Яичный альбумин выделение

В 1889 г. Гофмейстер обнаружил, что яичный альбумин, выделенный из белка куриных яиц, кристаллизуется из концентрированного раствора сернокислого аммония, из которого предварительно были осаждены остальные белки [232]. Наилучшие результаты могут быть достигнуты в том случае, если рН раствора, из которого осуществляется кристаллизация, приблизительно равен 4,8, а температура близка к 20° [162]. Яичный альбумин, приготовленный этим методом или по какому-либо из его вариантов [224, 233, 234] и перекристаллизованный несколько раз, является, как показали иммунологические [235] и иные пробы [236, 237], чистым веществом. Электрофорез обнаруживает наличие двух [c.54]

При растворении полярного яичного альбумина в воде (полярный растворитель) процесс вначале идет только вследствие уменьшения энтальпии. Энтропия в начальной стадии растворения имеет даже отрицательные значения из-за сильной гидратации полимера. (Молекулы воды в гидратной оболочке переходят в более упорядоченное состояние. Кроме того, не исключено уменьшение гибкости молекул полимера при гидратации его молекул.) Но, конечно, для того, чтобы полимер мог растворяться, абсолютное значение ДЯ должно быть больше ГД5. Однако по мере гидратации гидратированные молекулы полимера растворяются в избытке воды со все меньшим выделением тепла. Растворение в этой конечной стадии идет уже главным образом за счет возможности распределения молекул по всему объему системы, т. е. уже за счет энтропийного фактора. [c.442]

Р н с. 195. Зависимость величины полярографического тока I, показателя степени I — -кривой и скорости тангенциального движения раствора около капли V от потенциала электрода при каталитическом выделении водорода. 5- 10 в м. раствор яичного альбумина в аммиачном буфере [16]. [c.385]

Развитие пространственной структуры геля яичного альбумина (pH > 10) представлено на рис. 44. Прочность возникает сразу же, достигая максимального значения в течение малого промежутка времени, а затем происходит самопроизвольное плавление геля, которое сопровождается выделением аммиака. Из рис. 45 видно, что в щелочной области процесс гелеобразования также сопровождается конформационными превращениями молекул яичного альбумина — удельное оптическое вращение увеличивается до определенного значения и далее не изменяется. Плавление геля не сопровождается дальнейшим изменением удельного оптического вращения. Исследование концентрационной зависимости максимальной прочности структур в растворах яичного альбумина показало, что минимальная концентрация белка, способная образовать пространственную структуру, при pH < 3 больше 2 г/100 а при pH > 10 больше 3,5 г/100 мл. Результаты представлены на рис. 46, из которого видно, что кривая зависимости Р/ от концентрации имеет параболический вид. [c.127]

Доказательством прочности связи первой порции воды с белками является высокая энергия этой связи и заметное сокращение объема, сопровождающее процесс связывания. Теоретический расчет показал, что связывание молекул воды белком на стадии, соответствующей первому участку кривой, сопровождается выделением значительного количества энергии — от 3 до б ккал на 1 моль связанной воды. Связывание воды на этом этапе сопровождается также заметным увеличением плотности так, плотность яичного альбумина после связывания 6,15% воды возрастает с 1,2655 до 1,2855. Удельный объем соответственно понижается с 0,792 до 0,777 мл/г. В среднем это уменьшение объема для различных белков составляет примерно 0,05— 0,08 мл на 1 г сухого белка. [c.175]

Растворы высокомолекулярных веществ в термодинамически равновесном состоянии аналогично истинным растворам обладают абсолютной агрегативной устойчивостью. Высокая устойчивость коллоидных растворов высокомолекулярных соединений определяется двумя факторами — наличием на поверхности частиц двух оболочек электрической и сольватной (гидратной). Для коагуляции коллоидов высокомолекулярных соединений необходимо не только нейтрализовать заряд коллоидной частицы, но и разрушить жидкостную оболочку. Выделение высокомолекулярных соединений из растворов по своему характеру отличается от коагуляции типичных гидрофобных коллоидов. Так, если для гидрофобных золей достаточно незначительных добавок электролита, чтобы вызвать коагуляцию, то для высокомолекулярных веществ этого недостаточно. Для выделения дисперсной фазы полимеров необходимы высокие (вплоть до насыщенных растворов) концентрации электролитов. Например, яичный глобулин выделяется при полунасыщении раствора сульфатом аммония, а яичный альбумин— только при полном насыщении. [c.472]

Один из самых чувствительных методов идентификации белков — это иммунная реакция, т. е. реакция между антигеном и антителом. Если раствор кристаллического яичного альбумина ввести кролику, то чужой белок действует как антиген, стимулируя образование антител в организме кролика. Антитело, выделенное из крови кролика, осаждает из смеси неизвестных аминокислот только яичный альбумин. [c.292]

В 1889 г. впервые был выделен в кристаллическом виде альбумин из. яичного белка. Удалось также без больших трудностей изолировать в кристаллическом виде гемоглобин. Следует, однако, указать, что после выделения указанных двух белков животного происхождения прошло свыше 30 лет до разработки новых приемов, позволивших получить в кристаллическом виде значительное количество белковых веществ. Большую роль здесь сыграло применение сернокислого аммония. Пользуясь различными концентрациями сернокислого аммония, можно фракцию водорастворимых белков, извлеченную из той или иной ткани, расчленить на отдельные-части и из них при дальнейшей обработке получить белки в кристаллическом виде. [c.35]

Эта методика была использована для выделения Р-лактогло-булина, тропомиозина кролика и яичного альбумина полученные результаты согласуются с данными динитрофенильного метода Сэнджера. [c.177]

Так, Д1апример, при гидролизе глобина 25 н. серной кислотой при 40° был выделен пептид гистидина [6]. Подобным же образом дипептиды были выделены из гидролизатов, полученных при обработке белков концентрированной соляной кислотой при 37° [7]. Образование при гидролизе пептидов служит указанием на неодинаковую устойчивость различных пептидных связей к гидролизующему агенту. Если, например, подвергнуть яичный альбумин действию 23-процентной соляной кислоты при температуре от 30 до 60°, то быстро расщепляются только 56 пептидных связей этого белка [8]. [c.24]

Выше было уже упомянуто об образовании слабо растворимых солей (например, хлоридов и сульфатов) белковых катионов з кислой по отношению к изоэлектрической точке области [195, 202] и об использовании этого явления, например, для выделёнйя кристаллического сульфата альбумина плазмы [106]. Было получено также несколько кристаллических солей лизоцима [204]. Белковые соли, содержащие тяжелые комплексные анионы, например воль-фрамат-, фосфовольфрамат-, трихлорацетат- или метафосфатионы, а также соли, содержащие катионы тяжелых металлов — цинка, меди или ртути, — известны уже давно и применялись для освобождения раствора от белков перед некоторыми анализами [10, 78]. Предполагалось, что эти реагенты при их применений действуют на белки сильно денатурирующим образом. Вслед з-а кристаллизацией цинковой соли инсулина [205, 206] и метафос-фата яичного альбумина [207] недавно последовало приготовление серии кристаллических производных инсулина [208] и сывороточных альбуминов человека [209, 210]. Последние были получены в присутствии ионов, концентрация которых была недостаточна для высаливания (если не добавлять в количестве 5—30% органического растворителя и во избежание денатурации не вести процесс при низких температурах). В этих условиях многие из указанных солей менее растворимы, чем свободный белок или соли с такими катионами, как натрий или калий, и, следовательно, могут найти применение при выделении белков [51] (4). Были получены также кристаллические додецилсульфатпроизводные Р-лактоглобулина [211]. [c.51]

Подобным же образом, здесь не будут обсуждаться солепо-добные производные белков, которые образуются при электростатическом взаимодействии кислых или основных групп белка с катионами или ан-нонами. Отдельные аспекты этой проблемы были затронуты в статьях, посвященных выделению белков и их взаимодействию. Следует, однако, отметить возможность получения разнообразных стехиометрических белковых комплексов в кристаллическом виде. К таким комплексам относятся, например, метафосфат яичного альбумина [13], додецилсульфат лактоглобу-лина [14] и, что наиболее важно, ряд кристаллических производных сывороточного альбумина и меркаптальбумина, полученных Левиным [15]. [c.271]

Высказанные выше предположения следует считать предварительными, так как для полного объяснения превращения яичного альбумина в плакальбумин требуется большее количество сведений о химическом строении этих белков. Недавно Линдерштрём-Ланг [151е] предложил несколько моделей структуры яичного альбумина, которые объясняют выделение указанных двух пептидов. В одной из моделей яичный альбумин и плакальбумин имеют свободную карбоксильную группу, но не имеют ни одной концевой аминогруппы, доступной для реактива Зангера. Согласно другой модели, плакальбумин в отличие от яичного альбумина содержит свободную концевую аминогруппу. [c.335]

Постепенное дефосфорилирование яичного альбумина было подтверждено электрофоретическим выделением дифосфояичного альбумина Ль частичным дефосфорилированием яичного альбумина фосфатазой предстательной железы, в результате которого образуется монофосфорное производное Л2, и полным дефосфорилированием производного Л2 кишечной фосфатазой с образованием альбумина Лз, не содержащего фосфора [150в]. За исключением содержания фосфора и характера подвижности, все три белка А, Л2 и Л3 обладают сходными свойствами. Как и в случае превращения яичного альбумина в плакальбумин, изменение подвижности, которым сопровождается процесс дефос-форилирования, можно использовать для оценки изменения суммарного заряда белков. Эти результаты показывают, что в удалении каждого из атомов фосфора принимают участие два способных ионизироваться атома водорода. Установление взаимосвязи между тремя формами яичного альбумина помогает объяснить электрофоретическую гетерогенность свежеприготовленных растворов этого белка и изменения, наблюдающиеся при старении. [c.335]

Орнитин, НгЫ СНз СН2 СНз СНСЫНг) СООН. Эта аминокислота, как и цитруллин, является известным продуктом метаболизма (продуктом обмена веществ) и является составной частью орнитуровой кислоты. -Моно-ацетилорнитин выделен из растительных веществ [211. Наличие орнитина в гидролизатах белков, обработанных щелочами или иным путем, можно объяснить распадом остатков аргинина [22]. Орнитин, изолированный из кис лотных гидролизатов тироцидина [14] и грамицидина-С [23, 109 а], может также появляться в результате распада при автолизе исходных бактерий. Неудачи в обнаружении орнитина в белковых гидролизатах могут быть часто следствием несовершенства аналитического метода однако даже при современных тщательных исследованиях продуктов кислотного гидролиза яичного альбумина ис удалось его обнаружить. [c.49]

В ЭТОМ фрагменте углеводная цепь присоединена к остатку аспарагиновой кислоты. Связь Туг — Asp, входящая в состав недеградированного белка, количественно расщепляется проназой-Р. Однако смесь гликопептидов, образующаяся при расщеплении белка папаином [19J, содержит связь Туг — Asp, устойчивую к действию проназы-Р [12]. Выделение гликопептидов из яичного альбумина иллюстрирует упомянутые трудности. Обработка белка проназой-Р или последовательно пепсином и трипсином вместе с химо-трипсином дает продукты, которые еще содержат различные, но относительно большие количества лейцина и меньшие количества серина и треонина. Эти аминокислоты можно удалить действием карбоксипептидазы, однако только после предварительного замещения свободной аминогруппы карбобензоксирадикалом [12, 20]. Аналогичные проблемы возникают при получении гликопептидов из других белков и, по-видимому, могут быть решены аналогичным путем. [c.241]

Было установлено, что яичный альбумин не содержит ни фукозы, ни сиаловой кислоты [73]. Поэтому наиболее вероятно, что углеводная часть яичного альбумина состоит из 2% маннозы и 1,2% глюкозамина или соответственно из 5 и 3 остатков этих сахаров. Данные анализа и кривые титрования [17, 73, 74, 58, 59] показывают, что все три остатка глюкозамина К-ацети-лированы. В соответствии с этими выводами находятся данные о молекулярных весах гликопептидов, выделенных из белка (см. раздел 6). Характер присоединения углевода к пептидной цепи подробно обсуждается в гл. 10 (том 1). [c.13]

Иммобилизовалпые овомукоиды. Мукоиды, впервые обнаруженные в синовиальной суставной жидкости и стекловидном теле глаза, были выделены в отдельную группу по общему признаку все они представляют собой ковалентно связанные белково-углеводные комплексы (по некоторым версиям термина — еще и не осаждающиеся из подкисленного раствора). Гликопротеид, выделенный из белка куриных яиц, называется овомукоидом. Он не коагулирует при нагревании и поэтому может быть сравнительно легко отделен от других белков. После удаления денатурированных яичного альбумина и яичного глобулина овомукоид осаждают из фильтрата этанолом. Овомукоид содержит около 20 % углеводов его К-концевой аминокислотой является аланин, а С-концевой — фенилаланин. В состав углеводного компонента входят остатки К-ацетилглюкозамина, маннозы и галактозы в соотношении 7 3 1 [38, с. 296]. [c.546]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология