Конкурентные методы

КОНКУРЕНТНЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА [c.258]

Рис. 122. Влияние соотношения констант ассоциации меченого и определяемого лигандов на относительную чувствительность конкурентного метода анализа —анализ проводится в оптимальных условиях для Ко 2 — анализ про-

Константы образования комплексов с 13 и другими реагентами в большинстве случаев определяются основностью лигандов и стери-ческими факторами. Исследования, проводимые конкурентным методом с использованием 13 (М = Ей) и пары лигандов или бифункциональных [c.308]

КОНКУРЕНЦИЯ ДВУХ ОДНОВАЛЕНТНЫХ ЛИГАНДОВ ЗА ОДИН ЦЕНТР СВЯЗЫВАНИЯ. КОНКУРЕНТНЫЕ МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ РАВНОВЕСНЫХ КОНСТАНТ. КОНКУРЕНТНЫЕ МЕТОДЫ АНАЛИЗА [c.230]

Процессы связывания, протекающие по схеме (10.1) — (10.2), часто используются в двух аспектах а) для определения равновесных констант комплексообразования с помощью конкурентного вытеснения меченого лиганда изучаемым б) для аналитического определения концентраций лигандов конкурентным методом. Рассмотрим эти аспекты применения систем конкурентного связывания подробнее. [c.247]

Общий принцип конкурентных методов анализа следующий. К системе, содержащей определяемый лиганд, добавляют известное количество меченого лиганда (либо того же самого, если метки — зн, С, 2Р, либо близкого по молекулярному строению или структуре, если метки — или в качестве метки вы- [c.258]

Полученные результаты сравнивают с калибровочной кривой и по ней определяют концентрацию исследуемого лиганда. В зависимости от типа используемых центров связывания конкурентные методы анализа могут быть подразделены на отдельные виды иммуноанализ (центры связывания — антитела), рецепторный анализ (центры связывания — растворимые и мембранные рецепторы), [c.258]

Несмотря на то что конкурентные методы, представленные в табл. 32, основаны на использовании различных типов центров связывания, теоретическое их описание близко и в самом простейшем случае основано на схеме (10.1) — (10.2). Ключевыми характеристиками любого метода анализа, в том числе и конкурентного, являются чувствительность и специфичность. Остановимся подробно на том, какие факторы определяют эти характеристики для конкурентных методов анализа. При этом для простоты будем полагать, что процесс конкурентного связывания меченого и це-меченого лигандов протекает по схеме (10.1) —(10.2). [c.259]

Одним из основных требований, предъявляемых к конкурентным методам анализа, является специфичность метода по отношению к определяемому соединению. Специфичность метода анализа часто характеризуется параметром относительной способ- [c.266]

ДЬв)о — чувствительность конкурентных методов анализа [c.340]

Конкурентные методы анализа......... [c.344]

Определение констант связывания конкурентными методами [c.344]

В заключение приведем результаты недавно выполненной работы Ю. М. Азизова с соавторами [95], исследовавших влияние давления на скорость разложения перекиси водорода каталазой. Определение велось конкурентным методом в качестве конкурентной реакции служило окисление аскорбиновой кислоты перекисью водорода в присутствии пероксидазы. Ранее Азизовым было показано, что давление в 1000 атм практически не влияет на скорость пероксидазного окисления аскорбиновой кислоты. [c.241]

Здесь имеет смысл кратко остановиться на вопросе о применимости конкурентных методов для изучения химических реакций с участием катион-радикальных интермедиатов. Такой подход был использован для оценки относительной реакционной способности ряда замещенных бензолов [13, 14]. Эти реакции протекают через быстрое обратимое взаимодействие окислителя с ароматическим соединением, приводящее к образованию соответствующего катион-радикала. Лимитирующей стадией является идущая после равновесия химическая реакция, такая, как отщепление протона. Исходные концентрации обоих субстратов были одинаковыми. Соотношение двух ион-радикалов, определенное по значению /< равн гомогенных реакций переноса электрона, оказывает влияние на полученную таким образом относительную реакционную способность. Поэтому при простом применении этого метода следует соблюдать осторожность, особенно если заранее известно, что скорость гомогенного переноса электрона велика и равновесие сильно смещено в одну сторону. [c.101]

Приведенные выше реакции включают стадии, в которых устанавливается предварительное равновесие. В некоторых из них можно и не обнаружить продуктов равновесия. Однако об их присутствии можно судить либо при помощи конкурентных методов по составу конечных продуктов, либо по порядку реакции в отношении исходных реагентов. [c.134]

Предполагают, что Си(1П) реагирует аналогичным образом, так как использование конкурентных методов показало, что нри разложении Си(П1) в кислых растворах [26] образуются радикалы ОН-. [c.138]

Gr(VI) в воде существует в нескольких состояниях [146]. Изучение этого процесса при помощи конкурентных методов [148] и индукционное окисление [149] убедительно показало, что при окислении хромом(У1) в качестве промежуточных соединений будут образовываться комплексы r(IV) и r(V). Примером индуцированного окисления является следующая реакция [c.149]

Рис. 23. Схемы конкурентных методов твердофазного анализа

А — прямой конкурентный метод Б — метод последовательного насыщения В — метод [c.117]

Конкурентные методы анализа используют для различных антигенов, но чаще всего для определения гаптенов. Они отличаются простотой постановки реакции, но имеют ряд ограничений. Во-первых, в конкурентных методах предъявляются высокие требования к стандартизации количества связанных и добавленных реагентов. Во-вторых, чувствительность этих методов определяется в основном константой связывания антител. [c.118]

Метод отскока (динамический метод) не относится к акустическим методам неразрушающего контроля. Однако он кратко рассматривается, как конкурентный методу контактного импеданса. Метод отскока имеет несколько вариантов, наиболее известный и широко применяемый из которых - метод Лееба [422, [c.777]

При конкурентном методе РИА на поверхности полистироловых лунок сорбируют известные АТ. Затем в лунки вносят исследуемый антигенсодержащий материал и спустя определенное вре- [c.81]

При взаимодействии с высокоактивными электрофилами зафиксированы случаи, когда согласованность между изменением субстратной и позиционной селективности нарушается. Так, при изучении конкурентным методом относительных скоростей реакций замещения метилбензолов в нитрометане при нитровании тетрафторборатом нитрония или бромировании системой Вгг,— [c.91]

В ряде случаев прямое измерение константы ассоциации комплекса белок — органический лиганд невозможно либо вследствие недоступности меченого соединения, либо вследствие небольшого значения величины константы ассоциации. В этих случаях обычно используют методы определения констант связывания, основанные на вытеснении лиганда с Известной константой связывания исследуемым лигандом. Рассмотрим некоторые из этих методов. Во избежание возможной путаницы будем обозначать индексом 1 все, что относится к лиганду с известной константой, индексом 2 — все, что относится к лиганду с определяемой константой. Суше-ствующие конкурентные методы определения равновесных констант можно подразделить на два типа а) методы, основанные на ингибировании связывания ( вытеснении ) первого лиганда с постоянной концентрацией Lia возрастающими концентрациями второго лиганда Lia (см. рис. 108) б) методы, основанные на анализе равновесных кривых связывания первого лиганда в присутствии постоянной концентрации второго лиганда Ьга (см. рис. 109, ПО). Выбор метода зависит от условий эксперимента, доступности лигандов, поэтому трудно отдать предпочтение какому-либо одному из них. [c.248]

Глава 10. Конкуренция двух одяовалеитных лигандов за один центр свя зывания. Конкурентные методы определения равновесных констант [c.344]

Существует несколько подходов к оценке чувствительности конкурентных методов анализа. Чувствительность характеризуют тангенсом угла наклона кривой зависимости какого-либо параметра связывания. от концентрации лиганда La (Yalow, Berson, 1968) и определяют как минимально измеряемую из данной кривой концентрацию лиганда (ALa)o (Ekins et al., 1968). Последнее определение является более корректным и поэтому будет служить [c.260]

Рис. 120. Зависимость чувствительности конкурентного метода анализа от кгастанты ассоциации Ка=К а н наличия в системе экспериментальных ошибок в помимо ошибки за счет статистики радиоактивного распада (данные работы Ekins et al., 1968) в в % / 0 2 — 0,5 S -l 4-5

Рис. 123. Зависимость относительной чувствительности конкурентного метода анализа от константы ассоциации меченого лиганда (константа сродства немеченого лиганда равна 10" М ) и наличия в системе экспериментальных ошибок (помимо ошибки за счет статистики радиоактивного распада) (данные работы Ekins et al., 1968) е в % /—0 2 — 0,1

Рассмотрим теперь, как можно учесть неспецифическое связывание при определении равновесных констант комплексообразования конкурентными методами. Для примера остановимся на методе вытеснения двумя одновалентными лигандами меченого лиганда (с. 251) (Blondeau et al., 1978). В присутствии неспецифичеокого связывания (практически ненасыщаемого) имеем [c.298]

Иной путь (,,конкурентный метод ) предлагает Ингольд. Определяют относительные скорости замещения, внося, например, недостаточное количество азотной кислоты в эквимолярную смесь бензола и хлористого бензила. Так можно установить, что группа СН2С1 затрудняет дальнейшее замещение, причем в лета-положении сильнее, чем в орто-пара-положениях. [c.486]

Кроме того, циклопентин с его чрезвычайно большим напряжением и реакционной способностью является особым случаем и может оказаться, что конкурентный метод не даст надежных [c.44]

Если на первой стадии анализа в системе одновременно присутствует анализируемое соединение и его аналог (меченное ферментом анализируемое соединение или анализируемое соединение, иммобилизованное на твердой фазе), конкурирующие за имеющиеся в относительном недостатке центры специфического связывания, то метод является конкурентным. Необходимым условием конкурентного метода является недостаток центров специфического связывания по отношению к суммарной концентрации анализируемого соединения и его аналога, так как в противном случае каждый из процессов образования иммунокомплексов может происходить независимо от другого, а следовательно, определяемая экспериментально концентрация метки не будет зависеть от концентрации анализируемого соединения в растворе. [c.81]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология