Элюирование нисходящее

В колоночной хроматографии проводят разделение макроколичеств веществ, при этом пробу в виде раствора отмеряют обычной мерной посудой. Подвижную фазу вводят в верхний конец колонки из резервуара, используя способ нисходящей хроматографии, при которой подвижная фаза движется под действием поля земного притяжения. При небольшой скорости передвижения жидкости в колонке продолжительность анализа сокращают, повышая давление. Обычно непродолжительным считают разделение со скоростью 1—20 мм мин- или 1—10 мл-мин . При проведении градиентного элюирования или при проявлении хроматограммы (см. стр. 344) применяют простую установку, приведенную на рис. 7.9. Она состоит из двух склянок с тубусами. В сосуд А вводят чистый растворитель Ьд, в сосуд Б — растворитель Ьб- При переходе растворителя Ьд в сосуд Б с одновременным переходом подвижной фазы из сосуда Б в разделительную колонку концентрация вещества А в подвижной фазе постоянно возрастает. [c.352]

Для элюирования можно воспользоваться любой из хорошо известных методик, а именно восходящей, нисходящей или радиальной хроматографией. Чаще всего, однако, применяется техника восходящей хроматографии. [c.463]

Элюирование проводят восходящими, нисходящими и горизонтальными методами. Методики нанесения пятен и детектирования элементов аналогичны уже описанным для хроматографии на бумаге. Здесь также справедливы замечания об окрашенных реагентах для детектирования элементов. Тонкослойные хроматограммы следует сушить в сушильном шкафу, а не в струе воздуха, что достаточно при работе с бумагой. [c.464]

Элюирование в нисходящем линейном градиенте концентрации (0,56—0,38 М) хлорида натрия в 0,02 М трис—буферном растворе с pH 8 в сочетании с нисходящим градиентом температуры от 80 до 36 °С (2°С/ч). Объем элюента 750 мл. Скорость подачи 36 мл/ч. [c.92]

В ионообменной хроматографии важно, чтобы растворы проходили через колонку равномерно по всему поперечному сечению каких бы то ни было нарушений равномерности потока необходимо тщательно избегать. До сих пор почти все исследователи применяли нисходящие потоки однако успешные результаты были получены также и при элюировании восходящим потоком элюента [64]. Процессы с нисходящими потоками проще в осуществлении, но в некоторых случаях, когда элюент имеет высокую плотность, следует предпочесть проведение процесса в восходящем потоке. При всех сложных разделениях рекомендуется применять плоское днище (например, в виде стеклянного пористого диска), но пе пробку из стеклянной ваты. В настоящее время имеются хроматографические колонки с взаимозаменяемыми частями. В таких колонках можно производить замену стеклянных фильтров, а также другие необходимые изменения. В случае ионитов, которые могут забивать поры стеклянного фильтра, на его поверхность наносят ровный слой волокон стеклянной ваты или кварцевого песка. Оба способа с успехом применяются в лаборатории автора. Предлагалось также покрывать стеклянный фильтр волокнами синтетических материалов (например, полиэфира) или слоем фильтровальной бумаги. Некоторые исследовате.ли рекомендуют помещать пробку из стеклянной ваты в верхнюю часть колонки, чтобы предотвратить образование каналов в слое ионита. [c.189]

При элюировании в нисходящем направлении образец вносят путем наслаивания на слой геля при этом плотность образца должна превышать плотность буферного раствора. Если плотность образца недостаточна, в раствор добавляют сахарозу, хлористый натрий или другие водорастворимые вещества. Во избежание взмучивания верхнего слоя геля кончик шприца (пипетки или полиэтиленовой трубки) должен быть слегка изогнут. Если элюирование ведут снизу вверх, то образец вносят аналогичным образом, предварительно перевернув колонку. [c.252]

Выше описано разделение путем восходящего элюирования. Возможны иные варианты элюирования [244] нисходящее элюирование горизонтальное элюирование (круговая хроматография [250]) — пробу наносят по кругу на квадратную пластинку с тонким слоем сорбента (на пересечение диагоналей), в центр подают растворитель, вещества разделяются с образованием концентрических зон многократное элюирование одним и тем же растворителем (после элюирования пластинку высушивают и операцию повторяют со свежей порцией элюента) ступенчатое элюирование — многократное элюирование разными растворителями центрифужное элюирование — под действием центробежной силы движение потока растворителей ускоряется в 2—3 раза градиентное элюирование — состав элюента непрерывно изменяется. [c.103]

Ступенчатое элюирование — последовательное элюирование смесями, элюирующая способность которых постепенно возрастает (рис. 1.9). При таком методе элюирования иногда два следующих один за другим растворителя элюируют один и тот же компонент в виде двух пиков, в результате может показаться, что в смеси содержатся два компонента, а не один. Кроме того, пики могут быть асимметричными с вытянутой нисходящей ветвью кривой, т. е. образуются .хвосты- . В этих и подобных им ситуациях целесообразнее пользоваться следующим методом разделения. [c.32]

При градиентном элюировании осуществляется постепенное, а не дискретное изменение состава элюирующих растворителей. Два (рис. 1.10) или большее число растворителей постепенно смешиваются, и состав элюента, вводимого в колонку, постепенно изменяется в соответствии с количеством выходящей из колонки смеси. При этом нисходящая ветвь пика (к) всегда элюируется растворителем с несколько более высокой элюирующей способностью, чем растворитель, использованный для элюирования восходящей ветви пика (в). Таким образом достигается сужение зон и уменьшается возможность образования хвостов . Применение градиентного элюирования обычно спо- [c.32]

На практике применяют различные виды элюирования восходящее, нисходящее, горизонтальное, круговое (центрифужное). При нисходящем хроматографировании следует тщательно уложить край бумаги в лоток и прижать ее тяжелой стеклянной палочкой или узкой пластинкой, чтобы бумага не могла соскользнуть в процессе элюирования. Во время работы не следует касаться бумаги пальцами, особенно если хроматографируются аминокислоты. Закрепленную в лотке полоску или лист бумаги помещают на подставку внутри камеры, закрывают камеру крышкой и выдерживают в атмосфере паров неподвижной фазы в течение определенного времени — от 5 мин до 16 ч, т. е. до следующего дня. При работе с сильно летучими растворителями типа растворителей Буша (см. разд. 3.5.6 Стероиды и терпеноиды ) бумагу следует выдерживать над неподвижной фазой не менее 3 ч, а лучше до следующего дня, если неподвижная фаза не наносилась на бумагу посредством одного из указанных выше методов. По окончании выдержки наливают в лоток подвижную фазу и дают ей передвигаться в бумаге под действием капиллярных сил почти до самого края. После этого осторожно вынимают хроматограмму из камеры, сразу же отмечают положение фронта растворителя и дают листку высохнуть. При работе с большими листами удобно пользоваться специальными широкими щипцами. [c.92]

Фиг. 28. Формирование зон элюирования (А—Г) при нисходящем прохождении двух катионов по колонке, наполненной смолой в натриевой форме.

Нисходящее элюирование обычно используют для непрерывного элюирования при работе с медленно движущимися по слою соединениями. Во многих случаях этим методом можно достичь [c.134]

Методы элюирования, например нисходящий или восходящий. [c.311]

ТСХ с нисходящим элюированием применяют для анализа проб, компоненты которых очень медленно движутся по слою. Элюент в. этом случае подают иа пластину из специального устройства сверху. К, капиллярным силам добавляется сила гравитации. Таким образом в некоторых случаях удается дост (чь лучшего разделения по сравнению с первым вариантом. Для горизонтального элюирования используют пластины с незакрепленным слоем сорбента. Г1.яа-стину при этом закрепляют горизонтально, а растворитель подают с помощью фитиля из мягкой ткакк. Во всех случаях хроматограмма имеет нпд окрашенных пятен (рис. 28.10). [c.611]

В зависимости от положения пластинки и направления потока элюента различают восходящую, нисходящую и горизонтальную ТСХ. По технике работы выделяют фронтальный анализ (когда подвижной фазой служит анализируемая смесь) и обычно используемый элюционный вариант. Применяют также круговую (когда анализируемый р-р и р-ритель последовательно подаются в центр пластинки) и антикруговую ТСХ (когда анализируемый р-р наносится по окружности и элюент перемещается от периферии к центру пластинки), ТСХ под давлением (когда р-ритель под давлением пропускают через слой сорбента, покрытый плотно прижатой полиэтиленовой пленкой), а также ТСХ в условиях градиента т-ры, состава сорбента н т. п, В т. наз. двухмерной ТСХ хроматографич. процесс осуществляют последовате.чьно в двух взаимно перпендикулярных направлениях с разл. элюентами, что увеличивает эффективность разделения, С этой же целью применяют многократное элюирование в. одном направлении. [c.608]

Хотя преимущественным методом проявления в ПТСХ служит восходящее элюирование, Хоробин [25] использовал непрерывное нисходящее элюирование в бак с верхним расположением резервуара. [c.139]

Непрерывное разделение нисходящим способом можно реализовать по методу, предложенному Райзертом и Шумахером [157] (рис. 25). Аналогичное устройство было использовано ранее Ми-стрюковым [133] при непрерывном элюировании хроматограмм с незакрепленным слоем. Для подачи растворителя служит полоска [c.94]

Колонка 1,9X42 см. Сорбент 50 г смеси Се1Н 545+М1сгосе1 Е (9 1) в нижнем сдое системы этилацетат—этоксиэтанол-2—10%-ная муравьиная кислота (4 1 2). Элюирование (со скоростью подачи 60 мл/ч) в нисходящем градиенте концентрации муравьиной кислоты в верхнем слое указанной системы растворителей (400 мл) затем элюирование верхней фазой системы этилацетат—бутанол-1—вода (1 1 1). На колонку нанесена суспензия 4 г сорбента в 2 мл нижней фазы исходной системы растворителей, содержащая по 5 мг / —тимина 2 — урацила 3—аденина 4 —гуанина 5 — цитозина. [c.45]

Используя сочетание методов селективного поглощения и селективного элюирования, можно, конечно, разделить анилизируемую смесь более чем на две группы. Иногда достаточно на всем протяжении процесса разделения применять один и тот же комплексообразователь, а при элюировании изменять концентрацию элюента или pH. Для других разделений при поглощении применяют один комплексообразователь, а при элюировании — другой. Если элюирующая способность элюента возрастает с увеличением его концентрации, то процесс, как правило, можно проводить в нисходящем потоке в колонке обычного типа. Этот простой метод не может применяться в тех случаях, когда при поглощении используется хелатообразователь и когда элюирующая способность элюента уменьшается с ростом концентрации. При таких разделениях элюент (например, соляную кислоту) вводят в колонку снизу. [c.213]

В свете сказанного выше рассмотрим процесс разделения мальтенов гудрона котуртепинской нефти на группы с использованием одной из модификаций широко распространенной методики определения группового состава [22]. Разделение проводили на активном силикагеле при соотношении адсорбент проба 200 1. В качестве растворителей последовательно использовали чистый изооктан дпя элюирования насыщенных углеводородов и смеси изооктана с бензолом, содержащие 5, 10, 15, 20, 25 и 30% (объемн.) бензола, для элюирования трех групп ароматических углеводородов. Первую группу смол элюировали бензолом, вторую - спиртобензольной смесью. В процессе разделения отбирали фржции элюата равного объема, масса которых после анализа состава растворителя и его последующего отгона служила основой для построения элюционной кривой выхода разделенного нефтепродукта из колонки, а показатели преломления этих фракций использовали для определения границ хроматографических групп. Кривые состава подвижной фазы по каждой фракции элюата получены на основе газохроматографического анализа. Полученнь1е результаты представлены на рис. [13]. Как и следовало ожидать, концентрационные кривые растворителей, входящих в состав подвижной фазы, показьшают, что в слое адсорбента произошло расслоение подвижной фазы, которое привело к образованию ряда фронтальных зон бензола и этанола. Предполагалось, что число фронтальных зон бензола будет соответствовать числу изменений его концентраций от 5 до 100%, т. е. будет образовано 7 таких зон. Однако достаточно четко прослеживается наличие только четырех зон. Вероятно, это связано с низкой эффективностью колонки вследствие того, что колонка была заполнена крупными частицами силикагеля (0,25—0,5 мм) и элюирование проводили в нисходящем потоке подвижной фазы. Несмотря на это, можно видеть, что движение фронтальных зон подвижной фазы по слою адсорбента вызывает вытеснение, выталкивание этим фронтом гех адсорбированных соединений нефтепродукта, адсорбционная способность которых ниже адсорбционной способности этого растворителя. [c.41]

Проявление тонкослойных или бумажных хроматограмм может осуществляться путем восходящего, нисходящего, горизонтального или радиального движения растворителя. При восходящей хроматографии ослол непия, связанные с образованием каналов при движении растворителя, сводятся к минимуму. При непрерывном проявлении растворитель продвигается до конца бумаги или тонкого слоя в одном опыте. При многократном проявлении после того, как фронт растворителя достигает края листа, растворителю дают испариться и повторяют проявление при том же направлении движения растворителя. Ступенчатое проявление включает проявление на пластинке в неполярном растворителе, испарение растворителя и второе проявление в более полярном растворителе. При двухмерном проявлении также последовательно применяют два растворителя сначала проводят хроматографирование в одном направлении, затем высушивают пластинку для испарения первого растворителя, поворачивают пластинку на 90° и проводят проявление вторым растворителем. При градиентном элюировании состав растворителя меняется в ходе проявления [94]. Эта методика, однако, сложна, в ней теряется простота тонкослойной или бумажной хроматографии. [c.553]

Рис. 9.6. Камера для нисходящего элюирования методом тонкослойной гель-хроматографии (с разрешения фирмы РЬагтас1а).

На рис. 9.6 доказана выпускаемая фирмой Phaгma ia камера для нисходящего хроматографирования [2], предназначенная для тонкослойной гель-хроматографии. Для горизонтального элюирования ири различных, но точно устанавливаемых условиях предварительного насыщения слоя сорбента можно использовать К5-жамеры (рис. 9.7). Оптимальные условия разделения в этих камерах можно быстро установить. Другие типы камер, используемые для специальных методов, например проточного (непрерывного) элюирования, градиентного элюирования или круговой хроматографии, описаны в монографиях по ТСХ ([2Э, [c.95]

Найдены условия разделения и, ТЬ и РЗЭ с помощью бумаги, обработанной жидким анионитом [2741. Жидкий анионит готовят встряхиванием бензольного раствора три-н.октиламина с трехкратным объемом раствора НЫОз или ее соли и последующим отделением органической фазы фильтрованием через хлопковое полотно. Полученной жидкостью пропитывают бумагу ватман № 1. Эффективное разделение получено при элюировании растворами НЫОз различной концентрации, а также растворами Ь1Ы0з, ЫаЫОз, ЫН4ЫО3, Са(ЫОз)2 и А1(ЫОз)з методами радиальной и нисходящей хроматографии. [c.186]

В препаративной БХ от хроматограммы отрезают узкую полоску для определения положения радиоактивных зон, которые затем элюируют с остальной части хроматограммы. При этом зоны, подлежащие элюированию, вырезают и помещают в подходящий растворитель, который затем отфильтровывают. Кроме того, вещества можно смыть с хроматограммы с помощью нисходящей хроматографии. [c.64]

ДНБ 3,5-динитробензоаты бумага 5 5 2043Ь, пропитанная 50%-ным раствором диметилформамида в ацетоне подвижная фаза — насыщенный диметилформамидом декалин нисходящее элюирование. [c.102]

Подобный прием элюирования был рассмотрен Маттиненом и др. [3] для случая нисходящей хроматографии. Другие авторы описывали методы многократного элюирования хроматограммы одним и тем же [4] или различными [5] растворителями для случая восходящей хроматографии. При этом каждый раз элюирование заканчивали по достижении фронтом растворителя верхнего края, и перед следующим элюированием хроматограмма высушивалась. Разработка этих методов была связана с необходимостью разделить вещества, имеющие близкие и низкие значения R/. [c.27]

Рис. 5.7. Схема устройства для непрерывного нисходящего элюирования тонкослойных пластинок [59] (с разрешения авторов и Elseveir Publishing o.).

Луццато и Окое [172] и Стрикленд [173] использовали фитиль для подачи растворителя меняющегося состава на тонкослойную пластинку при нисходящем или горизонтальном элюировании. Растворители смешивали в специальном сосуде, снабженном магнитной мешалкой. Для получения смеси растворителей переменного состава предложено много различных [c.159]

Пробу наносят на пластинку, установленную горизонтально, после чего устанавливают пластинку под углом 10—20° к горизонтали и элюируют нисходящим потоком растворителя, регулируя его скорость углом наклона. Можно также использовать сэндвичевые пластинки или специальные держатели для пластинок фирмы Rharma ia. Яворек [226] и Джеймс и сотр. [227] приводят подробные схемы установок для гель-фильтрации, а также устройства для измерения оптической плотности разделенных фракций. При количественных исследованиях принимают специальные меры для получения однородных слоев адсорбента. Возможно и горизонтальное элюирование в этом случае скорость движения растворителя регулируют, поднимая или опуская сосуд, из которого он подается. Согласно данным работы [c.162]

Приводя данные о полученных значениях Rf, следует указать метод элюирования так, метод восходящего элюирования дает значения Rf, отличающиеся от значений, полученных мето-дохМ нисходящего или горизонтального элюирования. [c.310]

Впервые ТСХ была применена для анализа соединений этого типа в 1957 г. Стэнли и Ваннье [80, 81], которые таким методом разделили несколько кумаринов и фурокумаринов, содержащихся в лимонном масле (табл. 28.3). Эти соединения выделяли хроматографированием на колонке с кремневой кислотой, проверяя разделение по методу Миллера и Кирхнера [82]. При использовании флуоресцентных хроматографических полосок пятна указанных соединений обнаруживали облучением УФ-светом [83]. Стэнли и Ваннье [84, 85] разработали методику количественного определения содержания кумаринов в цитрусовых маслах с помощью непрерывной нисходящей хроматографии (см. т. 1, гл. V, разд. 3). После разделения этих соединений пятна элюировали этанолом и измеряли оптическое поглощение элюата на спектрофотометре. Свифт [86] разработал метод спектрофотометрического определения флавонов в нейтральной фракции сока из апельсиновой кожуры. Для получения достаточного разделения, которое можно было контролировать по поглощению в УФ-области, применяли многократное элюирование на слоях силикагеля с 15 %-ным раствором н-бутанола в гексане. [c.271]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология