Анализ рецепторный

Механизм волосковых клеток удивительно чувствителен самые слабые звуки из тех, какие мы только можем слышать, растягивают вертикальные нити, прикрепленные к верхушкам стереоцилий, в среднем на 0,04 нм, что вдвое меньше диаметра атома водорода. Анализ рецепторного тока показывает, что в стереоцилий, вероятно, находится от одного до пяти механически регулируемых каналов. Каждая слуховая волосковая клетка человека несет около сотни стереоцилий, а в одном ухе имеется около 3500 таких клеток, так что способность слышать нам обеспечивают менее 4 млн. молекул-преобразователей. [c.341]

Влияние, которое оказали результаты рентгеноструктурного анализа белков на изучение их фракций, детально рассматривается в следующем томе настоящего издания. Здесь хотелось бы обратить внимание на то, что наличие уже в течение нескольких десятилетий уникальной структурной информации все еще не привело к концептуальному развитию или переосмыслению представлений о природе и принципах функционирования белков, сложившихся до становления кристаллографии макромолекул. Ставшие доступными данные рентгеноструктурного анализа о пространственном строении белковых молекул не вызвали качественных изменений в понимании биокатализа, гормон-рецепторных взаимодействий и многих других явлений. Функционирование биосистем молекулярного уровня не обрело строгой трактовки в рамках сформулированных ранее концепций ферментативных и иных реакций, равно как и последние не получили на основе структурных данных своей объективной оценки. По-прежнему, фундаментальные различия между обычными химическими реакциями в растворе и реакциями, осуществляемыми ферментами, продолжают видеться в напряжении и деформации субстрата при его сорбции в активном центре в сторону переходного состояния, в индуцированном соответствии и принудительных конформационных изменениях фермента, в его изна- [c.75]

Как мы увидим ( 17.8), применение теории информации в биологии требует анализа последствий рецепции сообщения. Учет этих последствий означает, что нужно изучить сам акт рецепции как необратимый, неравновесный процесс перехода рецепторной системы из менее устойчивого состояния в более устойчивое. При этом происходит запоминание информации. [c.306]

Установки спектрометрического и спектрографического анализа аналогичны, за исключением устройства их рецепторной части. В фотоэлектрических установках свет после диспергирующего элемента через специальные щели в фокальной плоскости попадает на фотоэлемент или фотоумножитель, соединенный с накопительным конденсатором и далее с регистрирующим потенциометром. Одна из щелей в приборах с фиксированными приемниками света предназначена для линии сравнения, а остальные — для линий анализируемого элемента или элементов. В приборах этого типа для каждой линии предусмотрен свой фотоэлектрический приемник. В сканирующих спектрометрах измерение интенсивности линии определяемого элемента производится фотоэлектрическим приемником, который передвигается вдоль спектра по специальной программе. Фотоэлектрический измерительный блок может также использоваться в качестве приставки к спектроскопу или спектрографу. Такой блок, состоящий из входной щели и фотоэлемента или фотоумножителя с измерительным устройством, устанавливается на место кассеты для фотопластинки. Сконструированный таким образом простой спектрометр может быть эффективно применен для анализа проб с несложным спектром. [c.41]

Полученные результаты сравнивают с калибровочной кривой и по ней определяют концентрацию исследуемого лиганда. В зависимости от типа используемых центров связывания конкурентные методы анализа могут быть подразделены на отдельные виды иммуноанализ (центры связывания — антитела), рецепторный анализ (центры связывания — растворимые и мембранные рецепторы), [c.258]

Зрительные процессы являются, быть может, самыми замечательными из всех биологических процессов, в которых явно участвуют возбужденные состояния молекул. Несмотря на огромное количество работ, посвященных изучению структуры сетчатки [1], спектров поглощения и биохимии зрительных пигментов [2, 25], а также исследованию психофизическими и электрофизиологическими методами различных стадий проведения и восприятия сигналов, многие детали процесса зрения либо все еще не известны, либо наши представления о них носят гипотетический характер. Импульсы, передающиеся по волокнам зрительного нерва в мозг, по-видимому, очень похожи на импульсы, приходящие из других рецепторных систем. В одних волокнах зрительного нерва частота спонтанных импульсов резко возрастает при освещении (механизм включения ), в других волокнах при освещении она уменьшается, но возрастает при выключении света (механизм выключения ). Наконец, в волокнах третьего типа частота импульсов увеличивается как при включении, так и при выключении освещения (механизм включения—выключения ) (фиг. 59) . Из анализа электроретинограммы (запись изменений потенциала сетчатки при включении и выключении света) можно увидеть, что в сетчатке возникают электрические потенциалы, достаточно большие для деполяризации нервных волокон и изменения характера разряда импульсов. [c.181]

Важнейшая область биохимических исследований, которой занимается нейрохимическая патология, связана с химическим анализом причин, вызывающих патологию мозга, возникающую под влиянием следующих факторов 1) дефицит или избыток известного или еще не обнаруженного медиатора 2) аномалии в химической структуре медиаторов и рецепторных поверхностей клеток 3) разрыв в нормальной цепи ферментативных реакций, ведущий к синтезу необычных, чужеродных организму биологически активных веществ, и др. [c.462]

Аминокислотная последовательность рецепторных белков, связывающих эстрогены, у человека и кур была установлена путем анализа нуклеотидной [c.243]

Выбор метода солюбилизации зависит от цели исследования и имеет смысл только тогда, когда дает возможность сохранить нативные свойства рецепторного белка и исследовать его с помощью обычных биохимических подходов. Поэтому выбор солюбилизирующего агента на первом этапе может оказаться ключевым для анализа сфуктуры и функции рецептора. [c.267]

Клеточные рецепторы избирательно взаимодействуют с самыми разнообразными по химическому строению веществами — от органических соединений с небольшой молекулярной массой до высокомолекулярных белков. Размеры молекул рецепторных белков, число образующих их полипептидных цепей варьируют (табл. 1). Вполне закономерно поэтому стремление выявить характерные для каждого рецептора особенности структуры участка, ответственного за распознавание лиганда. Вместе с тем анализ функциональных свойств различных по специфичности (т. е. распознающих различные лиганды) рецепторов выявляет определенные черты сходства между ними. Как было показано в гл. 2, прн взаимодействии рецепторов со своими лигандами происходит их активация, выражающаяся либо в усилении ферментативной активности рецепторов, либо в изменении их сродства к внутриклеточным белкам или ДНК. Этот процесс связан с глубокой конформационной перестройкой рецепторных белков, распространяющейся на участки, находящиеся на большом удалении от центров связывания лигандов (активные центры рецепторов). Последнее дает основание считать, что внеклеточные участки различных по специфичности рецепторов, в пределах которых находятся активные центры последних, должны использовать сходные принципы структурной организации, обеспечивающие при связывании любого по строению лиганда изменение конформации внутриклеточных участков молекул рецепторов. [c.43]

Следовательно, если диагностику сравнительно быстрых процессов (например, анализ первого прохождения индикатора) можно осуществить как с диффундирующими (например, Тс-пертехнетат, Тс-М1В1), так и с недиффундирующими РФП (например, с Тс-альбумином или с эритроцитами, мечеными Тс-8п-пирофосфатом), то для оценки метаболизма, состояния рецепторных полей и т. д. необходимы специфические этим задачам соединения. Причём даже в настоящее время многие из них могут быть мечены только позитронными нуклидами, что значительно обременительней и дороже для повседневной клинической практики. [c.312]

Следует отм етить, что предположение античных атомистов о необходимости заполнения пор органа обоняния частицами пахучих веществ для возникновения запаха было возрождено в середине XX в. Эймур [35, 36] писал, что идея так называемой сте-рео химической теории запаха о проникновении молекул пахучих веществ в определенные углубления рецепторных участков исходит от Лукреция, гипотеза которого ...была в своей основе верной . Исторический анализ, однако, дает основание полагать, что мысль об истечениях и порах была высказана почти на четыреста лет ранее Лукреция Эмпедоклом. [c.104]

Таким образом, анализ последних экспериментальных данных свидетельствует о том, что активность самых различных типов ионных каналов в целом ряде типов клеток эффективно модулируется рецепторными и цитоплазматическими тирозинкиназами и тирозинфосфатазами. [c.74]

А. Рецептор ка.1ьцитриола. Присутствующий в клетках кишечника белок с мол. массой 90000— 100000 связывает кальцитриол с высокой степенью сродства и малой емкостью. Связывание насыщаемо, специфично и обратимо. Таким образом, этот белок отвечает основным критериям, характеризующим рецептор он обнаружен во многих из перечисленных выше тканей. Если при анализе используют физиологические концентрации солей, то большая часть незанятого рецептора выявляется в ядре в связанном с хроматином виде. Это аналогично локализации рецепторов если не всех стероидных гормонов, то во всяком случае прогестерона и Т,. Остается не ясным, требуется ли для связывания с хроматином предварительная активация комплекса кальцитриол—рецептор, как это имеет место с типичными стероид-рецепторными комплексами. [c.201]

Результаты психофизических экспериментов показывают, что свойства слуховой системы отличаются от свойств обычного спектрального анализатора. Главное отличие состоит в том, что высокая точность частотного анализа обеспечивается в ней при использовании в качестве набора фильтров низкодобротной колебательной системы — основной мембраны. Кроме того, точное различение частот достигается за короткий интервал времени. Как указывалось выше, с технической точки зрения такие качества как высокая точность различения частот при низкодобротных фильтрах или точное различение при коротком времени анализа являются взаимоисключающими, несовместимыми. Они могут быть объяснены только за счет дополнительной обработки информации в нейронных структурах, расположенных выше рецепторного аппарата — основной мембраны и волосковых клеток. Выяснению принципов обработки информации о частоте и интенсивности и разработки модели нейронных структур, осуществляющих эту обработку, и посвящена гл. V. [c.75]

Рентгеноструктурный анализ гормон-рецепторного комплекса показал, что внеклеточная белковая цепь молекулы ЬОНЬр образует два хорошо различимых домена, состоящих из фрагментов 1-123 и 128-238, соединенных лабильным участком 124-127. Каждый домен содержит семь Р-тяжей, образующих сэндвичевую структуру. Большое значение в реализации гормональной функции авторы [249] отводят С-концевому октапептидному участку 239-246. При сорбции субстрата он обеспечивает необходимую для образования эффективных невалентных контактов конформационную подвижность двум доменам [c.61]

В разделах 3.1. и 3.2. были отмечены первые попытки подойти с помощью рентгеноструктурного анализа к решению проблемы структурной организации мембранных белков. Они завершились относительным успехом — установлением для ряда рецепторов трехмерных структур их периплазматических доменов, содержащих лиганд-связывающие центры. Развитие работ этого направления в конечном счете должно привести к определению пространственных структур целых рецепторных молекул, включающих также трансмембранные и цитоплазматические домены, и созданию экспериментальной основы, необходимой для решения проблемы структурнофункциональной организации молекул мембранных белков и количественного описания механизмов их функционирования. Трудности на этом пути, имеющие, главным образом, технический и препаративный характер, пока еще велики. [c.80]

Действие одиночных молекул АХ было изучено с помощью медленного внесения АХ из микропипетки в область концевой пластинки — метода, известного под названием микроионофоре-за. При отведении от концевой пластинки регистрировалась ожидаемая медленная деполяризация, но, кроме того, на нулевой линии были видны маленькие флуктуации (рис. 9.2В). На основании анализа шума было выдвинуто предположение, что они связаны с открыванием и закрыванием ионных каналов одиночными молекулами АХ в процессе их взаимодействия с рецепторными молекулами постсинаптической мембраны. Отведения по методу локальной фиксации (ракЬ-с1атр) показали, что через эти каналы проходят кратковременные трансмембранные токи (см. также гл. 8). [c.207]

Рис. 13.8. Экспериментальный анализ преобразования в тельце Пачин . А, На схеме изображены стерженек для стимуляции интактного тельца и отведение активности от иерва. Внизу — регистрация рецепторного потенциала и импульсации. Б. Повторение опыта после удаления пластинок. В. Чувствительность тельца Пачини к вибрационной стимуляции при разной частоте.-(А, Б — Loewenstein, 1971 В —S hmidt, 1978, с изменениями.)

Дальнейшего проникновения в механизмы частотного анализа на рецепторном уровне можно достичь, рассмотрев ухо у низших позвоночных. У амфибий волосковые клетки содержатся в удлиненном кусочке ткани, называемом папиллой (см. рис. 15.7). Эти клетки обладают сравнительно острой настройкой, и в них тоже происходит двухтоновое подавление, несмотря на отсутствие базилярной мембраны (и ее бегущей волны). У рептилий, например у ящериц, текториальная мембрана покрывает только низкочастотную область папиллы, и предположено, что высокочастотная избирательность зависит от градуальных различий в длине цилий волосковых клеток. У птиц механическая передача в среднем ухе происходит только через одну косточку, а в клеточных компонентах улитки имеется ряд особенностей. Так, сравнительные исследования показывают, что некоторые свойства, такие как бегущая волна, являются адаптациями для определенных видов, а основной механизм частотной избирательности и взаимодействия частотных ответов, возможно, зависит от особых свойств самих волосковых клеток. Теперь существует предположение, что в общем линейные свойства базилярной и текториальной мембран, наблюдаемые в настоящее время, могут быть значительно изменены нелинейными свойствами, которые не обнаруживаются в препаратах, взятых из трупов, или же не выявляются современными экспериментальными методиками. [c.407]

Наиболее широко распространенным и разработанным методическим подходом для количественного анализа взаимодействия нейромедиаторов со своими рецепторами на мембране клетки является радиолигандный метод. Суть этого метода заключается в изучении параметров связывания радиоактивного лиганда (нейромедиатора, агониста или антагониста) с мембранно-связанными или изолированными рецепторными белками. В настоящее время существует хорошо развитая кинетическая теория рецептии и методы определения физико-химических параметров процесса образования комплекса лиганд-рецептор. Такой физико-химический анализ позволяет сделать определенные заключения о структуре активных центров нейрорецепторов, в частности, выяснить природу некоторых функциональных групп, которые ответственны за первую стадию взаимодействия лиганда с акцептором. [c.262]

Перед тем как приступить к дальнейшему выделению и изучению мембранных рецепторных белков, следует по возможности более полно удалить избьггок детергента, поскольку он может оказывать нежелательное действие на биологическую активность и последующий физико-химический анализ структуры нейрорецептора. [c.268]

Иммунохимический анализ пептидньос компонентов глицинового рецептора с помощью моноклональных антител позволил обнаружить существование общих антигенных детерминант этих рецепторных белков, вьщеленных из разных объектов головного и спинного мозга мьшей, крыс, свиньи и человека. Более того, интересными являются данные о том, что некоторые участки глицинового и ГАМК-рецепторов иммунологически идентичны. Этот факт хорошо подтвержден генно-инженерными исследованиями. [c.282]

При анализе методов, используемых для выделения клеточных рецепторов, обращает на себя внимание стремление к применению максимально щадящих методов на стадии элюции рецептора с сорбента. Так, применение сорбентов с иммобилизованными лактинами для очистки рецептора инсулина продиктовано прежде всего стремлением избежать воздействия на рецепторный белок растворов с низкими значениями pH, концентрированных растворов амидов (мочевина) или других денатурирующих белок веществ. В то же время в кислой среде (или с применением денатурирующих агентов) производится элюция с иммобилизованных лигандов (антигены или гаптены) различных по специфичности антител, не приводящая к их инактивации. Различие подходов к способам элюции клеточных рецепторов и антител (иммуноглобулины) с иммобилизованных лигандов, выбранных эмпирическим путем, связано с конформационнон лабильностью рецепторных белков. Так, для ряда изученных к настоящему времени рецепторов (например, рецептор для эпидермального фактора роста) характерны выраженные изменения конформации при переходе из нейтральной в слабокислую среду (см. гл. 3). [c.11]

Ниже будут приведены данные сравнительного анализа первичных структур полипептидных цепей иммуноглобулинов и внеклеточных доменов некоторых рецепторных белков, подтверждающие существование в рецепторах нелимфоидных клеток участков аминокислотной последовательности, гомологичных FR-уча-сткам полипептидных цепей иммуноглобулинов. В настоящем разделе рассмотрены данные иммунологического анализа, свидетельствующие в пользу сходства строения активных центров антител и клеточных рецепторов. [c.49]

Те же принципы анализа были использованы (А. Я. Кульберг, 1986) для сравнительного изучения первичной структуры вариабельных районов полипептидных цепей иммуноглобулинов и указанного выше рецепторного белка — пoли-Ig/ , При описании структуры этого рецептора (К- Е. Моз1оу et а ., 1984) было сделано заключение о существовании в его внеклеточной части нескольких доменов. Этот вывод обосновывался регулярным расположением в пептидной цепи этого белка (его внеклеточной части) остатков цистеина, которые, как предположили авторы, участвуют в формировании внутридоменных ди-сульфидных связен. [c.62]

В заключение этого раздела следует сказать об открывающихся возможностях сравнительного изучения аминокислотных последовательностей рецепторных белков между собой и с иммуноглобулинами. Уже в ходе предварительного анализа первичной структуры внеклеточных районов а-субъединипы инсулинового [c.63]

Принципиальную по своей значимости проблему биосинтеза рецепторов и регуляции этого процесса начали изучать лишь в последнее время. Одним из центральных объектов изучения оказались антигенсвязывающие рецепторы лимфоцитов и прежде всего иммуноглобулиновые рецепторы В-лимфоцитов. Этому в значительной степени способствовало углубленное изучение генетики иммуноглобулинов и биосинтеза этих белков. Затем на основе сведений о подобии некоторых структурных элементов иммуноглобулинов и антигенсвязывающих рецепторов Т-лимфоцитов (см. разд. 3.4) было нач ато исследование генов этих рецепторных белков, не имеющих иммуноглобулиновой природы. Таким образом, как при изучении строения клеточных рецепторов, так и при исследовании генов этих белков большая роль принадлежит сравнительному анализу, где в качестве эталона сравнения выступают иммуноглобулины. Принимая во внимание сказанное, представляется необходимым прежде всего кратко обобщить основные сведения относительно генетики иммуноглобулинов и биосинтезе этих белков. [c.65]

Представляется, что описанные выше изменения скорости полуобмена иммуноглобулиновых рецепторов лимфоцитов отражают закономерности обмена самых различных по специфичности рецепторов как лимфоцитов, так и других клеток. Наблюдаемое при активации клеток ускорение обмена рецепторов может быть связано с их агрегацией на клеточной поверхности она подобна агрегации, происходящей при сшивании рецепторов мультивалентным лигандом (см. гл. 1) или антителами, направленными против рецепторного белка (см. гл. 1 и 4), Электронно-микроскопический анализ активированных митоге-нами лимфоцитов подтверждает факт изменения равномерного распределения мембранных структур у этих клеток, формирование кластеров и последующий отрыв от клетки агрегатов мембранных белков вместе с участками клеточной мембраны (С. Быковская и др., 1985). [c.78]

Стехиометрия и характер взаимодействия субъединиц, образующих компоненты рецепторного комплекса Т-клетки, остаются предметом многостороннего изучения. С помощью мутационного анализа in vitro установлено, что заряженные аминокислотные остатки в составе трансмембранных участков полипептидных цепей имеют решающее значение для сборки и экспрессии полного рецепторного комплекса на поверхности клетки. Как предполагается, при сборке воз- [c.116]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология