Валин в смесях

Цель данной работы — разделить и идентифицировать аминокислоты, смесь которых дана в виде раствора. Задача разработана для глицина, аланина, валина и фенилаланина. [c.98]

Целью данной работы является разделение и идентификация аминокислот, смесь которых дается студенту в виде раствора. Задача разработана для гликокола (глицин гли), аланина (ала), валина (вал) и фенилаланина (фен). [c.36]

К смеси 2,73 г (4,99 ммоль) активированной аминокислоты Р-17д и 0,84 г (5,01 ммоль) гидрохлорида метилового эфира L-валина в 50 мл безводного дихлорметана прибавляют 1,01 г (10,0 ммоль, 1,40 мл) безводного триэтиламина и смесь перемещивают 1 ч при 20 С (при добавлении амина появляется ярко-красное окращивание, переходящее в желто-коричневое при перемещивании). [c.566]

КИСЛОТОЙ в 4-м положении [7]. Речь идет соответственно о пролине и валине. Когда имеется смесь белков, анализ соотношения пролин/валин в 4-м положении позволяет определить количественное соотношение белков, имеющих а- и 7- последовательности в этой смеси. [c.192]

М серной кислотой и полученную смесь аминокислот, обогащенную на 85 % изотопом С фракционируют на ионообменной колонке [70]. Специфически меченные изотопом С аминокислоты синтезированы также для рещения вопросов, связанных с выяснением механизмов реакций. Заслуживает внимания пример синтеза валина, содержащего СНз-группу вместо одной из его метильных групп изопропильной группировки в боковом радикале. Это дает возможность изучать с помощью ЯМР включение валина в пенициллин. Синтез (25)-[4- С]валина интересен еще и потому, что его независимо осуществили три группы ученых. Эти синтезы представлены на схемах (39) — (41) [71—73] и дают представление [c.252]

Вопросу анализа аминокислот методом хроматографии на бумаге посвящено большое число работ советских и иностранных авторов. Однако почти все они связаны с разделением аминокислот белков и других биологических препаратов [61. Наша попытка применить их для анализа мелассы не дала положительных результатов, что можно объяснить мешающим действием остальных компонентов мелассы, ио отношению к которым содержание отдельных аминокислот составляет лишь 0,1—3 вес. %. Описанный в литературе метод 17, 81, состоящий в сорбции аминокислот на катионите с последующей их элюцией и идентификацией на бумаге неудобен, так как требует сложной специальной аппаратуры и чрезмерно длителен. Первой частью нашего исследования было хроматографическое разделение искусственной смеси из десяти аминокислот, приблизительно имитирующей аминокислотный состав мелассы [1, 81. Смесь включала лизин, аргинин, серии, глицин, аспарагиновую и глютаминовую кислоты, а-аланин, валин, метионин и лейцин. Растворы аминокислот готовили в 15%-ном этиловом спирте с концентрацией 0,5—1 у аминокислоты в 1 мкл. [c.212]

Для определения коэффициента распределения можно использовать 0,01 эквимолярный раствор смеси трех аминокислот гистидина, валина, лейцина. Неподвижный растворитель—вода подвижный растворитель—смесь н-бутанола, уксусной кислоты и воды (4 1 5). [c.141]

Принцип метода. Смесь аминокислот дезаминируют азотистой кислотой и определенные объемы полученной смеси оксикислот окисляют хроматом или перманганатом. Содержание лейцина и валина рассчитывают из выходов ацетона после окисления СгОз [c.283]

Разделяют посредством БХ аминокислоты и пептиды преимущественно в виде водных растворов иногда целесообразно заменить воду на н-пропанол. Чтобы разделение было полным, в некоторых случаях, как установлено, следует помимо однократного элюирования провести еще и многократное элюирование (рис. 3.24). Полезно хроматографировать исследуемые пробы параллельно со смесью аминокислот известного состава. В лабораторных работах автора применялась стандартная смесь А, содержащая цистеиновую кислоту, лизин, аргинин, серин, глутаминовую кислоту, аланин, тирозин, метионин, фенилаланин, лейцин, а также стандартная смесь Б, в состав которой входили цистеиновая кислота, гистидин, аспарагиновая кислота, глицин, треонин, аланин, пролин, валин, изолейцин. В 10 мкл смеси находилось около 0,025 мкмоль каждой из перечисленных аминокислот. Хроматографирование неизвестной пробы вместе с такой стандартной смесью позволяет приближенно оценить содержание аминокислот или пептида в пробе. [c.122]

Аминокислоты- свндетели — 50 мМ растворы отдельных аминокислот в смеси муравьиная кислота — уксусная кислота — вода (7 5 13). Смесь А — равные объемы растворов тирозина, фенилаланина, глутад гиновой кислоты, лейцина, серина, аланина, аргинина и лизина. Смесь Б — равные объемы растворов аспарагиновой кислоты, треонина, пролина, валина, аланина, глицина и гистидина. [c.137]

Сухую бумагу размечают так, что линия старта находится на расстоянии одной трети (20 см) от катода. Гидролизат, растворенный в смеси ацетон — 1 н. НС1 или в 50%-ном растворе пиридина, наносят на сухую бумагу в минимальном объеме (10—20 мкл). С обеих сторон от образца-гидролизата на расстоянии 2—3 см наносят образцы отдельных ДНС-аминокислот- свидетелей , а также 2 стандартные смеси ДНС-аминокислот. Смесь А состоит из ДНС-производных аспарагиновой кислоты, пролина, треонина, валина, фенилаланина, бис-ДНС-лизина, а-ДНС-лизина, в-ДНС-лизина и ДНС-ЫНг. Смесь Б состоит из ДНС-производных цистеиновой кислоты, глицина, глутаминовой кислоты, серина, аланина, лейцина, изолейцина, гистидина, аргинина, а-ДНС-тирозина, о- и б с-ДНС-тирозина. На бумагу необходимо наносить не менее 1—5 нмоль каждой из ДНС-аминокислот. После нанесения образцов бумагу увлажняют буфером (с. 138), помещают в прибор для средневольтного электрофореза с источником пи- [c.150]

Бензоил-2,5-дифенилпергидропирроло[3, 4 3,4]циклопента [с]пиррол-1,3,4,6-тетраон (4). Смесь 0.010 моль фенилглиоксаля моногидрата 1, 0.010 моль валина 2 и 0.02 моль N-фенилмалеимида 3 в 30 мл 1,4-диоксана и 20 мл воды нагревают при перемешивании 3 ч [1]. Раствор упаривают в роторном испарителе при пониженном давлении и остаток перекристаллизовывают из изопропанола. Получают соединение 4 в виде порошка белого цвета. Выход 23%. Т л 253-255°С. Структура 4 установлена на основе спектров ЯМР ( Н, С) и элементного анализа. [c.586]

Ген, нередко встречающийся у лиц африканского происхождения, вызывает (в случае гомозиготности) тяжелое, часто летальное заболевание, получившее название серповидноклеточная анемия . В 1949 г. Полинг и Итано с сотрудниками обнаружили, что гемоглобин больных серповидноклеточной анемией имеет необычно высокую электрофоретическую подвижностьб. Позднее, в 1957 г., Ингрем разработал метод пептидных карт (гл. 2, разд. 3.2, рис. 4-20) и применил его для исследования гемоглобина. Он расщепил молекулу гемоглобина трипсином на 15 пептидов и разделил полученную смесь с помощью электрофореза и хроматографии. Ему удалось показать, что аномалия, характерная для серповидноклеточного гемоглобина (гемоглобина 5), локализована в Р-цепи (в шестом положении) (рис. 4-17). Глутаминовая кислота, находящаяся в этом положении в нормальном гемоглобине, оказалась замещенной в гемоглобине 5 на валин. Это [c.314]

В предварительно прогретой трехгорлой колбе на 1 л, снабженной мещалкой с пришлифованным затвором и холодильником с металлическим змеевиком, в атмосфере азота суспендируют 25,0 г (0,66 моль) LiAlH4 в 400 мл безводного тетрагидрофурана. К полученной суспензии порциями осторожно прибавляют 35,1 г (0,30 моль) г-валина (внимание сильное выделение Hj ). По окончании добавления г-валина реакционную смесь в течение 15 ч кипятят с обратным холодильником, охлаждают и при охлаждении льдом гидролизуют добавлением 60 г толченого льда. Смесь отфильтровывают на воронке Бюхнера, остаток примерно в течение 1 ч трижды кипятят со 150 мл смеси ТГФ-вода (4 1), объединенные фильтраты упаривают в вакууме. Оставшееся масло обрабатывают хлороформом (250 мл) и нагревают с насадкой Дина-Старка до прекращения отделения воды. После отгонки растворителя в вакууме и перегонки сырого продукта также в вакууме (85 С/12 мм рт. ст.) получают 28,5 г (92%) бесцветного, неприятно пахнущего масла, кристаллизующегося при стоянии (т. пл. 55-56 С). [c.486]

Оптически активные бинафтилсодержащие макроциклы селективно вступают в комплексообразование с энантиомерами аминокислот и органических аммонийных солей. Это позволяет использовать лиганды такого типа для разделения рацемических смесей аминов, и наоборот, смесь энантиомеров краун-эфира, полученного из рацемического 2,2 -диокси I, Г-бинафтила, можно разделить в процессе комплексообразования ее с Ь-валином [539, 5401 [c.180]

Как и ожидалось, на ХНФ с Ы-ацил-и-валином можно осуществлять разделение энантиомеров N-ациламинокислот в неводных подвижных фазах (обычно смесь гексана и пропанола-2) [169]. Оптимальные результаты при разделении ряда метиловых эфиров N-aue-тиламинокислот были получены на (М-формил-ь-валиламино)пропил-силикагеле. В дальнейшем повышение значения а было достигнуто [c.154]

К смеси 2,73 г (4,99 ммоль) активированной аминокислоты Р-Ш и 0,84 г (5,01 ммоль) гидрохлорида метилового эфира L-валина в 50ш безводного дихлорметана прибавляют I.OI г (10.0 ммоль. 1,40ии безводиого триэтиламина и смесь перемешивают 1 ч при 20 " С (при добавлении амнна появляется ярко-красное окрашивание, переходят в желто-коричневое при перемешивании). [c.566]

Анализ. Методы анализа белковых макромолекул селективны и осуществляются в зависимости от того, какая структура является объектом исследования, и начинаются с определения аминокислотного состава. Для этого необходимо провести полный гидролиз пептидных связей и получить смесь, состоящую из отдельных аминокислот. Гидролиз проводят при помощи 6 М соляной кислоты при кипячении в течение 24 ч. Так как для гидролиза пептидных связей изолейцина и валина этого может быть недостаточно, проводят контрольный 48- и 72-часовой гидролиз. Некоторые аминокислоты, например триптофан, при кислотном гидролизе разрушаются, поэтому для их идентификации используют гидролиз при помощи метансульфоновой кислоты в присутствии триптамина. Для определения цистеина белок окисляют надмуравьиной кислотой, при этом цистеин превращается в цистеиновую кислоту, которую затем анализируют. Вьщеление и идентификацию аминокислот проводят при помощи аминокислотных анализаторов, принцип действия которых основан на хроматографическом разделении белкового гидролизата на сульфополистирольных катионитах, В основе количественного определения той или иной аминокислоты лежит цветная реакция с нингидрином, однако более перспективным следует считать метод, при котором аминокислоты модифицируют в производные, поглощающие свет в видимом диапазоне. Разделение смеси аминокислот проводят при помощи высокоэффективной жидкостной хроматографии, а само определение — спектрофотометрически. Следующим этапом является определение концевых аминных и карбоксильных [c.40]

Анализ таблицы показывает, что в первом растворителе (За) плохо разделяются валин и метионин, не разделяются глицин и аспарагиновая кислота, а во втором (46) вместе движутся аргинин и аспарагиновая кислота и близко друг к другу — глицин и серии. Для разделения аминокислот, дающих одно пятно в бутанольно-водном растворителе, применяли смесь фенола с фосфатным буфером с рН=12. Кроме того, для увеличения разрешающей способности растворителя для веществ с близкими Rf на пятно аминокислот на стартовой линии несколько раз наносили порции растворителя. При этом аминокислоты перемещаются на периферию пятен и проявляются в виде колец. Удовлетворительное разделение аминокислот при использовании бутанольно-водных растворителей достигается через 36 ч. Увеличение времени протекания растворителя не улучшает разделения, но пятна аминокислот получаются диффузными, особенно у веществ с большой величиной Ег (валин, метионин, лейцин). [c.214]

Двухкомпонентная смесь, в состав которой входят аминоуксусная кислота и валин, также оттитрована дифференцированно (кривая 4). Первая точка эквивалентности соответствует оттит-ровыванию валина, вторая — аминоуксусной кислоты. [c.233]

Первую фракцию хроматографируют на силикагеле в следующих условиях в системе хлороформ — (этанол—петролейный эфир) (1 1) элюируют смесь ДНФ-лейцина и ДНФ-изолей-цина в системе хлороформ—(ацетон—циклогексан) — (этанол— петролейный эфир) (1 2 2) элюируют смесь ДНФ-валина и ДНФ-фенилаланина, которые можно разделить в той же системе, элюируя при соотношении компонентов 1 2 1 ДНФ-валин, а при соотношении 1 2 2 ДНФ-фенилаланин в системе хлороформ— (этанол—петролейный эфир) (1 3) элюируют ДНФ-ме-тионин, ДНФ-пролин и ДНФ-аланин. Эти аминркислоты разделяют в системах хлоро4горм—(этанол—петролейный эфир) — (метанол—четыреххлористый углерод), элюируя при соотношении 1 3 1 ДНФ-метионин и при соотношении 1 3 2 смесь ДНФ-пролина и ДНФ-аланина. Эту пару разделяют, добавляя в последнюю композицию этиленгликоль—бензол в соотношении 1 3 2 1 (ДНФ-пролин) и 1 3 2 2 (ДНФ-аланин). [c.361]

Примечание. Недавно Мур и Штейн [11] использовали хроматографию распределения на крахмале для разделения фенилаланина лейцина, нзолейцина, метионина, тирозина и валина. Подвижной фазой являлась смесь 1 1 0,288 н-бута-нол — бензиловый спирт — вода. Вытекающие из колонки фрак-ции автоматически собираются и исследуются на количественное содержание в них отдельных аминокислот. [c.390]

Из приведенного выше обсуждения очевидно, что аминокислотная последовательность пептида может быть определена по его масс-спектру, если можно идентифицировать пики, обусловленные расщеплением пептидной связи. Идентификация пиков аминокислотного типа фрагментации может быть облегчена подходящим выбором защитных групп. Ацилирование М-концевой аминогруппы пептида эквимолекулярной смесью уксусной и три-дейтероуксусной кислот (или смесью СОз-и СНз-декановых кислот) [25] приводит к появлению пар пиков равной интенсивности, отличающихся на 3 м. ед., которые соответствуют ионам аминокислотного типа фрагментации. Можно использовать другие смешанные реагенты, содержащие ацильные группы, например такие, как эквимолекулярная смесь гепта- и октадекано-вых кислот [18], которые для всех ацилсодержащих ионов дают пары пиков, отличающихся на 14 м. ед,, тем самым облегчая интерпретацию масс-спектров. В некоторых природных олигопептидах дублеты с разницей в 14 м. ед, могут быть вызваны присутствием различных аминокислотных гомологов, например валин или изолейцин в грамицидинах А, В и С [32]. Однако лучше использовать смешанные, содержащие СНз- и СОз-ациль-ные цепи. [c.198]

А, Н. Белозерским и Т. С. Пасхиной и продолженное затем зарубежными исследователями, показало, что он представляет собой полипептид, дающий при гидролизе эквимолекулярную смесь пяти аминокислот L-лейцина, D-фенилаланина, L-пролина, L-валина и L-орни-тина. Этот пентапептид повторяется в молекуле грамицидина дважды, причем концы цепи из десяти остатков аминокислот замыкаются в одно гигантское кольцо. Таким образом, грамицидин С представляет собой циклический декапептид [c.389]

Грамицидин С (грамицидин советский) был выделен в 1942 г. Г. Ф. Гаузе н М. Г. Бражниковой из одного вида Ba ilus brevis (из садовой земли). Изучение его химического строения, начатое А. Н. Белозерским и Т. С. Пасхиной и продолженное затем зарубежными исследователями, показало, что он представляет собой полипептид, дающий прн гидролизе эквимолекулярную смесь пяти аминокислот L-валина, L-орнитина, L-лейцина, D-фенилаланина и L-пролина. [c.380]

Анализ проводят при температуре 50°. В верхнюю часть колонки вносят пробу, содержащую 0,1—2,5 мкмолей аминокислот (гидролизат 1—2 мг белка) и растворенную в 2 лелО,1 н. НС1 или буферного раствора pH 2,2 (при этом стараются не возмутить поверхностный слой смолы и не оставить его сухим). Объем наносимой пробы имеет существенное значение, так как при элютивной хроматографии разделяемая смесь должна занимать перед началом опыта минимальный слой сорбента в колонке. Через колонку пропускают деаэрированный буферный раствор pH 3,25 со скоростью 30 мл/час в количестве, в 2,15 раз превышающем удерживаемый объем аспарагиновой кислоты (около 260—280 мл). После этого производят смену буферных растворов, начиная пропускать буфер 4,25, с тем чтобы валин вышел с новым [c.133]

Разделение метиловых эфиров хлорзамещенных аминокислот глицина, аланина, а-аминомасляной кислоты, валина, норвалина, лейцина, изолейцина и норлейцина — было изучено в изотермических условиях при 130° С на двухметровой колонке с ПЭГ и на комбинированной колонке длиной 4 м, состоящей из двухметровых колонок и содержащих одна — ПЭГ, другая — смесь силиконового масла и стеариновой кислоты. На сорбенте с ПЭГ абсолютные времена удерживания производных указанных аминокислот были несколько меньше, чем на сорбенте со смесью НЖФ [108]. [c.62]

Используя пленки с ионообменным слоем (см. табл. 9.5), Девении и др. [10] успешно разделили смесь 16 аминокислот описанный этими авторами метод можно также использовать, например, для быстрого анализа гидролизатов пептидов. Пленку в течение 3 ч приводят в равновесие с нитратным буферным раствором (0,004 н. раствор соли натрия, pH 3,2) и потом сушат при комнатной температуре. Стандартным раствором служит 0,1%-ный раствор смеси аминокислот (аргинин, лизин, гистидин, фенилаланин, тирозин, лейцин, изолейцин, метионин, валин, пролин, аланин, глицин, глутамовая кислота, треонин, серин и аспарагиновая кислота) в 0,01 н. соляной кислоте, ко- [c.129]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология