Элюирование многократное

В зависимости от режима подачи элюента различают ТСХ непрерывного, многократного, ступенчатого, градиентного и двумерного элюирования. При непрерывном элюировании растворитель постоянно подается на пластину. Для этого элюент, достигший конца слоя, удаляется испарением, впитыванием бумажным фильтром или толстым слоем сорбента, помещенным в конце пластины. С целью улучшения разделения компонентов смеси можно многократно повторять процесс элюирования одним и тем же растворителем. [c.611]

В хромато-масс-спектрометрах, снабженных ЭВМ, метод масс-фрагментографии может реализоваться не с помощью устройств МИД, а путем построения хроматограмм по заданным ионам. Эти ионы автоматически выбираются ЭВМ из полных масс-спектров, зарегистрированных и внесенных в ее память в результате многократного сканирования спектров в процессе элюирования из колонки всех компонентов смеси. Для примера на рис. 8.4 приведены хроматограммы сложной смеси алканов и алифатических спиртов, зарегистрированные по полному ионному току (а) и по иону с m/z 31 (б), характерному для спиртов. Видно, что время появления максимумов (т.е. время удерживания) компонентов на обеих хроматограммах совпадает. Однако вторая хроматограмма принципиально отличается от первой, поскольку на ней проявляются зоны только тех спиртов, масс-спектры которых характеризуются пиком с m/z 31. [c.195]

Если имеется необходимость предварительного кондиционирования слоя (т.е. контроля активности), приходится прибегнуть к непрерывному элюированию. Многократное кондиционирование между каждым из этапов привело бы к слишком большим затратам времени. Ни непрерывное элюирование, ни обычный метод многократного элюирования не пригодны [c.250]

Выше описано разделение путем восходящего элюирования. Возможны иные варианты элюирования [244] нисходящее элюирование горизонтальное элюирование (круговая хроматография [250]) — пробу наносят по кругу на квадратную пластинку с тонким слоем сорбента (на пересечение диагоналей), в центр подают растворитель, вещества разделяются с образованием концентрических зон многократное элюирование одним и тем же растворителем (после элюирования пластинку высушивают и операцию повторяют со свежей порцией элюента) ступенчатое элюирование — многократное элюирование разными растворителями центрифужное элюирование — под действием центробежной силы движение потока растворителей ускоряется в 2—3 раза градиентное элюирование — состав элюента непрерывно изменяется. [c.103]

Анализируемый препарат в виде раствора или смеси с небольшим количеством сорбента помещают в хроматографическую колонку сверху. После этого через колонку с определенной скоростью (около 20 капель в 1 мин) пропускают подвижную фазу, что должно приводить к разделению хроматографируемой смеси по длине колонки на более или менее отдаленные друг от друга зоны, содержащие индивидуальные вещества. Эти зоны перемещаются по сорбенту со скоростью меньшей скорости течения подвижной фазы. Это позволяет для выделения отдельных компонентов анализируемой смеси использовать элюентный метод, т. е. пропускать подвижную фазу через колонку до тех пор, пока разделенные вещества не будут элюированы из нее. Последовательность элюирования отдельных веществ зависит от их хроматографической подвижности в данных условиях. Элюат собирают по фракциям. При необходимости в ходе элюирования можно менять состав подвижной фазы, увеличивая ее полярность. Вещества, содержащиеся в различных фракциях элюата, могут быть выделены и определены качественно и количественно обычными препаративными и аналитическими методами. Применение элюентного метода делает возможным многократное использование хроматографических колонок. [c.97]

Минимальный объем газа, необходимый для достижения по всей длине ловушки равновесной концентрации, удобнее всего выражать в величинах хроматографического удерживания, которые могут быть получены в пробном опыте и многократно использованы для данной колонки-концентратора. В проявительном варианте хроматографии Ид " составляет объем газа, требуемый для элюирования всей хроматографической полосы (рис. 4.2) [c.180]

Разделение. Критерии оценки, способы оптимизации 203 Параметры, характеризующие степень разделения и разрешающую способность 203 Разрешающая (дискриминирующая) способность 223 Хроматографический принцип неопределенности 228 Непрерывное элюирование 230 Методы многократного элюирования 239 Элюирование при изменении уровня погружения пластинки в растворитель 251 [c.8]

Элюирование (простое, многократное, круговое, в двух направлениях), часто в хроматографическом процессе принимает участие газовая фаза Преимущественно статическое [c.31]

Значение tio, tu и Rr характеризуют простое, однократное элюирование. Приведенные уравнения предполагают, что расстояние от линии погружения до стартовой линии равно 1 см. Сопоставление затрат времени на применение такого метода с затратами времени на многократное элюирование будет дано с следующем разделе. [c.234]

Методы многократного элюирования [c.239]

Некоторые аспекты, связанные с применением тонкослойной хроматографии при изменении места погружения в растворитель (см. следующий раздел), могут быть также отнесены к "тонкослойной хроматографии с использованием многократного элюирования". [c.240]

Рнс. 83, Разделение, достигаемое прн многократном элюировании. [c.241]

Путем перестановки получаем выраженне. позволяющее подсчитать число этапов многократного элюирования, необходимое для перехода от Кг к "Кг [c.242]

Из рис. 83 мы видим, что а) разделительный интервал ЛКг увеличивается при возрастании Кг б) при Кг > 0.45 многократное элюирование (при числе этапов более одного) приводит к потере степени разделения. [c.242]

Без дальнейших иллюстративных пояснений мы можем констатировать, что а) многократное элюирование улучшает степень разделения только тогда, когда (Кг) + (Кг)г <0.5 [76] б) при разделении соседних пятен (ЛКг)макс всегда равняется 0.63 ед. Кг (независимо от исходной ддя веществ величины Кг [62] в) после достаточно большого числа элюирований (на том же самом участке пластинки) степень разделения пятен снижается и все пятна постепенно начинают сливаться в зоне, соответствующей фронту растворителя (на самом краю пластинки). [c.242]

Как и при непрерывном элюировании, число тарелок N вдоль всего разделяющего участка снижается во времени (т.е. при каждом очередном этапе элюирования). Следовательно, значения ДКг не обязательно дают нам информацию об эффективности разделения (поскольку степень размывания пятна устойчиво повышается). Точно так же нельзя сказать, что наличие сплюснутых с двух сторон пятен (форма которых обусловлена многократным элюированием) автоматически свидетельствует об обеспечении лучшей разделяющей способности. [c.242]

Бюргером предложен такой вариант градиентного изменения (см. рис. 84, случай б) для разделения на силикагеле (подвижная фаза метанол, ацетонитрил, дихлорметан и гексан), который выгодно отличается широкой применимостью и малой степенью расслоения подвижной фазы (некоторого расслоения все же можно ожидать, поскольку камера конструктивно напоминает сэндвич-камеру). Градиентное элюирование начинают, пользуясь полярной смесью, а заканчивают применением довольно неполярной. К относительным преимуществам метода программируемого многократного элюирования относятся следующие [c.246]

Сопоставление методов многократного элюирования и непрерывного [c.247]

Преимущества многократного элюирования в тонкослойной хроматографии а) в перерывах между отработкой этапов можно оценить вид хроматограммы быстро перемещающиеся вещества не выходят за пределы [c.247]

Сопоставление затрат времени на многократное элюирование и непрерывное элюирование [c.248]

Рассмотрим теперь ситуацию, характерную для многократного элюирования. Уравнение (59) показывает, что для Кг = 0.1 оптимальная величина п составит 10 этапов. Для получения "Кг = 0.4 мы должны (согласно уравнению 596) провести элюирование (примерно) 5 раз [c.249]

Программируемое многократное элюирование (камера АМО) 120 10 1,5 Широкая область применения возможность пользования градиентным изменением состава подвижной фазы [c.303]

В тех суспензией сорбента покрывают стеклянную или металлич. пластинку получ. слой высушивают на воздухе и нагревают для удаления следов влаги (активируют). Широко использ. промышленно изготовленные пластины с закрепленным слоем. Размеры пластин варьируют от 2 X 2 до 10 X 20 см. На слой сорбента наносят капли анализируемого р-ра объемом 1 — 10 мкл. Край пластины погружают в р-ритель. Эксперимент проводят обычно в камере — стеклянном сосуде с притертой крышкой. Р-ритель перемещается по слою под действием капиллярных сил. Возможно одновременное разделение нескольких разл. смесей. Предложен т. н. колоночный вариант ТСХ, в к-ром р-ритель под давл. пропускают через слой сорбента, покрытый плотно прижатой полиэтиленовой пленкой это позволяет значительно сократить время разделения. Для увеличения эффективности разделения использ. Линия многократные элюирования в том же или перпендикулярном нап-фроита равлении, тем х<е илн др. эшо-ентом. [c.584]

В зависимости от положения пластинки и направления потока элюента различают восходящую, нисходящую и горизонтальную ТСХ. По технике работы выделяют фронтальный анализ (когда подвижной фазой служит анализируемая смесь) и обычно используемый элюционный вариант. Применяют также круговую (когда анализируемый р-р и р-ритель последовательно подаются в центр пластинки) и антикруговую ТСХ (когда анализируемый р-р наносится по окружности и элюент перемещается от периферии к центру пластинки), ТСХ под давлением (когда р-ритель под давлением пропускают через слой сорбента, покрытый плотно прижатой полиэтиленовой пленкой), а также ТСХ в условиях градиента т-ры, состава сорбента н т. п, В т. наз. двухмерной ТСХ хроматографич. процесс осуществляют последовате.чьно в двух взаимно перпендикулярных направлениях с разл. элюентами, что увеличивает эффективность разделения, С этой же целью применяют многократное элюирование в. одном направлении. [c.608]

Первые элюированные фракции содержат белки, не поглощенные за счет иммунности (неспецифичные к иммобилизованному реагенту), и белки, специфичные к иммобилизованному реагенту, которые имеются в избытке. После промывки колонок обычно происходи десорбция посредством попиження pH до 2,8, использования хаотроиических ионов или мочевины. Затем колонки вновь приводятся в состояние равновесия первоначальным буферным раствором и могут многократно использоваться таким же образом. [c.110]

Фракции хлорофилла из листьев растений, экстрагированные с помощью хлороформа, наносили в виде полос на слои силикагеля PF254 толщиной 2 мм [12]. Зоны разделили при многократном проявлении в восходящем направлении подвижная фаза смесь петролейный эфир — хлороформ (1 1 по объему). После нескольких проявлений отделенные хлорофилловые и нехлорофилловые полосы были видны в дневном свете и в ультрафиолете. Вещества были извлечены из зон обычной процедурой элюирования. [c.148]

Конечно, все сказанное о воздействии абсолютного значения Кг правомерно только для случая однократного элюирования. Влияние малых Кг может быть обойдено за счет многократного элюирования или непрерывного элюирования (см. ниже разд. "Непрерывное элюирование"). При наличии показанного оптимума для разделения пары веществ, не выходящих на оптимальный участок, требуется повышение селективности (чтобы степень разделения оказалась то11 же. что при оптимуме рис. 73, 74). В жидкостной колоночной хроматографии гге имеется такого оптимума [c.209]

Из-за ограниченной свободы действий экспериментатора в ТСХ (длина участка разделения 5-14 см, число тарелок 1000-9000) следует попьггатьсся выгодно воспользоваться всей длиной пластинки (т.е. более разумно использовать доступное число тарелок за счет увеличения тх) без попадания под ухудшающее влияние "экстремальных значений Кг" на разрешаюшую способность [см. рис. 72 К5=к(ЫКг) 2(1 Осознанно или неосознанно, мы пользуемся выгодами такого решения, когда прибегаем к специальным приемам тонкослойной хроматографии (таким, как многократное элюирование или непрерывное элюирование). При таком подходе к разделению обычно сливающихся пар веществ выбранный растворитель должен обладать настолько слабой элюирующей способностью, чтобы поддерживать значения Кг очень низкими (т.е. те значения, которые наблюдаются при однократном элюировании). Это значит, что множитель (1-Кг), ограничивающий разрешающую способность, приходится поддерживать высоким. При непрерывном элюировании проходимый пятном путь тх (= Кг) [c.231]

Варианты многократного элюирования До последнего времени методы многократного элюирования в плоскостной хроматографии использовались относительно редко. Обычно элюировали дважды (или большее число раз) после промежуточного периода просушки слоя. Можно указать три типа многократного элюирования 1) многократное элюирование с использованием того же самого растворителя в том же направлении 2) многократное элюирование с употреблением различных растворителей в том же самом направлении 3) первоначальное элюирование выбранным растворителем в одном направлении, после чего проводится элюирование другим растворителем в перпендикул5фном направлении (двумерное элюирование). [c.239]

Одномерное многократное элюирование В этом разделе будет показано, что одномерное многократное элюирование тем же самым растворителем теоретически и на практике оказывается менее эффективным, чем разделение на тонкослойной пластинке при введении образца уже после начала элюирования. При повторном элюировании (и на всех последующих этапах элюирования) поднимающийся фронт растворотеля достигает нижнего пятна перед подходом к верхнему пятну. В результате ниж нее пятно начинает смещаться раньще верхнего, из-за чего снижается величи на ДКг и ухудшается разделение, полученное на первом этапе элюирования Такое ухудшающее воздействие (отсутствующее при непрерывном элюирова НИИ) оказывается тем сильнее, чем выше поднимаются вещества на пластинке Следовательно, число этапов элюирования должно пройти через оптимум соответствующий наиболее качественному разделению (рис. 83). Оптимальное число этапов может бьггь определено по следующему уравнению Поп =-1/[1п(1-Е/)1 (59 ) [c.240]

Зависимость расстояния между центрами пятен (ДКг) от числа этапов разделения п при различных значениях Кг, отмечаемых после однократного элюирования. Если п превышает некое оптимальное число, степень разделения соседних пятен снижается. При Кг < 0.5 многократное элюирование приводит к снижению ДКс. Данные заимствованы из публикации Тома [77]. Основополагающее уравнение ДКг = (Кг) - (Кг) = [I- (Кг) )" - [I- (Нг) ]". Сондерс и Снайдер [78] приводят несколько иные значения Полт для конкретных исходных Кг (приведены соотношения Кг /попг 0.33/1 0.29/2 0.26/3 0.22/5 0.16/10). [c.241]

Многократное элюирование могло производиться до тех пор, пока разделяющий участок не достигал верхнего края пластинки. Преимущества такого способа (над обычным многократным элюированием) очевидны 1) число тарелок увеличивалось в 3-4 раза 2) при использовании этого варианта первоначальный короткий участок слоя, на котором зоны разделяемых соединений еще близко расположены друг от друга, короче (по сравнению с классическим вариантом многократного элюирования), причем затем следует сравнительно длинная зона последующего разделения ее продолжительность оказывается на каждом этапе элюирования одинаковой следовательно, эффективность этого метода не ограничена величиной Попт для многократного элюирования вдоль идентичного разделяющего участка 3) поскольку пластинку обрезали, нижняя часть слоя больше роли не играла при этом снижалась итоговая продолжительность элюирования 4) каждый этап элюирования сопровождался обеспечением оптимальных условий (Кг 0.3). [c.243]

Интересный вариант "программируемого многократного элюирования" бьш предложен Перри с соавт. [79]. Если при обычном многократном элюировании продолжительность всех этапов одинакова, то этот подход основан на изменении длительности этапов. Бюргер [159] усовершенствовал предложенный способ первое элюирование начиналось с обеспечения zr = 3 мм каждый последующий этап сопровождался заходом еще дальше на 3 мм (см. рис. 84, случай а). Общее число этапов попадало в интервал значений п от 10 до 25 и соответствовало итоговой продолжительности элюирования 0.5-3 ч общая длина разделяюшего участка равнялась 3-10 см. Такое постепенное увеличение противодействует конечному объединению всех пятен при Rr = 1, что является характерной отличительной особенностью обычного варианта тонкослойного разделения за счет многократного элюирования. [c.244]

Рнс. 84. Программируемое многократное элюирование с использованием камеры AMD а - многократное элюирование с промежуточной просушкой слоя б - рекомендуемое градиентное изменение состава подвижной фазы для последовательных этапов п изократического элюирования в - программируемое многократное элюирование может обеспечить разделение веществ с различной полярностью (включая ионогенные вешества) на силикагеле г - фракция экстракта нз растений, полученная прн предварительном разделении на колонке с сорбентом Lobar (обращенная фаза) и впоследствии разделявшаяся методом ТСХ с использованием камеры AMD на пластинке с силикагелем (д). Данные заимствованы из публикации [159]. A N - ацетонитрил п - число этапов I - фронт 2 - беизанилид 3 - ацетанилид 4 - п-ннтрофенол 5 - тиомочевина 6 -роданид 7 - нитрат аммония 8 - нафталинсульфокислота 9 - бензойная кислота 10 -фталевая кислота 11 - старт 12 - начало сбора фракции 13 - окончание сбора фракции 14 [c.245]

Преимущества непрерывного элюирования в отличие от ситуации, характерной для методов многократного элюирования, когда требуется промежуточная просущка. процесс элюирования не прерывается до заверщения разделения б) при необходимости предварительного кондиционирования слоя такая подготовка пластинки проводится лищь один раз, из-за чего работа упрощается и экономится время в) теоретически предсказываемая максимальная разрешающая способность выще, чем в случае многократного элюирования (при тех же самых условиях) г) величина Нг возрастает пропорционально времени и, в отличие о ситуации, характерной для многократного элюирования, отношение значений Кг остается неизменным. [c.248]

Эти сопоставления проводились при упрощающем предположении, что затраты времени (а, следовательно, и степень диффузии) равны для обоих методов (что приблизительно и соответствует действительности), а увеличение пути (проходимого пятном) с 1.5 до 6 и 13 см соответственно будет приводить (в случае многократного элюирования) к одинаковому повышению разрешающей способности с 0.2 до 0.4 и 0.6 соответственно. Из-за исходного снижения расстояния между пятнами, когда фронт растворителя достигает пятен, разрешающая способность оказывается худшей в случае многократного элюирования. В результате, сопоставление двух методов оказывается даже еше более неблагоприятным для случая многократного элюирования (если не считать варианта, предложенного Халпаапом). [c.250]

ДЛЯ разделения многокомпонентных смесей веществ с щироким диапазоном полярности оба подхода приведут скорее к значительным осложнениям, чем к получению хороших результатов. Возможно, подходящим окажется метод программируемого многократного элюирования. [c.251]

При непрерывном элюировании, при многократном элюировании и прп разделениях на ТСХ-пластинке, сопровождающихся испарением, стараются получить смещение пятен как можно дальше (за нормальное для них положение, соответствующее "Кг") к концу разделяющего участка, чтобы КгН Ы (т.е. чтобы разделение происходило с максимально большим числом используемых тарелок). Все эти три подхода ограничены необходимостью получения наилучших результатов при пользовании доступной длиной разделяющего участка гг-тс (в случае обычных тонкослойных пластинок длина участка попадает в интервал от 5 до 15 см). Элюирование при изменении места погружения пластинки в растворитель снимает ограничения обычной длины разделяющего участка, длина слоя может быть увеличена до 1 м, а разделение обеспечивается прн приемлемых затратах времени. Соответственно, разрешающую способность (и разрешающую способность за еданицу вре.мени) удается увеличить в 4-10 раз. [c.252]

Лниейпып (многократное элюирование) =90 5 1.1-1.3 Улучшение разрешающс способности в области средних значений Кг, потеря при высоких К/, когда пятна начинают сливаться [c.302]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология