Хроматография центробежная

К Ж. X. обычно относят также гидродинамич. хроматографию, где неподвижная фаза отсутствует. В этом случае используют тот факт, что скорость потока элюента максимальна в центре полого капилляра и минимальна у его стенок, а разделяемые компоненты распределяются между движущимися с разной скоростью слоями элюента в соответствии со своими размерами или под влиянием наложенного в поперечном направлении внеш. силового поля (центробежного, электрического, магнитного). [c.151]

Аминокислотный состав и последовательность аминокислот выяснены для многих тысяч белков. В связи с этим стало возможным вычисление их молекулярной массы химическим путем с высокой точностью. Однако для огромного количества встречающихся в природе белков химическое строение не выяснено, поэтому основными методами определения молекулярной массы все еще остаются физико-химические методы (гравиметрические, осмометрические, вискозиметрические, электрофоретические, оптические и др.). На практике наиболее часто используются методы седиментационного анализа, гель-хроматография и гель-электрофорез. Определение молекулярной массы белков методами седиментационного анализа проводят в ультрацентрифугах , в которых удается создать центробежные ускорения [c.44]

Из рис. 56 следует, что значения Кг в круговой (центробежной) хроматографии выще значений Кг для линейной хро.матографии (в тех же условиях) за исключение.м случаев, когда Кг =0 и Кг =1 (при которых, конечно, обеспечивается равенство). Возрастание значений Кг сказывается сильнее дая низких значений. Такая ситуация правдоподобна, поскольку пропускная нагрузка (для растворителя на единицу площади) снижается при увеличении степени удаленности от центра. Иначе говоря, объем растворителя, необходимый для заполнения удаленных (от центра) секторов должен проходить через узкую "горловину", где обеспечиваются [c.164]

На рис. 59 показаны некоторые из таких воздействии на градиент, отмечаемый в круговой бумажной хроматографии, а на рис. 62 иллюстрируются некоторые ситуации, отмечаемые в круговой (центробежной) тонкослойной хроматографии при работе с и-камерами. Как и предполагалось, количество растворителя в слое снижается при увеличении расстояния от центра пластинки. Создается типичный "антипараллельный градиент" (см. соответствующую главу), сжимающий пятна таким образом, что они преобразуются в эллипс. Профиль градиента оказывается довольно пологим при наибольщей скорости поступления растворителя в слой (порядка 1 мкл/с), но приобретает увеличивающуюся крутизну прн снижении скорости потока (показанный на рис. 62.а). Кривая, соответствующая скорости 1 мкл/с (показанная на рис. 62.6), представляет собой специальный случай (когда профиль идеально полог и находится на одном уровне) аналогичный график, приведенный на рис. 62.а, скошен вниз. Такое существенное различие объясняется тем, что эксперименты в случае а проводились при относительной влажности около 45%, а в случае б - 90%. При такой высокой влажности слоем улавливается столь много воды, что она частично вытесняется движущимся фронтом гидрофильного ацетона (в результате вода движется в виде бесцветного кольца впереди фронта растворителя). Поскольку вода перемещается по слою медленнее ацетона, следующий за ней растворитель замедляется кольцом воды, в результате чего объемный градиент выравнивается (см. также рис. 19). [c.166]

Рис. 59. Профили растворителя (объемного градиента) в круговой (центробежной) бумажной хроматографии. Данные заимствованы па публикации (18) 1 - сектор 20 , без фитиля 2 -полукруг, фитиль 10 см 3 - полукруг, фитиль 20 см 4 -полукруг, фитиль 30 см.

Рис. 62. Зависимость объемных градиентов от скорости поступления растворителя в круговой (центробежной) хроматографии

В центробежной тонкослойной хроматографии интегральная пропускная способность высока прн малых значениях Rr, а сопутствующее высокое значение (1 - Rf) "обеспечивает" высокую разрешающую способность. В случае центростремительной - при малых Rr разрешающая способность посредственна (поскольку низка пропускная способность), а при высоких Rr относительно высокая пропускная способность не проявляется из-за малого значения множителя (1 - Rr). [c.292]

Если вращающуюся спиральную колонку заполнить с одного конца стационарной фазой, а через другой конец спирали ввести подвижную фазу, в объеме колонки произойдет их взаимное диспергирование. При этом вытеснению стационарной фазы будет препятствовать действующая в противоположном направлении сила архимедова винта, возникающая вследствие вращения колонки относительно оси центрифуги. Если эта сила, зависящая от скорости вращения центрифуги, будет перемещать частицы стационарной фазы со скоростью, превышающей скорость движения подвижной фазы, реализуются условия для осуществления противоточного хроматографического разделения. Если скорости движения фаз сбалансированы, отпадает необходимость в постоянной подпитке колонки стационарной фазой и появляется возможность хроматографического разделения в обычном режиме пропускания через колонку подвижной фазы. Случай строго сбалансированного по скорости противоположно направленного движения обеих фаз, при котором стационарная фаза оказывается неподвижной относительно стенок колонки, практически трудно реализуем и не является оптимальным для данного процесса. Поэтому метод вошел в литературу как противоточная центрифужная хроматография. В то же время, несмотря на наличие встречного движения фаз, соответствующего формальным признакам противоточного хроматографического процесса, ЖЖХ в поле центробежных сил по конечному эффекту разделения ближе к обычной колоночной хроматографии. [c.190]

В работе [18] описана хроматография в системе жидкость— твердое тело с применением центробежной силы на микроколонках, заполненных тонкодисперсным силикагелем. Метод, по-видимому, очень быстр (разделение происходит в течение 7 мин) и эффективен. [c.216]

Выше описано разделение путем восходящего элюирования. Возможны иные варианты элюирования [244] нисходящее элюирование горизонтальное элюирование (круговая хроматография [250]) — пробу наносят по кругу на квадратную пластинку с тонким слоем сорбента (на пересечение диагоналей), в центр подают растворитель, вещества разделяются с образованием концентрических зон многократное элюирование одним и тем же растворителем (после элюирования пластинку высушивают и операцию повторяют со свежей порцией элюента) ступенчатое элюирование — многократное элюирование разными растворителями центрифужное элюирование — под действием центробежной силы движение потока растворителей ускоряется в 2—3 раза градиентное элюирование — состав элюента непрерывно изменяется. [c.103]

Обычно в препаративном хроматографе колонны и детектор размещают в одном термостате. Однако широко применяемое в последнее время программирование температуры вызвало необходимость отдельного термостатирования детектора. Термостат препаративного хроматографа имеет большую емкость, что затрудняет контроль температуры в нем. Основными требованиями, предъявляемыми к термостату, является поддержание заданного температурного режима во времени и отсутствие большого перепада,температуры в объеме термостата, если перепад не задан режимом работы. Заданный температурный режим обеспечивается интенсивным перемешиванием воздуха с помощью центробежных вентиляторов, направленность циркуляции потока создается специальными диффузорами. В термостате, изображенном на рис. 58, воздух засасывается из пространства внутри прямоугольного диффузора и выбрасывается в зазор между диффузором и стенкой. Конструктивно термостат обычно выполняется в виде шкафа, в котором при открывании передней дверцы обеспечивается свободный доступ к [c.140]

Предлагаются также и другие способы хроматографии, например круговой. В этом случае пробу наносят в центре большого фильтра, из которого вырезается узкая полоска-сектор, немного не доходящая до центра фильтра. Большую часть ее отрезают, оставив около 1,5 см, служащие фитилем, подающим растворитель со дна чашки Петри, несколько меньшей, чем фильтр. Сверху фильтр накрывают такой же чашкой Петри и плотно придавливают. Особых преимуществ такой вид хроматографии не представляет. Но в последнее время предлагают для круговых хроматограмм специальные приборы типа центрифуги, где при вращении такой хроматограммы, в силу развития центробежных сил, происходит чрезвычайно быстрое разделение веществ. [c.111]

По технике эксперимента можно выделить два варианта жидкостной хроматографии, различающиеся главным образом организацией перемещения подвижной фазы колоночная жидкостная хроматография (КЖХ), в которой осуществляется принудительный поток элюента, и тонкослойная, в которой подвижная фаза перемещается в основном за счет капиллярных сил (в некоторых случаях в сочетании с силами тяжести и центробежными силами). Однако обычно па практике под ТСХ (или плоскостной хроматографией) понимают вариант, в котором слой сорбента имеет высоту намного меньше ширины. [c.5]

Центробежную хроматографию проводили с теми же системами растворителей при атмосферном давлении, вводя проявитель в центр хроматограммы. На бумаге ватман № 1 разделение происходило за 45 мин при 600 об/мин [6]. [c.81]

В косвенных методах размеры частиц определяются по признакам, зависящим только от этих размеров, например по скорости оседания в жидкой среде (седиментационные способы анализа в гравитационном или центробежном полях — см. 2.2.3) или по характеру радиальных хроматограмм на бумаге или капельных проб. Сочетание нескольких методов анализа, например определение фильтруемости и седиментационного центрифугального с радиальной хроматографией, позволяет охватить диапазон размеров частиц от 0,2 до 4—5 мкм, характерный для выпускных форм красителей [20, 21]. [c.31]

Известен такой вариант колоночной хроматографии, в котором элюент перемещается по колонке под действием центробежной силы [18], а не давления. В этом случае колонка представляет собой своего рода зональный ротор центрифуги, вдоль [c.16]

В круговой хроматографии элюирование осуществляется в направлении от центра к периферии слоя сорбента. Образец наносят в виде дуги или кольца вокруг центра хроматограммы, куда затем подают растворитель. Полученные с помощью этого метода хроматографические зоны представляют собой концентрические дуги или окружности, расположенные на различном удалении от центрального пятна. Если хроматографирование в плоском слое сорбента осуществляется таким же образом, как в классической колоночной хроматографии, метод непрерывного элюирования соответствует простому элюированию с колонки, многократное элюирование — хроматографии с повторяющимся циклом, а радиальное элюирование — центрифужной колоночной хроматографии. Следует отметить, что под действием центробежной силы скорость радиального элюирования плоских хроматограмм увеличивается . для создания такой силы используют приспособление типа фонографа. [c.23]

О препаративной газовой хроматографии. Центробежный холодильник для отделения веществ в виде снега или тумана из медленного потока газа. [c.42]

Чтобы обеспечить более эффективное осаждение вещества, образующего туман, разработаны специальные ловушки, в которых аэрозоли разрушаются при помощи электрического поля (Томпсон, 1961) или под действием центробежной силы (Верли и Ковач, 1959 и 1960). Выход повышается до 95%, но такие охлаждающие системы из-за их больших размеров пригодны преимущественно для препаративной газовой хроматографии. [c.257]

В поршневых Н. для периодич. сообщения рабочей камеры с областями всасывания и нагнетания (рис. 4,а,б) предусмотрены клапаны. Различают Н. приводные (от электродвигателя) и прямодействующие (от паровой машины). По сравнению с центробежными поршневые Н. сложнее по конструкции, имеют при одинаковой мощности большие габариты, массу и стоимость. Однако они отличаются сравнительно высоким кпд и независимостью подачи от напора, что позволяет использовать их в качестве Т-наз. дозировочных Н. для точного регулирования подачи жидкостей (напр., в жидкостной хроматографии). Поршневые Н. применяют при сравнительно небольших подачах и высоких давлениях для перемещения высоковязких, а также огие- и взрьшоопасных (паровые Н.) жидкостей. [c.175]

Сложности с терминологией [58] возникли после того, как Кайзер [57] в 1978 г. назвал свой вариант метода, разработанного Ван Дайком для элюирования от периферической части окружности к центру (правильно названного Ван Дайком "центросремительной тонкослойной хроматографией"), "антикруговой" высокоэффективной тонкослойной хроматографией. Вряд ли можно считать удачным термин "антикруговая", буквальный смысл которого совпадает со смыслом слов "против окружности" или "противоположно окружности". Термин "круговая хроматография" подходит и для случая "центробежной хроматографии" (в направлении от центра), и для случая "центростремительной хроматографии" (в направлении к центру). Понятие "центробежная" не совсем удобно, поскольку может привести в заблуждение людей, лишь собирающихся заняться тонкослойной хроматографией (возникают ассоциации с вращением и вопрос "... но как же пластинка вращается "). В тексте данной книги не будет обсуждаться тот вариант центробежной тонкослойной хроматографии, при использовании которого пластинка действительно вращается (прибор типа "Хроматрон"). [c.163]

В центростремительном режиме круговой хроматографии (Ван Дайк [55.56], Де Дейн и Веттере [59], Кайзер [57]) направление потока противоположно характерному для более привычного центробежного метода. Образец наносят на внешнюю стартовую окружность, а элюирование производят с этой окружности по направлению к центру, откуда растворитель и растворенные вещества могут быгь отобраны (если потребуется). Для преобразования значений Кг, характерных для линейной хроматографии, можно воспользоваться следующими уравнениями [c.167]

Для исследования использован краситель с Rr=l. Подвижная фаза 0.006%-й раствор Судана красного в ацетоне. Центробежный режим реализован с использованием U-камеры (фирма amag), центростремительный режим - U-камеры для антикруговой хроматографии (та же фирма). На вставке показана получаемая "антикруговая хроматограмма с окрашенной точкой в центре (см. текст). Использованы НС опубликованные данные. Покупная пластинка с силикагелем 60 (с закрепителем слоя). См. также рис. 106. [c.171]

Три варианта камер с принудительным потоком растворителя, используемые в 1985 г., представляют собой ненасыщенные сэндвич-камеры, в которых неизбежно расслоение подвижной фазы в слое во время элюирования. Единственным способом устранения этого вредного эффекта является продувка слоя потоком газа, содержащего пары многокомпонентной подвижной фазы, непосредственно перед началом элюирования (когда пластинка уже установлена в камеру и подготовлена к работе). Кроме того, влияния разложения подвижной фазы можно избежать, если вводить образец уже после начала элюирования (когда все образующиеся фронты уже прошли ми.мо стартовой линии). Центробежный плоскостной хроматограф с вращающейся пластинкой (Rota hrom, фирма Petazon Ltd, Цюрих, Швейцария) начал выпускаться в 1987 г. Прибор пригоден для обеспечения аналитических и препаративных разделений обеспечивает постоянство скорости потока через разделяющий участок длиной 10 см может использоваться в круговом режиме и (за счет прорезания соответствующих борозд в слое) в "антикруговом" или линейном режимах [298]. Метод плоскостной жидкостной хроматографии с принудительным потоком растворителя еще является новшеством. Разрабатываются удобные детекторы, дающие возможность регистрации разделения в реальном масштабе времени. Однако даже на данно.м этапе развития этот метод дает возможность сочетать (при сопоставимой продолжительности анализа) высокую разрешающую способность, свойственную для колоночной [c.273]

По сравнению с вариантами линейного элюирования, центробежная ТСХ дает возможность (при той же длине разделяющего участка) добиться лучшей разрешающей способности (особенно при низких значениях Кг, если старт оказывается близким к точке подачи растворителя). Однако при переходе к более высоким значениям Кг разрешающая способность снижается. Это наглядно иллюстрируют рис. 56-58 (на которых значения Кг, получаемые при линейном проявлении и при работе в режиме круговой хроматографии, сравниваются схематически), рис. 110 (случаи 6 и 8) и рис. 113 (на этих двух последних рисунках приведены реальные хроматограммы). Такая зависимость объясняется просто после завершения элюирования в случае круговой тонкослойной хроматографии большее количество растворителя проходит через любую точку слоя (чем чфез пятна, удаленные на то же расстояние от старта в случае линейного элюирования), поскольку каждая точка хроматограммы вынуждена "питать" растворптеле.м гораздо большую плошадь. находяшуюся впереди (по сравнению с площадью, находящейся [c.286]

Доводы за и ПРОТИВ метода центробежной (круговой) хроматографии. Доводы за 1) значительное улучшение разрешаюшен способности в интервале низких значений Rr (менее 0.5) по сравнению с достигаемой при линейном элюировании при сопоставимых затратах времени 2) легкая в эксплуатации, универсальная конструкция U-камеры, дающая точные, воспроизводимые результаты и возможность легкой количественной их оценки. Метод может использоваться для выбора условий разделения, которые будут пригодными [c.288]

Особенности центробежного и центростремительного вариантов ТСХ иллюстрируют рис. 105-107. При реализации центростремительного варианта растворитель подается в слой из кольцевой канавки, имеющейся на периферии проходит через периферическую окружность, на которую наносятся образцы, после чего движется к центру пластинки почти с постоянной скоростью перемещения фронта (рис. 107). Взаимосвязь получаемых значений Кг с теми, которые характфны для линейного элюирования, описана уравнениями (43. 43а) и иллюстрируется рис. 56-58. В то время как в центробежном варианте тонкослойной хроматографии растворитель попадает на пластинку через малый канал и затем распределяется по большой секторной плошади (как в воронке, которая заполняется снизу), при центростремительном режиме растворитель поступает со всей окружности (с периметра), постепенно занимает центр поток при достижении центра прекращается (см. рис. 107). Емкость сектора, заполняемая объемом растворителя, составляет половину е.мкости, характерной для линейного элюирования (стартовая линия на периферической дуге). Следовательно, общая пропускная способность (для растворителя) на 50% [c.289]

Рис. 109 иллюстрирует историю совершенствования качества пластинок с силикагелем, выпускаемых основной фирмой-поставщиком. Прежде всего удивительно то, что значения Кг даже в наиболее чувствительной области (Кг=0,5 рис. 54) изменялись менее че.м на 0.1 ед. для материалов, изготавливавшихся на протящении 20 лет (в 1986 г. отмечались все те же самые уровни). При подобной оценке, конечно, активность поддерживалась постоянной благодаря сохранению относительной влажности на уровне 40%. Единственный выпадающий за эти границы результат, соответствующий материалам, изготовленным в 1958 г.. обусловлен (вероятно) иной структурой пор. Скорость потока постепенно приближалась к более оптимальной (увеличивалась) в случае пластинок, изготавливаемых без закрепителя (для пластинок с закрепителем такое изменение происходило медленнее и в меньшей степени). Первое улучшение распределения частиц по размерам было отмечено в 1971 г. При уменьшении размера частиц (в 1976-1978 гг.) выявилось значительное повышение эффективности пластинок. Именно тогда появился термин "высокоэффективная тонкослойная хроматография", первоначально применительно к слоям с размером частиц 5 мкм. используемым в центробежной тонкослойной хроматографии (при работе с и-камерами). [c.306]

Усовершенствование методов. Наиболее очевидным усовершенствованием было приспособление камер к уменьшенным габаритам пластинок (в настоящее время наиболее часто используются пластинки 10x10 см). Параллельно были улучшены условия центробежной (круговой) тонкослойной хроматографии за счет внедрения и-камеры. Однако эти достижения постепенно низводятся развитием метода ТСХ под давлением (этот метод высокоэффективной тонкослойной хроматографии несомненно превзойдет в конкурентной борьбе все остальные приемы, используемые в тонкослойной хроматографии). Достигаемая с его помощью эффективность оказывается между обеспечиваемой круговой тонкослойной хроматографией и колоночной жидкостной хроматографией (но лежит ближе к последней см. рнс. ИЗ). [c.309]

Представление о классификации методов планарной хроматографии дают данные, представленные на рис. IV. 1. Это не только методы, в которых движение элюента происходит под действием капиллярных сил [бумажная (БХ), тонкослойная (ТСХ) и ее разновидность высокоэффективная ТСХ (ВЭТСХ)], но и методы, при которых движение элюента происходит под действием различных приложенных внешних сил. Ко второй группе методов относят ТСХ под давлением (ТСХД) (ОРГС), разновидностью которой является круговая ТСХ под высоким давлением (КТСХВД), и ТСХ под действием центробежной силы (ротационная ТСХ — РТСХ). Наиболее широко на практике используют ТСХ и ВЭТСХ. [c.336]

При кажущейся простоте схемы противоточного способа осуществления хроматографического процесса его практическая реализация требует сложных технических решений для осуществления взаимного перемещения фаз во встречных направлениях и непрерывного выделения из их потоков целевых компонентов. Целый ряд попыток создания противоточных хроматографических устройств для газовой и ионообменной хроматографии закончился неудачей из-за технических трудностей. К тому же в подавляющем большинстве случаев их преодоление не оправдано достигаемым конечным эффектом разделения исходной смеси веществ только на две фракции. Неожиданным техническим решением проблемы осуществления противоточного хроматографического процесса яви.пась противоточная центрифужная хроматография ounter urrent entrifugal hromatography (ССС), которая по смыслу механизма разделения может называться в русскоязычной литературе ЖЖХ в поле центробежных сил. Этот вариант хроматографического процесса был впервые реализован в системе двух жидких фаз. И до сих пор ЖЖХ в поле центробежных сил остается основным направлением развития этого метода. В этом методе, в отличие от традиционных направлений ЖЖХ, не требуется носитель стационарной фазы. Диспергирование стационарной фазы и ее удержи- [c.189]

Во многих случаях разделение может быть осуществлено за счет различия в скорости движения различных компонентов смеси. Разделить смесь, компоненты которой различаются по физическим свойствам, можно путем приложения соответствующих сил, таких, как давление, электрический потенциал, магнитное поле, гравитационное поле, центробежная сила, или сил, вызванных градиентом температуры. Эффективность разделения физическими методами часто зависит от степени различий в физических свойствах разделяемых веществ (растворимости — при разделении смеси песка и хлорида натрия, летучести, размера молекул, способности диффундировать, полярности молекул, ионной подвижности и т. д.). На этом принципе основано большое число инструментальных методов анализа, таких, как газовая хроматография, диализ (как, например, в химическом анализаторе Te hni on SMA , о котором упоминалось в гл. 1), электрофорез, ультрацентрифугирование и др. [c.58]

Противоточная хроматография ускоряется центробежной силой. Stinson S. С., 62, [c.247]

Для эффективного отделения аэрозольных веществ были разработаны специальные ловушки, в которых аэрозоль осаждался либо с помощью электрического поля [18], либо под действием центробежных сил [19, 20]. Выход в этих ловущках достигает 95%, однако ввиду некоторой громоздкости системы охлаждения они находят применение преимущественно в препаративной хроматографии. [c.254]

На тех же принципах основано действие систем растворителей (табл. 3.1). Когда с этими системами используют полизональную технику проявления хроматограмм, движение разделяемых красителей практически идеально, почти с линейным увеличением Яр относительно длины пути. При центробежной хроматографии с теми же системами растворителей результаты разделения эквивалентны полученным при восходящей и нисходящей технике сохраняется та же последовательность пятен и они так же четко различимы. Кроме того, время проявления уменьшается от 12— [c.72]

В системах с изоамиловым спиртом можно хроматографировать водорастворимые красители всех химических классов. Процесс в этой системе сходен с распределительной хроматографией и выявляет различия коэффициентов распределения и растворимости красителей. Однако скорость движения растворителя по бумаге, которая обычно в случае распределительной хроматографии влияет на воспроизводимость результатов, в данном случае не оказывает какого-либо действия. Это было показано, когда данный растворитель применяли для хроматографии в центробежном поле, где скорость движения системы растворителей по бумаге возрастает во много раз. В табл. 3.2 для отдельных групп водорастворимых красителей показаны интервалы изменений значений Rf, определенные по данным для нескольких сотен красителей с известным химическим строением. Значения Rf относятся к системе с изоамиловым спиртом на бумаге ватмап № 1. [c.75]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология