Цистеин получение

Полученную жидкую массу подкисляют, добавляя на каждые 100 л автолизата 0,25 л концентрированной серной кислоты, которую предварительно разбавляют в 4 раза. После этого автолизат кипятят 15—20 мин. После охлаждения он готов к употреблению. Кроме белкового гидролиза в дрожжевом автолизате могут идти и другие побочные процессы — декарбоксилирование кетокислот, образование аминокислот из кетокислот, спиртовое брожение и др. После автолиза 10—12% (по сухой массе) суспензии дрожжей в течение 24 ч при 45°С в жидкой фракции автолизата содержится до 5% сухих веществ. Из общего количества азота фильтрата 50% приходится на аминный азот аминокислот тирозина, триптофана, метионина, цистеина, аргинина, гистидина и др. Кроме того, в фильтрат переходят витамины группы В — тиамин, витамин РР и др. Добавки жидкого автолизата к питательным средам определяются экспериментально. [c.110]

Сильная нуклеофильность, легкая окисляемость и кислый характер тиольной группы цистеина требуют селективного блокирования на всех стадиях синтеза. Еще в 1930 г. дю Виньо [208] впервые применил S-бензильный остаток для защиты тиольной функщ1и. Получение окситощ1на в лаборатории открыло путь для всех дальнейших синтезов с использованием цистеина и цистина. S-Бензильная группа снимается только натрием в жидком аммиаке в некоторых случаях, в особенности при синтезах инсулина, применение этого метода сопровождалось повреждением пептидных цепей. Поэтому были разработаны другие методы эффективного блокирования тиольной функции (некоторые примеры приведены в табл. 2-6). [c.134]

Меркаптаны и тиофенолы очень чувствительны к окислителям и переходят при окислении в дисульфиды. Последнее происходит часто уже при соприкосновении с кислородом воздуха. В связи с этим при получении и последующих превращениях меркаптанов чаще всего работают в атмосфере инертного газа или газа-восстановителя (азота, водорода, см. также разд. Г, 2.5.5). Процесс превращения меркаптана (тиофенола) в дисульфид обратим дисульфиды мягкими восстановителями вновь переводятся в меркаптаны (тиофенолы). (О биологическом значении этой реакции на примере системы цистин — цистеин посмотрите в учебнике.) [c.257]

Таурин ЫН —СН2СН2—ЗОдН является одновременно и амином и сульфокислотой он может быть получен из цистеина. При энергичном окислении цистеина образуется сульфокислота [c.381]

Для некоторых аминокислот известны специфические методы расщепления. Так, для расщепления треонина, в состав которого входит гидроксигруппа, можно использовать один из методов расщепления спиртов (см. ниже) — реакцией с фталевым ангидридом с последующим образованием солей с алкалоидами. Цистеин получен в оптически активном виде через диастереомеры, образуемые с галактозой [42] (схема 21). [c.56]

Необходимо иметь в виду, что здесь проблема будет рассмотрена в наиболее простом ее виде. В ряде частных случаев требуется применение специальных операций или мер" предосторожности, к которым относятся блокировка чувствительных боковых цепей (цистеин), получение выбранного изомера, если молекула А содержит две карбоксильные группы [481] или молекула В обладает двумя способными ацилироваться группами и т, д. [c.187]

Циклоцистеинилполиглицилцистеинил. Ярвис и сотр. [1140] описали получение циклических дисульфидов из ь-цистеинил-пентаглицил-ь-цистеина и ь-цистеинилгексаглицил-ь-цистеина. Полученные соединения не проявляли депрессорной (на птицах) или прессорной (на кошках) активности и не подавляли действия окситоцина или вазопрессина. [c.415]

Радиозащитное действие впервые было описано Patt и соавт. (1949). Цистеин, введенный мышам перед летальным рентгеновским облучением, предотвращал гибель большого числа л<ивотных. Полученные данные, подтверждающие реальную возможность уменьшения влияния ионизирующих излучений на биологические процессы у млекопитающих, положили начало широкому развитию исследовательских программ в целях поиска средств с выраженным защитным действием, способных обеспечить защиту человеческого организма. [c.11]

Белок растворяют в таком объеме 40 мМ раствора № I, чтобы конечная концентрация остатков цистеина составляла 1 10 " —4-10 М. К раствору белка добавляют дитиотреитол до конечной концентрации 1 10 —4-Ю " М и инкубируют 30 мин при 37°С. Далее к раствору белка добавляют раствор ДТНБ, приготовленный на том же буфере, до конечной концентрации, в 10 раз превышающей концентрацию 5Н-групп белка, и инкубируют 30 мин при 37 °С. Модифицированный белок подвергают цианолизу, добавляя к инкубационной среде водный раствор цианистого калия до конечной концентрации, в 20 раз превышающей концентрацию ДТНБ в инкубационной среде. Полученную смесь инкубируют при 37 °С в течение ночи. При необходимости по окончании инкубации образец можно обессолить на маленькой колонке с сефадексом 0-50, уравновешенной 50—100 мМ бикарбонатом [c.143]

Тепловая обработка. К полученному после диализа раствору белка (измеряют объем) добавляют L-цистеин (или 2-меркаптоэтанол). до 0,03 М концентрации, ЭДТА — до 0,5 мМ и 2 М. раствором триса доводят pH до 7,5. Инкубируют при 37° С в течение 30 мин в термостатированной бане, затем раствор охлаждают до 25° С и центрифугируют при комнатной температуре. Осадок отбрасывают, а pH супернатанта увеличивают до 8,2, добавлением 2 М раствора триса, инкубируют в тех же условиях. К охлажденному до 25° С белковому раствору добавляют 1 н. СНзСООН до pH 7,0. В случае образования мути раствор центрифугируют, осадок отбрасывают. [c.222]

Хотя S-валилцистеамин был получен сплавлением валилхло-рида и хлоргидрата цистеамина [356], эта реакцня не идет, если вместо цистеамина применять цистеин [290.]. [c.266]

В качестве источников углерода дрожжевые клетки могут использовать и низшие спирты — метанол и этанол, получаемые в биотехнологии из природного газа или растительных отходов. Дрожжевая масса, полученная после культивирования дрожжей на спиртах, содержит больше белков (56 — 62 % от сухой массы) и меньше вредных примесей, чем кормовые дрожжи, выращенные на парафинах нефти, такие, как производные бензола, /)-аминокисло-ты, аномальные липиды, токсины и канцерогенные вещества. Кроме того, кормовые дрожжи имеют повышенное содержание нуклеиновых кислот — 3 — 6% от сухой массы, которые в этой концентрации вредно воздействуют на организм животных. В результате их гидролиза образуется много пуриновых оснований, превращающихся затем в мочевую кислоту и ее соли, которые могут быть причиной мочекаменной болезни, остеохондроза и других заболеваний. Тем не менее кормовые дрожжи хорошо усваиваются и перевариваются в организме животных, а по содержанию таких аминокислот, как лизин, треонин, валин и лейцин, значительно превышают многие растительные белки. Вместе с тем белки дрожжей частично не сбалансированы по метионину, в них мало цистеина и селенцистеина. Оптимальная норма добавления дрожжевой массы в корм сельскохозяйственных животных обычно составляет не более 5 —10 % от сухого вещества. [c.11]

Следует подчеркнуть, что именно ван-дер-ваальсовы взаимодействия формируют структуры, в которых остатки ys и ys , а также ys и ys оказываются сближенными на расстояние, необходимое для образования дисульфидных связей, расположение которых соответствует экспериментально полученной схеме. С другой стороны, только после образования этих связей избирательно стабилизируется единственная конформация основной цепи молекулы. Автоматическое сближение остатков цистеина при расчете плотноупакованных структур является хорошим контролем правильности найденной конформации, так как фиксация конформационных углов основной цепи допускает лишь незначительные (на 1,5-2 A) изменения расстояний между СР-атомами цистеинов, необходимые для формирования дисульфидных связей. На заключительном этапе расчета (см. рис. 1П.12) уже для целой молекулы тертиапина рассматривались конформационные возможности боковых цепей и коротких N- и С-концевых участков, расположенных за пределами системы дисульфидных связей. Участок Gly -Lys °-Lys молекулы тертиапина лабилен в интервале 0-6 ккал/моль у него имеется восемь различных конформаций основной цепи, относящихся к четырем типам. [c.311]

Полученная структура M D-пептида согласовывалась с имеющимися экспериментальными данными. В низкоэнергетических линейньтх конформациях фрагментов ys - ys и Lys - ys определенные остатки цистеина сближались и располагались в пространстве таким образом, что образование нативной системы дисульфидных связей не сопровождалось увеличением энергии. Расчетная структура M D-пептида имела только шесть прочных водородных связей с участием NH-rpynn основной цепи, поскольку связи с боковой цепью Asn легко разрывались при изменении ее конформации. Это соответствовало данным ЯМР-спектро-скопии о наличии шести медленно обменивающихся с растворителем протоков пептидных групп. Конформационная стабильность полученной структуры M D-пептида и высокое содержание в ней а-спиральных участков согласовывалось с данными спектров кругового дихроизма. [c.316]

К наиболее интересным примерам этерификации с ПФК относится взаимодействие а-аминокислОт с бёнзиловым спиртом, осуществляемое нагреванием в течение 4 час при 90— 105° [54]. Этим методом были получены хлоргидраты бензи-ловых эфиров Л-фенилаланина (выход 65%), /-цистеина (выход 45%), /-фенилаланина, /-лейцина и /-тирозина. ПФК использовалась при получении многих монофосфатов амино-сииртов, оксиэфиров, (жсиамидш. и оксинитрилов [31]. Одним из первых примеров примене л ПФК является получение фосфатов из спиртов [32J, в том числе из глюкозы [142]. [c.81]

Пролин и оксипролин полностью устойчивы к действию фермента.- Цистеин в продуктах расщепления не был обнаружен. Полуцистин, если он присутствует в продуктах расщепления, мог образоваться за счет разрыва пептидной связи при этом связь с полипептидной цепью дисульфидным мостиком сохраняется. Окисление остатков цистина в цистеиновую кислоту не должно давать способную отщепляться под действием карбоксипептидазы группу, так как она содержит заряженную боковую цепь, но восстановление и алкилирование до --S H2 ONH2-rpynn приводят к образованию нейтрального остатка. Такой остаток был недавно обнаружен [198] в гидроЛизатах, полученных при действии карбоксипептидазы на восстановленный и алкилированный пролактин, что свидетельствует о присутствия С-концевого полуцисти нового остатка. [c.233]

В растворе 9 г солянокислого /-цистеина в 2 л буферного расгвора, состоящего из 0,5 М раствора уксусной кислоты и 0,5 М буферного раствора ацетата натрия, растворяют 155,5 г (0,75 моля) N ацетил-З-фенилаланина при нагревании до 50°. Полученный раствор смешивают с 80 г (0,75 моля) п-толуидина и 150 мл раствора папаина (примечание 3), разбавляют до 3 л буферным раствором и нагревают при температуре 40° в течение 7 дней (pH 4,6), после чего выдерживают смесь при температуре 5° в течение 2 час. Выпавший ге-толуиднд Ы-ацетил-3-/-фе-нилалапина отделяют, промывают 1 л воды и сушат на воздухе (примечание 4). Выход 102—106 г (92—95%), т. пл. 215—217°. Дальнейшую очистку проводят перекристаллизацией из 1,25 л горячего 96%-ного спирта. Полученные кристаллы промывают 500 жл холодного спирта. Выход 86—89%, т. пл. 219°, [ 1 0 + 35 Г (с = 4, в пиридине). [c.240]

Газовая хроматография [69]. Этерификация 16 пропанолом-2 и последующая реакция с фосгеном дают с хорошим выходом тиазолидин-2-он (17) (схема 8.5). Последующее хроматографирование на капиллярной колонке, покрытой ХНФ ХЕ-60-г-валин-(Я)-а-фенилэтиламидом (хромнак), при 170°С с водородом в качестве газа- Носителя позволяет разделить полученные производные с прекрасным разрешением. При этом также разделяется неметилированный аналог пеницилламина — цистеин (рис. 8.12). Значение селективности [c.200]

После проведения гидролиза белка полученную смесь аминокислот необходимо разделить и количественно проанализировать. Метод газо-жидкостной хроматографии привлекает своей быстротой и чувствительностью, в особенности метод хромато-масс-спек-трометрии [10]. Разумеется, необходимо перевести свободные аминокислоты в более летучие для ГЖХ производные и в этом состоит трудность. Большинство известных методов включает две реакции образование сложного эфира по карбоксильной группе и ацилирование аминогруппы. Крайне важно, чтобы обе реакции протекали практически нацело, а образовавшиеся производные можно быЛ о бы разделить. Несколько сотен опубликованных за последние 25 лет работ свидетельствуют о трудностях, которые при этом возникают. Карбоксильную группу обычно переводят в сложноэфирную, используя простые радикалы от метила до пентила, в то время как для защиты амино- или иминогруппы популярны iV-трифтораце-тильная и JV-гептафтормасляная группы, так как они позволяют проводить ГЖХ-анализ с высокой чувствительностью при использовании детектора электронного захвата. Трудности связаны с ацилированием гуанидиновой группировки аргинина и термолабильностью производных цистеина из-за реакций -элиминации. Обсуждаемая техника и соответствующая литература коротко изложены в обзоре [11]. [c.260]

Цистеиновые протеиназы [65] очень сходны с сериновыми. Объектом большинства работ служил папаин. В настоящее время известна трехмерная структура этого фермента [66]. Папаин состоит из одной полипептидной цепи почти того же размера (212 остатков), что и у химотрипсина, с характерной глубокой впадиной , содержащей участок связывания субстрата. Папаин инактивируется иодуксусной кислотой, которая, как известно, алкилирует тиоловые группы. Так как шесть из семи остатков цистеина фермента связаны в дисульфидные мостики, в реакции принимает участие единственная свободная HS-rpynna цистеина-25. Имеется убедительное доказательство образования ацилфермент-ного интермедиата как и в случае химотрипсина, можно приготовить циннамоилпапаин. Последующий его гидролиз проходит без осложнений, вносимых на стадии ацилирования [67]. Более того, УФ-спектр ацилфермента, полученный в реакции папаина с тиоэфиром (42), соответствует ожидаемому спектру дитиоэфира (43) [68]. [c.498]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология