отмечают невозможность установить какце-либо простые правила, которые позволили бы получать количественные результаты. Температура, кислотность среды, концентрация цистеина и иода, скорость и порядок прибавления реагентов, концентрация KI — все это в разных направлениях и в разной степени сказывается на связывании иода. Авторы рекомендуют соблюдать следующие условия [c.197]

Основы. метода. Цистеин реагирует с иодом избыток иода определяют газометрическн по азату, выделяющемуся после реакции с гидразином (см. Ван-Сляйк и Гаукинс [635]). [c.207]

Основы метода. Во время гидролиза белка иодистоводородной кислотой образуются цистеин и тиолактон гомоцистеина. Цистеин можно определить окислением иодом до цистина, кольцо тиолактона гомоцистеина разложить щелочью (МН40Н) и образовавшийся гомоцистеин, в свою очередь, оттитровать иодом. [c.212]

Симпсон с сотр. [12] с успехом применял АцИ при исследовании карбоксипептидазы А. При действии АцИ ацилировалось примерно 4 из 19 остатков тирозина, 2 из них деацилировались с более высокой скоростью. В присутствии р-фенилпропианата подавлялось ацилирование двух остатков из четырех. Уксусным ангидридом ацилируются 6—7 остатков тирозина, а иод модифицирует 6 остатков. Таким образом, АцИ является наименее реакционноспособным реагентом. В трипсине АцИ ацилирует6,7 из 10 остатков тирозина. Эта величина близка 6,0 — числу остатков, взаимодействующих с ЦФ [30] и способных ионизоваться с высокой скоростью [6]. Оксигруппа остатков серина и сульфгидрильная группа цистеина лишь частично модифицируется этим реагентом. [c.353]

В отличие от растительных волокон, не содержащих серы, животные волокна содержат соединения серы в цистеино-вых составляющих протеинов. Эти соединения содержат группу —5Н, способную ускорять иод-азидную реакцию. Поэтому эту реакцию, описанную на стр. 308, можно использовать для отличия шерсти от хлопка. [c.676]

Выше указано (стр. 132), что превращение цистина или цистеина в таурин можно осуществить путем окисления и декарбоксилиро-вания [154, 455а,б]. Образующаяся в качестве промежуточного продукта цистеиновая кислота (а-амино-р-сульфопропионовая кислота) может быть получена различными путями. Цистин окисляется кислородом в присутствии соляной, но не серной кислоты [388].. Медные соли ускоряют реакцию [389]. Перекись водорода является удовлетворительным окислителем, особенно в присутствии ванадиевой, вольфрамовой или молибденовой кислот [390] или сернокислой соли двухвалентного железа [391]. Окисление иодом в кислом растворе протекает практически количественно [392] [c.169]

Реакция с сульфгидрильными группами цистеина, уреазы, папаина или денатурированного овальбумина и последующее определение остаточных SH-rpynn юз-105 Д/ етод пригоден для определения не только серного иприта, но и всех ОВ, действующих на сульфгидрильные группы, в частности, таких, как бромацетон, хлорпикрин, эфиры иод- и бромуксусной кислоты. [c.85]

Соединения, содержащие группу С =5 или С—5Н, катализируют реакцию 2ЫаЫз+ J.2=2NaJ —ЗЫ,. Для опрыскивания хроматограмм используют раствор, содержащий 1,5% азида натрия в 0,01 М растворе иода в этаноле. Тиоловые соединения, подобные цистеину, вызывают быстрое выделение азота с одновременным обесцвечиванием коричневого фона. Цистин реагирует приблизительно за 15 мин, метионин — за 60 мин цистеиновая кислота реакций не дает. [c.29]

ДО полного изменения в расположении пептидных цепей. Развертывание пептидных цепей при денатурации подтверждается тем, что денатурированные белки дают более интенсивные цветные реакции, чем нативные белки. Это было впервые установлено для реакций на сульфгидрильные группы цистеина и на дисульфидные группы цистина [136]. Реакция с нитропуссидом, титрование железосинеродистым калием [39], ацетилирование [137] и полярография [138] — все эти методы определения сульфгидрильных и дисульфидных групп показали, что число этих групп в денатурированных белках больше, чем в тех же белках, находящихся в нативном состоянии. Денатурированные белки дают также более интенсивные цветные реакции на тирозин с фосфорномолибденовой кислотой [139, 140] и с диазореактивом [141], а на аргинин с реактивом Сакагуши [142] и присоединяют большие количества иода [143]. В то время как в нативном лакто-глобулине только 12 -аминогрупп лизина реагируют с динитрофторбензолом, в денатурированном лактоглобулине эту реакцию дает 31 е-аминогруппа, т. е. все содержащиеся в нем е-аминогруппы [144]. Таким образом, все приведенные данные подтверждают ту точку зрения, что при денатурации в связи с развертыванием пептидных цепей становятся доступными те активные группы, которые в нативных белках недоступны для соответствующих реактивов. Подобным же образом можно объяснить меньшую устойчивость ряда денатурированных белков по отношению к действию трипсина. Как известно, многие денатурированные белки гораздо легче расщепляются трипсином, чем те же самые белки в нативном состоянии. Это можно рассматривать как следствие того, что при денатурации разрываются связи, тесно удерживающие пептидные цепи друг около друга, и обнажаются те пункты, на которые может воздействовать фермент [146, 147]. Можно полагать, что трипсин, гидролизуя (хотя и медленно) нативные белки, гидролизует, в сущности, содержащиеся в них следы денатурированных белков. При этом процессе должно происходить непрерывное нарушение равновесия в системе нативный белок—денатурированный белок и смещение этого равновесия в правую сторону. [c.149]

Мочевая кислота в моче (реагирует с 2 атомами иода) (см. № 10) п-Бромфенилмсркаптуровая кислота Цистеин (см. № 29) [c.278]

Количество глутатиона может быть впол1 е точно определено иодометрическим путем, так как расход иода значительно меньше зависит от условий титрования, нежели в случае цистеина (см. стр. 276). Количество израсходованного иода соответствует теоретическому, если реакцию проводить при температуре ниже 25° и при pH меньше 5 с уменьшением концентрации расход иода на моль глутатиона повышается. [c.277]

Найдено, что в уксуснокислых растворах дегидрирование сульфгидриль-пых соединений при действии иода протекает быстро и в точных стехиометрических соотношениях [218]. В этих условиях становится излишним удаление кислорода воздуха. Теоретические величины для г. утатиона, тиомолочной кислоты и цистеина были получены практически только в растворе 70-процентной уксусной кислоты. При микроопределении применяют навески сульфгидриль-ного соединения от 0,2 до 0,5 лгг и двойное по сравнению с вычисленным количество 0,004 н. раствора иода в уксусной кислоте реакционную смесь оставляют па 1 мин. при 20°, разбавляют равным объемом воды и титруют остаток иода 0,004 п. раствором тиосульфата. Для количественного определения глутатиона, кроме того, рекомендуется метод, основатный на осаждении его в виде нерастворимого кадмиевого соединения, образующегося при действии лактата кадмия [219]. Синяя окраска, которую дает глутатион с фосфориовольфрамовой кислотой, использована в колориметрическом методе определения глутатиона. [c.277]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология