Аминокислоты определение аминного азота метод

Задача 37.15. Реакция первичных алифатических аминов с азотистой кислотой приводит к количественному выделению азота в виде газа, что является основой метода определения аминного азота по Ван-Слайку. Какой объем азота (при нормальных условиях) выделится при обработке 0,001 моля следующих аминокислот а) лейцина б) лизина в) проли-на [c.1045]

Основные научные работы относятся к теории растворов. Разработал (1903) общий метод синтеза аминокислот и метод количественного определения аминного азота. [c.460]

На этой реакции основано количественное определение (по выделяющемуся азоту) первичной аминогруппы в алифатических и ароматических аминах, в аминокислотах и незамещенных амидах кислот (метод Ван-Сляйка). [c.66]

Другим методом количественного определения азота является метод Кьельдаля. При ЭТОМ вещество подвергают разложению нагреванием с концентрированной серной кислотой в присутствии ртуть- или селеносодержащего катализатора при этом происходит во.сстаиовление до аммиака. После добавления едкого кали и перегонки ацидиметриче- ски определяют количество образовавшегося аммиака в дистиллате. Метод Кьельдаля с успехом применяется для количественного определения азота в аминокислотах и аминах, однако он неприменим для анализа нитро- и азосоединений. [c.33]

Метод Ван Слайка нашел широкое применение для определения аминного азота в аминокислотах и белках [40], однако его можно использовать для анализа многих первичных аминов. [c.462]

Спектрофотометрическое определение (реакция с нингидрином) [119]. Смешивают 1 мл анализируемого раствора, содержащего 0,05—5,6 мкг аминного азота, с 0,5 мл нитратного буферного раствора (pH 5) и 0,2 мл 5%-ного раствора нингидрина в метил-целлозольве. Для приготовления указанного буферного раствора 21,008 г моногидрата лимонной кислоты растворяют в 200 мл воды, прибавляют 200 мл 1 н. раствора едкого натра и разбавляют водой до 500 мл. К 1 мл полученного раствора, содержащего аминокислоту и нингидрин, приливают 5 мл 0,01 М раствора цианида калия и 245 мл метилцеллозольва. Смесь нагревают в течение 15 мин до 100 °С, затем 5 мин охлаждают и разбавляют спиртом до соответствующего объема. Измеряют оптическую плотность при 570 нм (в случае пролина и гидроксипролина при 440 нм). Аналогичный метод описан в работе [120]. [c.174]

Реакция применяется для определения аминного азота в аминокислотах, пептидах и белках (метод ван-Сляйка). [c.464]

Реакции аминогруппы. При взаимодействии с азотистой кислотой -аминокислоты, подобно алифатическим аминам (см. 6 2), подвергаются дезаминированию. Измерение объема выделившегося в этой реакции азота лежит в основе количественного определения аминокислот (метод Ван-Слайка). [c.410]

При окислении альфа-аминокислот нингидрином при pH 1 образуется аммиак, двуокись углерода, восстановленный нингидрин и другие продукты. При pH выше 3 аммиак, восстановленный нингидрин и невосстановленный нингидрин образуют окрашенное в синий цвет соединение. Оно гидролизуется при pH 11 с выделением азота в виде аммиака, который затем, после аэрации, определяют реактивом Несслера. Метод применяют для определения альфа-аминного азота, хотя он дает некоторую ошибку вследствие того, что оксипролин, пролин и триптофан взаимодействуют с нингидрином при pH 1 не количественно. Из 23 исследованных альфа-аминосоединений для 14 точность результатов количественных определений находилась в пределах 5%, а для 16 соединений — в пределах +10%. [c.115]

Эта реакция была использована Ван-Слайком для разработки метода количественного определения аминокислот. Измерив объем выделившегося азота, в определенных стандартных условиях и разделив найденное количество азота на два (исходя из того, что аминокислотам принадлежит лишь половина выделившегося азота), можно определить количество аминного азота, имевшегося в растворе. [c.239]

Определение аминного азота аминокислот по ван Сляйку [197]. Аминогруппа, присутствующая в аминокислотах, проявляет такое же отношение к действию азотистой кислоты, как и обычная аминогруппа первичных аминов, т. е. замещается на гидроксильную группу с одновременным выделением азота. Поэтому для определения азота аминогруппы в аминокислотах может быть использован тот же метод ван Сляйка, который применяется при анализе первичных алифатических аминов, изложенный на стр. 145. Никаких существенных изменений в методику вносить не требуется. 1 мл выделяющегося азота соответствует 0,585 мг азота аминогруппы. [c.270]

Экспериментально было установлено, что метод титрования формальдегидом дает заниженные результаты при определении аминного азота в таких аминокислотах, как лизин. Несколько менее заниженные результаты получаются при анализе некоторых других аминокислот, например, гистидина и фенилаланина. Как показывает опыт, истинные конечные точки при титровании индивидуальных аминокислот не соответствуют одной и той же величине pH. При титровании смесей всегда необходимо выбрать для конечной точки определенное значение pH и в зависимости от этого [c.211]

Алифатические диазосоединения. Ранее была рассмотрена (стр. 173) реакция первичных алифатических аминов с азотистой кислотой, приводящая к образованию спиртов и олефиновых углеводородов. Эта реакция имеет особое значение для аминокислот, так как по объему выделившегося азота можно определить количество аминогрупп. Метод Ван-Слайка для определения аминогрупп в аминокислотах, пептидах и белках основан на этой реакции. [c.474]

Осн. работы относятся к теории р-ров. Разработал (1903) общий метод синтеза аминокислот и метод колич. определения аминного азота. Выполнил цикл работ по определению концентрации водородных ионов в водных р-рах. Ввел (1909) понятие водородного показателя (pH). Показал (1909) зависимость активности ферментов от величины pH. Разработал стандартные р-ры для приготовления буферных смесей с известными pH. Изучал природу р-ров белков как системы [c.406]

При определениях аминного азота методом Ван-Сляйка необходимо учитывать, что наиболее быстро реагируют с азотистой кислотой аминогруппы, расположенные в а-положении по отношению к карбоксилу для всех аминокислот эта реакция при температуре 20° заканчивается через 5 минут. [c.14]

Характер взаимодействия азотистой кислоты с аминокислотой сходен с рассмотренным выше для случая обычных аминов (разд. 19-6,В, см. также упражнение 19-21, а). Первичные амины реагируют с выделением азота, причем промежуточно образуются соот-ветствуюш,ие диазониевые соединения вторичные амины превращаются в нитрозосоединения, а третичные обычно не вступают в реакцию. Измерение количества азота, выделяющегося при обработке аминокислот или их производных азотистой кислотой, лежит в основе широко применяемого метода анализа на свободные NHa-группы аминокислот (определение аминного азота по Ван Сляйку). В случае аминокислот, так же как в случае аминов, взаимодействие с азотистой кислотой не может рассматриваться как вполне удовлетворительный препаративный метод превращения RNHa в ROH. [c.107]

Была также показана возможность синтеза пиримидил-Ы-а-амино-кислот на основе конденсации р-дикарбонильных соединений и их аналогов с а-амино-со-гуанидоалифатическими кислотами. В частности, было установлено, что аргинин способен вступать с малоновым эфиром в конденсацию, приводящую к получению соответствующей пиримидиламинокислоты. В этом случае возможно образование как пиримидил-Ы-а-аминокислоты, так и N-пиримидил-а-аминокислоты [33]. Однако в пределах чувствительности методов хроматографии и электрофореза, в реакционных смесях обнаруживается лишь одно вещество, способное поглощать УФ-лучи и одновременно проявляться нингидрином. Определение аминного азота по Ван-Слайку показало, что в полученном веществе имеются две свободные аминогруппы. Это однозначно указывает на структуру пиримидил-Ы-а-аминокислоты и позволяет исключить из рассмотрения изомерную ей структуру [33]. Аналогичные результаты были получены при конденсациях аргинина с ацетоуксусньш, формил-уксусным и циануксусным эфирами [34, 35]. [c.339]

Сёренсен предложил метод синтеза аминокислот и метод определения аминного азота. [c.579]

Ацидиметрическое определение аминного азота. Разработан метод прямого титрования аминного азота в аминокислотах, дипептидах, амидах и т. п. спиртовым раствором соляной кислоты (0,1 и. H I в 90%-ном спирте) с применением of-нафтилкрасного в качестве индикатора. [c.202]

Принцип метода. Сущность медного способа определения аминного азота состоит в том, что аминокислоты реагируют с солями меди с образованием растворимого медного комплекса. Избыток меди удаляют из раствора, и содержание меди в растворе может быть определено либо йодометрически, либо с помощью диэтилдитиокар-бамата натрия, который количественно разлагает медные соединения с аминокислотами, давая при этом желтое окрашивание. Оптическая плотность окрашенного раствора определяется колориметрически. Линейная зависимость между количеством большинства аминокислот сохраняется в пределах от 1 до 30 микрограммов (мкг) аминного азота. [c.23]

Для выявления адсорбционных свойств различных смол применялись колонки, содержавшие 1—2 г тонкозериенных катионитов при высоте слоя адсорбента в колонке 10—14 см или 1—4 г анионитов. Через колонки фильтровались со скоростью 15—20 капель в мин. 0,1—0,2 н. растворы аминокислот или их смесей в количестве, необходимом для полного илтг частичного насыщения адсорбента. После промывания колонок водой адсорбированные аминокислоты вытеснялись 0,05 п. растворами пиридина, аммиака или соляной кислоты. Фильтрат собирался небольшими порциями, в 1 оторых производились определения кислотности, аминного азота и аминокислотного состава качественно — методом распределительной хроматографии на бумаге и, в случае необходимости, количественно колориметрическими или весовыми методами. В некоторых опытах определялись также общий азот и аммиак. [c.136]

Существенным моментом при проведении полного гидролиза белков является определение его конца. Обычно конец гидролиза устанавливают по прекращению нарастания аминного азота (определяемого методом ван Сляйка) и выражают его в процентах от количества общего азота. Эта величина не достигает 100%, если белок содержит аминокислоты, в которых азот находится не только в виде а-аминного, например, содержит аргинин, гистидин, пролин и т. д. [c.478]

Метод электрохимического восстановления на ртутном катоде дал возможность судить о количестве дикетопиперазинов и пептидов в природном белке. Было доказано, что дикетопиперазиновые структуры входят в состав белковых молекул. Метод ионофореза позволял следить за поведением циклических структур при различных деструкциях белка [288]. Биуретовая реакция [269] оказалась надежным сродством для суждения о длине полипептидной цепочки в микромолекуле белка. Сущность биуретовой реакции сводится к образованию медных комплексов рядом азотсодержащих веществ (белки, пептоны, амиды, амины, аммиак). Определение медных чисел белка, спектрофотометрические кривые медных комплексов позволили установить, что пептидные цепочки в белке чаще всего построены из трех и во всяком случае не более чем из пяти остатков аминокислот. С другой стороны, относительное уменьшение аминного азота при гидролизе после восстановления белка дает ключ к выявлению относительного количества дикетопиперазинов. Результаты всех этих определений привели к таким выводам в молекуле желатины на каждое дикетопиперазиновое кольцо приходится четыре аминокислоты, у альбумина крови — пять. [c.268]

Метод используется для количественного определения аминогруипы (по объему выделившегося азота) в алифатических первичных аминах, аминокислотах, пептидах, белках. Вторичные амины в условиях реакции превращаются в нитрозамины, третичные — в солн. [c.104]

Отгонка аммиака используется в широко известном методе определения азота в органических соединениях по Кьельдалю. В простейшем варианте этого метода пробу обрабатывают при нагревании концентрированной серной кислотой в присутствии солей ртути (катализатор), в результате чего органические соединения окисляются до СО2 и Н2О, а азот переходит в ЫН4Н504. После охлаждения к остатку добавляют раствор щелочи и отгоняют ЫНз в отмеренный объем титрованного раствора кислоты, а затем определяют избыток кислоты, не вошедшей в реакцию с аммиаком, и рассчитывают массу азота в пробе по формуле обратного титрования. Методом Кьельдаля можно определять азот в аминах, аминокислотах, алкалоидах и многих других азотсодержащих соединениях. Некоторые соединения можно проанализировать по методу Кьельдаля только после предварительного разложения или восстановления хлоридом олова (И) или цинковой пылью (азотсоединения, производные гидразина и т. д.) [c.215]

Дезаминирование первичных аминов азотистой кислотой сопровождается выделением азота, количество которого можно определить по объему на этом основан метод Ван-Сляйка для количественного определения соединений, содержащих первичную амино- группу (алифатических и ароматических аминов, аминокислот, незамещенных амидов). [c.232]

Имеется ряд других методов превращения органического азота в аммиак [1702]. Амиды и производные амидинов могут быть подвергнуты гидролизу щелочью, в то время как а-аминокислоты выделяют аммиак при обработке гидратом трикетогидриндена. При помощи последнего соединения может быть непосредственно определен изотопный состав азота аминной группы. [c.91]

На основе этой реакции разработан метод определения первичных аминов, первоначально предназначавшийся для анализа аминокислот (метод ван Сляйка). Количество амина вычисляют на основании объема выделяющегося азота, измеряемого в соответствующей аппаратуре (см. стр. 145). [c.139]

Органич. К. а. резко отличается от неорганич. анализа. Подавляющее большинство органич. соединений имеет ковалентный характер и потому каждое из них должно идентифицироваться индивидуально. Для этого сначала проводят реакции, определяющие принадлежность соединения к к.-л. классу органич. соединений, а затем — реакции, характерные для данного соединения. В органич, К. а. смесь веществ первоначально разделяют, основываясь на их разной летучести, растворимости или сорбции. К легколетучим относят вещества с т. кин. ниже 160°, к труднолетучим — ст. кип. выше 160°. Затем вещества разделяют по классам согласно их растворимости, преим. в воде и эфире. Наконец, применяют групповые реакции, с помощью которых устанавливают присутствие классов химич. соединений (спирты, фенолы, кислоты, амины и проч.). Некоторые химич. реакции позволяют перевести малоразличимую смесь веществ в вещества с достаточно различными физич. свойствами, что дает возможность отделять их далее посредством дистилляции или растворением. Напр., можно превратить смесь поликарбоновых к-т и аминокислот в летучие сложные эфиры, сравнительно легко разделяемые. При идентификации выделенного чистого вещества большое значение имеет элементарный К. а., проводимый обычными методами для открытия углерода, водорода, азота, серы, галогенов, фосфора, мышьяка и металлов, а также испытание основных физич. свойств (темп-р плавления и кипения, растворимости и определение молекулярного веса). См. также Элементарный анализ, Функциональный анализ. [c.252]

Другой вариант использования метода ЯМР для определения оптической чистоты основан на применении оптически активных растворителей, в которых различные химические сдвиги дают энантиотопные атомы, имеющиеся в оптических антиподах. Этим методом были определены оптическая чистота 2,2,2-трифтор-1 -фенилэтанола с использованием ( + ) -а-фенилэтиламина в качестве растворителя, оптическая чистота аминов и метиловых эфиров а-аминокислот с применением в качестве растворителя ( — )-2,2,2-трифтор-1-фенилэтанола. Различия в химических сдвигах связаны с образованием диастереомерных сольватов. При взаимодействии антиподных метиловых эфиров а-аминокислот с 2,2,2-трифтор-1-фенилэтанолом образуются диастереомерные сольваты (193) и (194). Их существование обеспечивается взаимодействием атома водорода гидроксильной группы с атомом азота аминогруппы и л-электронного облака бензольного ядра с атомом углерода карбоксигруппы, несущим частичный положительный заряд. Условия образования сольвата (193) выгоднее, чем сольвата (194), так как во втором случае взаимодействию ядра и атома углерода карбоксигруппы мешает радикал аминокислоты, повернутый в сторону ядра. [c.112]