Пептидный синтез быстрый

Итак, биосинтез белков, по современным представлениям, проходит четыре основных этана 1) активирование аминокислот и взаимодействие их с ферментами 2) соединение аминокислот с растворимой РНК 3) перенос аминокислот на молекулы информационной РНК в рибосомах и образование пептидных связей и 4) высвобождение полипептидной цепи из рибосомы. Последовательность реакций белкового синтеза представлена на схеме (рис. 25). Следует подчеркнуть, что все эти процессы биосинтеза белка в клетке идут очень быстро. Наблюдения над синтезом гемоглобина показали, что построение молекулы белка, состоящей из 150 аминокислотных остатков, заканчивает [c.294]

Главная трудность при обычном пептидном синтезе в растворе заключается в соединении больщих фрагментов, состоящих из 50 и более остатков аминокислот. Так как реакция конденсации протекает как реакция 2-го порядка, для быстрого соединения фрагментов нужны высокие концентрации реагирующих партнеров. Защищенные длинноцепочечные пептиды часто плохо растворяются в используемых для [c.163]

Разработка твердофазного метода синтеза пептидов— важное достижение современной пептидной химии, приближающее исследователей к исполнению их самых заветных желаний. Если справедливо, что наши желания — это предчувствия наших возможностей, то можно надеяться, что ознакомление с новым методом широкого круга исследователей будет содействовать быстрейшему претворению желаемого в области пептидного синтеза в возможное и действительное. [c.8]

Пептидный синтез [21. Э. о. быстро реагирует с хлорангидридом Ы-фталоил-ь-фенилаланина (2) при комнатной температуре с отщеплением хлористого этила и образованием активированного эфира [c.277]

Идея метода красива и плодотворна. Она красива благодаря простоте, остроумию и изяществу заключенного в ней подхода, а плодотворность этой идеи доказывается не только тем, что она быстро вошла в практику пептидного синтеза и открывает широкий простор для творческого поиска наилучших конкретных решений, но и тем, что эта идея обладает замечательной степенью общности и применима не только к случаю получения пептидов, но и к синтезам других биополимеров и их аналогов. [c.6]

Метод твердофазного пептидного синтеза вызвал широкий интерес, быстро овладел умами многих исследователей и привлек многочисленных сторонников. Однако вплоть до самого последнего времени практическое освоение этого метода было затруднено отсутствием достаточно подробных описаний методики проведения эксперимента. Появление книги Стюарта и Янг во многом ликвидирует этот пробел, поскольку в монографии последовательно, четко и всесторонне освещаются как теоретические, так и практические аспекты твердофазного метода пептидного синтеза. Авторы проделали большую и весьма полезную ра- [c.6]

Книга представляет интерес для весьма широкого круга исследователей. Она позволит быстро войти в рассматриваемую область тем, кто ранее не занимался пептидным синтезом и не обладает сколько-нибудь существенным опытом ведения подобного эксперимента. В то же время книгу по достоинству оценят опытные синтетики, специализировавшиеся в области получения пептидов, ибо монография содержит множество весьма важных практических деталей, значение которых очевидно. Отыскание таких деталей в ранее опубликованных журнальных статьях затруднительно, а во многих случаях — просто невозможно, так как ограниченность объема журнальных публикаций нередко вынуждала авторов излагать лишь основные результаты, поступаясь деталями эксперимента. Книга представит интерес и для тех, кто желал бы перенести принципы твердофазного метода получения пептидов на иные объекты и области синтеза. Конечно, было бы опрометчиво утверждать, что среди читателей этой книги найдутся люди, равнодушные к пробле.мам синтеза биополимеров, но можно с уверенностью предсказать, что все те, кто работает или намерен работать в области синтеза пептидов, заинтересуются этой книгой, а многие сделают ее своим настольным пособием. [c.8]

Специфичность ферментов в реакциях синтеза хорошо согласуется с их специфичностью в гидролитических реакциях [2139,2152]. То же самое относится к рН-зависимости пептидного синтеза [2151]. При использовании в качестве катализатора сериновых протеаз, они с эфиром быстро образуют ацилфермент и затем ацильная группа переносится на амин [c.200]

Эти опыты подтвердили наличие энергичного обмена тканевых белков, установленного ранее при работе с дейтерием. При помощи этого изотопа ыло найдено, что в течение трех дней происходит обновление состава белков мышц на 2,5%, печени на 10%. Все это привело к предположению, что в белках тела происходит быстрое чередование размыкания и замыкания пептидных цепей, в результате чего происходит смена аминогрупп или даже целых аминокислотных молекул. Наблюдается быстрое перемещение аминогрупп среди аминокислот в белках у животных. Возможно, при этом существенную роль играет реакция подстановки. Дело в том, что протеазы катализируют, кроме гидролиза и синтеза пептидных связей, также и реакции замещения, или подстановки. При этих реакциях как аминокислоты, так и целые пептидные цепи, принимающие участие в образовании пептидной связи, могут без предварительного гидролиза быть замещены аминокислотами или пептидными цепями. Такая высокая интенсивность обмена белков установлена в тканях не только животных, но и растений. [c.365]

Такая связь, вероятно, станет более очевидной, когда окажется возможным исследовать промежуточные пептиды, более сложные, чем дипептиды. Работа Зангера с сотрудниками позволяет детально выяснить структуру пептидных цепей в настоящее время имеются также методы быстрого и эффективного синтеза оптически активных пептидов (см. статью II). В связи с этим можно надеяться, что развитие этой области исследования пойдет быстрым темпом. [c.265]

Элонгация включает в себя все реакции-от образования первой пептидной связи до присоединения последней аминокислоты к белковой молекуле. Это наиболее быстрая стадия белкового синтеза, во время которой рибосома перемещается от первого до последнего кодона на информационной РНК. [c.72]

Исследуя удельную активность различных фракций печени крыс после введения [С ]-глюкозамина, Робинсон и сотрудники обнаружили, что глюкозамин, быстро превращаясь в кислоторастворимую форму, преимущественно фосфорилированную, связывается с белками, находящимися в клеточных частицах (микросомах и митохондриях), а затем поступает в плазму. Этот процесс не оказывает влияния на содержание белков клеток печени. Это свидетельствует о том, что гексозамин присоединяется к пептидной цепи гликопротеинов перед выходом последних из места их синтеза. [c.288]

Пептиды имеют очень большое биомедицинское значение особенно велика их роль в эндокринологии. Пептидами являются многие важнейшие гормоны человека. Их часто назначают больным для коррекции соответствующей недостаточности. Самый известный пример—введение инсулина больным сахарным диабетом. Пептидами являются также различные антибиотики (валиномицин, грамицидин А) и некоторые противоопухолевые препараты (например, блеомицин). Разработанные в последние годы методы быстрого химического синтеза пептидов позволили наладить производство пептидных гормонов в значительных количествах это разрешило многие проблемы, поскольку обычно гормоны присутствуют в организме животных в очень малых концентрациях и их трудно выделить в количествах, достаточных для терапевтических целей. По той же технологии осуществляется синтез и других пептидов, которые ввиду их малого содержания тоже трудно выделять из природных источников в частности, это относится к вирусным пептидам, используемым в качестве вакцин. [c.33]

Процесс протекает быстро и с прекрасным выходом. На образование каждой пептидной связи затрачивается около 3 ч. Этим методом за 8 сут была синтезирована А-цепь инсулина (21 остаток) и за 11 сут—В-цепь (30 остатков). Наиболее выдающийся результат состоял в полном синтезе панкреатической рибонуклеазы (124 остатка рис. 5.10) с общим выходом 18% это был первый синтезированный фермент. Это достижение ознаменовало собой нача- [c.40]

Определение эстеразной активности карбоксипептидазы N в сыворотке крови является наиболее простым и быстрым методом фермент гидролизует эфирную связь значительно быстрее, чем пептидную ограничивающим фактором оказались дефицитность ГАК и сложность синтеза этого эфира. [c.181]

Пептидные гормоны выделяются в кровь при участии специальных механизмов секреции. Эти гормоны после их синтеза включаются в секреторные гранулы — мембранные пузырьки, образующиеся в пластинчатом комплексе гормон освобождается в кровь путем слияния гранулы с плазматической мембраной клетки (экзоцитоз). Синтез гормонов происходит быстро (например, молекула проинсулина синтезируется за 1-2 мин), в то время как образование и созревание секреторных гранул требуют большего времени — 1-2 ч. Запасание гормона в секреторных гранулах обеспечивает быструю реакцию организма на действие стимула стимул ускоряет слияние гранул с мембраной и освобождение запасенного гормона в кровь. [c.383]

Кратко изложив стратегию и тактику пептидного синтеза, попробуем проанализировать его современное состояние. Методические возможности, которыми располагает исследователь, достаточны, чтобы осуществить синтез небольшого белка. Приведенные в табл. 2-9 данные пр твердофазному пептидному синтезу убедительно показывают, что относительно быстро можно построить длинные пептидные цепи. Но так как в результате получаются, как правило, только трудно или вообще неочищаемые продукты, этнм методом целесообразно синтезировать только короткие пептиды, а также аналоги и фрагменты с максимальным числом аминокислотных остатков от 10 до 15. [c.226]

Одновременно с этими исследованиями проводились работы, в которых изучались механизмы высвобождения гипоталами-ческих факторов. Электрическая стимуляция гипоталамуса и локальные инъекции гипоталамических экстрактов позволили выявить расположение нейроэндокринных клеток, вырабатывающих эти факторы. Некоторые места образования таких веществ указаны на рис. 25.5. Клетки всех этих участков посылают аксоны к срединному возвышению (eminentia mediana), находящемуся на нижней поверхности гипоталамуса. Аксоны оканчиваются на портальных сосудах, и в этих окончаниях накапливаются гипоталамические пептиды. Высвобождение их регулируется электрической активностью самих нейросекреторных клеток и циркулирующими, в крови гормонами. Пептиды действуют быстро (в течение нескольких минут), а затем инактивируются в крови. Их воздействие на клетки гипофиза приводит как к немедленному выбросу гипофизарных гормонов, так и к более длительному эффекту — усилению их синтеза. Влияние либеринов на клетки аденогипофиза опосредовано общим для пептидных гормонов механизмом — активацией мембранных рецепторов и синтезом циклического АМР (см. гл. 9). [c.169]

Поскольку аминолиз низших алкиловых и ациловых эфиров протекает слишком медленно, подобная активация карбоксильной компоненты в пептидном синтезе не достаточна. Исключением является легкое образование дикетопнперазинов при циклизации ди-пептидных эфиров (см. с. 380), ускоренное крайне благоприятным пространственным фактором. Для осуществления быстрой бимолекулярной реакции необходимо увеличение электрофильного характера сложноэфирной карбонильной группы. Обычно это достигается введением электроотрицательного заместителя в алкильную или арильную сложноэфирную функцию. Типичным примером такого рода являются цианометиловый (84) [71] н п-нитрофениловый эфиры (85) [72, 73]. Большей реакционноспособностью обладают сложные эфиры тиолов, например (86) [73, 74], и многие особые структуры, прежде всего производные 0-ацилгидроксиламина, например (87) [69]. [c.395]

Фениловые эфиры (70) были предложены [314] для защиты карбоксильной группы в пептидном синтезе, так как их расщепление под действием высоконуклеофильного гидроперокси-аниона проходит в мягких условиях без рацемизации. 1,5-Диазабицик-ло [4.3.0] но ён-5 легко и быстро элиминирует карбоксилатные анионы из 2-толуол-/г-сульфонилэтиловых эфиров (71) схема (155) . Этот альтернативный метод расщепления [217] позволяет избежать риска вторичного гидролиза при применении водного основания [315]. ..... [c.65]

Рацемизацию в карбодиимидном методе пептидного синтеза связывают обычно с образованием промежуточных быстро ра-цемизующих оксазолонов. 2 Трифторметил-4-изопропилпсевдо-оксазолон-5 (I) действительно обнаруживали с помощью ГЖХ как промежуточный продукт в реакции N-TФA-L-вaлинa с метиловым эфиром L-валина (И) и дициклогексилкарбодиимидом в абсолютном тетрагидрофуране при 20 °С [20]. [c.178]

Книга, предлагаемая вниманию читателей, посвящена новому перспективному методу пептидного синтеза с использованием нерастворимых полимерных носителей и представляет собой первую в мировой литературе монографию по этому вопросу. Важность работ по совершенствованию методов пептидного синтеза очевидна. От умения химиков быстро, надежно и эффективно синтезировать достаточно длинные пептидные цепи зависит как возможность воспроизведения природных пептидно-белковых структур, так и возможность получения практически неограниченного числа их разнообразных аналогов. Этим, в свою очередь, определяются уровень и темп исследований в области изучения ферментов, антител, больших групп гормонов, антибиотиков, биотоксинов и множества других биологически важных и физиологически активных веществ пептидно-белковой природы. [c.5]

Первое устройство для встряхивания, сконструированное для пептидного синтеза (см. рис. 18) [71, 128], в настоящее время усовершенствовано и выпускается в продажу. Эта качалка поворачивает стеклянный реактор по дуге в 105° со скоростью примерно 25 цикл1мин. Более быстрое вращение приводит к нежелательному разбрызгиванию суспензии смолы, [c.151]

Используя несомненные преимущества метода Меррифилда, уже сегодня можно сравнительно быстро синтезировать пептидные фрагменты, которые могут быть получены с высокой степенью чистоты при помощи имеющейся теперь техники фракциоиирювания. Конденсация таких фрагментов с помощью обычных методов, позволяющих проводить тщательную очистку и анализ после каждой стадии, указывает путь иа ближайшее будущее. Наряду с этим с помощью твердофазного синтеза следует получать короткие биологически активные пептиды и прежде всего многочисленные аналоги. Хотя трудно установить предел длины цепи, позволяющий использовать этот метод для успешного получения пептидов, но пептиды, включающие 10—15 аминокислот, — вот, по-видимому, предпочтительные объекты синтеза. Главные проблемы, решение которых позволит преодо- [c.194]

Эти данные позволяют думать, что in vivo рибосомы в печени крысы участвуют в быстрых иревращениях, в ходе которых синтезируются белки или большие пептидные фрагменты, которые затем, возможно, перемещаются в другие части клетки. По скорости включения метки в рибосомы фактически можно судить о скорости почти всего белкового синтеза в печени однако не исключено, что синтез белка может протекать и в других частях клетки, например в ядре (стр. 287). [c.265]

Механизм синтеза белка. На протяжении многих лет полагали, что синтез белков в теле происходит под влиянием обратимого действия гидролитических ферментов, обусловливающих образование пептидных связей в противоположность их расщеплению, имеющему место при гидролизе. Механизм, посредством которого в тканях осуществляется надлежащий подбор аминокислот во вновь синтезируемом белке, все еще окончательно невыяснен. Но наши познания в этой области быстро развиваются. Предметом весьма напряженных исследований, проводимых в настоящее время, служат механизм синтеза белка, последовательность расположения аминокислот в белке и генетический код, ответственный за эту последовательность. [c.380]

Другой фактор, ВЛИЯЮЩИЙ на стабильность реагентов, — доступ ультрафиолетового излучения (об этом уже шла речь в гл. III). Огсутствие защитного слоя озона, существующего в настоящее время, должно было приводить к тому, что ультрафиолетовое излучение действовало разрушительным образом на многие соединения, синтезированные при его же воздействии. Однако если эти соединения накапливались в воде, то это предохраняло их от разрушающего воздействия ультрафиолетового излучения в отличие от соединений, остававшихся в неводном окружении. Мы видели ранее, что ультрафиолетовые лучи могут стимулировать образование пептидных связей между теми аминокислотами, которые способны поглощать энергию ультрафиолетового излучения. С другой стороны, ультрафиолет может вызывать разложение аминокислот путем дезаминирования в том случае, если они находятся в водном растворе на небольшой глубине. Известно, что поглощение ультрафиолетовых излучений, особенно с длиной волны менее 1850 А, быстро возрастает с увеличением толщины водного слоя. Таким образом, с увеличением глубины аминокислоты все в меньшей степени будут подвергаться разложению (и соответственно будет также уменьшаться влияние ультрафиолетового света на синтез пептидов). [c.239]

Секреторные гранулы происходят из цистерн аппарата Гольджи (см. рис. 3). В случае нейронов образовавшиеся синаптические пузырьки далее транспортируются с быстрым аксотоком из тела клетки по аксону в область нервных окончаний, где происходит синтез медиаторов, везикулярный захват медиаторов лз синаптоплазмы и их упаковка в синаптические пузырьки. Все секреторные гранулы имеют уникальный биохимический состав. Они содержат медиаторы или гормоны в очень высокой концентрации (см. табл. 4). В эндокринных клетках концентрация пептидных гормонов в гранулах в 200 раз выше, чем в цистернах аппарата Гольджи в экзокринных клетках это соотношение равно 9. Секреторные гранулы имеют необычно высокое соотношение липид/белок, равное 5 1. На внутренней поверхности мембран гранул нередко локализованы гликолипиды мембраны богаты холестерином, сфингомиелином. Во всех случаях показана идентичность содержимого гранул и секретируемых из клетки веществ. [c.65]

Многие белково-пептидные гормоны образуются из предшественников большего молекулярного веса, и секреция этих гормонов становится возможной только после того, как произойдет отщепление лишнего фрагмента. Так, секреции инсулина предшествует превращение в р-клетках препроинсулина в проинсулин, а затем в инсулин (см. раздел 2.2.1). Существование прогормонов защищает эндокринную железу от местного действия гормона, обеспечивает его внутриклеточный транспорт. По мере превращения препрогормона в гормон, как правило, возрастает гидрофильность молекулы. Посдедовательная модификация белка приводит к тому, что из эндоплазматического ретикулума он переходит в цистерньг аппарата Гольджи, а затем в специальные образования (везикулы) плазматической мембраны. В везикулах завершается синтез молекулы гормона, мембрана везикулы защищает гормон от инактивации, но главный выигрыш, который дает такой способ запасания гормона, — это быстрый выброс в кровь больших количеств регулятора. Биосинтез некоторых белково-пептидных гормонов, их транспорт к периферии секреторной клетки занимает 1—3 ч. Очевидно, что воздействие на биосинтез приведет к изменению уровня этих гормонов в крови лишь через несколько часов. Влияние же на секрецию гормонов, синтезированных впрок и запасенных в специальных гранулах, позволяет повышать концентрацию гормонов в крови в не- сколько раз за секунды или минуты. [c.103]

Ion, детерминирующим синтез полипептида с молекулярной массой 94 кДа, тетрамер которого и составляет фермент. Данная протеаза локализуется в цитоплазме, и ее действие направлено на гидролиз дефектных и чужеродных белков в бактериальной клетке. Эффективная деградация белков протеазой La до низкомолекулярных пептидов сопровождается гидролизом этим же ферментом АТР. Интересно, что для разрыва пептидной связи гидролиз АТР не требуется. Считают, что энергия, пол Д1аемая при гидролизе АТР, необходима для транслокации фермента вдоль белка-субстрата и быстрой и полной его деградации без выделения в окружающее пространство продуктов частичного гидролиза белка, которые могут быть токсичны для клетки. [c.153]

Смотреть страницы где упоминается термин Пептидный синтез быстрый: [c.687] [c.419] [c.394] [c.351] [c.74] [c.74] [c.247] [c.277] [c.24] [c.288] [c.213] [c.400] [c.547] [c.249] [c.33] [c.288] [c.166] [c.166] [c.122] [c.190] [c.22]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология