Яичный альбумин заряд

Белки благодаря своему большому молекулярному весу находятся в коллоидальном состоянии. Белковые молекулы содержат некоторое количество свободных карбоксильных и аминных групп, и поэтому белки относятся к амфотерным электролитам. В щелочной среде белок диссоциирует, как кислота, в кислом растворе — как щелочь. Отсюда следует, что в щелочном растворе молекулы белка заряжены отрицательно, а в кислом — положительно. При прохождении постоянного электрического тока через щелочной раствор белка молекулы его движутся к аноду, а через кислый раствор белка — к катоду. При определенной для каждого белка концентрации водородных ионов количество положительных и отрицательных зарядов в молекуле белка становится одинаковым, и белки перестают передвигаться в электрическом поле. Концентрация водородных ионов реакция среды), при которой в молекуле белка устанавливается равенство положительных и отрицательных ионов, носит название изоэлектрической точки данного белка. Изоэлектрическая точка для различных белков оказывается неодинаковой. Так, например, для казеина изоэлектрическая точка находится при pH 4,7, для яичного альбумина — при pH 4,8, сывороточного глобулина — при pH 5,4, для эдестина из семян конопли — при pH 5,5, для зеина кукурузного зерна — при pH 6,2 и т. д. [c.36]

Рис. 123. Заряд яичного альбумина как функция pH, определенный из электрофоретической подвижности при использовании уравнения (24-7). Этот заряд сравнивается с зарядом, обусловленным равновесием кислых и основных групп, определенным из кривой титрования. Расхождение частично можно объяснить тем, что заряды, обусловленные кислыми и основными группами в молекуле, не составляют полный заряд иона белка, но часть расхождения должна быть приписана несовершенству уравнения (24-7). Ионная сила в этих экспериментах составляла 0,10 (рисунок взят из работы ) /—заряд, определенный из кривой титрования

При определенных значениях pH раствора число положительных и отрицательных зарядов в молекулах белка становится одинаковым и такие молекулы не переносятся ни к аноду, ни к катоду. Значение pH раствора, при котором достигается такое состояние белка, называется изоэлектрической точкой. Последняя не одинакова для различных белков, так как в зависимости от их аминокислотного состава они могут содержать разное количество свободных амино- и карбоксильных групп. Например, для яичного белка (альбумина) изоэлектрическая точка находится при pH = 4,8 (кислая среда), а для белка пшеницы (глиадина) — при pH = 9,8 (щелочная среда). [c.295]

Можно сказать, что в этом случае происходит борьба за воду между макромолекулами и ионами. Критические концентрации высаливания обычно на 3—5 порядков превышают пороги коагуляции и измеряются уже не в миллимолях, а в молях на литр. Высаливающее действие не связано однозначно с зарядом иона, поскольку оно определяется дегидратирующей функцией. Однако многочисленные исследования показали, что наибольшее влияние на высаливание оказывает заряд аниона. Ниже приведены концентрации некоторых солей различных кислот, вызывающие высаливание яичного альбумина из водных растворов [c.334]

Аналитические данные показывают, что яичный альбумин содержит около 9 остатков тирозина, обнаружить которые титрованием не удается. Благодаря тому что белки, имеющие изо-электрическую точку в кислой области, в щелочных растворах приобретают большой отрицательный заряд, характерное для фенольных групп значение р ш—Ю может измениться под влиянием электростатических эффектов до рк 2. Ионизацию фенольных групп можно установить спектральным методом, так как известно, что при 295 ммк заметно поглощает только анионная форма остатков тирозина. В яичном альбумине до рН>12,5 роста поглощения, характерного для анионной формы фенольных групп, не наблюдается, а затем оно наступает быстро и необратимо. Если затем снизите значение pH, то конформация белковой молекулы оказывается отличной от исходной. Необратимую денатурацию вызывает также нагревание и добавление сильной кислоты или концентрированного раствора мочевины. [c.117]

Можно заметить, что яичный альбумин имеет молекулярный вес 45 ООО я в изоионной точке (в которой делал измерения Ванг), обладает приблизительно 41 положительным зарядом (катионный азот) и равным числом отрицательных зарядов (карбоксильные группы). [c.391]

Особенно хорошо получается коацервацпя при смешивании белка и лецитина (жироподобное вещество), белка и нуклеиновых кислот. Но для этого необходимо, чтобы оба коллоида были заряжены и чтобы заряды их были по знаку противоположны. Известно, что изоэлектрический пункт лецитина достигается при pH=6,0. В кислых растворах лецитин заряжается положительно. Известно, что желатина или яичный альбумин имеют изоэлектрический пункт при pH = 4,7. При сдвижении в щелочную сторону от него эти белки заряжаются отрицательно. Ясно, что коацервация может произойти лишь между этими границами. [c.389]

Важный аспект устойчивости компактной конформации рибонуклеазы, несущей максимальный заряд, заключается в том, что такая конформация не сохраняется при температурах намного выше 25° С. Существенное разворачивание происходит при нагревании до 40° С, причем характеристическая вязкость возрастает приблизительно до 7 см 1г . Однако процесс разворачивания макромолекулы полностью обратим, и это означает, что можно быть уверенными в истинной термодинамической устойчивости рибонуклеазы при температуре 25 °С. Такое утверждение не будет справедливым для всех глобулярных белков. Например, яичный альбумин и пепсин —такие две макромолекулы, которые, прежде чем развернуться, могут приобрести значительный заряд. Когда же они разворачиваются, то процесс необратим. Это означает, что кажущаяся устойчивость, наблюдаемая для рассмотренных белков, имеет кинетическую, а не термодинамическую природу. Данные, полученные при изучении разворачивания макромолекул этих белков, не могут быть положены в основу расчета силы внутренних связей, подобно тому, как это было сделано для рибонуклеазы. [c.585]

Существует и другой способ независимого определения заряда белка — по доннановскому равновесию при диализе (метод мембранного потенциала ). Этот способ имеет свои специфические недостатки, но он определяет в отличие от титрования полный заряд. В табл. 2 сопоставлены величины заряда яичного альбумина, найденные различными способами при разных ионных силах [10,12]. [c.61]

Сравнение числа элементарных зарядов, приходящихся на молекулу яичного альбумина при pH 7,1, но данным титрования, измерения электрофоретической подвижности и мембранного потенциала [12, 10] [c.62]

Растворы высокомолекулярных веществ в термодинамически равновесном состоянии аналогично истинным растворам обладают абсолютной агрегативной устойчивостью. Высокая устойчивость коллоидных растворов высокомолекулярных соединений определяется двумя факторами — наличием на поверхности частиц двух оболочек электрической и сольватной (гидратной). Для коагуляции коллоидов высокомолекулярных соединений необходимо не только нейтрализовать заряд коллоидной частицы, но и разрушить жидкостную оболочку. Выделение высокомолекулярных соединений из растворов по своему характеру отличается от коагуляции типичных гидрофобных коллоидов. Так, если для гидрофобных золей достаточно незначительных добавок электролита, чтобы вызвать коагуляцию, то для высокомолекулярных веществ этого недостаточно. Для выделения дисперсной фазы полимеров необходимы высокие (вплоть до насыщенных растворов) концентрации электролитов. Например, яичный глобулин выделяется при полунасыщении раствора сульфатом аммония, а яичный альбумин— только при полном насыщении. [c.472]

Рассчитайте заряд молекулы яичного альбумина в единицах валентности, используя уравнение (7.30) и приводимую ниже информацию. [c.451]

Ранее уже отмечалось, что белковые молекулы перемешаются в электрическом поле (при любом pH, кроме изоэлектрической точки). Методы, основанные на этом свойстве белковых молекул, широко используются прн изучении смесей белков. По кривой титрования белка можно составить представление о суммарном электрическом заряде молекулы при любом pH. Так как скорость перемещения молекулы в электрическом поле в значительной степени определяется ее суммарным зарядом, электрофоретическая подвижность белка зависит от pH, как, впрочем, и степень ионизации молекулы. На рнс. 5.22 приведены электрофоретическая подвижность и кривая титрования кристаллического яичного альбумина. Хотя форма и размеры молекулы оказывают влияние на абсолютную скорость перемещения в электрическом поле, определяющим фактором является все же суммарный заряд. [c.161]

На рис. 123 даны величины Z для яичного альбумина в зависимости от pH, определенные Лонгворсом1 2 из электрофоретических подвижностей, которые были рассчитаны согласно уравнению (24-7). Величины Z сравнивались с величинами, рассчитанными из кривой титрования яичного альбумина (ср. раздел 30), и, как оказалось, согласие было плохим. Часть расхождения может быть приписана тому, что кривая титрования не дает величины полного заряда, а только той его части, которая обусловлена присутствием заряженных кислых или основных групп, т. е. связыванием и диссоциацией ионов Н . Установлено, что яичный альбумин также связывает другие ионы (в нашем случае это должны были быть ионы СГ или К , или те и другие вместе, поскольку электролит был КС1). Данные по связыванию таких ионов встречаются редко, но те данные, которые имеются, указывают на то, что связывание ионов не может являться единственной причиной расхождения. [c.486]

Если значение й сохраняется постоянным при помо щи ряда буферов различного pH, но имеющих одинаковую ионную силу, то подвижность сферической молекулы белка будет прямо пропорциональна заряду. Обычно, как мы видели, подвижность является функцией как заряда, так и толщины двойного слоя. Свободный заряд на молекуле белка в первом приближении равен сумме связанных водородных или гидроксильных ионов. Эти данные могут быть получены из кривой титрования белка кислотами и основаниями. Абрамсон сравнил заряд, вычисленный по уравнению (43), с зарядом, вычислент ным по кривой титрования, и получил хорошее совпадение. Лонгсвортс также показал пропорциональность между подвижностью и кривой титрования яичного альбумина в интервале pH от 3 до 12. Аналогичные результаты для р-лактоглобулина получены Каннаном, Пальмером и Кибриком. [c.219]

При этом кулоны переводятся в электростатические единицы, которые затем следует разделить на заряд электрона. Одновременно учитывается перевод вольтов в электростатические единицы потенциала. Радиус молекулы яичного альбумина можно принять равным 27,8-10 см, а средний радиус ионов в растворе — 2,5-10 . Параметр Дебая — Хюкк("ля X в условиях эксперимента равен 1,033-10 см . [c.451]

Постепенное дефосфорилирование яичного альбумина было подтверждено электрофоретическим выделением дифосфояичного альбумина Ль частичным дефосфорилированием яичного альбумина фосфатазой предстательной железы, в результате которого образуется монофосфорное производное Л2, и полным дефосфорилированием производного Л2 кишечной фосфатазой с образованием альбумина Лз, не содержащего фосфора [150в]. За исключением содержания фосфора и характера подвижности, все три белка А, Л2 и Л3 обладают сходными свойствами. Как и в случае превращения яичного альбумина в плакальбумин, изменение подвижности, которым сопровождается процесс дефос-форилирования, можно использовать для оценки изменения суммарного заряда белков. Эти результаты показывают, что в удалении каждого из атомов фосфора принимают участие два способных ионизироваться атома водорода. Установление взаимосвязи между тремя формами яичного альбумина помогает объяснить электрофоретическую гетерогенность свежеприготовленных растворов этого белка и изменения, наблюдающиеся при старении. [c.335]

И 114, заимствованных из работ этих исследователей, показано, каким образом электрофоретическая подвижность и = и Х растворов сывороточного альбумина, не содержащих солей и оттитрованных с помощью основания, изменяется с увеличением заряда при постоянной концентрации белка и с повышением концентрации белка при постоянной величине заряда. Как и следовало ожидать вследствие различных перечисленных выше причин, зависимость подвижности белка от его заряда имеет убывающую кривизну, причем подвижность также уменьшается с увеличением концентрации белка. Как это обнаружено Лонгсвортом [828] для яичного альбумина в растворе с ионной силой, равной 0,1, в присутствии достаточно больших количеств добавленной соли подвижность молекулы белка, по-видимому, пропорциональна его заряду. Значения подвижности, которые он обнаружил при этих условиях, составляли около 60% значений, рассчитанных в соответствии с уравнением (УП-49). [c.304]

Рассмотрим влияние электрических зарядов на кинетику образования и прочность адсорбционных слоев яичного и сывороточного альбуминов и казеина на границах с воздухом и с маслом. В кислых и щелочных областях от изоэлектрической точки наблюдалось замедление нарастания прочности межфазных адсорбционных слоев. В этом сказывается большое влияние зарядов на процесс адсорбции и на взаимодействие отдельных молекул друг с другом. Нарастание прочности адсорбционных слоев япчпого альбумина на границе с воздухом показано на рис. 33 при разных [c.208]

Белки. Спектры ЭПР у-облученных при 77° К бе.чков зависят от аминокислотного состава макромолекул. Так, в желатине, гемоглобине, проколлагене, протамине, в составе которых нет серусодержащих аминокислотных остатков, зарегистрированы симметричные многокомпонентные спектры с g = =2,0036. В спектрах фиброина шелка, пол и-у-метил- -гл утамата, поли-у- бен-зил- -глутамата, пепсина, миозина есть синглеты с g = 2,006 -ь 2,008. Белки,. имеющие в составе большое количество серусодержащих аминокислотных остатков (рибонуклеаза, трипсин, яичный и сывороточный альбумин, лизоцим), дают асимметричный спектр с неразрешенной структурой [193—196]. Исчезающие при действии света парамагнитные центры можно отнести к захваченным зарядам [196]. Кроме того, предпо.чагают образование радикалов [c.308]