Белки методы идентификации

Применение люминесценции для аналитических целей включает широкую область использования ее для идентификации веществ, для обнаружения малых концентраций веществ для контроля изменений, претерпеваемых веществом для определения степени чистоты веществ. Широко применяются измерения люминесценции при изучении кинетики обычных химических реакций. Высокая чувствительность метода позволяет фиксировать малую степень превращения, а иногда по люминесценции промежуточных соединений становится возможным установить механизм химической реакции. Люминесцентные методы используются в биологии, в частности, для исследования структуры белков методом флуоресцентных зондов и меток. [c.49]

Эта область ионообменной хроматографии белков наиболее обширна. Сделаем попытку систематизации используемых здесь приемов, разделив их на шесть групп. Но прежде всего заметим, что постановке хроматографического опыта в любом случае должна предшествовать отработка метода идентификации очищаемого белка (путем обнаружения ферментативной активности или других биоло- [c.302]

Эти методы основаны на специфичности антител при выявлении на срезах тканей клеток локализации антигенного белка среди всех других белков. Для идентификации антител в местах их специфического связывания антитела метили флюоресцентны- [c.105]

Для определения строения белков разработан ряд методов, которые еще 20 лет тому назад были неизвестны, — хро матография, противоточное распределение и ионофорез в неподвижной среде. Благодаря указанным методам удалось получить белки в чистом виде и выделить их составные части— пептиды, аминокислоты и их производные. Эти методы характеризуются не только высокой эффективностью, но позволяют работать с количествами вещества порядка нескольких микрограмм. Следующим этапом явилась разработка химических методов идентификации аминокислот и пептидов, полученных расщеплением полипептида [266, 277, 320]. [c.164]

Сейчас разработаны хорошие методы выделения и очистки белков [1]. Удается получить белки и в кристаллической форме. Вместе с тем многие важные белки до сих пор в чистом виде не выделены (например, ацетилхолинэстераза). Методы идентификации характерных групп и связей в белках описаны в биохимической литературе (см., в частности, [2]). [c.68]

В дальнейшем (.в 60—70-х гг.) были найдены структурные формулы и других белков. Применение при исследованиях новейших методов идентификации аминокислот и автоматических устройств значительно облегчило и ускорило выполнение опе- [c.263]

Эдмана реакция (деградация белков но Эдману) - метод отщепления от белка и идентификации К-концевой аминокислоты. Действующим реагентом в реакции является фенилизотиоцианат. [c.530]

Хроматография производных аминокислот получила интенсивное развитие в связи с разработкой методов определения первичной структуры белков. Вероятно, трудно найти в органической химии и биохимии более удачный пример столь тесной взаимосвязи развития представлений о структуре и функциях большого класса веществ, каким являются белки, с хроматографическими методами анализа. Основное внимание было направлено на разработку методов определения N-концевых остатков аминокислот в белках, причем в идентификации соответствующих производных большое значение имели тонкослойная (ТСХ) и бумажная хроматография (БХ) (см. обзоры [1, 2]). Газожидкостная и жидкостная колоночная хроматографии находят в этой области ограниченное применение, однако интерес к последнему методу постепенно растет. Интерес к жидкостной хроматографий вызван вполне определенными причинами. Во-первых, постоянно появляются новые методы избирательной модификации остатков аминокислот в белках, а идентификация производных аминокислот требует развития хроматографических методов. Во-вторых, исследованию подвергают все более труднодоступные белки, что в свою очередь вызывает необходимость создания надежных методов количественного анализа. Интерес к колоночной хроматографии возрастает также в связи с выделением и получением необычных аминокислот, а также в связи с необходимостью предотвращения ошибок при определении аминокислотной последовательности. Понятия современный и классический метод используют здесь условно, поскольку новые методики обычно создают на базе стандартной аппаратуры примером может служить автоматический анализ ДНФ- и ДНС-аминокис-лот [3, 4]. Насколько известно, до сих пор не пытались использовать скоростную хроматографию высокого разрешения для разделения производных аминокислот, хотя некоторые соединения, например ДНС-аминокислоты, являются для этого метода довольно удобным объектом. Производные аминокислот использовали в структурном анализе белков крайне неравномерно. По-видимому, всеобщее увлечение ДНФ-аминокислотами проходит окончательно, уступая место повышенному интересу [c.360]

Применение. В гистохимии в качестве компонента при выявлении белков методом сулема--бромфеноловый синий [Пирс, 706]. В газовой хроматографии в качестве стандартного образца для идентификации веществ и калибровки хроматографа, [c.80]

В пятидесятых годах, в период бурного развития БХ, был опубликован ряд статей с описанием методик и систем растворителей, предназначенных для разделения белковых гидролизатов или аминокислот, полученных из различных физиологических жидкостей (см. [51, 77]). Эти системы использовались для разделения сложных смесей аминокислот и пептидов и смесей аминокислот, с трудом поддающихся идентификации, например лейцин, изолейцин. С появлением автоматических аминокислотных анализаторов [120], а также новых ионообменников (см. гл. 5) БХ все реже и реже используют для анализа аминокислот и пептидов. В настоящее время в лабораториях, ведущих исследование белков, методом БХ проводят главным образом окончательную очистку простых смесей пептидов, полученных с помощью других методов разделения, кроме того, БХ служит одним из критериев однородности вещества (часто в сочетании с электрофорезом на бумаге), и только в считанных случаях ее применяют для идентификации отдельных аминокислот. [c.121]

Из органических высокомолекулярных соединений построено большое количество биологически и технически важных веществ. К ним относятся вещества, из которых состоят растения и природные волокна,— целлюлоза и другие полисахариды, шерсть, шелк к ним принадлежат также коллаген и эластин, основная часть белков — протеиды и нуклеотиды, гликоген и крахмал, натуральные полипрены — каучук и гуттаперча. Синтетические высокомолекулярные соединения охватывают область пластических масс и синтетических волокон. Химия высокомолекулярных соединений изучает методы синтеза, характеристики и исследования этих веществ, а также превращения природных и синтетических полимеров в их производные. Если учесть значение перечисленных выше соединений, то представляется обоснованным выделение химии высокомолекулярных органических соединений в особую область органической химии. В строении макромолекул полимеров, а также в их химических и физических свойствах и в методах идентификации и характеристики этих соединений имеется столько особенностей, что необходимо самостоятельное рассмотрение этих вопросов. Однако следует учесть, что как для высокомолекулярных, так и для низкомолекулярных органических соединений в основном характерны одни и те же типы связи атомов в молекуле. Таким образом, все законы органической химии в полной мере относятся также и к химии высокомолекулярных соединений. [c.11]

Данная работа посвящена идентификации продуктов пиролиза некоторых аминокислот, пептидов и белков методом хромато- [c.48]

Проведена идентификация продуктов пиролиза аминокислот и белков методом хромато-масс-спектро-метрик. Рассмотрены возможные процессы, протекаю-Щ )с при пиролизе этих продуктов. [c.87]

Один из самых чувствительных методов идентификации белков — это иммунная реакция, т. е. реакция между антигеном и антителом. Если раствор кристаллического яичного альбумина ввести кролику, то чужой белок действует как антиген, стимулируя образование антител в организме кролика. Антитело, выделенное из крови кролика, осаждает из смеси неизвестных аминокислот только яичный альбумин. [c.292]

Значение какого-либо индивидуального метода идентификации конечных аминокислот определяется теми задачами, для которых он применяется, и природой исследуемого вещества. Последние лучше всего разделить на малые пептиды, большие пептиды и белки. [c.234]

Тот факт, что рестрикционные маркеры сохраняются при изменениях генома, затрагивающих фенотип, лежит в основе чрезвычайно эффективного метода идентификации генетических локусов на молекулярном уровне. Типичным примером могут служить мутации с известным фенотипическим эффектом, которые локализованы на генетической карте, хотя функция соответствующего гена или белка не известна. К этой категории относятся некоторые тяжелые заболевания человека. Это, например, кистозный фиброз, хорея Гентингтона и многие другие серьезные и даже смертельные болезни, которые наследуются по законам Менделя. Во всех этих случаях молекулярная природа мутантной функции неизвестна и, вероятно, она сможет быть выяснена только после того. [c.48]

Рис. 14-63. Иммунологический метод идентификации белков плазматической мембраны, участвующих в межклеточной адгезии. На этапе 1 получают антитела (обычно кроличьи) к исследуемым клеткам или к их изолированным плазматическим мембранам. На этапе 2 выделяют и тестируют моновалентные фрагменты, чтобы получить препарат антитела, блокирующий межклеточную адгезию. (Используются моновалентные фрагменты, пол ченные с помощью протеаз - см. разд. 18.2.4), так как они не сшивают клетки и, таким образом, не вызывают ложной адгезии.

Вторым основным методом идентификации акцепторов биологически активного света является хроматографический анализ гидролизатов облученных белков, который позволяет определить, какие и сколько аминокислотных остатков разрушилось под действием света. Хроматографический анализ аминокислотного состава облученных ( 1=254 нм) химотрипсина и трипсина показал, что на одну инактивированную молекулу первого белка приходится один разрушенный остаток триптофана, а в случае трипсина — один остаток триптофана и два-три остатка цистина. [c.250]

Был описан очень чувствительный метод идентификации количественного определения белков в агаровых и агарозных гелях 1[671]. Белки осаждали смесью спирта и уксусной кислоты или антисывороткой. Затем пластинки геля погружали на 5 мин в 2%-ный раствор ферроцианида калия. В среде, близкой к нейтральной, ферроцианид связывается с белками. Связанный фер- [c.275]

Наиболее привлекательной чертой исследования препарата клеточных или мембранных белков методом двумерного электрофореза является возможность систематического биохимического анализа большого числа синтезируемых клетками белков. Этот метод позволяет качественно различать до 10 разных белков. При его использовании нас прежде всего интересует возможность идентификации уникальных типов белковых молекул, специфически экспрессируемых В-лимфоцитами на различных стадиях дифференцировки. Мы считаем, что этот метод дает существенные преимущества, которых лишена методика негативной селекции, описанная в разд. II. В данном случае идентификацию уникальных (специфичных для данной стадии дифференцировки) белков можно проводить независимо от их антигенных свойств. Следовательно, хотя и желательно получить МА к таким потенциально маркерным молекулам, совсем не обязательно, чтобы все они обладали иммуногенностью. [c.185]

Для оценки молекулярного веса белков, образующих при электрофорезе отдельные полосы, необходимо параллельно на той же пластинке проводить электрофорез смеси белков с известными молекулярными весами. В качестве стандартов не рекомендуется брать протеолитические ферменты (например, трипсин или химотрипсин), так как они сохраняют активность и после кипячения с 2% ДСН. При идентификации белков методом радиоавтография удобно использовать белковые стандарты, меченные С-иодацетатом или С-уксусным ангидридом. [c.117]

Для выявления вирусного антигена в зараженных клетках используют флуоресцирующие антитела. В каждую лунку планшета Терасаки вносят по 5 мкл конъюгированных с флуоресцеином антител против одного из вирусных антигенов (например, против нуклеокапсидного белка) и инкубируют планшет 30—60 мин при 37 °С во влажной камере. Следует убедиться в том, что на стенках лунок отсутствуют пузырьки воздуха. Альтернативный, непрямой метод идентификации вирусных антигенов предполагает использование моноклональных противовирусных антител мыши и конъюгированных с флуоресцеином антител против иммуноглобулинов мыши. [c.121]

Двумерная и одномерная распределительная ТСХ на целлюлозных, силикагелевых и полиамидных иластинках аминокислот, их данзилированных, динитрофенильных и фенилтногидантоиновых производных (ФТГ-АК) последнее — как основной или контрольный метод идентификации аминокислот при секвенировании белков по методу Эдмана. [c.460]

Один нз методов идентификации Л -концевой аминокислоты пептида нли белка состоит в замещении -аминогруппы иа такую груп-. пу, которая выдерживает гидролиз, и таким образом, после кислотного нлн ферментативного гидролиза меченую аминокислоту можно обнаружить спектрофотометрнчески, спектрофлуорометри-чески илн по радиоактивности и идентифицировать с помощью хроматографии. [c.264]

Футпринтииг (Footprinting) Метод идентификации участков ДНК, специфически связывающихся с белками. В его основе лежит защита ДНК в местах контакта с белком от эндонуклеазного расщепления. [c.563]

Т. е. для биополимеров, не имеющих регулярной структуры, необходимо установление общего плана построения молекул сюда относятся как сведения об архитектонике молекулы (число и относительное расположение разветвлений, природа и размеры внутренних и внешних цепей), так и данные о последовательности моносахаридов на каждом конкретном участке молекулы полимера. Нельзя не отметить, что задача установления общего плана построения полимерной молекулы при выяснении первичной структуры белков и нуклеиновых кислот (биополимеров с единственным типом межмономерной связи) не ставится и является характерной для полисахаридов, приобретая особое значение в случае смешанных углеводсодержащих биополимеров. В настоящее время для решения этой задачи применяют фрагментацию полисахаридной цепи на олигомеры посредством частичного расщепления гликозидных связей. Методы установления строения низших олигосахаридов, получаемых при такой фрагментации, в настоящее время разработаны достаточно хорошо и применимы к небольшим количествам вещества, но они весьма трудоемки. Поэтому требует внимания разработка прямых физико-химических методов идентификации и установления строения олигосахаридов. [c.633]

Основные научные работы посвящены химии белка. Изучал (с 1945) структуру инсулина. Разработал динитрофторбензольный метод идентификации концевых аминогрупп в пептидах, с помощью которого установил природу и последовательность чередования аминогрупп в инсулине, расшифровал его строение (1949—1954). Установил, что инсулин имеет общую формулу 254H337N65O75S6, три сульфидных мостика и состоит из двух цепей цепи А, содержащей 21 аминокислотный остаток, и цепи В, содержащей 30 аминокислотных остатков. Эти работы послужили основой для синтетического получения инсулина и других гормо- [c.457]

За последние десять лет внимание исследователей переключилось с изучения включения С в конечные продукты растущих микроорганизмов, таких, как белки, на идентификацию промежуточных продуктов метаболических реакций. Методы идентификации этих промежуточных соединений были в основном разработаны М. Кальвином, Дж. Бассамом с сотрудниками и описаны в двух широко известных монографиях [36, 59]. Принцип их заключается в том, что исследуемые соединения могут быть идентифицированы в виде пятен на двумерных хроматограммах по методу А. Мартина и Р. Синга. Пятна, содержащие С, можно обнаружить при наложении на двумерную хроматограмму рентгеновской пленки после проявления на ней образуются черные пятна в местах, соответствующих положению [c.36]

Один из важных п чрезвычайно избирательных методов идентификации и разделения белков — иммунологический. Иммунологические реакции — специфические защитные реакции высших животных по отношению к попадающим в организм чужеродньш белкам (по последним данным, и к нуклеиновым кислотам). При повторном введении в кровяное русло животного чуж еродного белка в кровяной сыворотке появляются белки, относящиеся чаще всего к классу у-глобулинов (так называемые антитела), которые специфически реагируют с тем веществом (антигеном), к которому они выработались. Реакция антиген—антитело может быть изучена вне организма, как обычная химическая реакция, путем смешения раствора антигена с так называемой антисывороткой. Одна из типичных иммунологических реакций — прецп-питиповая — состоит в выпадении осадка при соединении антигенов с антителами. [c.135]

Эти производные аминокислот образуются при разложении продуктов реакции белков или пептидов с фенплизотиоцианатом. Они очень удобны при изучении структур пептидов и позволяют отделить аминокислоты от мешающих анализу соединений. Кроме этого, с появлением усовершенствованного автоматического способа разделения аминокислот стал необходим метод идентификации этих соединений, поскольку за 72—90. мин с одним производным можно провести от 10 до 25 операций. В качестве такого быстрого метода идентификации соединений была предложена газовая хроматография однако в ряде случаев результаты анализа недостаточно однозначны и требуют подтверждения. [c.501]

Дальнейшая работа Д. Кендрью при разрешающей способности в 2 А привела к выяснению новых подробностей вторичной конфигурации полипептидной цепи миоглобина. Это представлялось чрезвычайно важным, так как могло привести исследователей к установлению закономерностей образования третичной структуры белков. Сам Кендрью сначала даже не предполагал, Что удастся идентифицировать и боковые радикалы. Но, как он сказал на V Международном конгрессе по биохимии в 1964 г., результаты превзошли все ожидания, поскольку оказалось возможным различать на рентгенограмме отдельные боковые цепи в виде оптически более плотных участков, отходящих от основной спиральной цепи. Более детальное их исследование зачастую позволяет довольно точно идентифицировать боковые цепи иногда остаются семнения в абсолютной правильности этой идентификации, но во всяком случае при установлении строения боковых цепей уже можно выбирать всего Из двух или трех возможных вариантов [23]. Такая высокая разрешающая способность позволила ученому точно идентифицировать около одной трети всех боковых радикалов, а остальные две трети — с бчень большой степенью вероятности [23]. Эти результаты говорили сами за себя — наука очень близко подошла к возможности непосредственного определения последовательности аминокислотных остатков в молекулах глобулярных белков методом лишь одного рентгшоструктурного анализа. Кендрью сообщил о сопоставимости результатов рентгеноструктурного анализа с предварительными результатами, полученными другими авторами при помощи чисто химических методов. Так было проведено сравнение последовательности аминокислотных остатков пептидов, выделенных из миоглобина. Кендрью обнаружил, что почти все полученные таким образом пептиды могут быть размещены вдоль полипептидной цепи построенной им модели, причем этот порядок размещения соответствовал порядку размещения пептидов вдоль цепи, предложенному на основании химического анализа. Несмотря на некоторые противоречия и несовпадения, можно надеяться, что увеличение разрешающей способности метода позволит однозначно решать вопрос о последовательности аминокислотных остатков с применением только рентгеноструктурного анализа. [c.152]

Ранние исследования этого рода проводились Даки-ном и сотрудниками [31, 32, 33] на отличающихся по антигенным свойствам образцах яичного альбумина утки и курицы, причем были найдены различия в конечных аминокислотах по описанному ниже методу (стр. 221). При этом не удалось очистить белки до простых индивидуальных веществ (применявшаяся методика была недостаточно точна). Все же, хотя чистота белков и значение, которое можно придавать методам идентификации, остаются под сомнением, были обнаружены различия в конечных аминокислотах. [c.215]

На минимум иоглощения белков, наблюдаемый приблизительно ири 248 нм, оказывает большое влияние примесь нуклеиновой кислоты, а минимум спектра поглощения нуклеиновых кислот, лежащий вблизи 228 нм, служит еще более чувствительным индикатором примеси белков (все белки сильно поглощают в этой области) [141]. Особенности кривой поглощения белков при нейтральном значении рИ и те изменения в характере этой кривой, которые происходят под влиянием щелочи, добавленной до концентрации 0,1 М, можно использовать для идентификации и количественного определения в них тирозина и триптофана [131]. По характеру спектра поглощения белков и нуклеиновых кис.лот можно судить таки<е и об их конформации. Так, денатурация белков обычно сопровождается заметными изменениями их спектра поглощения (главным образом незначительный сдвиг максимума поглощения в сторону более коротких длин волн). По спектру поглощеиия можно судить и о состоянии нуклеиновых кислот (гипер- и гинохром-ный эффекты). При этом в зависимости от температуры и ионной силы различия в поглощении между ними соста-в.ляют 20—40%. И наконец, определение характерных спектров поглощения компонентов нуклеиновых кислот используется в большинстве методов идентификации и количественной оценки этих комионентов (см. разд. А гл. VI). [c.59]

Осп. работы посвящены химии белка. Изучал (с 1945) структуру инсулина. Разработал динитро-фторбепзольный метод идентификации концевых аминогрупп в пептидах, с помощью которого установил природу и последовательность чередования аминогрупп в инсулине, расшифровал его строение (1949—1954). Установил, что инсулин имеет общую формулу Сш Н ) )7 N6507580, три сульфидных мостика и состоит из двух цепей цепи А, содержащей 21 аминокислотных остаток, и цепи В, содержащей 30 аминокислотных остатков, Эти работы послужили основой для синт, получения инсулина и др. гормонов. Предложил (1965) метить РНК и ДНК, предназначенные для структурных исследований, радиоактивным изотопом фосфора Р, что позволило осуществлять работы с чрезвычайно малым колич-вом материала— 10 г. Установил структуру 58 РНК (120 оснований 1967) и ДНК фага ФХ174 (5375 основа- [c.403]

Не могли быть использованы для глобулярных белков методы рентгеноструктурного анализа фибриллярных белков. Рентгенограммы последних вследствие неполной упорядоченности и нестрогой регулярности волокон содержат небольшое число рефлексов (5-50), которые к тому же, как правило, диффузны. Они получаются за счет дифракции рентгеновских лучей на регулярных участках волокон. На основе столь бедной рентгенограммы нельзя даже в принципе вьшолнить полное и независимое определение на атомном уровне структуры фибриллярного белка. Иными словами, число неизвестных (координаты атомов) в этой задаче намного превышает число уравнений, которые могут быть составлены для их определения на основе известных экспериментальных данных (положений и интенсивностей рефлексов). Волокнистая структура и нерастворимость таких белков делают практически невозможной их кристаллизацию с хорошей трехмерной упорядоченностью. Поэтому с помощью анализа рентгенограмм фибриллярных белков можно преследовать лишь ограниченную цель идентификации типа регулярных структур пептидного скелета и возможного способа его аранжировки. Сначала создается ориентировочная модель, причем только регулярной части белка, рассчитьшается картина рентгеновской дифракции этой модели, которая затем сопоставляется с наблюдаемой рентгенограммой. Путем изменения модели добиваются наиболее полного совпадения теоретической и экспериментальной дифракционных картин. Но и такая задача далеко не всегда решается однозначно. Поэтому при рентгеноструктурном анализе фибриллярных белков большое значение имеют дополнительные данные о структуре, полученные иным образом, с помощью привлечения спектральных методов, структурных параметров родственных молекул, информации о плотности, механических свойствах и т.д. Расчет дифракционной картины, соответствующей предполагаемому спиральному строению фибриллярного белка, выполняется на основе теории интерференции рентгеновских лучей спиральными структурами, разработанной Кокраном и Криком [77]. Обзор методов рентгеноструктурного исследования фибриллярных белков содержится в работе К. Холмса и Д. Блоу [174]. [c.42]

Ф. Максфилд и Г. Шерага предприняли в 1976 г. еще одну попытку разработать алгоритм предсказания, который мог бы дать ограниченный набор начальных конформаций белковой цепи, а минимизация последних привела бы к правильной трехмерной структуре макромолекулы [134]. Новый алгоритм, выведенный из статистического анализа 20 белков известной структуры, позволяет предсказывать для каждого остатка пять конформационных состояний в областях правой а-спирали, -структуры, левой а-спирали и двух промежуточных областях. В нем учитываются внутриостаточные взаимодействия, а та1сже (косвенным образом) парные взаимодействия данного остатка с четырьмя предшествующими остатками. Средняя точность разработанного алгоритма, по оценке самих авторов, составила всего 56%. Следовательно, около половины остатков в белковой последовательности предсказываются неправильно. Ф. Максфилд и Г. Шерага заключают, что хотя предложенный ими метод идентификации конформационных состояний среди всех существующих предсказательных алгоритмов является наиболее точным, но и он не обеспечивает выхода к структуре, которая могла бы послужить исходной для последующего уточнения. [c.265]

При ТОЛЬКО что описанной процедуре исходные антитела (анти-Х) продуцируются всей иммунной системой кролика. Следовательно, эти антитела поликлональны, ибо их вырабатывают лимфоциты, обладающие разной степенью специфичности по отношению к X. Моноклональные антитела, вырабатываемые-клетками-потомками одного лимфоцита, можно получить соответствующим скринингом, отобрав лимфоциты желательной специфичности. Получение моноклональных антител обещает сильно увеличить специфичность иммуноцитохимических методов идентификации нейроактивных веществ в нейронах. Кроме того, этот общий метод можно приспособить для еще более тонких измерений, таких как визуализация специфической РНК, в которой закодирован синтез определенного пептида или белка (см. гл. 4). [c.221]

Биохимические методы позволяют разделять, выделять и анализировать в чистом виде липидные и белковые компоненты, изучать их физико-химические свойства в свободном состоянии и в составе надмолекулярных комплексов в условиях воздействия различных внешних факторов (температуры, концентрации водородных ионов и др.), исследовать их время жизни , пути биосинтеза и распада этих компонентов. К ним относят методы выделения (недеструктивные и включаюп] ие разрушение клеток) разделения субклеточных фрагментов (хроматография, электрофорез, центрифугирование, иммуноаффинные методы) идентификации и оценки чистоты субклеточных фракций выделения органелл и мембранных систем экстракции липидов и разделения их по классам количественного определения фосфолипидов исследования трансмембранного распределения липидов солюбилизации мембранных белков, их реконструкции и определения функциональной активности реконструированных мембран, выделения и модификации мембранных белков. [c.202]