Ферменты электронно-микроскопическое

Электронно-микроскопическое исследование биодеградации имплантатов, разрушающихся по первому механизму (на примере материалов полиуретанового типа), показало, что разрушение материала начинается с поверхности за счет химического и биохимического гидролиза с участием содержащихся в окружающей среде ионов и ферментов. Эта стадия биодеградации называется стадией неклеточной биодеградации, протекающей в соответствии с механизмами, отмеченными в разд. [c.41]

Как уже указано, схема постулирует, что АТФаза в ходе каталитического цикла претерпевает два конформационных перехода. Были предприняты попытки обеспечить стабилизацию фермента в двух основных конформационных состояниях и зарегистрировать их с помощью электронно-микроскопического метода. С этой целью использовали аналог неорганического фосфата ванадат и катионы из группы лантанидов (L. Dux el al., 1983—1985). [c.60]

Биохимические и электронно-микроскопические исследования показали, что неспецифическая кислая фосфатаза, так же как и другие кислые гидролазы, локализуется главным образом в лизосомах. Поэтому она считается маркерным ферментом для лизосом (табл. 37). Поскольку лизосомы связаны своим происхождением с комплексе Гольджи, то, как и следовало ожидать, активность этого фермента выявляется также на внутренней мембране этого комплекса и цистерн гладкого эндоплазматического ретикулума. [c.181]

Электронно-микроскопическое выявление фермента также основано на восстановлении солей тетразолия, из [c.217]

Гигантские клетки характеризуются значительным полиморфизмом от 2—3 ядерных до поистине гигантских симпластов, содержащих около 100 ядер. Чаще всего встречаются клетки с 5—20 ядрами, В гигантских клетках инородных тел ядра располагаются в цитоплазме равномерно, реже—по периферии, в клетках Пирогова — Лангханса — преимущественно по периферии. Гистохимически они характеризуются пиронинофилией, ШИК-позитивной цитоплазмой, активностью кислой фосфатазы и окислительных ферментов. Электронно-микроскопическое изучение гигантских клеток [Хрущов Н, Г. и др., 1978 Ерохин В. В., [c.253]

Общие представления о пространственном строении молекулы Ка .К -АТФазы были получены с помощыо различных подходов. На основании результатов электронно-микроскопических исследований двумерных кристаллов белка была построена трехмерная модель Na , К -АТФазы с разрешением 2 нм. В очищенном препарате фермента, представляющем собой фрагменты плазматической мембраны, молекулы белка (в концентрации до I г/мл) плотно упакованы в липидном бислое. В результате длительного ингибирования этих препаратов при пониженной температуре в присутствии иоиов и ванадата происходит ассоциация молекул фер- [c.623]

F Fi-ATPa3y. Электронно-микроскопическое изучение полной молекулы этого фермента при высоком разрешении показало, что она состоит из Fj-головки, ножки и основания, которое обычно заполняет всю толщу внутренней митохондриальной мембраны (рис. 17-16). F Fi-АТРазу назвали АТРазой, потому что в изолированном виде она катализирует расщепление АТР на ADP и Р,. Однако в интактных митохондриях главная ее биологическая функция заключается [c.527]

Цитоплазма отделена от клеточной стенки плазматической мембраной. В цитоплазме находятся различные включения (пузырьки, гранулы) и ядро. Как показали электронно-микроскопические и биохимические исследования, цитоплазма-не гомогенный раствор белка она содержит многочисленные мембраны и разного рода мембранные структуры, а остальное пространство занимают жидкая фаза и рибосомы. Многочасовым центрифугированием при 1(Ю ООО 0 можно разделить разбавленную водной средой цитоплазму на растворимую фракцию, содержащую главным образом растворимые ферменты и растворимую рибонуклеиновую кислоту (РНК), и фракцию частиц, в которую наряду с мембранами в первую очередь входят рибосомы. Растворимые ферменты катализируют множество различных реакций распада и синтеза. Растворимые рибонуклеиновые кислоты [матричные (мРНК) и тран-спортны е (тРНК)] и рибосомы участвуют в синтезе белка. [c.42]

Осмий(У1П) оксид 0з04 применяется как фиксатор ткани (липидный стабилизатор) для гистологических исследований в виде 1 %-ного раствора в ацетоне. 0з04 можно использовать и для электронно-микроскопического выявления ферментов. Механизм действия 0з04 может быть представлен в следующем виде [c.302]

Электронно-микроскопические исследования позволили прояснить ситуацию Было установлено, что запасные соединения откладываются в вакуолях округлой формы, напоминающйх лизосомы, которые можно визуализировать у экспериментальных животных после введения им неме-таболизируемых соединений Поэтом) был сделан вывод, что эти вакуоли представляют собой лизосомы, наполненные непереваренными или лишь частично расщепленными гликозаминогликанами [1129] Это подтвердилось и для других тканей Хотя дефекты метаболизма оставались неисследованными, нарушения отнесли к лизосомным болезням, так как они сопровождались явной перегрузкой системы лизосом Важнейшая функция лизосом заключается в гидролитическом расщеплении макромолекул, поэтому представлялось вероятным, что отложение избыточных запасных веществ связано с недостаточностью гидролитических ферментов лизосом Другим доказательством нарушения метаболизма гликозаминоглика-нов было избыточное выделение этих соединений с мочой Табл 4 6 дает некоторое [c.30]

Благодаря электронно-микроскопическим и биохимическим исследованиям явления, бывшие ранее ботаническими курьезами, стали блистательными примерами изоморфизма и изофункционализма между растениями и животными. На поверхностях ловушек различных насекомоядных растений имеется несколько видов желез, связанных с пищеварением и другими функциями. Группы таких желез выделяют ферменты, переваривающие добычу. Они идентичны ферментам животных это — пероксидаза, рибонуклеаза, липаза, амилаза, протеазы и другие ферменты (табл. IO.I). Секреторные клетки насекомоядных растений подобны таковым животных также и в других отношениях (Heslop-Harrison, 1978). Многие их органеллы, например аппарат Гольджи и эндоплазматический ретикулум, модифицированы таким же образом, как и в клетках поджелудочной железы животных. Кроме того, лист, превратившийся в кувшинчик, заполненный пищеварительным соком (как у растения Sarra enia), очень напоминает желудок животных. [c.175]

В электронно-микроскопических исследованиях ферментов при работе с этими двумя аппаратами рекомендуется фиксащ1я перфузией. [c.30]

Однако, анализируя данные табл. 4, можно видеть, что способность альдегидов сохранять структуру не всегда коррелирует с их способностью сохранять ферментатив-Е[ую активность. Например, акролеин—плохой фиксатор для ферментов, а альдегиды 3-й группы не подавляют ферментативной активности. Хорошим фиксатором является глутаральдегид, который обеспечивает и сохранность структуры и стабилизацию ферментрв. Благодаря этому он служит основным фиксатором при электронно-микроскопическом выявлении ферментов. [c.38]

Фиксирующие вещества для электронно-микроскопического выявления ферментов (по Janigan, с изменениями) [c.52]

Щелочные фосфатазы способны гидролизовать многочисленные фосфомоноэфирные соединения. Биологическое значение этой груш1ы ферментов связано с обменом нуклеопротеидов, жиров и гликогена, с процессами гликонео-генеза и регенерации, как, например, при росте костей, а также с эмбриогенезом На основании электронно-микроскопических исследований щелочная фосфатаза была отнесена к группе мембранных ферметтов, функции которых связаны с различными процессами, протекающими в мембранах. [c.177]

Эти преимущества и отчетливый контраст тяжелых металлов на электронных микрофотографиях делают в принципе возможным использование метода Гомори с солями металлов для ультраструктурной локализации ферментов, высвобождающих фосфат. Благодаря легкой растворимости фосфата кобальта и сульфида кобальта в OSO4 в процессе дофиксации в электронно-микроскопических исследованиях для выявления щелочной фосфатазы вместо Са используют РЬ . Для предотвращения вьша-дения солей свинца в осадок, наблюдаемого уже при слабощелочных значениях pH, в инкубационную среду доба-, вляют комплексообразователи, такие, как тартрат, тирон, цитрат. Принцип комплексообразования зарекомендовал себя очень хорощо. Благодаря ему появилась возможность заменить методы, состоящие из двух последовательных реакций, одновременными реакциями, ведущими непосредственно к образованию конечного гистохимического продукта. [c.179]

После реакции антиген — антитело локализацию антигена устанавливают по активности связанного фермента. Использование пероксидазы в качестве ферментной метки имеет два решающих преимущества 1) фермент выпускается промышленностью в сравнительно чистом виде 2) для его выявления разработаны надежные гистохимические методы на световом и электронно-микроскопическом уровнях. Успех реакции определяется высокой удельной активностью антитела и чистотой ферментного препарата. Для конъюгации антител с ферментом используют различные реагенты. Помимо функционального реагента—и, п -дифтор-л ,л< -динитроли нилсульфона, который не оказывает существшного воздействия ни на ментативную, ни на иммунологическую активность, важное значение, по-видимому, имеет также глутаральдегид, поскольку и он не [c.302]

Наблюдая в условиях резорбции соединительной ткани активизацию клеток фибробластического ряда и усиление в них активности лизосомных ферментов, а также учитывая данные о наличии в Фб коллагеназы, мы предположили, что при определенных условиях фибробласты могут функционировать как фиброкласты, играя существенную роль в катаболизме коллагена [Шехтер А. Б., 1968, 1971]. Для проверки этого положения были проведены электронно-микроскопические исследования ин-волютивных процессов ( обратного развития ) соединительной ткани на ряде экспериментальных моделей 1) послеродовой инволюции матки, 2) рассасывании соединительнотканной капсулы, образовавшейся при имплантации инородного тела после удаления последнего, 3) рассасывании подкожной гранулемы и рубца, 4) перестройки рубца на месте заживающей кожной раны, 5) обратного развития цирроза печени [Шехтер А. Б., Милованова 3. П., 197 , 1975 Шехтер А. Б., Берченко Г. И., 1977, 1978 Милованова 3. П., 1975, 1979]. [c.135]

Целлюлозные микрофибриллы образуются на наружной поверхности плазмалеммы. Электронно-микроскопические исследования плазмалеммы растительных клеток показали, что ее наружная поверхность покрыта частично погруженными, упакованными в квадраты сферическими гранулами (рис. 2.3). От некоторых из них отходят волокна, размеры которых характерны для микрофибрилл. У высших растений диаметр гранул составляет 15 нм, диаметр микрофибрилл-8,5 нм, у зеленых водорослей 30 и 18,5 нм соответственно. Полагают, что эти гранулы представляют собой агрегаты фермента целлюлозо-синтазы. Гранулы с ферментами, по-видимому, играют двойную роль катализируют удлинение целлюлозных микрофибрилл и придают им [c.29]

Как мы видели на примерах переносчиков кислорода и ферментов, описанных в предыдущих главах, рентгеноструктурный анализ является надежным методом изучения трехмерной структуры растворимых белков. Применим ли рентгеноструктурный анализ к мембранным белкам Трудность заключается в том, что до сих пор не удавалось получить интегральных белков мембраны в виде трехмерных кристаллов. Однако некоторые мембранные белки образуют правильную решетку в плоскости мембраны, т.е. двумерные кристаллы. Структурный анализ этих кристаллоидных форм удается осуществить с помощью электронной микроскопии в частности, такое исследование было с успехом проведено на пурпурной мембране НаЬЬасгепит /1а/оЬшт-бактерии, обитающей в соленой среде. Пурпурная мембрана-это специализированная область клеточной мембраны, содержащая бактериородопсин-белок массой 25 кДа, который превращает энергию света в трансмембранный протонный градиент, используемый для синтеза АТР (разд. 19.21). Были получены кристаллоиды в виде листка, или диска, диаметром до 1 мкм. Благодаря тому что в каждом из них содержалось около 20 ООО молекул бактериородопсина, можно было получить изображение, используя очень слабый пучок электронов и тем самым сводя к минимуму радиационные повреждения. Кроме того, для получения изображения с высокой степенью разрешения можно было брать неокрашенные препараты. Одно электронно-микроскопическое изображение кристаллоидного листка пур- [c.221]

Исходя из принципа микроскопической обратимости, теория стереоэлектронного контроля предсказывает, что образующиеся орбитали свободной электронной пары гетероатомов должны быть антиперипланариы новой связи углерод—кислород (из 5ег-0Н и карбонила амидной группы) или углерод — азот. Важное обстоятельство, которое следует учитывать в этом случае, состоит в том, что несвязывающая пара электронов атома азота направ-лепа в сторону растворителя, а N—Н-связь — внутрь активного центра фермента. Чтобы облегчить пространственное восприятие, соответствующие атомы совмещены с контурами транс-декалина (затененная область). [c.255]

Перейдем теперь к генетике бактериофагов, которые изучены гораздо лучше, чем все другие вирусы. Картина заражения клетки бактериофагом следующая. Бактериофаг адсорбируется своим хвостом на внешней поверхности клетки, проделывает в оболочке микроскопическое отверстие, для чего в его хвосте присутствует специальный фермент со свойствами лизоцима, затем инъецирует внутрь клетки свое содержимое, что у больших фагов сопровождается настоящим сократительным движением (рис. 124). В результате от фага остается нустая белковая оболочка, или тень . Отдельные эпизоды во всей этой последовательности удается хорошо заснять с помощью электронного микроскопа. Освободить бактериальную клетку от адсорбированных на ней пустых оболочек фагов легко с помощью быстрой мешалки. [c.364]

Итак, мы имеем здесь дело с фотосинтезом без углекислоты Микроскопические исследования представили другие важные данные. В фотосинтезирующих клетках почти всех растений хлорофилл и сопутствующие ему пигменты содержатся в микроскопических тельцах, так называемых хлоропластах. При более детальном изучении было обнаружено, что в хлоропластах пигменты в свою очередь скапливаются в виде мелких зернышек — гранул, почти не различимых в обычный микроскоп, но прекрасно видимых в электронном микроскопе. Анализ взвесей Хилла показал, что содержащиеся в них частицы — это целые или разрушенные хлоропласты или же отдельные гранулы. Таким образом, гранулы являются теми кирпичиками в ферментной системе фотосинтеза, которые обеспечивают высвобождение кислорода из воды на свету, но которые не содержат ферментов, необходимых для поглощения и восстановления углекислоты. Так бьша доказана пространственная раз- [c.52]

Микроскопическое изучение строения листа показывает, что хлорофилл распределен не по всей протоплазме, а сосредоточен в хлоропла-стах. С помощью электронного микроскопа было обнаружено, что внутри хлоропластов имеются еще более мелкие тельца — гранулы, которые и содержат хлорофилл. Помимо хлорофилла в составе хлоропластов обнаружены белки, липиды, углеводы, ферменты, витамины, вещества неорганического происхождения и ряд пигментов, например каротиноиды. Предполагают, что белок в хлоропластах также участвует в фотосинтезе благодаря наличию системы цистин—цистеин (сульф-гидрильные группы — промежуточные переносчики ионов водорода). [c.167]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология