Хроматография центрифужная

Если вращающуюся спиральную колонку заполнить с одного конца стационарной фазой, а через другой конец спирали ввести подвижную фазу, в объеме колонки произойдет их взаимное диспергирование. При этом вытеснению стационарной фазы будет препятствовать действующая в противоположном направлении сила архимедова винта, возникающая вследствие вращения колонки относительно оси центрифуги. Если эта сила, зависящая от скорости вращения центрифуги, будет перемещать частицы стационарной фазы со скоростью, превышающей скорость движения подвижной фазы, реализуются условия для осуществления противоточного хроматографического разделения. Если скорости движения фаз сбалансированы, отпадает необходимость в постоянной подпитке колонки стационарной фазой и появляется возможность хроматографического разделения в обычном режиме пропускания через колонку подвижной фазы. Случай строго сбалансированного по скорости противоположно направленного движения обеих фаз, при котором стационарная фаза оказывается неподвижной относительно стенок колонки, практически трудно реализуем и не является оптимальным для данного процесса. Поэтому метод вошел в литературу как противоточная центрифужная хроматография. В то же время, несмотря на наличие встречного движения фаз, соответствующего формальным признакам противоточного хроматографического процесса, ЖЖХ в поле центробежных сил по конечному эффекту разделения ближе к обычной колоночной хроматографии. [c.190]

Качественное открытие можно проводить очень простыми известными способами в ямке фарфоровой пластинки, в центрифужной микропробирке или в макроколичествах. Многообещающими являются методы экстракции. Менее пригодны капельные реакции, проводимые на фильтровальной бумаге, хотя и здесь имеются известные возможности для открытия катионов бумажной хроматографией. [c.164]

Центрифужная хроматография — ускорение продвижения подвижной фазы вращением в центрифуге [234]. [c.95]

Выше описано разделение путем восходящего элюирования. Возможны иные варианты элюирования [244] нисходящее элюирование горизонтальное элюирование (круговая хроматография [250]) — пробу наносят по кругу на квадратную пластинку с тонким слоем сорбента (на пересечение диагоналей), в центр подают растворитель, вещества разделяются с образованием концентрических зон многократное элюирование одним и тем же растворителем (после элюирования пластинку высушивают и операцию повторяют со свежей порцией элюента) ступенчатое элюирование — многократное элюирование разными растворителями центрифужное элюирование — под действием центробежной силы движение потока растворителей ускоряется в 2—3 раза градиентное элюирование — состав элюента непрерывно изменяется. [c.103]

Ход анализа. Отобранную пробу допустимо хранить до 2 суток при температуре не выше 3°С в стеклянной или пластмассовой емкости, герметично закрытой. 50 г почвы трижды обрабатывают петролейным эфиром порциями по 50 мл для экстракции а-метилстирола и изопропилбензола (10, 5 и 5 мин соответственно). Экстракты объединяют, фильтруют через бумажный фильтр с безводным сульфатом натрия. Концентрируют экстракт в приборе для перегонки жидкостей при 50 °С под вакуумом. Растворитель отгоняют до объема 6—8 мл. Затем переносят в центрифужную пробирку и упаривают под тягой при комнатной температуре до 1 мл. Хроматограф включают и выводят на рабочий режим температура термостата колонок 120 °С, испарителя —175 °С расход газа-иосителя (азота) 20 мл/мин, водорода—25 мл/мин, воздуха —200 мл/мин скорость диаграммной ленты 240 мм/ч время удерживания изопропилбензола 4 мин 40 с, а-метилстирола — 7 мин 20 с. [c.341]

Для исследования спектра поглощения олигонуклеотидов пятна выявляют в ультрафиолете, соскребают с пластинки и элюируют 1,2 мл 0,01 н. НС1 в центрифужных пробирках [35] в течение 1—2 час (суспензию при этом время от времени встряхивают). Целлюлозу удаляют центрифугированием и измеряют поглощение раствора против элюатов из целлюлозы последнюю соскребают из контрольных пятен с другой пластинки, на которую не наносили гидролизат РНК, но которую подвергали электрофорезу и хроматографии в тех же условиях. [c.48]

В круговой хроматографии элюирование осуществляется в направлении от центра к периферии слоя сорбента. Образец наносят в виде дуги или кольца вокруг центра хроматограммы, куда затем подают растворитель. Полученные с помощью этого метода хроматографические зоны представляют собой концентрические дуги или окружности, расположенные на различном удалении от центрального пятна. Если хроматографирование в плоском слое сорбента осуществляется таким же образом, как в классической колоночной хроматографии, метод непрерывного элюирования соответствует простому элюированию с колонки, многократное элюирование — хроматографии с повторяющимся циклом, а радиальное элюирование — центрифужной колоночной хроматографии. Следует отметить, что под действием центробежной силы скорость радиального элюирования плоских хроматограмм увеличивается . для создания такой силы используют приспособление типа фонографа. [c.23]

Редкоземельные металлы разделяют на бумаге, пропитанной нонообменни-ками или нитратом аммония. На сильнокислой катнонообменной бумаге 8а-2 можно разделить лантан, церий и неодим методом центрифужной круговой хроматографии, используя для элюирования 0,4 М раствор гликолята (pH 3,76). Смесь Се, Рг, N(1, 8т, и 0(1 разделяют на анионообменной бумаге Ватман ОЕ-20 в растворе 0,15 М азотной кислоты в 99%-ном метаноле (Л/ Се — 0,06 Рг — 0,12 N(1 — 0,21 51т — 0,40 0(1 — 0,60). Для разделения 10 редкоземельных элементов и иттрия использую бумагу, пропитанную 10%-ным раствором нитрата аммония. Эллюируют пробу смесью ацетона и эфира (1 1) с добавками роданида аммония и соляной кислоты, а обнаруживают опрыскиванием насыщенным раствором ализарина в 90%-ном спирте. Порядок расположения пятен элементов соответствует порядку возрастания их атомных масс. Значения / , увеличиваются в ряду Ьа (0,08) Се (0,11) Рг(0,16) N(1 (0,20) 5т (0,31) 0(1 (0,44) V (0,49) Оу (0,50) Ег (0,56) Ь (0,59) Тт (0,90). [c.242]

Раствор хлорангидрида кислоты в 0,5 мл сухого бензола обрабатывают 0,100 а (0,72 Л1М0ЛЯ) 2-аллил-4-окси-3-метилцикло-пентен-2-она-1 (примечание 11) и 0,075 г (0,95 жмоля) сухого пиридина в 1 мл бензола. Смесь выдерживают в течение ночи, переносят в центрифужную пробирку с небольшими порциями соляной кислоты (всего 1 мл) и растворителя (Skellysolve В) (всего 1,5 мл) и промывают водой при центрифугировании, причем для отделения растворителя используют пипетку. Неочищенный продукт реакции испаряют при температуре 35—40° (1 мм рт. ст.) выход 0,1674 г (93%) (примечание 12). Вещество очищают методом распределительной хроматографии между гексаном и нитрометаном на колонке с кремневой кислотой при давлении воздуха 0,2—0,25 ат. Элюат отбирают порциями по 5 мл вблизи ожидаемого раздела фракций (примечание 13) и испаряют продукт реакции содержится в 131—250 мл элюата. Выход 0,1329 г (74,5% в расчете на кислоту). [c.532]

При кажущейся простоте схемы противоточного способа осуществления хроматографического процесса его практическая реализация требует сложных технических решений для осуществления взаимного перемещения фаз во встречных направлениях и непрерывного выделения из их потоков целевых компонентов. Целый ряд попыток создания противоточных хроматографических устройств для газовой и ионообменной хроматографии закончился неудачей из-за технических трудностей. К тому же в подавляющем большинстве случаев их преодоление не оправдано достигаемым конечным эффектом разделения исходной смеси веществ только на две фракции. Неожиданным техническим решением проблемы осуществления противоточного хроматографического процесса яви.пась противоточная центрифужная хроматография ounter urrent entrifugal hromatography (ССС), которая по смыслу механизма разделения может называться в русскоязычной литературе ЖЖХ в поле центробежных сил. Этот вариант хроматографического процесса был впервые реализован в системе двух жидких фаз. И до сих пор ЖЖХ в поле центробежных сил остается основным направлением развития этого метода. В этом методе, в отличие от традиционных направлений ЖЖХ, не требуется носитель стационарной фазы. Диспергирование стационарной фазы и ее удержи- [c.189]

Носителями стационарных фаз в этом варианте хроматографии служат неполярные химически инертные полимерные материалы, чаще всего фторсодержащие. Кроме того, носители фаз получают путем модифицирования поверхности силикагеля, заключающемся в замещении силано. п.ных групп Si-OH органофильными группами при обработке moho-, ди- и трихлорсилапами. С появлением обращенно-фазовой ЖАХ интерес к ЖЖХ с обращенными фазами снизился. Интенсивно развивающимся направлением в ЖЖХ становится ее противоточный центрифужный вариант. [c.214]

В работе Берозы и Боумана [1], выполненной с целью проведения качественного анализа пестицидов, эксперимент проводили следующим образом. Из 5 мл аликвотной части раствора анализируемой смеси в неполярном растворителе отбирали пробу (5 мш) для проведения анализа методом газовой хроматографии. Оставшуюся часть раствора (5 мл) волюметрической пипеткой помещали в градуированную центрифужную пробирку, снабженную притертой стеклянной пробкой. Затем в эту же пробирку добавляли равный объем полярного растворителя. Пробирку встряхивали в течение 1 мин. (температура опыта, при которой устанавливалось межфазное равновесие, 25,5° С). Объемы используемых жидких фаз перед смешением и после установления равновесия измеряли с целью контроля изменения объемов фаз. Как правило, изменения объемов фаз не наблюдалось. В случае образования эмульсии при смешении двух жидких фаз смесь подвергали центрифугированию с целью разделения слоев. Затем верхний (обычно неполярный) слой анализировали в тех же условиях, что и исходный раствор до экстракции. Принятая и используемая Берозой и Боулганом характеристика распределения, так называемая р-величина, определялась как отношение количеств анализируемого компонента в верхнем слое до и после экстракции. Используемые в качестве жидких фаз растворители были первоначально взаимно насыщены друг другом при температуре эксперимента. Чтобы избежать операции взаимного насыщения и иметь возможность проводить работу с неравными объемами растворителей, Боуман и Бероза предложили проводить распределение в аппарате, показанном на рис. 4. [c.39]

Приборы и посуда. Газовый хроматограф с детектором по захвату электронов ( Цвет-5 , Цвет-106 и т. п.). Гомогенизатор (измельчитель тканей), Колбы двугорлые, круглодонные на 500 и 250 мл. Делительная воронка на 500 мл. Колба Бунзена на 500 мл. Воронка Бюхнера диаметром 15 см. Грушевидные колбы на 100 мл. Ротационный испаритель ИР-1. Источник ультрафиолетового света. Водяная баня. Центрифужные пробирки. Контактный термометр на ШО°С. Мерные колбы на 5, 10 и 100 мл. Вакуумный водоструйный насос. Холодильник Либиха. Камера хроматографическая. Микропипетки. Медицинский шприц на 1 мл. Стеклянные пластинки размером 9X12 см. Сито капроновое 100 меш. Пульверизатор стеклянный. [c.177]

В других случаях желательно подчеркнуть особый характер течения фаз. В сухой колоночной хроматографии элюент вводят в колонку, заполненную сухим адсорбентом. В круговой хроматографии стартовая линия пробы имеет форму окружности элюент вводится в центр, и фронт растворителя движется радиально, образуя расширяющуюся окружность. Продвижение подвижной фазы можно ускорить, вращая хроматограмму в центрифуге центрифужная хроматография). Препаративный вариант этого процесса проводится в цилиндрическом сегменте и носит название радиальной хроматографии. Аппарат для препаративной центрифужной радиальной хроматографии называется хроматоцентрифугой. Хроматография на клиновидных полосках представляет собой комбинацию круговой и линейной хроматографии сначала используется принцип круговой хроматографии на круговом сегменте, чтобы расширить зоны в поперечном направлении и сузить в продольном, а дальнейшее разделение проводится при обычном линейном и параллельном перемещении растворителя. [c.34]

Как и хроматографию вообще, БХ можно разделить на распределительную, адсорбционную и ионообменную, а также на аналитическую и препаративную. По характеру методики мы различаем также проточную (непрерывную) хроматографию, соответствующую проявительной хроматографии в колонках (с тем различием, что не всегда элюируются все зоны), повторное хроматографирование, когда хроматографический процесс прерывают по достижении определенного положения фронта растворителя, хроматограмму сушат, после чего вновь проводят хроматографирование (иногда по нескольку раз) с той же или другой системой растворителей, и, наконец, одно- и двумерную, круговую и центрифужную хроматографию, а также хроматографию на хроматограммах клиновидной формы. В распределительной хроматографии можно выделить нормальную и обращенно-фазную хроматографию. В последнем случае (в отличие от нормального метода) неподвижная фаза более ли-пофильна, чем подвижная фаза. Отдельные типы БХ подробно рассматриваются ниже. [c.59]

Чтобы избежать превращения рифамицина В в рифамицин 51/, использовали также центрифужную хроматографию на бумаге. Время проявления в системе н-амиловый спирт — н-бутиловый спирт (9 1 смесь насыщена фосфатным буфером pH 8,6) составляет около 4 мин. за это время не наблюдалось такого превращения, хотя система не содержала аскорбиновой кислоты. При помощи хроматографии на бумаге и других методов было установлено, что нансимицин идентичен рифамицину В [1019]. Было установлено также, что некоторые препараты нан-симицина являются неоднородными [1020]. [c.165]

Брюинвельс [155] провел указанным методом определение альдостерона, гидрокортизона и кортикостерона на силикагеле, содержащем 3 % флуоресцентного лекарственного вещества (S. 5. Gruent/1 5319157, Leu htstoffwerk). Нанесенную на пластинку пробу разделяли в течение 1 ч методом восходящей хроматографии 8 %-ным раствором (96%) этанола в хлороформе в закрытой камере при 38,5°С. Пятна, видимые в УФ-свете, переносили в центрифужные пробирки. Пятно альдостерона смешивали с 1 мл концентрированной серной кислоты и выдерживали 1 ч. После отделения силикагеля путем центрифугирования раствор нагревали 1 ч при 100°С, охлаждали и из.меряли флуоресценцию. Гидрокортизон и кортикостерон элюировали смесью этанола с серной кислотой. Степень извлечения составляла 95 3,4%. Этим методом можно определять от 0,5 до 4 мкг вещества. [c.336]

Для приготовления колонок берут 5 г трисиликата магния, размешивают в 10 мл петролейного эфира и вносят в колонку. После оседания трисиликата в колонку осторожно прибавляют 1 г безводного сернокислого натрия. Затем вносят анализируемый экстракт и хроматографируют. Колонку промывают 100 мл петролейного эфира, что позволяет удалить значительную часть примесей. Цидиал из колонки элюируют 100 мл бензола. Полученный элюат упаривают в круглодонной колбе до 5—7 мл. Остаток переносят в центрифужную пробирку, упаривают в токе азота до нескольких капель и идентифицируют цидиал методом тонкослойной хроматографии. [c.67]

Выделение перегонкой с паром [53]. Ткань (30—40 г) измельчают в порошок и тщательно экстрагируют 6 порциями 10-процентной трихлор-уксусной кислоты по 60- мл. Объединенный экстракт доводят до 500 мл и фильтруют. Часть экстракта (50 мл) доводят раствором едкого натра с ти-молфталеином в качестве индикатора до pH 11—12. Амины подвергают перегонке с паром, улавливая их О, I н. соляной кислотой (10 мл). Объем дистиллята уменьшают примерно до 5 лл и оставшуюся воду удаляют в центрифужном осушителе при низкой температуре. Остаток растворяют в воде (0,3 мл) и соответствующее известное количество с помощью шприца вводят в хроматограф. [c.257]

Перспективы развития различных типов хроматографии. Несмотря на то что в создании более специфичных сорбентов (по сравнению с предложенными в свое время Полингом [70]) достигнуты значительные успехи, по-видимому, аффинная хроматография будет продолжать развиваться. Быстрыми темпами будет, по-видимому, совершенствоваться и препаративная хроматография (например, центрифужная [18], противоточная 19, 20] и так называемая флип-флопная хроматография 71]). Широкомасштабное использование хроматографии (например, для утилизации следовых количеств примесей или очистки лекарственных препаратов) потребует разработки новых, более рациональных процессов непрерывного разделения. Отчетливо наблюдается тенденция к полной автоматизации качественного и количественного анализа элюатов (использование микропроцессоров). Уже предпринято несколько попыток сконструировать универсальный детектор для жидкостной хроматографии. [c.33]

Интересным вариантом метода ВЭЖХ является центрифужная хроматография, в которой движение элюента через сорбент обеспечивается высокой скоростью вращения колонок. Разделение смесей, содержащих вплоть до 0,5 мг каждого компонента, на мелкодисперсном силикагеле или оксиде магния в системе легкий петролейный эфир — метанол занимает 2—6 мин [364]. [c.249]

Для идентификации антибиотиков и их отнесения к той или иной группе антибактериальных препаратов служит ряд хроматографических методов. До недавнего времени наиболее распространенным методом была бумажная хроматография (восходящая, нисходящая, круговая, центрифужная, одно- и двумерная бумажная хроматография, хроматография на бумаге, пропитанной буферами [2], на ионообменной бумаге [3] и т. п.), однако впоследствии широкое распространение получила также ТСХ (преимущественно на силикагеле или на оксиде алюминия), отличающаяся простотой аппаратурного оформления и высокой скоростью анализа [4—9]. Чтобы придать сорбенту определенные свойства, его можно предварительно обработать соответствующим реагентом. Например, для разделения тетрациклинов, способных образовывать хелаты, Нишимото и др. [10] использовали пластинки с силикагелем, пропитанным раствором динат-риевой соли ЭДТА. Известны примеры хроматографического [c.144]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология