Инфекционность, метод определения

Вредители лесов, полей и садов ежегодно приносят огромный ущерб народному хозяйству. Для их уничтожения широко используют ядохимикаты, ыо до сих пор еще не найдены такие химические соединения, которые воздействовали бы только на один вид вредных насекомых, т. е. ядохимикаты очень узкого и специфического воздействия. Обычио при использовании ядохимикатов страдает и полезная фауна, кроме того, ие исключено их отрицательное воздействие иа организм человека. Сейчас в борьбе с вредителями все чаще используют биологические методы. При использовании методов микробиологического воздействия на вредителей растений с помощью специфических микроорганизмов или вирусов вызывают инфекционные заболевания определенного вида вредителей. Они передают инфекцию друг другу и в результате погибают. [c.131]

Основная задача санитарно-бактериологических исследований воды заключается в получении гигиенической оценки ее качества в отношении инфекционной опасности. Определение отдельных видов патогенных микроорганизмов требует специальных, зачастую сложных методов микробиологического исследования, да и полученный отрицательный результат не всегда гарантирует отсутствие этих форм. Поэтому в практике микробиологических исследований применяют косвенные методы оценки качества воды по бактериологическим показателям. При систематических исследованиях эпидемиологического состояния водоема в качестве санитарно-показательных микроорганизмов используются наиболее характерные представители микрофлоры кишечника человека. [c.233]

ИММУНОХИМИЯ — наука, изучающая химич. процессы, с к-рыми связана невосприимчивость организма к инфекционному заражению (и м м у н и -т 0 т), а также повышенная чувствительность к повторному введению в организм нек-рых веществ. Невосприимчивость может быть обусловлена врожденными особенностями организма (естественный иммунитет), а также создана искусственно (приобретенный иммунитет). Химич. основы естественного иммунитета могут существенно различаться в случае разных инфекций (напр., наличие у нек-рых организмов специальных ферментов, разрушающих биосубстраты бактерий наследственно закрепленная аномалия гемоглобина, пагубно влияющая на возбудителя малярии, и т. п.). Главным предметом изучения И. является приобретенный иммунитет, в основе к-рого лежит способность организма, в ответ на попадание в него ряда веществ антигенов) синтезировать специфич. белки — антитела, к-рые взаимодействуют именно с этими веществами или веществами, близкими к пим ио структуре. Основные проблемы И. изучение химич. природы антигенов, механизма биосинтеза антител, изучение взаимодействия между антигенами и антителами, создание химич. методов определения содержания антител и выделения их из сыворотки в чистом виде, изучение структуры антител. [c.111]

Количественные методы определения инфекционности нуклеиновых кислот [c.174]

Оба описанных выше метода определения титра вируса страдают одним общим недостатком — необходимостью строить калибровочные кривые на основе точных стандартов. Кроме того, этими методами нельзя различить дефектные вирусы и полноценные инфекционные частицы. Очевидно, что наиболее информативными следует считать такие методы титрования вируса, которые основаны на определении количества инфекционных частиц с помощью биологических тестов. В случае репликационно-компетентного MLV этой цели отвечает анализ бляшек с использованием ХС-клеток [15]. Однако обычно нет нужды [c.298]

Любой препарат вируса гриппа представляет собой смесь инфекционных и неинфекционных частиц, общее количество которых можно легко определить либо в РГА, либо в электронном микроскопе. Предварительные подсчеты [53] показали, что 10 вирусных частиц эквивалентны одной инфекционной дозе, определенной путем инокуляции в куриный эмбрион, что является наиболее эффективным из доступных методов. [c.188]

Методы определения инфекционности [c.52]

Все методы определения инфекционности требуют чувствительной линии клеток и тщательного соблюдения стерильных условий. [c.52]

ВВС титруют стандартным методом бляшек. Однако этот простой и точный метод определения инфекционности применим не ко всем рабдовирусам. Для многих с успехом применялись альтернативные подходы, в том числе модификации метода бляшек. [c.116]

В предыдущих разделах настоящей главы рассмотрены методы определения количества вируса, основанные на его биологических свойствах способности размножаться в культуре клеток и куриных эмбрионах, а также агглютинировать эритроциты. Очевидно, что эти методы не пригодны для определения числа физических частиц вируса. Соотношение между единицами гемагглютинации или инфекционности и числом вирусных частиц в очень большой степени зависит от штамма вируса, и поэтому часто возникает необходимость определения числа вирусных частиц с помощью электронной микроскопии. Наиболее распространенный метод подсчета вирусных частиц состоит в том, что образец исследуемого вируса смешивают с равным объемом суспензии шариков латекса с известной концентрацией эти шарики имеют примерно такой же диаметр (около 100 нм), что и вирионы вируса гриппа. Полученную смесь после негативного контрастирования (например, фосфорно-вольфрамовой кислотой) наносят на сеточки для электронной микроскопии и сравнивают число шариков латекса и вирусных частиц в одних и тех же полях (рис. 6.4). Зная концентрацию шариков латекса в исходной смеси, нетрудно подсчитать концентрацию вирусных частиц [15]. [c.181]

Электрофорез уже давно использовался в биологии различными авторами для суждения о знаке и величине заряда, главным образом различных бактерий и белков. Определение электрофоретической скорости белков по методу подвижной границы с получением электрофоретических диаграмм, на чем мы остановимся далее подробно, является весьма важным методом не только для изучения сложных белковых систем, но и используется широко для практических медицинских целей. При различных инфекционных заболеваниях специфически изменяется белковый состав плазмы крови, и поэтому электрофоретические диаграммы могут быть успешно применены для диагностики болезней. [c.6]

Н. С. Правдин выступил против ограниченности оценки вещества по клиническим симптомам интоксикации. Он указывал, что промышленные интоксикации прежде всего проявляются в других формах, симптомах и изменениях, чем острые и хронические отравления, изучаемые обыкновенно токсикологией. Из этих изменений особого внимания заслуживают те, которые сопровождаются не явным нарушением здоровья, а лишь понижением работоспособности организма и скрытым предрасположением к общим заболеваниям, в частности к инфекционным . Иными словами, речь шла о необходимости определения порога действия яда. Н. С. Правдин считал необходимым подчеркивать, что мы должны определять не просто порог действия, а порог вредного действия, применяемый метод исследования должен иметь гигиеническую значимость. [c.19]

В данном пособии детально представлены этапы лабораторной диагностики бактериальных, вирусных инфекций, протозоозов, микозов и гельминтозов, а также методы санитарно-микробиоло-гических исследований различных объектов внешней среды. Описаны современные методы исследования, основанные на морфологических признаках возбудителя, его культуральных и других физиологических свойствах особенностях взаимодействия с организмом экспериментальных животных в модельных опытах антигенном строении возбудителя и реакциях макроорганизма на эти антигены (идентификация микроорганизмов или индикация их антигенов, серологическая и аллергологическая диагностика инфекционного заболевания) определении генома возбудителя в исследуемом материале или геноидентификации. [c.5]

В нашей клинике установлено, что многие инфекционные заболевания ведут к понижению возбудимости нервных центров. При помощи предложенного Макаровым метода определения адекватной оптической реобазы и хронаксии показано (рис. 2), что при большинстве инфекционных заболеваний увеличивается реобаза и удлиняется хронаксия. Динамика этих показателей под влиянием биофлавоноидов была прослежена у 25 больных. До назначения биофлавоноидо средняя величина реобазы равнялась 421 ед. (норма 60—100 ед.) после приема 400 ла биофлавоноидов она уменьшилась до 285 ед. Адекватная оптическая хронаксия в среднем составляла 127,6 мсек (норма 20—70 мсек) после назначения биофлавоноидов она уменьшилась до 99,4 мсек (рис. 3). Таким образом, биофлавоноиды повышали пониженную возбудимость нервных центров. Можно также провести сравнение с эфедрином, который вызывал аналогичные изменения этих показателей. Вероятно, что возбуждающее влияние биофлавоноидов происходит за счет удлинения действия адреналина. [c.336]

Таким образом, в районах, снабжаемых водопроводной водой, прошедшей обработку на современных очистных сооружениях, могут наблюдаться спорадические случаи вирусных заболеваний водного происхождения, распространяющиеся, однако, на большие территории. Эти спорадические случаи могут действовать далее как фокусы инфекционного процесса, из которых через пищу или путем контакта между людьми возникают эпидемии, вовлекающие большое количество людей. В тех случаях, когда большие группы населения получают спльпо загрязненную воду, пе прошедшую соответствующую обработку, могут возникать и значительные эпидемии водного происхождения. Из сказанного следует, что необходима разработка методов определения вирусов в воде и соответствующих критериев вирусологической безопасности воды. Оценка качества воды с помощью индикаторных микроорганизмов не может заменить такие методы, так как вирусы менее чувствительны [c.277]

Рибонуклеиновая кислота, выделенная мягкими методами из вируса табачной мозаики (ВТМ) 1319, 320], изучена очень широко, поскольку она является одним из немногих препаратов уклеино-вых кислот, который с полным основанием можно считать гомогенным. Инфекционность таких препаратов и легкая потеря ими инфекционности являются хорошим критерием целостности и других свойств РНК по сравнению с ее свойствами в интактном вирусе. Кроме того, в этом случае инфекционность с определенностью показывает, что изменения во вторичной структуре, которые не нриво- [c.609]

Пытаясь стандартизировать микробиологические препараты, приготовленные в лаборатории или собранные в поле, для использования в полевых опытах, дозировки часто устанавливали, исходя из инфекционного содержимого определенного числа больных насекомых на единицу опытной площади. Этот метод дает грубое представление о количестве распределяемого инфекционного материала и особенно пригоден для первоначального испытания чрезвычайно патогенных микроорганизмов. Однако лучший метод, который широко применялся при оценке концентраций, связан с использованием гемоцитометра для определения приблизительного числа устойчйвых форм (спор спорообразующих микроорганизмов и полиэдров вирусов) возбудителя болезней насекомых, которые содержатся в единице веса или объема. О подобном методе оценки концентрации капсул вируса гранулеза в инфекционном материале сообщали Мартиньони и Ауэр [1293], которые проводили точные определения с помощью специальной счетной камеры и фазового микроскопа. [c.464]

Возможно, наиболее важный результат исследований Шлезингера состоял в следующем. С помощью дифференциального центрифугирования неочищенных фаговых суспензий и пропускания их через фильтры с градуированным диаметром пор ему удалось выделить фаговые частицы в количествах, достаточных для определения их массы затем с помощью прямого химического анализа очищенного фага он показал, что фаг состоит в основном из примерно одинаковых количеств белка и дезоксирибонуклеиновой кислоты. Хотя фаговые частицы невозможно видеть под обычным микроскопом, Шлезингеру удалось непосредственно определить общее число фаговых частиц в очищенном препарате, подсчитав число светящихся точек в темном поле микроскопа. Таким путем он установил, что число фаговых частиц в препарате приблизительно равно инфекционному титру, определенному методом Д Эрреля. [c.253]

Другим надежным критерием для установления природы инфекционности служит определение скорости седиментации инфекционной фракции. Полные вирусы по своим размерам крупнее и седиментируют значительно быстрее, чем их нуклеиновые кислоты. Интактные молекулы нуклеиновых кислот имеют весьма характерные скорости седиментации в стандартных условиях ионной силы и т. д. Таким образом, определение инфекционности во всех фракциях, полученных при центрифугировании вирусной РНК в градиенте концентрации сахарозы, ясно показывает, связана ли инфекционность с компонентом типичной РНК (константа седиментации у многих вирусных РНК равна приблизительно 30S), седиментирует ли она подобно вирусу (константа седиментации обычно в пределах 60— 200S) или подобно комплексу, образовавшемуся между РНК и небольшим количеством белка. Существуют и такие методы дифференцирования вирусов и РНК, которые основаны на различиях их растворимости в молярных растворах солей [144, 162]. [c.178]

Антигены, значение р1 которых при pH 8,6 больше, чем у антител, находясь в геле, обладающем высокими электроэндосмотическими свойствами, способны достаточно быстро мигрировать к аноду навстречу антителам, которые перемещаются из противоположной лунки к катоду. Использование этого явления позволяет быстро получить линии преципитации между лунками с антигенами и антителами при условии, что они внесены в соответствующих пропорциях. Встречный ИЭФ — очень чувствительный и быстрый метод определения как антигенов, так и антител 16]. Он широко применяется для выявления инфекционных антигенов в физиологических жидкостях (например, антигенов вируса гепатита В), изменений концентрации сывороточных белков (например, а-фетопро-теина), а также для тестирования антител к целому ряду антигенов, мигрирующих к аноду. Чувствительность метода достигает 400 нг/мл. [c.228]

Сравнение методов определения инфекционности по T IDso и по бляшкам [c.54]

В этом разделе мы рассмотрим ряд методов определения концентрации вируса в различных препаратах. При необходимости определение инфекционного титра проводят методом бляшек (см. разд. 6.1), который позволяет наилучшим образом охарактеризовать вирусный препарат. Недостаток данного метода состоит в том, что он требует довольно много времени. Во многих случаях приблизительный титр определяют по проценту инфицированных клеток методом иммунофлуоресцентного окрашивания на Т-антиген (для этого сравнивают значения, полученные при инфицировании культур тестируемым препаратом и препаратом, титр которого известен). С помощью реакции гемагглютинации (см. разд. 6.2) так же, как и путем измерения оптической плотности или электронной микроскопии препаратов, можно определить общее количество вирусных частиц, в том числе пустых капсидов, псевдовирионов (содержащих вместо вирусной ДНК фрагментированную ДНК клетки-хозяина) и ДИЧ [12]. По соотношению между БОЕ и ГАЕ можно сделать вывод о наличии дефектных частиц в препаратах вируса. Для хороших заготовок вируса это соотношение составляет около 5-105—10 [13]. С большей точностью дефектные и другие нестандартные вирионы можно выявить, экстрагируя вирусную ДНК из небольшого объема заготовки (или лизата) и исследуя ее с помощью рестрикционного анализа или электрофореза (см. разд. 6.3). [c.235]

Инактивированные вакцины имеют определенные преимущества, поскольку при иммунизации ими риск заражения почти или даже совсем отсутствует. Такие вакцины не должны содержать вирус в неинактивированной форме или в виде примеси, поскольку случайное присутствие неинактивированного вируса может иметь серьезные последствия. И подобные примеры известны. Так, ранние не полностью инактивированные партии полиомиелитной вакцины индуцировали паралитические заболевания [128, 145]. Эта проблема была очень быстро-решена, когда ввели более строгие методы определения остаточной инфекционности и изменили технологию производства вакцины, которая стала гарантировать получение монодис-персной суспензии вируса. В некоторых ранних сериях инактивированного вируса полиомиелита была обнаружена примесь [c.157]

До того как Холмс [814] предложил метод подсчета местных норан<ений, единственным способом определения инфекционности, имевшимся в распоряжении исследователей, было заражение нескольких групп растений образцами различного разведения и последующая регистрация растений с системным поран ением. Этот способ занимает много времени и требует гораздо большего числа растений для получения надежных данных. Одпако в отдельных случаях такой метод определения инфекционности используется и сейчас, например в отношении вирусов, которые ие имеют растений-хозяев с xopoiHO выраженной местной некротической реакцией, или вирусов, переносимых насекомыми. [c.22]

Вообще метод подсчета числа местных поражений является гораздо-более чувствительным, чем физические и химические методы. Некоторые-серологические методы приближаются по своей чувствительности к методами определения инфекционности. Применение изотопов для метют растений,. [c.34]

Феномен фагоцитоза - один из основных факторов иммунитета. Выраженность фагоцитарной реакции является важным показателем состояния реактивности организма, степени его иммунной активности. Метод определения фагоцитарной активности лейкоцитов при контакте их с инфекционным агентом относится к своеобразной категории проб, представляющих собой функциональные нагрузки in vitro, основанные на том, что течение реакции в этих условиях с определенной адекватностью отражает сдвиги в состоянии тестируемой системы, объективно произошедшие in vivo (в целостном организме). [c.309]

Эритроциты в крови можно по ряду свойств рассматривать так же, как частички гидрофобной эмульсии. На их поверхности адсорбированы молекулы белков, аминокислот и ионы электролитов. Все они сообщают эритроцитам определенный отрицательный заряд, а противоионы создают некоторый диффузный слой. При различных патологических процессах в организме, когда в кровн увеличивается содержание некоторых видов белков (либо особого глюкопротеида, относящегося к а-глобулинам, либо при инфекционных заболеваниях Y-глoбyлинoв), происходит процесс, очень напоминающий ионообменную адсорбцию место ионов электролитов на поверхности эритроцитов занимают белки, заряд которых ниже, чем у суммы замещенных ими ионов. В результате заряд эритроцитов понижается, они быстрее объединяются и оседают (ускоряется реакция оседания эритроцитов — РОЭ). Этот процесс зависит еще от ряда факторов содержания других белковых фракций и мукополисахаридов, концентрации эритроцитов в крови, наличия в крови микробов, наконец, расположения сосуда, в котором наблюдается РОЭ (в частности, скорость ее выше в наклонно расположенном капилляре). Оседание эритроцитов протекает сходно с процессом седиментации гидрофобного коллоида. Как показали исследования при помощи микрокинематографии (Кигезен), к имеющимся в крови агрегатам и монетным столбикам присоединяются отдельные эритроциты укрупнившиеся агрегаты оседают вначале быстро, а потом медленнее, так как в нижних частях капилляров их расположение становится настолько плотным, что частично сохранившиеся у них заряды начинают в большей мере противодействовать сближению частиц. Структура этого осадка напоминает губку чтобы его уплотнить, необходимо выжать оттуда воду, причем чем плотнее осадок, тем труднее это достигается. Поэтому в клинических исследованиях обычно не ожидают завершения оседания эритроцитов, а регистрируют результаты спустя 1—2 ч после начала реакции. Учитывая, что скорость процесса меняется на разных этапах, было предложено изучение его динамики измерением величины оседания эритроцитов каждые 15—30 мин (так называемая фракционная РОЭ). Этот метод представляет значительный интерес и находит широкое применение. [c.167]

НИИ ЛАЛ-тест, безусловно, дешевле теста на кроликах. Область применения этого метода по сравнению с определением на кроликах значительно шире создается возможность для определения пирогенности лекарств, которые нельзя было испытать на кроликах — короткоживущих изотопов, препаратов седативного действия и др. проводится определение эндотоксинов в крови и других биологических жидкостях организма, что расширяет возможности ранней диагностики инфекционных заболеваний, вызываемых грамотрицательными микроорганизмами анализируется чистота медицинских аппаратов, соприкасающихся с кровью пациента, проводится постадийный контроль содержания ЛПС в производстве инъекхщонных препаратов. [c.309]

Метод электрофореза широко применяют в клинике для анализа белков плазмы и сыворотки крови. Концентрация белков плазмы составляет 60—80 г/л. Сыворотка крови представляет собой плазму, лишенную фибриногена. При заболеваниях может изменяться как общее количество белков плазмы, так и содержание отдельных белков или белковых фракций без изменения общего количества белка. При некоторых заболеваниях, например при воспалении почек, циррозе печени и др., наблюдается уменьшение содержания белков плазмы (за счет снижения количества альбуминов). Напротив, острые инфекционные заболевания, возникновение некоторых злокачественных новообразований сопровождаются повышенным содержанием белков в крови, чаще всего глобулиновой фракции. Поэтому анализ белков сыворотки крови имеет большое диагностическое значение и позволяет наблюдать за ходом лечения. Суммарный заряд белковой молекулы изменяется в зависимости от pH и при определенном значении pH (изоэлектриче-ская точка) равен нулю. Белок в изоэлектрическом состоянии при электрофорезе не передвигается ни к катоду, ни к аноду, наименее устойчив в растворе и при стоянии выпадает в осадок. [c.31]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология