Число разбавления буферных растворов

Буферный раствор — смесь слабой кислоты или слабого основания с собственной солью, мало меняющая pH при разбавлении раствора в пределах 0,1—0,0001 н., а также при добавлении небольшого количества свободной кислоты или свободной щелочи. Буферной емкостью раствора называют число молей сильного основания, которое, будучи добавлено к 1 л раствора, повышает pH на 1, или число молей сильной кислоты, которое, будучи добавлено к 1 л раствора, понижает pH на 1. Для данной общей концентрации компонентов буферного раствора наибольшая буферная емкость достигается при равной концентраций каждого компонента [НА] = [МеА . От добавления к буферному раствору сильной кислоты или сильного основания концентрации кислоты и соли меняются. Поэтому высокая концентрация кислоты НА еще недостаточна для того, чтобы раствор оказывал буферное действие при добавлении сильного основания. Буферная емкость равна, [НА [МеА , [c.58]

Буферными растворами называют растворы, поддерживающие постоянное значение pH при добавлении небольшого количества сильной кислоты или основания или при разбавлении водой. Способность растворов поддерживать постоянное значение pH количественно характеризуется буферной емкостью. Она представляет собой число молей сильного электролита, которое при добавлении к 1 л раствора изменяет его pH на 1. [c.181]

Иммуноанализ проводят следующим образом. Полистирольные пробирки (80X11 мм) покрываются антителами при обработке 1 мл раствора антител. Растворы антител разбавляют ОД М N a-карбонатного буфера (pH 9,8) или фосфатным (солевым) буфером. Пробирки с этими растворами оставляют на 3 ч при 37 °С для хранения раствор оставляют в пробирках на холоду. Перед определением необходимое число пробирок промывают 0,9%-ным хлоридом натрия, содержащим 0,05% твина 20. В каждую пробирку помещают 0,5 мл одного из следующих растворов 1) стандартный раствор иммуноглобулина G, 2) неизвестный образец, 3) буферный раствор. После этого добавляют 0,1 мл разбавленного конъюгата щелочной фосфатазы и иммуноглобулина G (приготовленного с помощью сщивапия глутаровым альдегидом). Для разбавления используют фосфатный (солевой) буферный раствор, содержащий 1% сывороточного альбумина человека и 0,02% азида натрия. Пробирки инкубируют при комнатной температуре в течение ночи (16 ч) на роторной мешалке так, чтобы поверхность, покрытая антителами, покрывалась 0,6 мл раствора, находящегося в каждой пробирке. Затем пробирки промывают три раза раствором Na l-твин. Количество фермента, присоединенного к иммуноглобулину G, связанному стенками пробирок, покрытых антителами, определяют, добавляя 1 мл 0,05 М Na-карбонатного буфера (pH 9,8), содержащего 1 мг/мл п-нитрофенилфосфата и 1 ммоль/л хлорида. магния. Через 30 мин реакцию останавливают, добавляя 0,1 мл 1 М ХаОН. Измеряют оптическую плотность при 400 нм и строят стандартный график зави-си.мости ферментативной активности (изменение оптической плотности в единицу времени) индивидуальных образцов от содержания в них иммуноглобулина G. [c.382]

Буферные растворы (англ. buffer, от buff — смягчать удар) — растворы с определенной устойчивой концентрацией водородных ионов смесь слабой кислоты и ее соли (напр., СНзСООН и СНзСООМа) или слабого основания н его соли (напр., NH3 и NH4 I). Величина pH Б. р. мало изменяется прн добавлении небольших количеств свободной сильной кислоты или щелочи, при разбавлении или концентрировании. Б. р. широко используют в различных химических исследованиях. Б. р. имеют большое значение для протекания процессов в живых организмах. Напр., в крови постоянство водородного показателя pH поддерживается буферными смесями, состоящими из карбонатов и фосфатов. Известно большое число Б. р. (ацетатно-аммиачный буферный раствор, фосфатный буферный раствор, боратный буферный раствор и др.). [c.29]

Свойства стандартов. Составы, плотность, число разбавления буферная емкость и температурный коэффициент ран для семи стандартных растворов сведены в табл. У.14 [38]. Следующие разделы содержат некоторые дополнительные замечания относительно поведения каждого раствора. [c.121]

Рис. V. 2. Число разбавления Д рНу для НС и для буферных растворов, состоящих из одноосновной незаряженной слабой кислоты и ее сильной соли в равных молярных концентрациях, как функция pH.

Боратный 0,01 М буферный раствор. При сохранении боратного буфера в течение года или более содержание воды в нем обычно падает от 10 моль до 9,0—8,5 моль на 1 моль буры или даже ниже, если сосуд не закрыт герметически. Однако число разбавления боратного раствора так мало, что это изменение содержания воды заметно.,не сказывается. Изменение состава исключает применение раствора в качестве ацидиметрического стандарта. Значение pH 0,01 М раствора изменяется на 0,001 ед. при адсорбировании 0,2% СОг. Поэтому целесообразно сохранять раствор тщательно закупоренным. [c.122]

Уравнения (8.36) — (8.38) показывают, что pH буферного раствора данного состава определяется отношением концентраций кислоты и соли или основания и соли, поэтому не зависит от разбавления. При изменении объема раствора концентрация каждого компонента изменяется в одинаковое число раз. [c.129]

На рис. V. 2 приведены рассчитанные числа разбавления для сильной кислоты и буферных растворов четырех концентраций, [c.103]

Составы, буферная емкость р и число разбавления АрН, щелочных буферных растворов (25° С) [c.146]

Условия адсорбции и элюирования выделяемого соединения зависят от его специфических свойств. Если нужно выделить небольшое количество белка из неочищенной смеси с помощью аффинного лиганда, обладающего высоким сродством, то иногда сочетают обработку в стационарных условиях с элюированием после переноса сорбента в колонку [16]. Если же соединение, которое необходимо выделить, обладает незначительным сродством к специфическому адсорбенту, оно очень часто элюируется из колонки даже без смены буферного раствора. В этом случае получают разбавленный раствор этого соединения. При выделении высокомолекулярных соединений скорость потока жидкости, проходящего через колонку, должна быть достаточно низкой. На адсорбционное равновесие влияет не только число [c.12]

Число разбавления АрНу (в единицах pH) для четырех типов буферных растворов при pH 4,5—9,5 [c.104]

Число разбавления одноосновных слабокислотных буферных растворов уменьшается с уменьшением концентрации в области значений pH 4,5—9,5. Инверсия происходит около pH 4 и при низких pH число разбавления увеличивается с уменьшением концентрации. Однокислотные слабоосновные буферные растворы проявляют аналогичные свойства с инверсией около pH 10, но в промежуточной области значений pH число разбавления отрицательно. Для числа разбавления растворов бифталата калия минимум будет при с 0,02. Интересно отметить, что растворы силь- [c.104]

Число разбавления рассчитано по уравнениям, данным в предыдущем разделе. Эти данные достаточно хорошо согласуются с наблюдаемыми значениями, за исключением боратных буферных растворов. В последнем случае расхождение несомненно следует приписать хорошо известной тенденции к образованию комплексных полиборных кислот при увеличении концентрации борной кислоты. [c.109]

Из формул (33) и (34) следует, что концентрации водородных и гидроксильных ионов в буферных растворах не зависят от абсолютных количеств составных частей, а только от их отношения. Это значит, что [Н ] и pH буферных растворов мало зависят от разбавления при разбавлении данного раствора числитель и знаменатель дроби уменьшаются в одинаковое число раз, отношение же их остается неизменным. [c.92]

Большое количество фермента обеспечивает полное превращение мочевины и постоянство характеристик колонки в течение по меньшей мере месяца ее эксплуатации, несмотря на неоптимальное значение pH буферного раствора [5]. Анализ выполняли в 0,05 М Трис-НС (pH 8,1), тогда как уреаза проявляет максимальную активность при pH 7,0. Градуировочная кривая для проб объемом 0,2 мл линейна вплоть до концентрации 40 мкМ, а предел обнаружения равен 0,2 мкМ (рис. 27.10). В течение часа можно проанализировать 20 проб сыворотки, разбавленной в 500 раз, с погрешностью около 2%. Очевидно, скорость выполнения анализов недостаточна для обработки крупных серий проб и должна быть повышена, например за счет использования нескольких параллельных сенсоров (а возможно, и ферментных колонок) и соответствующего автоматического переключателя. Однако и имеющаяся в настоящее время проточная система великолепно обрабатывает ограниченное число проб, а в силу высокого постоянства характеристик и короткого стартового периода является вполне удовлетворительной дублирующей системой. [c.436]

Наоборот, если прибавить такое же количество кислоты или основания к 1 л чистой воды, то pH изменится на 5 единиц (т. е. понизится с 7 до 2 или повысится с 7 до 12). Нетрудно видеть, что pH буферной смеси не меняется также и с разбавлением раствора, при котором Скисл и Ссоли изменяются в одинаковое число раз. [c.281]

Из уравнения видно, что pH буферного раствора остается постоянным при разбавлении раствора, так как при разбавлении в одинаковое число раз будут разбавляться кислота и соль с прибавлением кислоты pH изменится незначительно, так как концентрация кислоты стоит под логарифмом. [c.331]

Буферный раствор со значением pH 5,8—6,0 готовят следующим образом 30 г ацетата натрия помещают в мерную колбу емкостью 100 мл, растворяют в воде, доливают водой до метки и перемешивают. Отбирают 10 мл раствора и нейтрализуют разбавленной соляной кислотой (1 8) по индикатору ализарину до перехода красной окраски раствора в желтую. Как и в случае анализа ацетата натрия, следует сосчитать число капель кислоты, израсходованных на нейтрализацию. Оставшийся раствор ацетата натрия (90 мл) нейтрализуют таким же числом капель, но уже концентрированной кислоты и тщательно перемешивают. [c.284]

Перед экстракционным разделением необходимо растворить анализируемое вещество, ввести буферные и комплексообразующие агенты, добавить экстрагент, е. разделение связано с необходимостью использования большого числа чистых реагентов. В самом акте экстракции редко достигается значительное концентрирование примесей экстракт представляет собой обычно довольно большой объем разбавленного раствора примеси, содержит балластные, в том числе органические, соединения. Спектральное конечное определение возможно только после дополнительных этапов абсолютного концентрирования примесей и обработки концентрата. Наконец, исследованиями последних лет доказана заметная роль сопряженных процессов при экстрагировании. Наличие соэкстракции делает необходимым постановку специальных опытов, доказывающих отсутствие потерь следов при извлечении основы. [c.271]

Для разделения низкомолекулярных соединений, экстрагированных разбавленной кислотой из подзолистой почвы горизонта Б, предложен ряд методов [15]. Разделение проводили осаждением после добавления сначала раствора солей двухвалентного свинца или избытка двухвалентного бария, после этого — избытка двухвалентной меди и затем избытка двухвалентного свинца. Ионы металлов удаляли из экстрактов, пропуская их через колонку, заполненную насадкой дауэкс 50. Дальнейший анализ проводили на колонке с целлюлозой. Для разделения на бумаге этих соединений было испытано большое количество элюентов, в том числе нейтральных, кислотных, основных и буферных. В ряде экспериментов бумагу предварительно пропитывали буфером. Оптимальными составами элюентов оказались смесь метилэтилкетон— ацетон — уксусная кислота — вода [16] и системы на основе смеси изопропанол — вода, которые подкисляли уксусной кислотой или подщелачивали аммиачной водой или буфером. Содержание изопропанола колебалось от 40 до 60%. Для соединений с большой молекулярной массой и более темной окраской следует применять растворители с большим содержанием воды. Основные, кислотные и буферные элюенты разделяют смеси на более компактные хроматографические зоны по сравнению с нейтральными элюентами. Проявление хроматограмм лучше всего проводить, облучая их УФ-светом. Изучение хроматограмм показывает, что в каждой из описанных методик часть соединений остается полностью или частично неразделенными [15]. Первая элюируемая из колонки фракция и соединения, в последнюю очередь выпадающие в осадок при добавлении ионов металлов, имеют самую светлую окраску, характеризуются максимальными значениями Rf и дают наиболее характерные реакции с реактивами, которыми опрыскивают хроматограмму для ее проявления. Так, фракция, элюируемая из [c.305]

Поскольку число разбавления эквимоляльного буферного раствора кислотного типа изменяет знак при высоких pH, то при разбавлении pH будет проходить через максимум. Подобным же образом число разбавления слабоосновного буфера меняет знак при низких значениях pH и при разбавлении раствора pH может пройти через минимум. В области промежуточных значений pH кривые для каждой концентрации буфера превращаются в прямые линии и число разбавления не зависит от константы диссоциации слабой кислоты или основания. Оно изменяется только с концентрацией, типом буферного раствора (кислотным или основ- [c.103]

Рис. V. 3. Число разбавления А рНу для NaOH и для буферных растворов, состоящих из однокислотнэго незаряженного слабого основания и его сильной соли в равных молярных концентрациях, как функция pH.

При разбавлении раствора Сц-ты и Ссом уменьшаются в одинаковое число раз, поэтому изменение Ah вызывается главным образом изменением коэффициента активности. Для 0,1 н. ацетатного буферного раствора [i,=0,l /сНзСоо-=0,78, а для 0,01 н. раствора х=0,01 и /снзсоо-==0,89, так что [c.164]

Вскоре после проведения этого исследования Консден, Гордон и Мартин [372] применили к пептидам свой знаменитый метод хроматографии а бумаге. Выбор подвижной фазы, очевидно, диктуется природой пептидов, подлежащих разделению, вследствие чего необходимы предварительные пробы однако некоторые съедения а выборе подвижной фазы в настоящее время можно найти в литературе [340, 349, 373 и пр.]. Положение пептидов на бумаге следует определять, не вызывая слишком сильного их разрушения. Для этой цели можно прибегнуть к флуоресценции [374] можно также использовать весьма разбавленный (0,02%-ный) раствор нингидрина или концентрированный его раствор, который наносится в отдельных точках специальной щеточкой [375а]. Крупные пептиды обнаруживаются с трудом, но их редко анализируют на бумаге. С помощью специальных цветных реакций (табл. 7) оказывается возможным установить расположение некоторых пептидов на хроматограмме [3756]. Двумерное хроматографирование на бумаге обладает действительно поразительной разрешающей способностью, которую целесообразно использовать для конечного разделения групп , полученных при предварительном фракционировании с помощью ионофореза, ионного обмена или адсорбции. Некоторые исследователи, располагающие очень малыми количествами дорогостоящего соединения, удовлетворены тем, что они могут провести хроматограмму на бумаге, используя для этого количество пептида, не превышающее примерно 1 мг. Другие исследователи сожалеют, что опасность перегрузки бумаги не позволяет им воспользоваться большими количествами, так как последующее разделение пятен и окончательная идентификация пятен, являющихся, повидимому, чистыми, представляет собой довольно деликатную операцию. Эти исследователи, однако, могут обратиться к двум другим методам либо к применению толстой бумаги [376] или хроматопилии [377а], либо к использованию колонок. Для фракционирования пептидов на бумаге можно применять ряд растворителей, в числе которых должны быть упомянуты фенол или крезол с аммиаком, колли-дин, пиридин -f- коллидин, фенол с буферным раствором, бутиловый спирт -f- уксусная (или муравьиная) кислота и фосфатные буферные растворы. [c.155]

Обычно раствор белка и буферных солей рассматривают как двухкомпонентную систему, поскольку существующая теория не разработана в достаточной мере и неудобна для учета всех потоков большого числа взаимодействующих компонентов. При экстраполяции к бесконечному разбавлению простое предположение о двух-компонентности приближается к действительности. Приведение величины 1)° к Ош (диффузия в воде при бесконечном разбавлении) осуществляется при помощи поправки на вязкость [c.76]

Это уменьшение объясняется увеличением числа групп С2О1 , входящих в состав комплексного иона и обладающих основными свойствами. Интересно, что в растворах соединения Кв[(и02)2(С204)5] имеет место постоянство pH с разбавлением, объясняемое, очевидно, тем, что pH в растворах этого соединения регулируется буферной системой H 20 —СзО . [c.362]

Для колориметрического определения pH в качестве стандартных растворов с определенным значением pH применяются так называемые буферные смеси, состоящие обычно из смеси слабой кислоты с ее солью (например, Hg OOH- - Hg OONa). Такие смеси почти не меняют своего pH при разбавлении или при прибавлении различных реактивов, в том числе и небольших количеств кислот или щелочей. Устойчивость pH характеризуется буферной емкостью раствора, т. е. величиной изменения pH при изменении концентрации кислоты или шелочи (стр. 264 и 274). [c.500]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология