Модификаторы влияние на удерживание

СОВМЕСТНОЕ ВЛИЯНИЕ СТРОЕНИЯ СОРБАТОВ И КОНЦЕНТРАЦИИ ОРГАНИЧЕСКОГО МОДИФИКАТОРА НА УДЕРЖИВАНИЕ [c.122]

Добавление органических модификаторов может приводить как к увеличению, так и к уменьшению удерживания. Кроме того, характер влияния органического модификатора на удерживание может очень сильно зависеть от природы компонентов, как это показано на рис. 3.26 на примере разделения ряда алкалоидов (используемых в качестве лекарственных средств), осуществляемого на немодифицированном оксиде алюминия. [c.115]

Рис. 3.31. Пример влияния длины углеводородной цепи ионов-модификаторов на удерживание в ион-парной хроматографии [85] (с разрешения изд-ва).

Таким образом, параметр Я действительно отражает влияние структуры сорбатов на их хроматографическое поведение. Существование связи между Я и 6, Я и gk может служить основой априорных расчетов удерживания и концентрации органического модификатора необходимой для хроматографирования. [c.293]

Большое влияние на энантиоселективность оказывает состав подвижной фазы. В обшем случае и и а уменьшаются с увеличением содержания органического модификатора в элюенте. В большинстве случаев метанол как модификатор приводит к меньшему снижению значения а, чем ацетонитрил. Удерживание на колонках с ЦД заметно зависит и от температуры, быстро снижаясь до нуля в пределах от 60 до 80°С. [c.113]

Как и при разделении на ранее описанных полимерных ХНФ, механизм хирального распознавания в данной системе является сложным и до конца не выяснен. Однако основные причины удерживания сорбата были выявлены в ходе систематических исследований влияния его структуры и состава подвижной фазы на коэффициент емкости. Во многих отношениях альбумин-силикагелевый сорбент ведет себя подобно обращенно-фазовым материалам на основе алкилированного силикагеля. Спирты, преимущественно пропанол-1, помогают регулировать время удерживания, поскольку вызывают его быстрое уменьшение вследствие ослабления гидрофобных взаимодействий с сорбентом. Оптимизировать состав подвижной фазы можно, варьируя тремя основными параметрами, а именно pH, ионной силой и органическим растворителем-модификатором [90]. Вероятно, в любой хроматографической системе одновременно наблюдается влияние диполь-ионных и гидрофобных взаимодействий. Кроме того, возможно образование водородных связей и комплексов с переносом заряда. Большое влияние свойств подвижной фазы на значения к разделяемых энантиомеров можно объяснить зависимостью свойств белков от распределения заряда и его конформации. БСА состоит как минимум из 581 остатка аминокислот, связанных в единую цепь (мол. масса 6,6-10 ), и его надмолекулярная структура в значительной мере определяется присутствием в молекуле 17 дисульфидных мостиков. При рН7,0 полный заряд молекулы равен - 18, а изоэлектрическая точка равна 4,7. Как это хорошо известно из химии ферментов, смена растворителя способна вызывать изменения в структуре связывающего центра белка в результате изменения его заряда и конформации. [c.133]

В то время как амины и аминокислоты, несущие положительный заряд, более прочно удерживаются при более высоких значениях pH, для отрицательно заряженных сорбатов справедливо обратное. Систематические исследования, проведенные на серии N-бензоил-о, L-аминокислот, позволили глубже понять механизм взаимодействия сорбата с белком. Влияние изменения свойств подвижной фазы на величины к VI а демонстрирует рис. 7.10. Во-первых, удерживание в значительной степени возрастает с усилением гидрофобного характера аминокислоты (Ser > А1а> Phe). Во-вторых, увеличение суммарного отрицательного заряда белка с увеличением pH вызывает уменьшение к для всех шести соединений (вследствие ионного взаимодействия). Далее, влияние концентрации буфера можно объяснить усилением адсорбции вследствие ионных взаимодействий при низкой ионной силе. Небольшое, но вполне заметное возрастание к для наиболее сильно удерживаемых сорбатов при высоких концентрациях буфера вероятнее всего является результатом усиления гидрофобных взаимодействий. Поскольку ионные (кулоновские) и гидрофобные взаимодействия по-разному подвержены влиянию ионной силы, то оба эффекта приводят к возникновению минимума в адсорбции сорбата (к ) в определенной точке. И наконец, совершенно очевидно влияние органического растворителя-модификатора он всегда приводит к понижению удерживания сорбата и тем сильнее, чем более гидрофобен сорбат. Влияние pH и ионной силы на удерживание незаряженных соединений невелико, но выражено вполне отчетливо. Оно связано исключительно с изменениями в связывающем центре ХНФ. Добавление пропанола-1 вызывает уменьшение удерживания по сравнению с наблюдаемым у заряженных сорбатов, что свидетельствует о преимущественном вкладе в удерживание гидрофобных взаимодействий. Это подтверждает также наблюдаемое очень большое влияние на удерживание длины цепи алканола-1. Высшие спирты являются значительно более эффективными конкурентами за связывающий центр, а потому вызывают более быстрое элюирование сорбата. Возможность регулирования удерживания путем изменения подвижной фазы, которую демонстрирует схема 7.6, говорит о том, что эту особенность данных хроматографических систем можно использовать в целях оптимизации разделения. [c.135]

На проявление модифицирующего эффекта существенное влияние оказывает pH подвижной фазы. Ассоциация модификатора с сорбатом, где бы она ни происходила, будет наиболее прочной, если оба они ионизированы. Поэтому pH подвижной фазы выбирают в зависимости от свойств сорбата и модификатора. На рис. 4.43 изображена типичная зависимость коэффициентов емкости слабой кислоты от pH подвижной фазы и концентрации модификатора. Нижняя кривая, соответствующая обычному обращенно-фазовому режиму, совпадает по форме с кривыми рис. 4.4. При добавлении в подвижную фазу динамического модификатора удерживание увеличивается. Более всего этот эффект выражен при pH около 6, где в достаточной степени ионизированы и сорбат, и модификатор. Рекомендуемые значения pH для ион-парной хроматографии приведены в табл. 4.38. [c.173]

Влияние длины цепи противоионов. Воздействовать на удерживание, не вызывая значительного изменения селективности, можно путем использования различных ионов-модификаторов одного гомологического ряда. Это дает возможность изменять величину удерживания в более или менее широком интервале. Пример влияния длины цепи ионов-модификаторов демонстрирует рис. 3.31. Как следует из этого рисунка, зависимость логарифма коэффициента емкости от длины цепи ионов-модификаторов практически представляет собой прямую. [c.126]

Концентрация противоионов. В ион-парной, как и в ионообменной хроматографии концентрация противоионов оказывает значительное влияние на удерживание. В ион-парной хроматографии противоион имеет такой же заряд, как и молекулы образца, но противоположный заряду нона-модификатора. Например, при разделении веществ анионной природы поп-парным [c.127]

Состав подвижной фазы. Как пентан, так и диоксид углерода отличаются низкой полярностью. Полярность подвижной фазы можно увеличить, добавляя в нее подходящие модификаторы. Такие модификаторы оказывают весьма заметное влияние на удерживание. Уменьщение удерживания, вызванное добавлением модификаторов, по-видимому, сходно с наблюдаемым в условиях жидко-твердофазной хроматографии (см. разд. 3.2.3). Полярные модификаторы влияют не только на удерживание, но и на форму пика. Добавление модификаторов в подвижную фазу, особенно при разделении полярных компонентов, становится весьма распространенным. Природа и концентрация органического модификатора являются теми параметрами, которые можно использовать для оптимизации разделения методом сверхкритической флюидной хроматографии. Информация об исследованиях, проводимых в этом направлении, дана в статье Рендалла [92]. [c.133]

Природа ионов-модификаторов в значительной степени влияет на удерживание. Чтобы величина к соответствовала оптимальному диапазону, для каждого иона-модификатора требуется своя специфическая концентрация. Выбор ионов-модификаторов в основном определяется природой ионного образца. Так, для образцов анионной природы требуются в качестве ион-парных добавок катионы и наоборот. Первоначальное добавление в подвижную фазу ион-парных агентов приводит к их адсорбции неподвижной фазой вплоть до насыщения. Поэтому влияние изменения концентрации ионов-модификаторов должно [c.276]

Рис. 142. Влияние длины цепи модификатора на удерживание в ОФ ЖХ. Растворитель - вода. Сорбенты сплошные линии - Si-100, модифицированный метильными ( i). бутильными (Са), децильными (Сю), и октадецильиымн ( ie. 22% углерода) группами. Из работы [114].

Филимонов В.И, За.муруев О.В., Балятипская Л.Н.. Колосова И.Ф. Влияние природы модификаторов бинарных подвижных фаз на удерживание синтетических жирорастворимых витаминов силикагелем в условиях ВЭЖХ. Модификаторы II и V групп селективности по классификации Снайдера// Теория и практика сорбционных процессов. 2000. вып.26. с.73 81, [c.521]

В целом же удерживание в данном случае определяется тем же типом взаимодействий, что и на альбумин-силикагелевой ХНФ, и здесь применимы в основном те же приемы регулирования удерживания и селективности, но в качестве спиртового модификатора более предпочтителен пропанол-2 [96]. В качестве модификаторов были также испытаны как катионные, так и анионные соединения. Анализ их влияния на удерживание ионных соединений показал, что оно хорошо описывается моделью ион-парных равновесий для взаимодействия сорбат-сорбент [97]. Таким образом, при разделении оптических изомеров на колонках Епап11оРас можно пользоваться теми же приемами, которые широко используются в обращенно-фазовой хроматографии [98]. Это еще раз подчеркивает важность гидрофобных связывающих центров для ХНФ на основе белков. [c.138]

Развитию основных положений теории удерживания препятствовал тот факт, что в зависимости от условий основное влияние на удерживание и селективность может оказывать одно из перечисленных ниже явлений (илн совокупность этих явлений) [260] 1) "сольвофобные" взаимодействия между анализируемым веществом и органическими группами на поверхности 2) "силанофильные" взаимодействия между анализируемым веществом и доступными силанольными группами на поверхности сорбента 3) взаимодействие между сорбентом и анализируемым веществом, растворенным преимущественно в органическом модификаторе элюента такой процесс наблюдается и в НФ ЖХ при расслаивании раствортеля 4) специфические взаимодействия с определенными компонента.ми растворителя (вторичные равновесные процессы) 5) явления эксклюзии вследствие стерических или электростатических эффектов. [c.74]

Одна1 о основной функцией щелочи яв.ляется устранение каталитической активности. В качество модификатора, изменяющего ио-]. ядок выделения компонентов, целесообразно вводить тяжелые органические вещества, напридкф вазелиновое масло, прц добавлении которого можно в широких пределах изменять порядок выделепия предельных и непредельных углеводородов. Приведенные ниже данные получены одним из авторов совместно с Л. Н. Васильевой [609]. Влияние добавок вазелинового масла на объемы удерживания предельных и непредельных углеводородов показано па рис. V. 3. В ка- [c.84]

Как показывает этот рисунок, первоначальное добавление в подвижную фазу небольших количеств ионов-модификаторов приводит к их преобладающей абсорбции неподвижной фазой. Однако неподвижная фаза быстро насыщается этими ионами, кривые распределения сглаживаются, а величина Ку уменьшается. Поэтому влияние изменения концентрации ионов-модификаторов должно быть гораздо заметнее в области низких, а не высоких концентраций. По этой причине Кромбин и др. [82] и Барта и др. [81]. предложили использовать для описания ион-парной хроматографии в качестве основного параметра концентрацию ионов-модификаторов в неподвижной фазе. Однако этот параметр неудобен, поскольку требует знания изотерм распределения. На практике обычно используют график зависимости удерживания (1п ) от логарифма концентрации ионов-модифи-каторэв в подвижной фазе (ln[Y]). Такие зависимости обычно имеют вид прямых (или немного искривленных, но монотонных Линий) в широком диапазоне концентраций пример такой зависимости приведен на рис. 3.30. [c.123]

Влияние органических модификаторов подвижной фазы. В обращенно-фазовой ион-парной хроматографии органические модификаторы элюента могут влиять как на удерживание, так и на селективность. Изотерму распределения противоионов, а следовательно, и удерживание более всего определяет количество добавленного модификатора. Растворимость ионов-модификаторов в подвижной фазе представляет собой второстепенный фактор. Для растворения в подвижний фазе достаточных количеств больших ионов-модификаторов может потребоваться высокое содержание органического растворителя в подвижной фазе. В принципе тип органического растворителя можно использовать в качестве пара.метра для оптимизации обращенно-фазовой ион-парной хроматографической системы. Однако вследствие широкого выбора других параметров эта возможность еще широко не исследовалась. [c.126]

В адсорбционной хроматографии на полярных сорбентах (например на силикагеле) в качестве основы подвижной фазы используют, как правило, неполярный алифатический углеводород, чаще всего н-гексан или н-гептан. Для получения требуемой полярности подвижной фазы добавляют более полярный растворитель, например метиленхлорид или хлороформ. В качестве другого компонента, имеющего влияние на удерживание разделяемых веществ, в подвижную фазу добавляют некоторые из алифатических спиртов (метанол, этанол, изопропанол),причем добавляют сравнительно малое количество — не более 1%. Аналогичное спиртам влияние имеют следовые количества воды (до 0,1%). В этом случае, однако, возникают затруднения, связанные с приготовлением подвижной фазы с определенным количеством такой добавки и поддержанием в ней постоянного состава (система должна быть совершенно уравновешена, ина-le вода может сорбироваться на стационарной фазе, и состав подвижной фазы в поцессе разделения будет изменяться). Некоторые авторы отдают предпочтение применению в качестве модификатора подвижной фазы простых эфиров, в частности метил-трег-бутилэфира, который имеет преимущество перед диэтиловым эфиром с точки зрения техники безопасности. [c.248]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология